袁文菊，孫留霞，趙慶楓，孫靈靈

（周口職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南周口 466000）

益生菌是一群具有活性的微生物，當(dāng)給予足夠劑量時可給宿主帶來益處，目前活的、非致病性細(xì)菌補(bǔ)充劑已被用于動物和人類營養(yǎng)中，以促進(jìn)腸道健康。但需要評估其對不同種類動物的健康、生長性能和產(chǎn)品質(zhì)量的影響。益生菌在家禽上的作用機(jī)制可能是通過競爭排斥和拮抗維持正常腸道菌群；通過模式識別受體和核苷酸結(jié)合改變宿主代謝；提高消化酶活性，降低細(xì)菌酶活性和產(chǎn)氨量；中和腸毒素、調(diào)節(jié)炎癥組織反應(yīng)及刺激免疫系統(tǒng)（王一涵等，2018）。在過去的幾十年里，益生菌被推廣為抗生素生長促進(jìn)劑的潛在替代品，為此，人們研究了許多不同的細(xì)菌科，其中芽孢桿菌屬是益生菌的一個重要屬，它是由革蘭氏陽性、桿狀和孢子形成的細(xì)菌組成，其孢子存在于營養(yǎng)細(xì)胞中，可長期儲存，并在惡劣的環(huán)境、加工條件及胃腸道低pH下存活（閔鐘熳等，2007）。因此，芽孢桿菌可以在通過胃屏障運(yùn)輸過程中存活，這是其他一些益生菌無法保證的特性，其中一個主要原因是其孢子形成能力及其他機(jī)制，如孢子核含水量、孢子外殼蛋白和其他相關(guān)機(jī)制（Hong等，2005）。有報道稱，肉雞日糧中添加枯草芽孢桿菌可能會降低飼料成本，同時其可彌補(bǔ)2%的代謝能損失（Harrington等，2016）。因此，芽孢桿菌降低飼料成本可能性的研究是進(jìn)一步評估的重點(diǎn)，同時，對這類微生物進(jìn)行研究的另一個有趣的影響是評估其是否具有抗氧化能力。因此，本試驗(yàn)旨在研究一種枯草芽孢桿菌屬的新型益生菌作用，試驗(yàn)評估了日糧添加不同劑量枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能、肉品質(zhì)、腸絨毛形態(tài)和腸道菌群的影響。

1 材料與方法

1.1 動物分組、日糧配方與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)將528只1日齡肉雞隨機(jī)分為3組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)22只。對照組肉雞飼喂基礎(chǔ)日糧，處理1組和處理2組肉雞飼喂基礎(chǔ)日糧+1和2 g/kg枯草芽孢桿菌（1.5×109CFU/g），試驗(yàn)為期5周。肉雞孵化后，將雞舍溫度維持在30℃，之后每周降低1℃。每天飼喂2次，根據(jù)每天的采食情況調(diào)整投喂量。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 數(shù)據(jù)記錄 在試驗(yàn)當(dāng)天、第21和35天對每個重復(fù)的肉雞進(jìn)行稱重，并記錄1～21 d、22～35 d的飼料用量。

1.3 樣品采集與分析 在試驗(yàn)第35天早上，每個重復(fù)隨機(jī)選擇3只體重一致的肉雞進(jìn)行屠宰，稱量屠體重。分離空腸、回腸和盲腸，回腸和盲腸內(nèi)容物立即用無菌EP管收集并-20℃保存。將空腸制備成切片后，用染色法分析絨毛形態(tài)，同時分析回腸和盲腸內(nèi)容物菌群數(shù)量（夏億等，2019）。胸肌分成3部分，參考孫永波等（2017）的方法分析肌肉pH、蒸煮損失、剪切力，另一部分烘干粉碎后測定常規(guī)養(yǎng)分。剩下的胸肌樣品在4℃冰箱中冷藏1和4 d后，分別用商品試劑盒測定丙二醛濃度。

1.4 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS軟件單因素方差分析模型進(jìn)行分析處理，采用Turkey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 對生長性能的影響 由表2可知，處理1和處理2組21 d、35 d肉雞體重、22～35 d平均日增重及試驗(yàn)前期和整個試驗(yàn)期飼料效率顯著高于對照組（P＜0.05），同時處理2組1～35 d肉雞平均日增重及22～35 d飼料效率顯著高于對照組（P＜0.05）。對照組與處理組對肉雞1～21 d平均日增重及各階段日采食量的影響無顯著差異（P＞0.05）。

表2 日糧添加不同劑量枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

2.2 對絨毛形態(tài)和腸道菌群的影響 由表3可知，對照組與處理組對回腸產(chǎn)氣莢膜梭菌和、大腸桿菌、回腸和盲腸細(xì)菌總數(shù)和雙歧桿菌無顯著差異（P＞0.05）。與對照組相比，處理組空腸絨毛高度及絨毛高度與深度比值顯著升高（P＜0.05），但隱窩深度顯著降低（P＜0.05）。乳酸桿菌在處理組回腸和盲腸的值顯著高于對照組（P＜0.05），但盲腸大腸桿菌數(shù)量顯著低于對照組（P＜0.05）。處理2組盲腸產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量顯著低于對照組（P＜0.05）。

表3 日糧添加不同劑量枯草芽孢桿菌對肉雞絨毛形態(tài)和腸道菌群的影響

2.3 對胸肌品質(zhì)的影響 由表4可知，日糧添加不同劑量的枯草芽孢桿菌對肉雞屠宰率、胸肌占比、肌肉滴水損失、蒸煮損失、剪切力及屠宰后45 min和24 h的pH均無顯著影響（P＞0.05）。處理組肌肉脂肪及冷藏1和4 d后的丙二醛含量均顯著低于對照組（P＜0.05），肌肉蛋白質(zhì)含量均顯著高于對照組（P＜0.05）。處理2組肌肉水分含量顯著高于對照組（P＜0.05）。

表4 日糧添加不同劑量枯草芽孢桿對肉雞胸肌品質(zhì)的影響

3 討論

芽孢桿菌是一種很有前景的益生菌，由于其對動物健康和生長的有益影響，以及其在胃腸道環(huán)境中的生存能力強(qiáng)，在加工和長期儲存過程中穩(wěn)定，被認(rèn)為是潛在的益生菌候選。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧添加1～2 g/kg枯草芽孢桿菌可以改善肉雞平均日增重和飼料效率，這與益生菌可以調(diào)節(jié)腸道菌群，改變腸道形態(tài)或酶的分泌，進(jìn)而促進(jìn)對營養(yǎng)物質(zhì)吸收有關(guān)（Zaghari等，2017）。

腸道形態(tài)與腸道消化功能和飼料成分的吸收密切相關(guān)，絨毛長度和表面積的增加可以更好地與食糜接觸，更好地吸收營養(yǎng)（Sen等，2011）。本研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌組顯著提高了空腸絨毛高度及絨毛高度與隱窩深度比值，這與Park等（2016）報道的添加芽孢桿菌類益生菌可以調(diào)節(jié)肉仔雞腸道形態(tài)，促進(jìn)生長和飼料利用的結(jié)果一致。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，腸道菌群平衡主要是由添加益生菌引起的，其中添加枯草芽孢桿菌組肉雞回腸和盲腸乳酸桿菌數(shù)量顯著提高，而盲腸中有害菌如大腸桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量顯著降低，這與Giannenas等（2014）報道的結(jié)果一致。

在本試驗(yàn)中，添加枯草芽孢桿菌可顯著降低肌肉脂肪含量，提高蛋白質(zhì)含量。Santoso等（2005）認(rèn)為，肌肉脂肪含量可能與乙酰輔酶A羧化酶的活性有關(guān)，乙酰輔酶A羧化酶是脂肪酸合成的限速酶，補(bǔ)充枯草芽孢桿菌可降低該酶的活性，因此，脂肪沉積會降低。此外，經(jīng)枯草芽孢桿菌處理的肌肉冷藏后脂質(zhì)氧化降低，這表現(xiàn)為肌肉丙二醛濃度降低，這與Aristides等（2012）的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

日糧添加1～2 g/kg枯草芽孢桿菌可改善空腸絨毛形態(tài)，并提高肉雞飼料效率，對肌肉品質(zhì)無負(fù)面影響，同時降低了回腸和盲腸中有害菌的數(shù)量。