覃艷芬

摘? 要：探討如何突破現(xiàn)有簡陋生物實(shí)驗(yàn)室局限，設(shè)計(jì)簡易無菌接種箱，把植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)帶進(jìn)高中課堂，并實(shí)施教學(xué)。從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、操作、觀察、結(jié)果分析等各個(gè)方面提出如何發(fā)展學(xué)生科學(xué)思維，達(dá)成科學(xué)思維和科學(xué)探究核心素養(yǎng)的問題，進(jìn)行探究。

關(guān)鍵詞：植物組織培養(yǎng);科學(xué)思維;科學(xué)探究;探究性實(shí)驗(yàn)教學(xué)

一、基于科學(xué)思維設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)

（一）實(shí)驗(yàn)思路多維設(shè)計(jì)

引領(lǐng)學(xué)生設(shè)計(jì)低成本、低消耗、低污染實(shí)驗(yàn)，可增強(qiáng)學(xué)生獨(dú)立思考能力，可培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)探究素養(yǎng)和發(fā)展創(chuàng)造性思維能力。標(biāo)準(zhǔn)組培實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)造分為：儲藥室、準(zhǔn)備室、緩沖室、接種室、培養(yǎng)室。學(xué)校生物實(shí)驗(yàn)室僅有藥品儲藏室，如何創(chuàng)設(shè)條件開展實(shí)驗(yàn)？經(jīng)討論做出以下兩點(diǎn)改進(jìn)：一是設(shè)計(jì)簡易無菌接種箱，代替標(biāo)準(zhǔn)接種室和無菌超凈工作臺。自制無菌接種箱替代標(biāo)準(zhǔn)接種室，如圖1所示;二是簡易玻璃門高柜代替組培培養(yǎng)室，如圖2所示。

（二）實(shí)驗(yàn)用品多維選擇

結(jié)合實(shí)驗(yàn)室已有條件，本實(shí)驗(yàn)室具備較多徑口為7cm的圓口瓶，高壓滅菌鍋。參考組培實(shí)驗(yàn)流程圖，引發(fā)學(xué)生思考：是否可以選用封口膜？MS培養(yǎng)基成分復(fù)雜，實(shí)驗(yàn)室所缺樣品較多，如何配置？植物激素是否需要購買？學(xué)生需要做出進(jìn)一步的探究推理，解決實(shí)驗(yàn)用品難題，此過程利于學(xué)生科學(xué)探究素養(yǎng)和“歸納與總結(jié)”思維素養(yǎng)的進(jìn)一步形成。

（三）實(shí)驗(yàn)過程多維推理

引領(lǐng)學(xué)生查找資料，尋找外植體消毒的可行性操作：是否可用簡單易得藥品代替實(shí)驗(yàn)室常用Hgcl溶液？如何優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，把組培過程串聯(lián)起來？師生探究后整理出圖3所示方案。

二、驗(yàn)證可行性和可操作性，實(shí)施植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)活動(dòng)

（一）制備MS固體培養(yǎng)基

按比例配制MS固體培養(yǎng)基，分瓶，高壓鍋高壓滅菌，取出待用。

（二）外植體消毒和接種

1. 接種箱消毒：用體積分?jǐn)?shù)為70%酒精擦拭無菌接種箱，紫外燈照射30min。

2. 外植體消毒：配制約30%的次氯酸鈉溶液，消毒時(shí)間為30min。無菌水清洗2～3次。

3. 接種：把外植體切割成2～3等分，每瓶接入2～3個(gè)外植體，胡蘿卜則為刮取形成層細(xì)胞，放入培養(yǎng)瓶中，或切取形成層，呈小塊狀，每瓶放入2～3塊。

（三）培養(yǎng)

接種后培養(yǎng)瓶放入簡易培養(yǎng)箱，每天打開紫外燈照射30min。需要時(shí)及時(shí)用日光燈照射。以探究為特點(diǎn)的主動(dòng)學(xué)習(xí)模式，通過組織學(xué)生觀察教師示范性組培操作，培養(yǎng)學(xué)生觀察能力。學(xué)生親手操作實(shí)驗(yàn)過程，提升學(xué)生動(dòng)手能力。操作中學(xué)生會(huì)出現(xiàn)“試錯(cuò)”操作，“試錯(cuò)”有利于學(xué)生體驗(yàn)和感悟?qū)嶒?yàn)原理，激發(fā)思維，促進(jìn)批判性思維養(yǎng)成。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果多元化呈現(xiàn)，引導(dǎo)科學(xué)探究思維

（一）基于事實(shí)和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，運(yùn)用歸納的方法概括規(guī)律

接種后約一個(gè)星期，可觀察到切割處理的外植體切面形成愈傷組織，刮取形成層胡蘿卜表面也可觀察到愈傷組織的形成。記錄愈傷組織出現(xiàn)時(shí)間，描述愈傷組織的特征，做好實(shí)驗(yàn)記錄。接種3～4天，觀察到外植體污染現(xiàn)象。一周后，觀察到外植體褐化現(xiàn)象。善于觀察，是獲得科學(xué)思維和探究能力的前提，創(chuàng)設(shè)真實(shí)情景更有利于激發(fā)學(xué)生興趣。把書本上枯燥乏味的知識，變成學(xué)生可看見、可觸摸、可操作的實(shí)驗(yàn)過程。在一般植物組培教學(xué)中，給學(xué)生展示組培愈傷組織、污染、褐化的相關(guān)圖片或視頻，很難展開相關(guān)實(shí)驗(yàn)教學(xué)，本課例創(chuàng)設(shè)真實(shí)情境，讓學(xué)生動(dòng)手操作，在實(shí)驗(yàn)中構(gòu)建知識體系，基于事實(shí)和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象運(yùn)用歸納概括的方法總結(jié)植物組培相關(guān)規(guī)律，并引導(dǎo)學(xué)生利用已有知識解決問題，促進(jìn)學(xué)生深度學(xué)習(xí)，更有利于科學(xué)思維和科學(xué)探究素養(yǎng)。

（二）小組合作探究，基于實(shí)驗(yàn)結(jié)果，引發(fā)學(xué)生深度思考

結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果，提出如下問題，引發(fā)學(xué)生深度思考，促進(jìn)知識內(nèi)化，知識與方法遷移，發(fā)展學(xué)生思維。外植體出現(xiàn)污染的原因可能有哪些？為什么某些小組會(huì)出現(xiàn)外植體大面積褐化？這會(huì)對實(shí)驗(yàn)材料帶來什么影響？簡易無菌接種箱以及在簡陋實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的整套組培實(shí)驗(yàn)裝置，是否滿足植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的無菌要求？如何證明？

引導(dǎo)學(xué)生用科學(xué)方法分析和解決問題，對結(jié)果做出合理解釋，嘗試使用統(tǒng)計(jì)學(xué)模型對所設(shè)計(jì)的組培裝置做出預(yù)測和評價(jià)，并能運(yùn)用相關(guān)科學(xué)術(shù)語，精確表達(dá)，在小組中展開交流。引導(dǎo)學(xué)生回歸主線，思考實(shí)驗(yàn)流程其可行性和可操作性，運(yùn)用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。污染率統(tǒng)計(jì)如表1所示。

分析數(shù)據(jù)可得，污染率較低，并未出現(xiàn)大批次外植體污染，說明已初步突破開展植物組織培養(yǎng)教學(xué)實(shí)驗(yàn)的難點(diǎn)，基本達(dá)到無菌要求，簡易組培裝置具備可行性和可操作性。由于前期實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)在于驗(yàn)證簡易組培裝置的可行性和可操作性，在制備MS培養(yǎng)基時(shí)未添加激素成分，植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)壳爸贿M(jìn)行到誘導(dǎo)愈傷組織階段，移栽和栽培等教學(xué)過程，在后期植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中呈現(xiàn)。

四、教學(xué)反思

本實(shí)驗(yàn)教學(xué)重點(diǎn)引領(lǐng)學(xué)生參與設(shè)計(jì)植物組培實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證整套簡易裝置的可操作性和可行性。自主設(shè)計(jì)的無菌接種箱基本接近無菌要求是本實(shí)驗(yàn)重大突破，此無菌接種箱成本低、操作簡單、輕巧、易搬走，對接種場地?zé)o特殊要求，可組織學(xué)生進(jìn)行較大規(guī)模的班級教學(xué)。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行推廣，開展系列實(shí)驗(yàn)，如微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、植物的組織培養(yǎng)技術(shù)、關(guān)于生長素和細(xì)胞分裂素兩種激素濃度比例不同的探究實(shí)驗(yàn)、誘導(dǎo)芽分化和生根實(shí)驗(yàn)、以組培實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)的生物學(xué)科系列實(shí)驗(yàn)教學(xué)探究活動(dòng)。本課例初步探討相對簡陋實(shí)驗(yàn)條件下，模擬無菌環(huán)境，設(shè)計(jì)密封性較好的無菌接種箱代替昂貴無菌室和超凈工作臺，這為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)多元化、完善生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)活動(dòng)提供了有益參考。

（責(zé)任編輯：胡甜甜）

參考文獻(xiàn)：

[1]中華人民共和國教育部. 普通高中生物學(xué)課程標(biāo)準(zhǔn)（2017年版）[M]. 北京：人民教育出版社，2018.

[2]曾勤. 提高高中生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)有效性初探[A];2020年基礎(chǔ)教育發(fā)展研究高峰論壇論文集[C]. 2020：19-21.