陳文強(qiáng)，汪小福，陳笑蕓，彭城，徐俊鋒，蔡健*

(1.阜陽師范大學(xué) 生物與食品工程學(xué)院，安徽 阜陽 236037；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全危害因子與風(fēng)險(xiǎn)防控國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 杭州 310021)

鐵皮石斛(DendrobiumofficinaleKimura et Migo)為蘭科石斛屬多年生附生型草本植物[1]，是我國常用的傳統(tǒng)中藥材，具有滋陰除熱、生津養(yǎng)胃等功效[2]，被譽(yù)為“中華九大仙草”之首[3]。近年來，現(xiàn)代藥理學(xué)對(duì)鐵皮石斛的成分開展了深入的研究，表明其有效成分具有增加免疫力、抗衰老與氧化等作用[4]。鐵皮石斛鮮枝不易保存[5]，通常會(huì)被加工成“楓斗”，鐵皮楓斗是近幾年來頗受歡迎的保健品之一[6]。鐵皮石斛市場(chǎng)需求量大，但其生長規(guī)律以及野生資源的破壞使得產(chǎn)量不足[7]，因而價(jià)格昂貴。市場(chǎng)存在利用外觀相似、性質(zhì)相近的金釵石斛或紫皮石斛等來充當(dāng)鐵皮石斛原料進(jìn)行加工和售賣的現(xiàn)象[8]，嚴(yán)重影響了鐵皮石斛市場(chǎng)的健康發(fā)展，損害了消費(fèi)者合法權(quán)益。

本文針對(duì)鐵皮石斛的組織形態(tài)、顯微鑒定、理化分析和DNA分子生物學(xué)鑒定等進(jìn)行闡述，介紹這幾個(gè)方面的研究進(jìn)展，分析存在的問題或不足，結(jié)合新技術(shù)的涌現(xiàn)和實(shí)際檢測(cè)的需要對(duì)鐵皮石斛鑒定方法和技術(shù)的發(fā)展進(jìn)行了分析和展望。

1 組織形態(tài)鑒別

組織形態(tài)鑒定主要以鐵皮石斛的表面特征，包括鐵皮石斛的莖、葉、花等器官以及組織學(xué)特征為研究對(duì)象。通常鐵皮石斛的形態(tài)特征為：莖為叢生，呈直立狀，節(jié)明顯，分節(jié)處略彎曲，有些會(huì)呈“Z”狀，通體圓柱；表面暗綠色或黃綠色，葉鞘具有紫色斑點(diǎn)；易折斷，汁較為黏稠，味淡微苦而回味甜，嚼之有濃厚黏性；鮮根近乳白色，老根貼近棕色[9-14]。包英華[15]通過收集不同地區(qū)的鐵皮石斛，根據(jù)種內(nèi)組織形態(tài)變異特征將鐵皮石斛分為9個(gè)變異類型：紫桿紅葉型、紅桿紅葉型、青桿細(xì)莖型、青桿粗莖型、紡錘粗莖型、矮桿粗莖型、矮桿彎曲型、長桿黑節(jié)型和短桿黑節(jié)型。丁小余等[16]對(duì)不同產(chǎn)地的鐵皮石斛進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)可分“F”楓斗型與“H”非楓斗型兩類。“F”型總體更為柔軟，具有較為豐富的蠟質(zhì)與黏多糖，適合加工為優(yōu)質(zhì)楓斗；“H”型莖較長，質(zhì)地堅(jiān)硬，不宜作為鐵皮楓斗的原料。

組織形態(tài)的鑒定是傳統(tǒng)的鐵皮石斛鑒定方法，方便快捷，主要依靠鑒定人的感官分析，基本不需要借助儀器。但對(duì)鑒定人的鑒定經(jīng)驗(yàn)及材料的新鮮度與完整性要求較高。

2 顯微鑒別

自20世紀(jì)80年代之后，隨著顯微技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，對(duì)于鐵皮石斛顯微性狀研究越加精密。趙玉嬌等[17-20]分別根據(jù)組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞形狀對(duì)鐵皮石斛的莖橫切面、薄壁細(xì)胞切片、維管束數(shù)量以及粉末顯微特征等進(jìn)行具體描述：莖切面大體呈多邊形，微木化，細(xì)胞壁加厚；薄壁細(xì)胞也呈多角形，含有大量淀粉顆粒，外側(cè)薄壁細(xì)胞中含硅質(zhì)塊，草酸鈣針晶多成束存在，其黏液細(xì)胞多貼近表皮處；維管束略排成4～5圈，韌皮部狹??；粉末在顯微鏡下是淡黃色，表觀呈無規(guī)則狀顆粒，均能觀察出淀粉顆粒，多為單粒。蔡沓栗等[14]基于《中華本草》記錄，對(duì)鐵皮石斛根、莖、葉進(jìn)行全面的組織形態(tài)鑒定，細(xì)化僅從單一橫切面分析，結(jié)合多組織細(xì)胞觀察，明確其特征及鑒別方法，確定根橫切面中鐵皮石斛具有明顯木質(zhì)增厚的外皮層。蔣素華等[21]利用冷凍切片技術(shù)，通過光鏡和蔗糖保護(hù)，在蔗糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)8%、冷凝溫度-25 ℃的最適條件，觀察鐵皮石斛根、莖、葉的顯微結(jié)構(gòu)，該方法可在蘭科植物中廣泛應(yīng)用。同時(shí)，不同產(chǎn)地的鐵皮石斛在顯微鑒定比較時(shí)無較大區(qū)別。李婭瓊等[22-23]對(duì)野生及栽培變異的鐵皮石斛與普通組培鐵皮石斛的顯微特征進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)只有在個(gè)別部位有些不同，總體上呈現(xiàn)的特征是一樣的。

操作簡(jiǎn)便、樣品用量少是顯微性狀鑒定的優(yōu)點(diǎn)，至今仍是中藥材鑒定的常用方法之一。而針對(duì)鐵皮石斛的顯微鑒定主要偏向鐵皮石斛與其余藥用石斛之間的差別，缺少明確鑒定鐵皮石斛的專屬性狀顯微特征。

3 理化性質(zhì)

理化鑒定指利用化學(xué)或物理的方法，對(duì)鐵皮石斛中所含有效成分進(jìn)行定性分析，以獲取具有鑒別價(jià)值的理化特征，鐵皮石斛中常用的理化鑒定方法包括色譜法、光譜法及質(zhì)譜法等。

3.1 色譜法

陳曉梅等[24]利用氣相色譜法(GC)分析鐵皮石斛中單糖組成，多糖中甘露糖和葡萄糖相對(duì)含量比值可區(qū)分鐵皮石斛與其余石斛。王麗麗等[25]采用裂解氣相色譜(Py-GC)結(jié)合系統(tǒng)聚類分析所得的指紋圖譜，能區(qū)別真?zhèn)舞F皮石斛。

孟海濤[26]以鐵皮石斛等3種霍山產(chǎn)石斛(霍山石斛、鐵皮石斛與銅皮石斛)為材料，通過高效液相色譜(HPLC)技術(shù)建立霍山產(chǎn)3種石斛葉、莖、花的HPLC指紋圖譜體系，明確鐵皮石斛在(56.57±0.02)min處存在特征色譜峰。黃月純等[27]對(duì)不同地區(qū)鐵皮石斛葉片黃酮類成分標(biāo)示HPLC特征圖譜，表明不同產(chǎn)地種源成分組成和比例存在顯著差異。梁芷韻等[28]優(yōu)化了鐵皮石斛黃酮苷類成分HPLC特征圖譜分析方法，明確指出不同種源的共性成分與特異性成分，可通過參照物峰判斷。宋紅坤等[29]建立鐵皮石斛HPLC特征圖譜，初步比較8個(gè)品種石斛HPLC特征圖譜差異，穩(wěn)定可靠，重復(fù)性好。吳成鳳[30]對(duì)鐵皮石斛黃酮類成分采用超高效液相色譜技術(shù)(UHPLC)分析，且得到鐵皮石斛特征圖譜可將其與霍山石斛、細(xì)莖石斛成功鑒別。Xu等[31]利用高效凝膠滲透色譜法(HPGPC)建立基于鐵皮石斛多糖成分的HPGPC指紋圖譜，成功鑒定鐵皮石斛與其余石斛。

3.2 光譜法

光譜鑒定分析主要是依據(jù)植物材料中所含成分對(duì)紅外光或紫外光的吸收峰值疊加后形成相應(yīng)的光譜，因所含成分及含量不一，所以其所對(duì)應(yīng)的出峰時(shí)間、峰形等存在差異，通過比較可實(shí)現(xiàn)植物間的鑒別。在鐵皮石斛中常用的光譜鑒定有紫外光譜法與紅外光譜法。鄧星燕[32]通過紫外指紋圖譜與偏最小二乘判別分析建立模法，可將云南5個(gè)地區(qū)鐵皮石斛及其余9種藥用石斛均成功鑒別和溯源，且發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛莖與葉的紫外指紋圖譜差異很大，經(jīng)類比后葉的紫外指紋圖譜更具有產(chǎn)地特征。

李兆奎等[33]首次通過紅外光譜法對(duì)5種常見藥用石斛(包括鐵皮石斛)進(jìn)行鑒定分析，在1 700～1 200 cm-1與1 000～700 cm-1處均具有特征峰圖，可將5種石斛成功鑒別。白音[34]對(duì)42種藥用石斛進(jìn)行紅外光譜分析，結(jié)果表明，在3 000～2 800 cm-1以及1 800～400 cm-1范圍之內(nèi)，紅外指紋圖譜存在顯著差異。上述研究說明紅外光譜技術(shù)可用于多種藥用石斛鑒別。劉瑞婷[35]通過近紅外光譜技術(shù)結(jié)合SIMCA模式識(shí)別方法對(duì)7種不同產(chǎn)地的鐵皮石斛進(jìn)行鑒別，成功鑒別7個(gè)產(chǎn)地的鐵皮石斛；并且針對(duì)3種不同品種楓斗完整樣與粉碎樣進(jìn)行近紅外光譜分析鑒定，均能成功鑒定。劉文杰[36]對(duì)不同產(chǎn)地的鐵皮石斛葉、莖、根部位進(jìn)行多糖紅外光譜分析，得出不同產(chǎn)地鐵皮石斛多糖含量差異很大的結(jié)論，由此可將廣西、云南與浙江的鐵皮石斛區(qū)分開。張雪瑛[37]利用傅里葉變換紅外光譜技術(shù)得到鐵皮石斛等9種石斛的特征光譜，并對(duì)4個(gè)產(chǎn)地的鐵皮石斛進(jìn)行紅外光譜分析，可知在紅外光譜的峰高上存在差異，可作為輔助手段建立鐵皮石斛綜合鑒定體系。

3.3 質(zhì)譜法

楊健等[38]采用熱電離質(zhì)譜和穩(wěn)定同位素質(zhì)譜分別測(cè)定鐵皮石斛中鍶元素等，采用主成分分析構(gòu)建(PCA)模型能夠區(qū)分不同產(chǎn)地的鐵皮石斛。嚴(yán)華等[39]采用微波消解法對(duì)樣品進(jìn)行前處理，建立電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)方法來測(cè)定鐵皮石斛中5種重金屬元素含量符合現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)。潘琳琳[40]基于核磁共振(NMR)代謝組分析和最小二乘支持向量機(jī)(LS-SVM)模型鑒別鐵皮石斛粉是否摻假，準(zhǔn)確性達(dá)98%。

Jiao等[41]利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)方法，并利用PCA分析，鑒定出78種代謝物。Yang等[42]使用超高效液相色譜飛行時(shí)間質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF-MS)和多變量分析系統(tǒng)地表征了來自不同種源的鐵皮石斛化學(xué)特征。將UPLC-Q-TOF-MS數(shù)據(jù)通過PCA分析，偏最小二乘判別分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘分析(OPLS-DA)顯示出明顯的分離。馬旖旎[43]針對(duì)7個(gè)不同產(chǎn)地的鐵皮石斛采用頂空固相微萃取技術(shù)(HS-SPEM)提取鐵皮石斛的有效成分，并結(jié)合GC-MS技術(shù)對(duì)相應(yīng)化學(xué)成分進(jìn)行解析，并建立了7個(gè)不同產(chǎn)地的鐵皮石斛葉片有效成分的HPLC指紋圖譜體系。Jin等[44]從不同生長年限的鐵皮石斛和霍山石斛莖中萃取分離出代謝物，并使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)對(duì)其進(jìn)行了鑒定，對(duì)11種具有明顯分化的代謝物進(jìn)行主成分分析(PCA)和OPLS-DA分析，作為鑒定區(qū)分鐵皮石斛和霍山石斛的生物標(biāo)記。

4 DNA分子生物學(xué)鑒定

DNA分子生物學(xué)鑒定是以生物大分子核酸的多態(tài)性或特異性為基礎(chǔ)的分子水平鑒定。DNA分子生物學(xué)鑒定具有準(zhǔn)確性高、數(shù)量級(jí)多、遍及整個(gè)基因組、遺傳穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。隨著DNA分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，越來越多的DNA分子生物學(xué)技術(shù)被應(yīng)用到鐵皮石斛的鑒別當(dāng)中。目前常用的有DNA分子標(biāo)記方法(如RAPD、ISSR、AFLP等)及DNA條形碼技術(shù)等。

4.1 隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性

RAPD(random amplified polymorphic DNA)技術(shù)是以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)，對(duì)不同模板DNA采用隨機(jī)合成的寡聚核苷酸序列引物擴(kuò)增，DNA片段呈現(xiàn)多態(tài)性[45]，僅在某一特定模板中成功擴(kuò)增即可作為該模板的分子標(biāo)記。Klinbunga等[46]首先通過對(duì)不同屬植物進(jìn)行擴(kuò)增，尋找屬間特有的產(chǎn)物，再通過對(duì)屬內(nèi)不同種植物進(jìn)行擴(kuò)增，尋找種內(nèi)特有產(chǎn)物，最后得到種內(nèi)不同個(gè)體之間的差異進(jìn)行鑒別。顏松[47]利用RAPD技術(shù)對(duì)鐵皮石斛基因組進(jìn)行擴(kuò)增，優(yōu)化反應(yīng)條件，為該技術(shù)在鐵皮石斛的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。張銘等[48]通過RAPD技術(shù)對(duì)鐵皮石斛基因組進(jìn)行擴(kuò)增，篩選最初設(shè)計(jì)的50種RAPD引物，成功選出一組對(duì)鐵皮石斛具有高度特異性的引物，達(dá)到正確鑒別鐵皮石斛與其余藥用石斛的目的。顧慧芬等[49]對(duì)鐵皮石斛試管苗采用RAPD技術(shù)，成功設(shè)計(jì)出能特異性鑒定鐵皮石斛的引物，并對(duì)其進(jìn)行多代培育驗(yàn)證其穩(wěn)定性。丁鴿等[50]對(duì)8個(gè)不同地區(qū)野生鐵皮石斛進(jìn)行RAPD技術(shù)分析鑒別，成功設(shè)計(jì)出S412引物，該引物可將8個(gè)野生群體準(zhǔn)確鑒別，并具有良好的穩(wěn)定和重復(fù)性。

4.2 簡(jiǎn)單重復(fù)序列區(qū)間

ISSR(inter-simple sequence repeat)技術(shù)是以微衛(wèi)星重復(fù)序列(SSR)為基礎(chǔ)[51]，在其引物3′或5′端錨定2～4個(gè)堿基成為新的引物，如[CT]4CG、[AG]4CT等，通過擴(kuò)增兩側(cè)反向SSR序列，電泳后呈現(xiàn)多態(tài)性，分析特征片段并建立進(jìn)化樹用于屬間及種間資源鑒定等。盧家仕等[52]利用ISSR技術(shù)對(duì)24份不同石斛屬樣品進(jìn)行多樣性和聚類分析，可將24份石斛屬分為6個(gè)類群，與傳統(tǒng)分類一致。李明焱等[53]采用ISSR技術(shù)對(duì)新培育的鐵皮石斛幼苗進(jìn)行分析，成功篩選出鐵皮石斛新品種新斛1號(hào)，電泳多態(tài)性與其余品種鐵皮石斛存在明顯差異。段媛媛等[54]采用單因素試驗(yàn)結(jié)合ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)霍山石斛與鐵皮石斛進(jìn)行多態(tài)性分析，篩選出6條多態(tài)性與穩(wěn)定性好的引物，可用于鐵皮石斛與霍山石斛的鑒定。ISSR技術(shù)汲取RAPD與SSR技術(shù)的長處，既能達(dá)到較好的穩(wěn)定性，又具有操作簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn)。

4.3 擴(kuò)增片段長度多態(tài)性

AFLP(amplified fragment length polymorphism)技術(shù)利用兩種限制性內(nèi)切酶對(duì)物種基因組DNA進(jìn)行切割，該方法基于染色體上眾多自然的酶切位點(diǎn)[55]，將堿基差異較大的物種進(jìn)行快速準(zhǔn)確鑒別。Ulrich等[56]在酶切兩端接人工合成接頭作為擴(kuò)增模板，將人工接頭堿基加上酶切位點(diǎn)堿基往前延伸2～3個(gè)堿基為擴(kuò)增引物，再通過聚丙烯酰胺凝膠放射熒光，通過銀染技術(shù)得到多態(tài)性條帶。王慧中等[57]利用AFLP技術(shù)對(duì)13種石斛屬植物進(jìn)行遺傳多樣性研究，成功篩選出3對(duì)選擇性擴(kuò)增引物組合，將13種材料分成3類，與傳統(tǒng)分類學(xué)結(jié)果基本一致。宋爽等[58]同樣對(duì)51個(gè)藥用石斛(包括35個(gè)鐵皮石斛)利用AFLP技術(shù)篩選出5對(duì)特征引物，成功將鐵皮石斛與其余石斛鑒別。

4.4 DNA條形碼技術(shù)

目前，DNA條形碼作為中藥分子鑒定中的熱點(diǎn)，自2003年加拿大圭爾夫大學(xué)Paul Hebert教授提出后，被生物界廣泛關(guān)注。生命條形碼聯(lián)盟(CBOL)[59]對(duì)陸地907個(gè)植物樣品進(jìn)行研究，認(rèn)為rbcL和matK片段具有很好的分辨能力，將這兩個(gè)片段聯(lián)合作為陸地植物的DNA條形碼。王暉等[60]利用rbcL和matK對(duì)石斛屬的5種石斛進(jìn)行了鑒別，但是這兩個(gè)基因在種內(nèi)的變異率很低，不建議作為鑒別石斛屬的候補(bǔ)DNA條形碼。中國植物條形碼工作組[61]對(duì)1 757個(gè)種的序列分析發(fā)現(xiàn)，ITS2和psbA-trnH片段具有更好的鑒定能力，將ITS2+psbA-trnH聯(lián)合片段作為中藥分子鑒定的通用條形碼。鐘志敏[62]研究將鐵皮石斛與其余藥用石斛進(jìn)行了鑒別，發(fā)現(xiàn)ITS2、matK以及yclb1對(duì)于石斛屬具有良好的鑒別能力。丁小余等[63]分別對(duì)楓斗類石斛ITS區(qū)全序列、nad1-intron2片段全序列、cp DNA psdA-trnH全序列進(jìn)行分析鑒別，并利用位點(diǎn)特異性PCR對(duì)“F”型鐵皮石斛與“H”型鐵皮石斛ITS2序列分析，在第273位上找到SNP位點(diǎn)，針對(duì)該位點(diǎn)設(shè)計(jì)引物鑒別兩種不同品質(zhì)的鐵皮石斛。圖1為鐵皮石斛DNA條形碼鑒別流程。

圖1 DNA條形碼鑒別的流程

4.5 其他DNA分子生物學(xué)技術(shù)

劉玲等[64]利用目標(biāo)區(qū)域擴(kuò)增多態(tài)性TRAP(target region amplification polymorphism)技術(shù)對(duì)鐵皮石斛群居及其雜交后代進(jìn)行分子鑒別，通過對(duì)鐵皮石斛中的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEPC)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)以及葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGP)構(gòu)建目標(biāo)區(qū)域，呈現(xiàn)多態(tài)性擴(kuò)增，篩選出7對(duì)引物成功將鐵皮石斛野生群居鑒別，同時(shí)對(duì)雜交后代進(jìn)行鑒別，能有效將親本與后代區(qū)分，有利于選擇優(yōu)質(zhì)品種進(jìn)行人工培育。TRAP技術(shù)根據(jù)目的基因序列隨機(jī)設(shè)計(jì)引物進(jìn)行多態(tài)性標(biāo)記，優(yōu)點(diǎn)是極大地提高基因型與表現(xiàn)型一致。

此外還有簡(jiǎn)單重復(fù)序列[65](simple sequence repeat，SSR)、相關(guān)序列擴(kuò)增多態(tài)性[66](sequence related amplified polymorphism，SRAP)、單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)、抑制消減雜交[67](suppression subtractive hybridization，SSH)等技術(shù)在鐵皮石斛鑒定研究中的應(yīng)用。

5 展望

傳統(tǒng)的鐵皮石斛鑒別方法主要依據(jù)不同石斛的特征形狀或性狀對(duì)石斛的質(zhì)量或真?zhèn)芜M(jìn)行評(píng)價(jià)與鑒別。然而石斛的外觀極其相似，特別是相關(guān)近緣種，很難鑒別，如果是加工品如鐵皮楓斗，就更加難以區(qū)分。因此，目前針對(duì)鐵皮石斛的鑒定方法主要有兩類，一類是理化分析方法，另一類是DNA分子生物學(xué)方法。

理化分析方法檢測(cè)和分析的主體是鐵皮石斛中的化學(xué)成分或元素，而鐵皮石斛中的化學(xué)成分或元素多樣，且受多種因素的影響，如氣候環(huán)境、種質(zhì)資源、栽培方式等。另一方面，目前的鑒定方法多基于單一或少數(shù)指標(biāo)性成分的檢測(cè)，缺乏專屬性和特異性，無法對(duì)不同石斛進(jìn)行精準(zhǔn)的鑒別。隨著色譜特別是質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展，近年來基于質(zhì)譜技術(shù)的代謝組學(xué)為理化分析方法提供了新的選擇，代謝組學(xué)基于高通量分析技術(shù)，如核磁共振、色譜質(zhì)譜和毛細(xì)管電泳質(zhì)譜等技術(shù)，對(duì)鐵皮石斛小分子代謝產(chǎn)物的組成、含量及其變化進(jìn)行定性和定量分析，通過代謝物信息與其生理變化的關(guān)聯(lián)分析，尋找鐵皮石斛的特征代謝標(biāo)志物，從而克服了目前其他理化方法檢測(cè)目標(biāo)單一或缺乏特異性的不足。

基于DNA分子的鑒別方法，直接從DNA分子水平反映植物物種的多樣性和特異性。DNA分子受外界因素以及生物體發(fā)育階段及器官組織差異等的影響較小，DNA分子相對(duì)穩(wěn)定和便于操作，使得DNA分子鑒定技術(shù)在鐵皮石斛的鑒別方面具有準(zhǔn)確性高、重現(xiàn)性好等優(yōu)勢(shì)。然而目前無論是DNA分子標(biāo)記技術(shù)還是DNA條形碼技術(shù)，其檢測(cè)過程仍然繁雜，而且分辨率有待提高。近年來，三代測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，使得測(cè)序的時(shí)間及成本大大縮短與降低，因此，有望利用測(cè)序技術(shù)達(dá)到對(duì)鐵皮石斛的精確鑒定。

鐵皮石斛鑒定是一個(gè)跨學(xué)科交叉的研究領(lǐng)域。就目前的技術(shù)而言，主要為上述理化分析技術(shù)和DNA分子生物學(xué)技術(shù)。然而任何一項(xiàng)技術(shù)都不是萬能的，每項(xiàng)技術(shù)都有各自的特色。為了達(dá)到鑒定的目的，技術(shù)的多元化交叉和聯(lián)合是當(dāng)前及未來的發(fā)展趁勢(shì)。而最終的目的主要有兩方面，即精確鑒定和快速鑒定。為了達(dá)到精確鑒定，一方面在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上升級(jí)改造和提升，另一方面是吸納和引入新的技術(shù)，如代謝組及其他組學(xué)的發(fā)展，多組學(xué)的聯(lián)合應(yīng)用也為鐵皮石斛的鑒定提供了新選擇；三代測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，為基于DNA序列信息的鐵皮石斛精確鑒別提供了可能；再如利用數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)鐵皮石斛進(jìn)行精準(zhǔn)定量分析。在快速檢測(cè)方面，以電子鼻、電子舌等各類傳感器為代表的智能快檢技術(shù)有望應(yīng)用于鐵皮石斛的快速檢測(cè)與鑒定。另一方面，將新興的芯片技術(shù)、恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、功能納米材料、微流控技術(shù)及光電技術(shù)進(jìn)行融合，從而打造針對(duì)鐵皮石斛快速鑒定的新技術(shù)。