王艷豐，張丁華

（河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學院牧業(yè)工程學院，河南 鄭州 451450）

近年來，隨著我國規(guī)?；i場快速發(fā)展，集約化程度越來越高，豬病也變得日趨復雜，新病不斷涌現(xiàn)，老病呈現(xiàn)新形式，根本原因在于豬群免疫力低下。大量研究表明，豬群普遍存在免疫抑制性因素，如疾病因素、營養(yǎng)因素、藥物因素、免疫因素、環(huán)境因素、應激因素、霉菌毒素等，其中豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型、豬瘟病毒、偽狂犬病病毒、豬巨細胞病毒和霉菌毒素等被認為是引起豬產(chǎn)生免疫抑制的主要原因[1-2]。目前對豬群免疫抑制尚無有效治療方法，主要是疫苗預防、對癥治療及防止繼發(fā)感染等，但效果均不太理想，同時抗生素對免疫抑制性疾病效果甚微。

中藥屬于天然藥物，含有多糖、苷類、生物堿類、有機酸類、揮發(fā)油等免疫活性成分，能增強機體細胞免疫和體液免疫功能[3-4]，將是今后防控豬免疫抑制性疾病的重要手段。全國獸用抗菌藥使用減量化行動方案（2021—2025年）指出：要根據(jù)養(yǎng)殖管理和防疫實際，推廣應用獸用中藥等無殘留的綠色獸藥，替代部分獸用抗菌藥品種，并逐步提高使用比例，實現(xiàn)畜禽產(chǎn)品生態(tài)綠色。鑒于此，本試驗綜合前期試驗結(jié)果，選擇在飼糧中添加不同比例補中益氣中藥，以生長肥育豬為研究對象，探究中藥復方對生長肥育豬免疫功能和抗氧化能力的影響，以期為中藥復方在生豬飼養(yǎng)中應用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗藥品與試劑

黃芪、黨參、熟地、枸杞、板藍根、山楂、當歸、何首烏、甘草均購自禹州中藥材專業(yè)市場。將上述中藥按2∶2∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1比例，烘干粉碎制成100～200目超微粉作為中藥復方備用。白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白細胞介素-4（interleukin-4，IL-4）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、丙二醛（MDA）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2 試驗動物及分組

試驗地點為商丘市睢縣某規(guī)?；i場，試驗時間為2020年8月25日至10月30日。將60頭3月齡健康狀況良好、體重相近的杜長大生長肥育豬隨機分為5組，每組12頭，分別為試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組和對照組。將各組豬進行分欄飼養(yǎng)，自由采食和飲水，免疫及消毒程序按豬場常規(guī)程序進行，預試期和正式試驗期分別為7 d和60 d。試驗正式期內(nèi)，試驗Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.5%、1.0%、1.5%、2.0%中藥復方，對照組僅飼喂基礎(chǔ)飼糧。

1.3 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平

基礎(chǔ)飼糧參照豬飼養(yǎng)標準（NY/T 65—2004）和NRC（2012）推薦的肥育豬營養(yǎng)需要進行配制，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗基礎(chǔ)飼糧配方及營養(yǎng)水平

1.4 免疫功能和抗氧化活性指標測定

試驗結(jié)束后每組挑選3頭豬前腔靜脈采血，每頭3 mL，然后以3 000 r/min離心10 min，分離血清于-20 ℃保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒檢測豬血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、細胞因子（IL-2、IL-4、IL-6）及抗氧化性能指標（MDA、T-SOD、CAT、GSH-Px）的水平，具體步驟按試劑盒說明書進行。

1.5 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析和多重比較，結(jié)果以平均值±標準差表示，P<0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 中藥復方對生長肥育豬血清免疫球蛋白含量的影響

由表2可見，與對照組相比，各試驗組豬血清IgG、IgA、IgM含量均有不同程度提高，其中試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組豬血清IgG、IgA、IgM含量顯著升高（P<0.05），而試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組間豬血清IgG、IgA、IgM含量差異不顯著（P＞0.05）。

表2 中藥復方對生長肥育豬血清免疫球蛋白含量的影響

2.2 中藥復方對生長肥育豬血清抗氧化酶指標的影響

由表3可見，與對照組相比，各試驗組GSHPx含量均顯著提高（P<0.05），其中以Ⅳ組GSHPx含量最高；試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組的T-SOD和CAT含量均較對照組顯著提高（P<0.05），Ⅲ組、Ⅳ組的MDA含量較對照組顯著降低（P<0.05）；試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組間GSH-Px、T-SOD和CAT含量差異不顯著（P>0.05）。

表3 中藥復方對生長肥育豬血清抗氧化酶指標的影響

2.3 中藥復方對生長肥育豬血清細胞因子水平的影響

由表4可見，與對照組相比，各試驗組IL-2、IL-4含量均顯著提高（P<0.05），其中以Ⅳ組IL-2、IL-4含量最高，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組間IL-2、IL-4含量差異不顯著（P>0.05）；試驗Ⅳ組的IL-6含量較對照組顯著提高（P<0.05），各試驗組間IL-6含量差異不顯著（P>0.05）。

表4 中藥復方對生長肥育豬血清細胞因子水平的影響

3 討論

3.1 中藥復方對生長肥育豬血清免疫球蛋白含量的影響

動物機體免疫包括體液免疫和細胞免疫，免疫球蛋白是體液免疫應答的信號分子，由B淋巴細胞產(chǎn)生，主要包括IgG、IgA和IgM。血清中IgG、IgA、IgM是機體防御系統(tǒng)中的重要成員，是衡量機體免疫功能的重要指標[5]。大量研究表明，中藥可提高機體血清中IgG、IgA、IgM的含量。研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加紫錐菊可顯著提高保育豬血清IgG、IgA的含量，增強機體免疫功能[5]；以黃芪、板藍根、益母草、黨參、山楂、當歸等組成的中藥復方，可顯著提高脾臟指數(shù)、血清IgG和IgA含量[6]；以杜仲、黃芪、紫蘇、黨參、山楂等組成的中藥復方，可顯著提高斷奶仔豬血清IgG、IgM、IgA水平，且隨著飼料中中藥濃度的增加而增加[7]。本試驗結(jié)果也表明，飼糧中添加中藥復方，可顯著提高豬血清IgG、IgA、IgM的含量，增強機體免疫功能。但也有報道在飼糧中添加中藥后，豬血清IgG、IgM、IgA含量無顯著變化，有的甚至出現(xiàn)IgG下降[6]，分析原因可能與添加的中藥劑量、種類及配伍等有關(guān)。

3.2 中藥復方對生長肥育豬血清抗氧化酶指標的影響

抗氧化酶系統(tǒng)具有清除活性氧自由基的功能，是維持動物健康的重要防線[8]。機體內(nèi)的各種抗氧化酶相互合作，共同構(gòu)成機體對抗自由基的第一道防線，其中以SOD、GSH-Px和CAT最重要[9]。SOD的主要作用是清除體內(nèi)自由基，保護脫氫酶免受超氧自由基影響失活[10]。CAT、GSH-Px的活性及T-AOC均能夠反映機體的抗氧化能力。MDA是脂質(zhì)過氧化反應的穩(wěn)定產(chǎn)物，具有很強的生物毒性，能破壞組織細胞完整性，其含量越高說明體內(nèi)過氧化反應越強烈，細胞受到的氧化損傷越強[8]。大量研究表明，飼糧中添加中藥可以提高豬CAT、SOD、GSHPx的活力，且能顯著降低保育豬血清MDA的含量，提高豬抗氧化能力[6-10]。本試驗結(jié)果也顯示，中藥復方各試驗組GSH-Px、T-SOD和CAT含量均顯著提高，并能顯著降低生長肥育豬血清MDA含量。

3.3 中藥復方對生長肥育豬血清細胞因子水平的影響

細胞因子在免疫應答與免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，IL-2、IL-4、IL-6屬于適應性免疫和促炎性細胞因子，當病原微生物入侵時，機體的免疫系統(tǒng)隨即被激活，促使機體分泌細胞因子以清除病原微生物。IL-2能促進T淋巴細胞增殖與分化，誘導具有細胞毒樣活力的殺傷細胞；IL-4由活化的Th2細胞產(chǎn)生，能促進B細胞增殖、分化、免疫球蛋白產(chǎn)生[11]；IL-6由各種類型的淋巴細胞和非淋巴細胞產(chǎn)生，可以維持抗原特異性免疫應答、參與宿主防御機制等[12]。研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加1%和2%黨參多糖均能顯著提高仔豬血清IL-2、IL-4和IL-6含量[13]；在斷奶仔豬飲水中添加3 g/L或6 g/L蒲公英水提物，均可顯著提高IL-2、IL-6的含量[14]；在飼糧中添加50～100 mg/kg姜黃素，也可以顯著提高IL-2、IL-6含量[15]。此外，中藥復方也具有良好的效果。胡健等[16]用麥冬、冬青葉、銀杏葉、益母草、艾葉、魚腥草等組成的中藥復方，以0.3%比例添加于飼糧中，可以顯著提高IL-6含量，增強斷奶仔豬的免疫能力和抗氧化功能。本試驗結(jié)果也表明，中藥復方可以提高豬血清IL-2、IL-4和IL-6含量。

4 結(jié)論

綜上所述，飼糧中添加1.0%、1.5%和2%中藥復方均能顯著提高生長肥育豬的免疫功能和抗氧化能力，結(jié)合經(jīng)濟成本，建議添加比例以1.0%和1.5%為宜。