翟 明，羅燕梅，余紹嬌，楊時(shí)鉆，張聲源，趙 瑩 *

(1.嘉應(yīng)學(xué)院 醫(yī)學(xué)院 客家藥用生物資源研究所，廣東 梅州 514031；2.嘉應(yīng)學(xué)院，廣東省 山區(qū)特色農(nóng)業(yè)資源保護(hù)與精準(zhǔn)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 梅州 514015)

膚癬菌病是一組常見病和多發(fā)病。臨床上治療皮膚癬菌病較常使用的藥物是化學(xué)藥物治療，外用藥治療雖起效較快，但是治療時(shí)間較長(zhǎng)、藥物極易被鞋襪抹去而造成病灶遺漏、患者依從性差、最終導(dǎo)致復(fù)發(fā)率高等缺點(diǎn)，適用于初期、病灶局限等的足癬患者[1]。近些年來(lái)，中藥足浴由于使用方便、臨床療效顯著，日漸成為人們?nèi)粘Ｖ委熌w癬菌病及養(yǎng)生保健的首選方法。泡騰片[2]在我國(guó)是一種較新的藥物劑型，與普通片劑不同，泡騰片利用酸源和堿源作為泡騰崩解劑，置入水中，即刻發(fā)生反應(yīng)。國(guó)內(nèi)對(duì)中藥泡騰片的研究主要在口服泡騰片、口腔泡騰片和陰道用泡騰片三類上，對(duì)于中藥泡騰片的用法仍有一定局限性，且研究較少[3]。國(guó)內(nèi)外亦未見中藥足浴泡騰片的文獻(xiàn)報(bào)道，足浴泡騰片較傳統(tǒng)湯劑具有生物利用度高、攜帶方便且成本低的優(yōu)勢(shì)。因此有必要探尋療效顯著、作用廣譜、不良反應(yīng)小、應(yīng)用方便的足浴泡騰片。

本研究所用中藥復(fù)方為某中醫(yī)院臨床常用抑制皮膚癬菌用方，復(fù)方由苦參、黃柏、野菊花、千里光、地膚子、冰片六味藥組成。該六味中藥均具有較強(qiáng)的抑菌作用，在臨床已使用多年且效果較好。故本研究將中藥復(fù)方制成泡騰片，探究抑菌足浴泡騰片的不同提取方法和制備工藝，為后續(xù)臨床使用提供參考。

1 材料與儀器

1.1 材料

黃柏、苦參、千里光、地膚子、野菊花(安國(guó)市旭芳中藥材有限公司)；95%乙醇(天津市富宇精細(xì)化工有限公司)；冰片(安國(guó)市旭芳中藥材有限公司)；檸檬酸鈉、碳酸氫鈉、硬脂酸美(廣東光華科技股份有限公司)；乳糖(北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司)。

1.2 儀器

WJS-100多功能粉碎機(jī)(上海緣沃工貿(mào)有限公司)；FA2004電子分析天平(瞬宇恒平儀)；JP-100S超聲波清洗機(jī)(深圳市潔盟清洗設(shè)備有限公司)；N-1300旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司)；PHG-9123A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海鴻都電子科技有限公司)；YD-1片劑硬度測(cè)試儀(上海黃海藥檢儀器廠)；MP512-01精密PH計(jì)(上海三信儀表廠)；ZP-5壓片機(jī)(廣州晨雕機(jī)械設(shè)備有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 復(fù)方浸膏得率提取

精確稱取復(fù)方苦參、黃柏、千里光、地膚子、野菊花粉末4份，各10 g，共50 g。乙醇濃度分別以40%、50%、60%和70%，在控制料液比為1∶14浸泡24 h，超聲提取2次，每次45 min，濾過(guò)，合并濾液，濃縮得復(fù)方浸膏，烘干至恒重，計(jì)算浸膏得率，平行操作3次，得復(fù)方浸膏得率平均值。結(jié)果見圖1。

圖1 不同乙醇濃度對(duì)復(fù)方浸膏得率的影響

由圖1可以看出，50%乙醇濃度，在料液比為1∶14，超聲提取45 min，提取2次情況下得到復(fù)方浸膏提取率最大，重復(fù)操作，確定此料液比為最優(yōu)的提取工藝。

2.2 泡騰片的制備工藝

將復(fù)方浸膏、潤(rùn)滑劑(硬脂酸鎂)與泡騰劑堿相(碳酸氫鈉)混合均勻，粉碎，過(guò)80 目篩。另將復(fù)方浸膏、潤(rùn)滑劑(硬脂酸鎂)、泡騰劑酸源(檸檬酸)、粉碎，過(guò)80目篩，上述細(xì)粉混勻，加入藥物冰片和填充劑(乳糖)，直接壓片即得[4-5]。

2.3 泡騰片配方優(yōu)化單因素試驗(yàn)

2.3.1 填充劑用量篩選 乳糖既可以增加片劑的重量，又可以改善藥物的壓縮成型性，從而提高含量均勻度，以軟材手握成團(tuán)，輕壓即散為考察目標(biāo)，篩選出填充劑乳糖用量。實(shí)驗(yàn)考察流浸膏和乳糖占比分別為1∶3、1∶3.5、1∶4、1∶4.5，結(jié)果顯示25 mL流浸膏與填充劑100 g(即占比1∶4)的情況下，符合標(biāo)準(zhǔn)。所以填充劑選擇乳糖的用量與流浸膏比例為4∶1。

2.3.2 崩解劑酸堿比例篩選 以復(fù)方浸膏提取物質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%，與酸堿混合的流浸膏配比為1∶1.5，崩解劑含量為50%，潤(rùn)滑劑的含量為1.5%，分別以酸堿比例為0.6∶1、0.8∶1、1∶1、1.2∶1、1.4∶1，制備復(fù)方足浴泡騰片，泡騰片的崩解時(shí)限與發(fā)泡量作為考察指標(biāo)，結(jié)果見表1。

表1 崩解劑酸堿比例對(duì)泡騰片的影響

2.3.3 潤(rùn)滑劑含量篩選 以復(fù)方浸膏提取物占10%，與酸堿混合的流浸膏配比為1∶1.5，崩解劑含量為50%，酸堿比例為1.2∶1，分別以潤(rùn)滑劑含量為2.5%、2%、1.5%、1 %、0.5%，制備復(fù)方足浴泡騰片，泡騰片的崩解時(shí)限與發(fā)泡量作為考察指標(biāo)，結(jié)果見表2。

表2 潤(rùn)滑劑含量對(duì)泡騰片的影響

2.3.4 崩解劑用量篩選 以復(fù)方浸膏提取物占10%，與酸堿混合的流浸膏配比為1∶1.5，酸堿比例為1.2∶1，潤(rùn)滑劑的含量為0.5%，分別以酸堿崩解劑含量為30%、35%、40%、45%、50%，制備復(fù)方足浴泡騰片，泡騰片的崩解時(shí)限與發(fā)泡量作為考察指標(biāo)。結(jié)果見表3。

表3 崩解劑用量對(duì)泡騰片的影響

2.4 抑菌足浴泡騰片處方的優(yōu)化

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，分析得出乳糖的用量與流浸膏比例為4∶1，與酸堿混合的流浸膏配比為1∶1.5的固定比例，以A(酸堿比例)、B(潤(rùn)滑劑含量/%)、C(崩解劑含量/%)作為3個(gè)考察因素，選取三個(gè)水平進(jìn)行試驗(yàn)。從表1可以看出酸堿比例在1∶1、1.2∶1、1.4∶1時(shí)崩解時(shí)限和發(fā)泡量符合標(biāo)準(zhǔn)；從表2可以看出潤(rùn)滑劑含量在1.5%、1%、0.5%時(shí)崩解時(shí)限和發(fā)泡量符合標(biāo)準(zhǔn)；從表3可以看出崩解劑用量在40%、45%、50%時(shí)崩解時(shí)限和發(fā)泡量符合標(biāo)準(zhǔn)。采用L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以崩解時(shí)間、發(fā)泡量為考察指標(biāo)，進(jìn)行多指標(biāo)綜合評(píng)分。綜合得分=(崩解時(shí)間/最大崩解時(shí)間)+(發(fā)泡量/最大發(fā)泡量)，其值越小越好[6-7]，以確定泡騰片處方的最佳工藝條件。結(jié)果見表4、表5。

表4 超聲提取工藝試驗(yàn)因素和水平

表5中，分析極差值可知，RA>RB>RC，即3個(gè)單因素對(duì)抑菌足浴泡騰片的崩解時(shí)限和發(fā)泡量的影響程度由大到小依次為：崩解劑用量>酸堿比例>潤(rùn)滑劑含量。分析綜合平均值K可知，對(duì)于因素A，K2>K3>K1，得出A2水平最優(yōu)；對(duì)于因素B，K3>K2>K1，得出B3水平最優(yōu)；對(duì)于因素C，K3>K1>K2，得出C3水平最優(yōu)，從而得出最優(yōu)組合為A2B3C3，即酸堿比例1.2∶1，潤(rùn)滑劑含量0.5%，崩解劑用量50%。

表5 超聲提取工藝試驗(yàn)按L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果

表6 超聲提取工藝試驗(yàn)方差分析

2.4 質(zhì)量評(píng)價(jià)

2.4.1 外觀性狀檢查 通過(guò)肉眼直接觀察足浴泡騰片，取10片本研究所制的足浴泡騰片，平放在潔凈的背景為白色的紙上，自然光下觀察其表面、色澤。

2.4.2 質(zhì)量差異 取泡騰片20片，精密稱定總質(zhì)量，求得平均片質(zhì)量后，再精密稱定每片的質(zhì)量。

2.4.3 崩解時(shí)限 取本品1片，置于250 mL燒杯(水溫40～45 ℃)中，有許多氣泡放出，當(dāng)片劑或碎片周圍的氣體停止逸出時(shí)，片劑溶解在水中，無(wú)聚集的顆粒剩留。同法檢測(cè)6片，均在5 min內(nèi)崩解。

2.4.4 硬度檢查 取本研究所制的足浴泡騰片10片，使用YD-1型片劑硬度儀檢查片劑硬度。符合片劑硬度要求[8]。

2.4.5 發(fā)泡量測(cè)定 取10支25 mL干燥具塞刻度試管(內(nèi)徑1.5 cm)，往里面各精密加2 mL水(片質(zhì)量≤1.5 g)，在(37±1)℃水浴箱中預(yù)熱5 min，然后分別在各管中投入1片足浴泡騰片，立即密塞，20 min內(nèi)觀察最大發(fā)泡體積，并計(jì)算平均發(fā)泡量。發(fā)泡量越大，泡騰片溶解效果越好。

2.4.6 pH值測(cè)定 取抑菌足浴泡騰片10片，分別于200 mL 20 ℃的蒸餾水中崩解完后，用酸度計(jì)測(cè)定每組pH值。

3 討論

目前泡騰片在生產(chǎn)上制備方法主要有5種，分別為酸堿分開濕法制粒法﹑干法制粒法﹑聚乙二醇包裹法、酸堿混合非水制粒法和直接壓片法。本實(shí)驗(yàn)中干法制粒法得到的片劑會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的斑紋，聚乙二醇包裹法制備的片劑外觀和崩解都合格，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)，本研究采用酸堿分開濕法制粒，效果較好。

本實(shí)驗(yàn)酸源選用的是檸檬酸鈉，不足的是吸濕性較強(qiáng)。通過(guò)改變與酸堿混合的流浸膏配比，在與酸和堿混合流浸膏配比為1∶1.5時(shí)，得到的酸堿軟材符合要求，酸堿顆粒色澤均勻。故實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制溫濕度，最佳溫度控制在18～20 ℃，濕度在30%以下。

利用超聲提取法，以抑菌足浴泡騰片的提取率最高為指標(biāo)確定最優(yōu)的提取工藝為：50%乙醇濃度，料液比1∶14，提取時(shí)間45 min，提取2次；制備工藝研究采用濕法制粒方法，在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行L9(34)正交法優(yōu)化，以崩解時(shí)限和發(fā)泡量為考察指標(biāo)，確定最佳的制備工藝為：流浸膏與乳糖比例為1∶4，含藥量為10%，酸堿崩解劑含量為50%，酸解比例為1.2∶1，0.5%潤(rùn)滑劑。按最佳工藝制備的片劑，參照2015版《中國(guó)藥典(第四部)》片劑項(xiàng)下各項(xiàng)要求，外觀光滑，無(wú)裂片，無(wú)斑紋；質(zhì)量差異、崩解時(shí)限、pH值、硬度、發(fā)泡量均符合要求，表明該抑菌足浴泡騰片配方合理，工藝條件可行。本研究首次對(duì)醫(yī)院常用足浴復(fù)方進(jìn)行劑型改變，方便臨床使用。