蘇澤春，和加衛(wèi)，楊正松，楊雅涵，和志嬌，和文佳

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所，云南 麗江 674199)

【研究意義】藍(lán)莓為杜鵑花科(Ericaceae)越桔屬(VacciniumL.)植物[1]，它是世界各國公認(rèn)的營養(yǎng)保健水果，已研究探明其具有多種功能性成分，如對眼健康[2]、改善心血管機(jī)能[3]、抑制脂肪細(xì)胞分化[4]、抗炎癥[5]、糖尿病[6]、有效地誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡[7]、有益于兒童認(rèn)知能力的提高等[8]。因此，藍(lán)莓種植熱和消費(fèi)熱已逐漸席卷全國，但藍(lán)莓應(yīng)季水果主要集中在5月前后上市，其它月份能否實(shí)現(xiàn)藍(lán)莓應(yīng)季上市是農(nóng)業(yè)科研工作者普遍關(guān)注的科學(xué)問題。在商業(yè)生產(chǎn)中，北高叢藍(lán)莓通常應(yīng)用于溫帶，南高叢藍(lán)莓應(yīng)用于熱帶和亞熱帶，而矮叢藍(lán)莓則應(yīng)用于寒帶[9]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)藍(lán)莓種植在云南低緯度高海拔區(qū)域條件下，一些品種會(huì)出現(xiàn)雙季開花結(jié)果的特征[10]，這一發(fā)現(xiàn)給藍(lán)莓錯(cuò)季上市帶來契機(jī)?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】國內(nèi)諸多的藍(lán)莓產(chǎn)區(qū)中，品種夏普藍(lán)的關(guān)注度比較高，在種植過程中多個(gè)產(chǎn)區(qū)已發(fā)現(xiàn)該品種有一年多次成花現(xiàn)象。有學(xué)者在哥倫比亞研究過夏普藍(lán)和比洛克西的豐產(chǎn)性，結(jié)果表明夏普藍(lán)結(jié)實(shí)性更強(qiáng)，36月齡植株的累積產(chǎn)量比比洛克西高60%[11]；有學(xué)者在美國佛羅里達(dá)州西南部采用夏普藍(lán)與其它品種搭配種植，研究結(jié)果表明，在冬季溫暖的氣候條件下搭配種植模式可實(shí)現(xiàn)無休眠藍(lán)莓生產(chǎn)[12]，同時(shí)，乙烯利可延緩夏普藍(lán)開花以應(yīng)對美國東南部春季低溫凍害[13]；夏普藍(lán)引種到中國后，浙江、安徽、云南等省均發(fā)現(xiàn)該品種二次或多次成花現(xiàn)象[14-16]；藍(lán)莓多次成花的理化研究及分子生物學(xué)研究在國內(nèi)還未見報(bào)道，一些模式植物，如擬南芥中的LFY基因轉(zhuǎn)到楊樹中，超量表達(dá)可使7年以上才能開花的楊樹在5個(gè)月內(nèi)開花[17]；植物內(nèi)源激素作為成花的生理信號對植物成花誘導(dǎo)、花芽分化等具有重要影響[18]?？梢?，將LFY基因表達(dá)量與內(nèi)源激素的動(dòng)態(tài)變化關(guān)系相結(jié)合，可為有效探索夏普藍(lán)一年多次開花結(jié)果提供新途徑?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】本研究嘗試將T-PCR技術(shù)下獲得的LFY基因時(shí)空表達(dá)與內(nèi)源激素含量的動(dòng)態(tài)變化相結(jié)合，將夏普藍(lán)一年多次開花機(jī)理的研究引向深入?！緮M解決的關(guān)鍵問題】研究試圖通過觀測夏普藍(lán)一整年的LFY基因的表達(dá)量和內(nèi)源激素含量之間的動(dòng)態(tài)變化關(guān)系，以期揭示不同時(shí)期內(nèi)源激素含量變化與成花基因之間的內(nèi)在聯(lián)系，為闡明夏普藍(lán)多次成花的原因提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

藍(lán)莓夏普藍(lán)樣品采集于云南省大理市銀橋鎮(zhèn)鶴下村云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所大理試驗(yàn)基地，地處100.12°E，25.76°N，海拔2014 m，以低緯高原季風(fēng)氣候?yàn)橹?，四季溫差變化不大，干濕分明，年平均氣?6.20 ℃，小于7 ℃的低溫280 h，年降雨量800 mm，pH 4.96，土壤有機(jī)質(zhì)含量58.69%。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 藍(lán)莓成花基因的克隆與表達(dá) 取5年生夏普藍(lán)的花芽，取樣后立刻放入液氮中保存，隨后置于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?018年4—11月進(jìn)行取樣，原則上每間隔7 d取1次樣，取樣過程中視花芽的生長發(fā)育情況存在小幅度的調(diào)整。

LFY同源基因的克隆與表達(dá)分析是通過GenBank數(shù)據(jù)庫中檢索近源植物L(fēng)FY同源基因序列，使用DNAMNA軟件進(jìn)行序列比對分析，結(jié)合軟件 Primer Premier 5.0，在比對結(jié)果的同源區(qū)設(shè)計(jì)的定量引物序列: YG-S(GTATTGCCAAGGAGCGAGGTGAA)和YG-A(GTTGGTCACAGTCAAATCACCCG)。選取藍(lán)莓的RH8基因?yàn)閮?nèi)參基因，引物序列為RH8-S(GGTGAATCGAGTAGAACTGCTGGC)和RH 8-A(AGATTCCTGCATGCACCATTCCGA)。

藍(lán)莓LFY同源基因的克隆與表達(dá)：參照葉陽陽[19]的方法進(jìn)行。對不同分化時(shí)期的藍(lán)莓花芽中LFY基因的表達(dá)量進(jìn)行比較分析，明確在花芽分化的不同時(shí)期LFY基因表達(dá)量的變化。

1.2.2 內(nèi)源激素含量的測定 2018年5月至2019年7月，選擇生長正常且樹勢基本一致的植株作為采樣植株，生長期在樹羽冠中上部采集腋芽作為內(nèi)源激素分析用的樣品；休眠期采集結(jié)果枝頂部芽體；開春芽體萌動(dòng)后，采集結(jié)果枝不同部位的芽體。3 次重復(fù)，每次各取芽體30個(gè)以上，樣品均為混合樣品。原則上每間隔15 d取1次樣，取樣過程中視芽的生長發(fā)育情況存在小幅度的調(diào)整。將擦拭干凈的樣品立即放入冰盒中帶回試驗(yàn)室，分類置入-80 ℃液氮中速凍保存。內(nèi)源激素測試樣品液氮低溫保存后，送到上海中科新生命生物科技有限公司進(jìn)行檢測，采用質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(Multiple reaction monitoring, MRM)技術(shù)結(jié)合UHPLC-MS/MS方法進(jìn)行檢測。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

藍(lán)莓成花基因克隆表達(dá)量及內(nèi)源激素含量采用Excel軟件作圖，內(nèi)源激素含量的差異性分析采用軟件SPSS 23.0進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 LFY基因的表達(dá)量與內(nèi)源激素ABA的動(dòng)態(tài)變化

結(jié)合不同生長發(fā)育時(shí)期夏普藍(lán)成花基因克隆表達(dá)量、ABA內(nèi)源激素含量及內(nèi)源激素多重比較分析結(jié)果可以看出(圖1)，LFY基因在2018年4月27日、2018年6月2—5日、2018年8月7日、2018年9月7—18日、2018年11月1日分別出現(xiàn)表達(dá)峰值，在兩兩峰值之間都對應(yīng)發(fā)生了ABA內(nèi)源激素的峰值，如2018年4月27日與2018年6月2—5日，ABA在5月20日出現(xiàn)峰值(405.25 ng/g)；2018年6月2—5日與2018年8月7日，ABA在7月4日出現(xiàn)峰值(489.81 ng/g)；2018年8月7日與2018年9月7—18日，ABA在8月20日出現(xiàn)峰值(509.09 ng/g)；2018年9月7—18日與2018年11月1日，ABA在10月20日出現(xiàn)峰值(890.01 ng/g)。從2018年11月之后的ABA變化趨勢可以看出， 11月至翌年的4月中的 3月20日，ABA含量也出現(xiàn)1次峰值(425.71 ng/g)，正好出現(xiàn)在第1次LFY基因表達(dá)峰值前(4月27日)。從ABA含量的多重比較結(jié)果可以看出，峰值出現(xiàn)的時(shí)間節(jié)點(diǎn)中，3月20日與5月20日的差異不顯著、7月4日與8月20日的差異也不顯著。從夏普藍(lán)成花基因克隆表達(dá)量與ABA內(nèi)源激素含量的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律還可以看出，促成成花基因克隆表達(dá)量峰值的發(fā)生，ABA濃度幾乎都處于400 ng/g以上的濃度值，全年中，夏普藍(lán)中的ABA在11月下旬至翌年3月上旬處于較低濃度范圍內(nèi)，這一發(fā)現(xiàn)可為深入探索夏普藍(lán)一年多次開花提供數(shù)據(jù)上支撐。

圖1 LFY基因的表達(dá)量和內(nèi)源激素ABA的動(dòng)態(tài)變化Fig.1 Dynamic changes of LFY gene expression and endogenous hormone ABA

2.2 LFY基因的表達(dá)量與內(nèi)源激素IAA的動(dòng)態(tài)變化

從圖2可以看出，在第2次與第3次LFY基因峰值之間，IAA含量從2018年5月4日的2.18 ng/g逐漸遞增到2018年6月20日的5.43 ng/g，然后急劇下滑至2018年7月4日的0.95 ng/g，在2018年7月20日出現(xiàn)了LFY基因峰值發(fā)生期間的第2次較高濃度值(8.66 ng/g)；后面3次LFY基因峰值發(fā)生期間，IAA含量呈先升后降的拋物線態(tài)勢，從2018年8月4日持續(xù)至2018年11月20日，濃度最低為2018年8月4日(0.74 ng/g)，最高為2018年10月20日(2.33 ng/g)；整體而言，前2次的IAA含量明顯比第3次的高。持續(xù)對IAA含量進(jìn)行檢測后發(fā)現(xiàn)，2018年12月20日、2019年3月20日的IAA含量又呈現(xiàn)出波峰，由此可見，LFY基因表達(dá)量與IAA含量的聯(lián)系不密切。

圖2 LFY基因的表達(dá)量和內(nèi)源激素IAA的動(dòng)態(tài)變化Fig.2 Dynamic changes of LFY gene expression and endogenous hormone IAA

比較不同生長發(fā)育時(shí)期內(nèi)源激素IAA含量可以看出，2018年7月4日(0.95 ng/g)、2018年11月20日(0.74 ng/g)、2019年1月20日(1.4 ng/g)是IAA處于波谷的3個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)，它們之間的IAA含量差異均不顯著。2018年7月4日、2018年11月20日、2019年1月20日的波谷出現(xiàn)后，IAA含量迅速提升至2018年7月20日的8.66 ng/g、2018年12月20日的6.06 ng/g、2019年3月20日的6.34 ng/g的波峰。從分析結(jié)果可以看出，2018年7月20日的IAA含量顯著高于2018年12月20日和2019年3月20日，2018年12月20日與2019年3月20日之間差異不顯著。

2.3 LFY基因的表達(dá)量與內(nèi)源激素ACC的動(dòng)態(tài)變化

從圖3可以看出，LFY基因峰值發(fā)生期間，以2018年8月20日為界點(diǎn)，前端的乙烯代謝前體ACC的波動(dòng)折線猶如以該界點(diǎn)為圓點(diǎn)，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)了180°后能與后端的波動(dòng)折線相重合一般。界點(diǎn)前，乙烯代謝前體ACC兩次波峰發(fā)生的時(shí)間分別為2018年5月20日(75.85 ng/g)、2018年8月4日(67.38 ng/g)，隨著ACC波峰的發(fā)生，LFY成花基因?qū)?yīng)出現(xiàn)2次表達(dá)峰值，時(shí)間分別為2018年6月2日和2018年8月7日。界點(diǎn)后，乙烯代謝前體ACC兩次波谷發(fā)生的時(shí)間分別為2018年9月4日(38.76 ng/g)、2018年10月20日(33.11 ng/g)，隨著ACC波谷的出現(xiàn)，LFY成花基因也對應(yīng)出現(xiàn)2次表達(dá)峰值，時(shí)間分別為2018年9月7日和2018年11月1日。LFY基因峰值發(fā)生之外的時(shí)間范圍內(nèi)，乙烯代謝前體的ACC含量出現(xiàn)2次峰值，時(shí)間分別為2018年12月4日(70.22 ng/g)、2019年1月4日(75.65 ng/g)。

圖3 LFY基因的表達(dá)量和內(nèi)源激素ACC的動(dòng)態(tài)變化Fig.3 Dynamic changes of LFY gene expression and endogenous hormone ACC

比較不同生長發(fā)育時(shí)期內(nèi)源激素ACC含量可以看出， 2018年5月20日、2018年8月4日、2018年12月4日、2019年1月4日為ACC波峰出現(xiàn)時(shí)間，它們之間的ACC含量差異不顯著；界點(diǎn)(2018年8月20日)后，2018年9月4日、2018年10月20日為ACC波谷出現(xiàn)時(shí)間，二者間的ACC含量差異也不顯著。

2.3 LFY基因的表達(dá)量與內(nèi)源激素CTK的動(dòng)態(tài)變化

從圖4可以看出，LFY基因峰值發(fā)生期間，內(nèi)源激素CTK含量在2018年8月4日出現(xiàn)最大峰值，濃度為35.68 ng/g，在2018年6月20日和2018年9月4日也出現(xiàn)1次小的峰值，濃度分別為16.06和13.46 ng/g；2018年6月20日前，CTK含量呈緩慢上升趨勢；2018年9月4日后，CTK含量呈緩慢下降趨勢。LFY基因峰值發(fā)生之外的時(shí)間范圍內(nèi)，CTK含量總體上也維持在較低的濃度水平。

圖4 LFY基因的表達(dá)量和內(nèi)源激素CTK的動(dòng)態(tài)變化Fig.4 Dynamic changes of LFY gene expression and endogenous hormone CTK

比較不同生長發(fā)育時(shí)期內(nèi)源激素CTK含量可以看出，2018年6月20日前，2018年5月4日與2018年5月20日、2018年6月4日與2018年6月20日差異不顯著，其余時(shí)間點(diǎn)差異顯著；2018年9月4日至2018年12月20日，所有的CTK含量差異均不顯著；其余時(shí)間點(diǎn)存在不同程度的差異。

2.4 LFY基因的表達(dá)量與內(nèi)源激素GAs的動(dòng)態(tài)變化

從圖5可以看出，在LFY基因峰值發(fā)生期間，GAs含量從2018年5月4日的較低濃度值(1.98 ng/g)一直遞增到2018年6月20日的第1次峰值(8.06 ng/g)，然后急劇下滑至2018年7月4日的谷底(3.99 ng/g)，接著在2018年7月20日出現(xiàn)了第2次高濃度值(8.41 ng/g)，隨后一直到2018年11月4日，GAs一直處于較低的濃度水平。2018年11月20日GAs含量有所回升，濃度為3.74 ng/g，接著又下降至2019年1月4日(2.47 ng/g)才開始逐漸增加。

圖5 LFY基因的表達(dá)量和內(nèi)源激素GAs的動(dòng)態(tài)變化Fig.5 Dynamic changes of LFY gene expression and endogenous hormone GAs

比較不同生長發(fā)育時(shí)期內(nèi)源激素GAs含量可以看出，在LFY基因峰值發(fā)生期間，第1次峰值前(2018年6月20日)的2018年5月4日、2018年5月20日、2018年6月4日、2018年6月20日的濃度值，兩兩差異達(dá)到顯著水平；第1次峰值(2018年6月20日)與第2次峰值(2018年8月4日)的2018年7月4日、2018年7月20日、2018年8月4日的濃度值，兩兩差異達(dá)到顯著水平；第2次峰值(2018年8月4日)至2018年11月4日的GAs含量，兩兩差異也達(dá)到顯著水平。在LFY基因峰值發(fā)生之外的時(shí)間范圍內(nèi)，2018年11月20日至2019年1月20日，除2018年11月20日與2018年12月4日、2018年12月20日與2019年1月4日差異不顯著外，其余時(shí)間節(jié)點(diǎn)的GAs含量均達(dá)到顯著水平。

3 討 論

果樹二次開花通常被認(rèn)為是不正常的生理現(xiàn)象，會(huì)致使來年產(chǎn)量和質(zhì)量的降低[20]。由于藍(lán)莓是多年生小灌木，每年新長的萌蘗枝都能培養(yǎng)成結(jié)果枝，因此，藍(lán)莓二次開花對生產(chǎn)的利與弊應(yīng)結(jié)合品種特性與種植環(huán)境來定。藍(lán)莓原產(chǎn)于北美，理論上屬于低溫成花植物[21]，而一些品種適應(yīng)云南的特殊環(huán)境后，沒有低溫條件也能開花，甚至有二次或多次開花的特征[22]，表現(xiàn)為春花果結(jié)果枝為頭一年8—10 月的秋梢、夏花果為當(dāng)年的春梢、秋花果為當(dāng)年的夏梢。有學(xué)者在浙江對3個(gè)藍(lán)莓品種作了內(nèi)源激素和StLFY基因表達(dá)等方面的研究[23]，由于只開1次花，又只在花期取樣，只探明了簡單的規(guī)律性，無法為多次成花機(jī)理提供充足的理論依據(jù)。由于品種特性的不同，多數(shù)品種兩次開花之間不會(huì)存在時(shí)間的重疊，而夏普藍(lán)卻存在時(shí)間的重疊，說明該品種的成花機(jī)理非常特殊，所表現(xiàn)的一些生理現(xiàn)象也會(huì)與其它品種有所不同。

ABA是一種重要的植物生長調(diào)節(jié)劑，能參與多種生理調(diào)控和多種非生物脅迫應(yīng)答。目前，ABA在藍(lán)莓生理調(diào)控方面只有零星報(bào)道，但結(jié)論依然存在爭議，有學(xué)者認(rèn)為花芽分化過程中，ABA呈降—升—降的變化趨勢，并提出花芽分化末期ABA值最大[24]；而有學(xué)者認(rèn)為低濃度ABA更容易使奧尼爾、梯芙藍(lán)、園藍(lán)成花[23]。本研究結(jié)果表明，ABA積累到一個(gè)峰值后，隨著濃度的變小刺激了LFY基因的表達(dá)；整體而言，LFY基因峰值發(fā)生期間，ABA含量都普遍高于發(fā)生之外，說明較低濃度的ABA含量也具有誘導(dǎo)花芽休眠、抑制成花的作用，這一觀點(diǎn)與李廣等[25]對側(cè)柏的研究一致。

生長素是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的植物激素，在植物生長過程中主要的作用是促進(jìn)細(xì)胞的伸長生長。目前，藍(lán)莓生長素的研究大多側(cè)重于外源激素對種苗生根等的影響，在生理調(diào)控方面，生長素對花芽分化的作用尚無統(tǒng)一定論，付傳明等[26]認(rèn)為芽中低水平的IAA 有利于花芽分化，梁釩等[27]卻認(rèn)為高水平IAA 有利于花芽分化。本研究中，LFY基因峰值發(fā)生期間，IAA在2018年6月20日和2018年7月20日出現(xiàn)兩次波峰，其余時(shí)段卻處于較低的濃度值；LFY基因峰值發(fā)生之外的時(shí)間范圍內(nèi)，IAA在2018年12月20日和2019年3月20日也出現(xiàn)兩次波峰。結(jié)合5次LFY基因表達(dá)量峰值出現(xiàn)時(shí)間，本研究認(rèn)為，2018年6月20日和2018年7月20日出現(xiàn)兩次波峰與花芽分化的聯(lián)系并不緊密，這一時(shí)期是藍(lán)莓抽梢及新根發(fā)生的關(guān)鍵時(shí)期，但是否與之相關(guān)還需進(jìn)一步研究才能定論。王海波等[28]研究葡萄表明，IAA具有葉片衰老前期促進(jìn)葉片生長發(fā)育、葉片衰老后期加速衰老的雙重作用，本研究IAA 后兩次波峰出現(xiàn)是否也存在雙重作用也需進(jìn)一步開展研究。

乙烯的基本生理功能是解除種子休眠、促使果實(shí)成熟和調(diào)節(jié)植物衰老，因此，植物在多個(gè)生長發(fā)育階段所需的乙烯較少。大量研究已證實(shí)，乙烯可調(diào)控花性別和授粉過程。對于瓜類而言，乙烯被認(rèn)為是黃瓜的“性激素”，主要是促進(jìn)雌花發(fā)育[29]。本研究中，LFY基因峰值發(fā)生期間, 乙烯代謝前體ACC的波動(dòng)折線猶如以2018年8月20日為界點(diǎn)，前端的波動(dòng)折線順時(shí)針旋轉(zhuǎn)了180°后幾乎能與后端的波動(dòng)折線相重合，但無論前端還是后端，都有LFY基因表達(dá)量峰值的發(fā)生。前端對應(yīng)的ACC濃度值相對較高，后端ACC濃度值相對較低。前端，果園內(nèi)搭配的雙豐、藍(lán)豐、比羅西、紅粉佳人等授粉樹品種不定期開花，后端，果園內(nèi)只有夏普藍(lán)獨(dú)自開花，有無花粉會(huì)刺激夏普藍(lán)作出性別分化上的表達(dá)，這方面的信號傳導(dǎo)途徑已有詳細(xì)的報(bào)告，說明前端的乙烯代謝前體ACC含量維持較高濃度時(shí)有利于花芽分化朝雌性化方向表達(dá)；后端的乙烯代謝前體ACC濃度相對較低有利于花芽分化朝雄性化方向表達(dá)。

細(xì)胞分裂素主要的作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂，主要存在于可進(jìn)行細(xì)胞分裂的部位。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為細(xì)胞分裂素(CTK)有促進(jìn)細(xì)胞分裂、芽的分化、除頂端優(yōu)勢等作用。從表觀角度來看，夏普藍(lán)開花與結(jié)果之間不存在明顯的界線，但每次開花結(jié)果的部位不相同，春花果結(jié)果枝為頭一年8—10 月的秋梢、夏花果為當(dāng)年的春梢、秋花果為當(dāng)年的夏梢，本研究中，4月4日出現(xiàn)的高濃度CTK是春梢上分化花芽并結(jié)夏花果的關(guān)鍵；6月20出現(xiàn)的高濃度CTK是夏梢上分化花芽并結(jié)秋花果的關(guān)鍵；9月4日出現(xiàn)的高濃度CTK是秋梢上分化花芽并結(jié)春花果的關(guān)鍵。

赤霉素是植物體內(nèi)具有重要作用的一類激素，其作用主要有促進(jìn)節(jié)間伸長、花的誘導(dǎo)和種子萌發(fā)等。大量研究表明，赤霉素?zé)o論在長日照還是短日照條件下都能夠誘導(dǎo)成花,對未經(jīng)春化作用的植物和長日照植物誘導(dǎo)開花效果顯著。研究還發(fā)現(xiàn)，GAs與IAA具有如協(xié)同促進(jìn)果實(shí)發(fā)育莖的伸長等作用[30]。本研究中，夏普藍(lán)也表現(xiàn)出一定的協(xié)同作用，LFY基因表達(dá)量的前2次峰值出現(xiàn)時(shí)伴有GAs和IAA濃度的提高，而LFY基因表達(dá)量的后3次峰值出現(xiàn)時(shí)，IAA和GAs卻一直處于較低濃度水平，由此可見，8月中旬前，GAs與IAA含量的協(xié)同變化主要表現(xiàn)為協(xié)同促進(jìn)莖的伸長和果實(shí)發(fā)育，8月中旬以后，主要表現(xiàn)為協(xié)同促進(jìn)果實(shí)發(fā)育。

4 結(jié) 論

結(jié)合藍(lán)莓LFY基因表達(dá)量與內(nèi)源激素的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行分析后，發(fā)現(xiàn)LFY基因峰值發(fā)生期間, ABA峰值間或出現(xiàn)在每一次LFY基因峰值之前，隨著ABA濃度由每個(gè)波峰走向波谷，都會(huì)刺激LFY基因量的表達(dá)；在第2次與第3次LFY基因峰值之間，IAA含量從2.18 ng/g遞增到5.43 ng/g，然后急劇下滑到0.95 ng/g，又急速升至8.66 ng/g，其余時(shí)刻的IAA含量一致維持在較低水平，僅結(jié)合LFY基因表達(dá)量進(jìn)行分析，生長素IAA對成花機(jī)理的作用機(jī)理尚不清晰；LFY基因峰值發(fā)生期間, 乙烯代謝前體ACC的波動(dòng)折線猶如以2018年8月20日為界點(diǎn)，前端的波動(dòng)折線順時(shí)針旋轉(zhuǎn)了180°后幾乎能與后端的波動(dòng)折線相重合。前端有較高濃度的ACC、后端有較低濃度的ACC，但都對應(yīng)有LFY基因峰值的發(fā)生，不同濃度的ACC調(diào)控著花性別分化的發(fā)生；細(xì)胞分裂素CTK能促腋芽細(xì)胞分裂與伸長、促進(jìn)芽分化為花芽，4月4日出現(xiàn)的高濃度CTK是春梢上分化花芽并結(jié)夏花果的關(guān)鍵；6月20出現(xiàn)的高濃度CTK是夏梢上分化花芽并結(jié)秋花果的關(guān)鍵；9月4日出現(xiàn)的高濃度CTK是秋梢上分化花芽并結(jié)春花果的關(guān)鍵；赤霉素在多場合下均表現(xiàn)為兩兩之間差異顯著，高低間或發(fā)生變化，并與其它激素一起促進(jìn)節(jié)間伸長和誘導(dǎo)成花。