陳 巖，袁 晨，劉 寧，紀(jì)鳳蘭，丁 濤，溫富春，徐惠波

(吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院·吉林 長春 130021)

血瘀證是中醫(yī)臨床常見證候，與冠心病、心絞痛，動脈粥樣硬化等多種疾病具有相關(guān)性[1-3]，中醫(yī)的治療原則多為活血化瘀[4]。XS組合物是由西洋參莖葉與山楂葉有效部位經(jīng)科學(xué)配比組合而成，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、行氣散瘀之功，可用于治療胸痹(氣陰兩虛證冠心病)。本研究通過觀察XS組合物對以皮下注射腎上腺素及冰浴刺激致大鼠急性血瘀模型血液流變學(xué)指標(biāo)變化和正常大鼠血小板聚集率變化的影響，證實(shí)其活血化瘀作用，為XS組合物臨床應(yīng)用的有效性和新藥開發(fā)提供理論研究依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 Wistar大鼠，雄性，5～6周齡，SPF級，體質(zhì)量(200±10)g，購自長春億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司，合格證：SCXK(吉) 2011-004。SD大鼠，5～6周齡，SPF級，雄性，體質(zhì)量(212±12)g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司。許可證號：SCXK(京)2009-0004。動物飼養(yǎng)在本單位屏障環(huán)境動物觀察室，溫度21～25 ℃，相對濕度40%～60%。

1.2 藥物與試劑 XS組合物(西洋參莖葉提取物∶山楂葉提取物=1∶1.1)：吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院新藥研究與開發(fā)中心劑型室提供，批號：20160101；益心酮分散片，海南天煌制藥有限公司生產(chǎn)，批號：1608211。鹽酸腎上腺素注射液(Adr)：天津金耀氨基酸有限公司，批號：1003121；二水合檸檬酸三鈉(檸檬酸鈉、又稱枸櫞酸鈉)：南京化學(xué)試劑有限公司，批號：050580052；水合氯醛：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：20100709；ADP：大連美侖生物技術(shù)有限公司，批號：091M70002V；肝素鈉：北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號：151809086A。

1.3 主要儀器 BT255型十萬分之一電子天平：北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；JJ2000型電子天平：常熟市雙杰測試儀器廠；FASCO-3010全自動血流變快測儀：重慶大學(xué)為多生物工程研究所；DT5-3型低速臺式自動平衡離心機(jī)：北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司；LBY-NJ血液凝聚儀：北京普利生精密儀器研究中心。

2 方法

2.1 急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的測定 取Wistar大鼠60只，適應(yīng)飼養(yǎng)3 d后按體質(zhì)量隨機(jī)分為6 組：正常對照組10只，血瘀模型組10只，陽性對照藥益心酮片(96 mg/kg)組10只，XS組合物(58.8、29.4、14.7 mg/kg) 高、中、低3個(gè)劑量給藥組每組10只。每天給藥1次，灌胃劑量為10 mL/kg，實(shí)驗(yàn)過程中正常對照組及血瘀模型組給予等量的蒸餾水，各給藥組均給予供試藥液，連續(xù)給藥7 d。給藥第7 d，除正常對照組大鼠皮下注射等體積生理鹽水外，其余各組大鼠皮下注射Adr0.08 mL/100 g體質(zhì)量，2 h后將大鼠置于1.5 ℃冰水中游泳4 min，撈出后2 h再注射Adr0.08 mL/100 g體質(zhì)量1 次，制備大鼠急性血瘀證模型[5]。大鼠第2次注射腎上腺素后，將大鼠禁食不禁水12 h，次日，大鼠灌胃給藥1 h后，大鼠腹腔注射水合氯醛(300 mg/kg)將其麻醉，進(jìn)行大鼠腹主動脈取血5 mL，緩慢注入肝素抗凝管中(血液與抗凝劑體積比為9∶1)混勻(每組前10只動物取血)。將肝素鈉抗凝管中的血液先取出適量測定血沉和紅細(xì)胞壓積。剩余血液用FASCO-3010全自動血流變快測儀測定大鼠全血黏度的高切(200/s)、中切(30/s)及低切(3/s)值；然后將全血3 000 r/min離心10 min，取出貧血小板血漿測定血漿黏度。

2.2 正常大鼠血小板聚集率的測定 取SD大鼠55 只隨機(jī)分為5 組，空白對照組，益心酮分散片(96 mg/kg)給藥組，XS組合物(58.8、29.4、14.7 mg/kg)高、中、低3 個(gè)劑量給藥組，每組11 只，各組大鼠每天灌胃給藥1次，連續(xù)7 d，空白對照組給予同體積(10 mL/kg)蒸餾水。末次灌胃給藥1 h后，于腹腔注射水合氯醛300 mg/kg麻醉大鼠，腹主動脈采血4.5 mL，緩慢注入裝有3.8%枸櫞酸鈉溶液0.5 mL的試管中(血液與抗凝劑體積比為9∶1)，混勻，離心，1 000 r/min，分離PRP血小板血漿和3 000 r/min，分離PPP血小板血漿，按文獻(xiàn)[6]方法用血液凝聚儀測定ADP(每份樣本加ADP7μL)誘導(dǎo)血小板1、3、5 min聚集率及最大聚集率。

3 結(jié)果

3.1 XS組合物對急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)的影響 見表1。

表1 各組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的比較

3.2 XS組合物對大鼠血小板聚集率的影響 見表2。

表2 各組大鼠血小板聚集率比較

4 討論

急性血瘀證是中醫(yī)臨床中常見的基本證候之一，是心、腦血管疾病發(fā)生、發(fā)展的病理生理基礎(chǔ)，而血瘀證的重要診斷指標(biāo)有血液流變性、血小板聚集功能的改變等[7]。冠心病氣虛血瘀證一直是中醫(yī)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為氣虛血瘀是冠心病的主要病機(jī)，氣虛則無力推動血液運(yùn)行，血液凝滯成瘀，阻于心脈，則會產(chǎn)生心前區(qū)憋悶疼痛[8]。XS組合物是由西洋參葉提取物與山楂葉提取物根據(jù)均勻設(shè)計(jì)原理經(jīng)計(jì)算機(jī)計(jì)算配比比例后組合而成[9]，方中選用西洋參莖葉提取物，取其補(bǔ)心氣、益脾氣之功；選用山楂葉提取物取其行氣散瘀之力，兩藥合用可使心血得以滋養(yǎng)、脾氣得以健運(yùn)、肝氣得以疏泄，共奏補(bǔ)氣養(yǎng)陰、行氣散瘀之功。氣行則血行，心脈通暢，心血充足，機(jī)體功能得以恢復(fù)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明西洋參有抗氧化、抗心肌缺血、增加心肌收縮力等作用[10-12]；山楂有活血化瘀、擴(kuò)張冠狀動脈、增加冠脈血流量、保護(hù)心肌缺氧的功能[13-17]。為此，西洋參葉與山楂葉有效部位組合，可用于治療胸痹(氣陰兩虛證冠心病)。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘接慩S組合物預(yù)防治療冠心病心絞痛的機(jī)制，并針對其補(bǔ)氣養(yǎng)陰、行氣散瘀的功能選用了血瘀模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示該藥可明顯改善急性血瘀大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)，明顯降低全血黏度，降低紅細(xì)胞壓積和血沉值，還能降低正常大鼠的血小板1、3、5 min的聚集率及最大聚集率。提示XS組合物能改善血瘀大鼠異常的血液流變學(xué)指標(biāo)，抑制血小板聚集；具有活血化瘀作用，可用于防治胸痹，還有可能通過該作用防治其他心、腦血管疾病。