劉金蓉，孫 雨，齊亞男，張傳美，王建琳，楊海燕*

(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，山東青島 266109；2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)動(dòng)物醫(yī)院，山東青島 266109)

肥大細(xì)胞瘤(Mast cell tumor,MCT)是犬發(fā)生率最高的皮膚腫瘤，惡性率和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)都較高[1],占所有皮膚腫瘤的16%～21%，其惡性率達(dá)19%～39%，其高發(fā)年齡為7歲以上[2]。其外觀各異，并可能出現(xiàn)皮膚或皮下水腫、丘疹、結(jié)節(jié)或有蒂的腫塊，直徑從幾毫米到數(shù)厘米不等[3]。常用的治療方法為手術(shù)切除[4]。本文介紹一例因頸部和腹部腫物長(zhǎng)期不退且逐漸生長(zhǎng)變大影響日常生活前來(lái)就診的犬，通過(guò)臨床檢查、血液檢查、生化檢查、細(xì)胞學(xué)檢查、影像學(xué)檢查等方法進(jìn)行診斷，并對(duì)患犬進(jìn)行手術(shù)摘除手術(shù)，為診斷及治療犬肥大細(xì)胞瘤提供臨床經(jīng)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 患病動(dòng)物

患犬為18歲中華田園犬，雌性未絕育，疫苗齊全，定期驅(qū)蟲，無(wú)既往病史。半年前發(fā)現(xiàn)其腹壁和頸部下方有腫物，最近2個(gè)月腫物生長(zhǎng)較快，頸部下方的腫物已經(jīng)嚴(yán)重影響到日常飲食，就診時(shí)精神狀態(tài)良好，飲食排便正常。臨床檢查，體溫38.8℃，體重7.4 kg。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢查

1.2.1 血常規(guī)檢查 采集病犬前肢靜脈血，加入EDTA-K2抗凝管抗凝并充分混勻，使用美國(guó)愛(ài)貝斯(Abaxis HM5)全自動(dòng)動(dòng)物血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 血液生化檢查 采集靜脈血，加入肝素鈉抗凝管混勻后離心，取血清采用日本富士NX500iVC干式生化儀進(jìn)行生化檢測(cè)。采用萬(wàn)孚VFS-112型免疫熒光檢測(cè)儀進(jìn)行C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)，采用德諾泰克FIC-Q100型熒光免疫分析儀進(jìn)行犬NT-proBNP檢測(cè)。

1.2.3 組織涂片檢查 細(xì)針抽吸腫物中心組織涂片，采用瑞氏吉姆薩染色液進(jìn)行染色。

2 結(jié)果

2.1 血常規(guī)檢查

血常規(guī)檢查結(jié)果顯示(表1)中性粒細(xì)胞增多為13.16×109個(gè)/L，說(shuō)明機(jī)體內(nèi)存在炎癥反應(yīng)，紅細(xì)胞比容增高說(shuō)明機(jī)體有輕度脫水，機(jī)體炎癥反應(yīng)導(dǎo)致血小板增多引發(fā)繼發(fā)性血小板增多癥。

表1 血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果Table 1 Blood routine test results

2.2 血液生化檢查

血液生化檢查結(jié)果(表2)顯示堿性磷酸酶升高(329 U/L)，總膽紅素下降(1 μmol/L)，尿素氮肌酐比升高44.7，其他指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，說(shuō)明機(jī)體的肝臟和腎臟系統(tǒng)已經(jīng)開(kāi)始受到影響，但功能基本正常，C-反應(yīng)蛋白(CRP)值為26 mg/L(參考范圍0～10 mg/L)，反應(yīng)機(jī)體已經(jīng)有炎癥反應(yīng)。犬NT-proBNP檢測(cè)結(jié)果為562 pmol/L(參考范圍0～800 pmol/L)，初步排除心臟病。

表2 血液生化試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Blood biochemical test results

2.3 組織涂片檢查結(jié)果

顯微鏡下可見(jiàn)大量圓形細(xì)胞，胞漿內(nèi)含有大量顆粒(圖1)。

箭頭所指細(xì)胞內(nèi)含有大量顆粒Arrow shows many granules in cells圖1 組織涂片檢查(瑞氏吉姆薩染色，400×)Fig.1 Tissue smear examination(Reichsler Giemsa staining,400×)

2.4 影像學(xué)檢查

2.4.1 DR檢查 使用西班牙賽德科(Sedecal)數(shù)字X射線成像系統(tǒng)對(duì)病犬進(jìn)行側(cè)臥位保定進(jìn)行頭部和腹部拍攝，可見(jiàn)頸部和腹部腫物，同時(shí)可見(jiàn)肝后可疑中等軟組織亮度影像。

圖2 腹部側(cè)位片F(xiàn)ig.2 Abdominal lateral film

圖3 頭部側(cè)位片F(xiàn)ig.3 Lateral film of head

2.4.2 B超檢查 采取仰臥位保定，對(duì)頸部和右側(cè)腹部腫物進(jìn)行超聲檢查，同時(shí)對(duì)肝臟和腎臟進(jìn)行掃查，見(jiàn)肝區(qū)彌散性低回聲暗區(qū)，右葉后見(jiàn)1.4 cm×1.4 cm左右腫物。

圖4 頸部B超F(xiàn)ig.4 Neck B ultrasound imaging

經(jīng)臨床檢查、血液常規(guī)檢查、血液生化檢查、組織涂片檢查、C-反應(yīng)蛋白以及影像學(xué)檢查綜合分析，初步診斷該犬患有體表腫瘤(肥大細(xì)胞瘤)和肝臟腫瘤。考慮到患犬年齡較大，并且體表腫瘤已經(jīng)嚴(yán)重影響到日常飲食生活，建議手術(shù)摘除體表腫瘤，肝臟腫瘤采取保守治療，經(jīng)得主人同意進(jìn)行體表腫瘤病理性切除。

圖5 右側(cè)腹部B超F(xiàn)ig.5 Right abdominal lateral B-ultrasound imaging

3 手術(shù)治療

3.1 術(shù)前準(zhǔn)備

病犬術(shù)前8 h禁食禁水，埋置靜脈留置針。為防止手術(shù)過(guò)程中出現(xiàn)出血、休克等情況，降低麻醉風(fēng)險(xiǎn)等，術(shù)前補(bǔ)充液體，包括9 g/L NaCl、50 g/L葡萄糖、甲硝唑、菌必治、止血敏、ATP、肌酐、輔酶A、VC等。術(shù)前15 min給以氟尼辛葡甲胺15 mg，阿托品0.7 mL。

3.2 麻醉與保定

采取仰臥保定，靜脈推注丙泊酚5 mL進(jìn)行誘導(dǎo)麻醉，氣管插管，異氟烷進(jìn)行吸入麻醉維持麻醉。

3.3 手術(shù)實(shí)施

在距離頸部腫瘤的基部3 cm處選擇好切口，切開(kāi)皮膚，使用手術(shù)剪從腫瘤邊緣位置銳性分離腫瘤，切除時(shí)在腫瘤底部多切除一層正常組織，周邊多切除2 cm～3 cm左右的正常組織，手術(shù)過(guò)程中隨時(shí)注意止血，腫瘤與機(jī)體完整分離后，用滅菌生理鹽水清理創(chuàng)口，散布氨芐西林，縫合皮膚，噴涂銀離子保護(hù)劑。按相同的方法處理右側(cè)腹部的腫瘤。

圖6 頸部腫瘤切除Fig.6 Excision of neck tumor

圖7 腹部腫瘤切除Fig.7 Excision of abdominal tumor

3.4 病理組織學(xué)檢查

為確診病變性質(zhì)，取病變組織，用濃度為40 g/L的甲醛固定，石蠟包埋，切成5 μm切片，HE染色后顯微鏡下觀察組織的病理學(xué)變化。低倍鏡下可見(jiàn)腫塊位于真皮層內(nèi)，與周圍結(jié)締組織界限較清，且結(jié)締組織內(nèi)有嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，可見(jiàn)腫瘤細(xì)胞呈條索狀和片狀分布。高倍鏡下可見(jiàn)腫瘤細(xì)胞單一；胞漿嗜堿性，細(xì)胞核呈圓形，部分細(xì)胞核染色質(zhì)邊集化，核偏向一側(cè)，部分腫瘤細(xì)胞核消失；腫瘤組織內(nèi)內(nèi)可見(jiàn)有少量的嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。病理診斷結(jié)論為犬肥大細(xì)胞瘤。

A.箭頭所指肥大細(xì)胞與周圍結(jié)締組織界限明顯；B.箭頭所指細(xì)胞核偏向一側(cè)A.Arrow shows the clear boundary between mast cell and surrounding connective tissue;B.Arrow shows the nucleus biased to one side.圖8 腫瘤組織病理學(xué)變化(A.HE200×；B.HE400×)Fig.8 Histopathological lesions of tumor(A.HE200×；B.HE400×)

3.5 術(shù)后護(hù)理及檢查

手術(shù)蘇醒當(dāng)天恢復(fù)正常飲食飲水，術(shù)后第1天輸液9 g/L NaCl、50 g/L葡萄糖、2 g/L甲硝唑氯化鈉溶液各80 mL，菌必治0.5 g、ATP、肌酐、輔酶A、VC，皮下注射拜有利0.7 mL，痛立定2.0 mL；術(shù)后第2、3天輸液9 g/L NaCl、50 g/L葡萄糖、2 g/L甲硝唑氯化鈉溶液各60 mL，菌必治0.5 g、ATP、肌酐、輔酶A、VC，皮下注射拜有利0.7 mL，科特壯1.4 mL。術(shù)后3 d精神狀態(tài)正常，飲食排便正常，停止輸液，口服消瘤丸，術(shù)后第10天拆線，切口愈合良好，患犬精神狀態(tài)、飲食一切正常，繼續(xù)口服消瘤丸1周。

4 討論

患犬經(jīng)過(guò)手術(shù)及術(shù)后治療護(hù)理，病情穩(wěn)定，康復(fù)出院，出院后堅(jiān)持服用消瘤丸預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)，后期回訪預(yù)后良好。從此病例中可以根據(jù)細(xì)胞學(xué)檢查，影像學(xué)檢查進(jìn)行診斷，同時(shí)應(yīng)對(duì)患犬進(jìn)行系統(tǒng)而全面的檢查，由此來(lái)判斷類似此病例的年齡大的犬是否符合手術(shù)條件。

犬肥大細(xì)胞瘤目前有報(bào)道的發(fā)病年齡是3歲～19歲，主要發(fā)生在老年犬，其完整的遺傳學(xué)病因尚未研究清楚，也未發(fā)現(xiàn)有性別傾向性[5]。腫瘤細(xì)胞主要位于真皮層，部分深達(dá)皮下脂肪組織[6]。手術(shù)切除腫瘤是治療犬肥大細(xì)胞瘤的首選，手術(shù)時(shí)應(yīng)同時(shí)切除腫瘤周圍2 cm～3 cm左右的正常組織，并對(duì)切除的腫瘤進(jìn)行評(píng)估以確定是否完全切除腫瘤。C-反應(yīng)蛋白在監(jiān)測(cè)惡性腫瘤治療時(shí)能正確指引合適的化療藥物[7]。犬肥大細(xì)胞瘤的手術(shù)預(yù)后受腫瘤發(fā)生位置、病理學(xué)分級(jí)、腫瘤細(xì)胞增殖速率、術(shù)后護(hù)理等多種因素影響，本病例治療過(guò)程中較為配合，術(shù)后靜養(yǎng)配合中藥調(diào)理，預(yù)后良好。