宋艷紅，李燕秀，馮俊吾*，武晉孝，趙平偉，張 薇，米彥飛，郭 禹，馬晉東

(1.山西省檢驗(yàn)檢測(cè)中心，太原 030027；2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，山西太谷 030801)

磺胺類和氟喹諾酮類廣譜抗菌藥作為畜牧業(yè)投入品，被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中，除治療外，還可預(yù)防、促生長(zhǎng)，提升動(dòng)物源食品產(chǎn)量和質(zhì)量[1]。然因此類獸藥在畜禽體內(nèi)不能被完全吸收、代謝和降解，大部分殘留藥物及代謝物會(huì)隨著畜禽糞污排出體外，進(jìn)入自然環(huán)境中，這些同樣具有生物活性[2]的殘留藥物及代謝產(chǎn)物，會(huì)對(duì)環(huán)境、動(dòng)植物和人體造成直接或者間接的危害。隨著養(yǎng)殖業(yè)規(guī)?；?、集約化飛速發(fā)展，我國(guó)畜禽糞污量同比大幅增加。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前我國(guó)年產(chǎn)畜禽糞污已達(dá)40億噸[3]，畜禽糞污中獸藥殘留污染問題已經(jīng)成為一個(gè)不容忽視的問題。因此，為了更好地掌握畜禽糞污中殘留獸藥的現(xiàn)狀，有必要建立一種方便、高效、準(zhǔn)確的畜禽糞污多獸藥殘留檢測(cè)方法。目前，獸藥殘留檢測(cè)方法通常有液相色譜法、微生物法、電化學(xué)檢測(cè)、免疫分析法、高效液相色譜-質(zhì)譜法、生物芯片法等[4]。與其他檢測(cè)方法相比，超高效液相色譜-質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)具有較高的特異性和靈敏度，抗干擾能力強(qiáng)，定量分析及定性分析更為準(zhǔn)確[5-7]。因此，本文擬利用固相萃取及超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，建立同時(shí)測(cè)定豬、雞、牛、羊糞污中7種磺胺及8種氟喹諾酮類常用獸藥的分析方法，為畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)獸藥使用情況提供技術(shù)支撐，對(duì)解決我國(guó)畜禽糞污中獸藥殘留污染問題具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：UPLC TQ-S，美國(guó)Waters公司；電子天平：TP-1102，1100～0.01 g，丹佛儀器有限公司；電子天平：BP211D，210～0.01 mg，北京賽多利斯天平有限公司；高速冷凍離心機(jī)：Biofuge stratos，德國(guó)郝黎氏公司；氮吹儀：N-EVAP，美國(guó)Organomation Associates公司；渦旋震蕩器：MS-3，德國(guó)IKA公司；固相萃取裝置：SPE-24，美國(guó)Supelco公司。

1.2 試藥與試劑 磺胺嘧啶(SD)、磺胺甲噁唑(SMZ)、磺胺二甲基嘧啶(SM2)、磺胺甲氧噠嗪(SMP)、磺胺間甲氧嘧啶(SMM)、磺胺喹噁啉(SQ)、磺胺二甲氧嘧啶(SDM)(美國(guó)Dr.E公司，純度分別為99.2%、99.5%、99.4%、99.7%、94.2%、98.9%、99.4%)；環(huán)丙沙星(Cipro.)、達(dá)氟沙星(Dano.)、恩諾沙星(Enro.)、沙拉沙星(Sara.)(美國(guó)Dr.E公司，純度分別為92.3%、94.2%、99.9%、85.82%)；諾氟沙星(Nor.)、培氟沙星(Pe.)、洛美沙星(Lome.)、氧氟沙星(O.)(中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，純度分別為99.4%、99.6%、98.6%、99.5%)；甲醇、乙腈、乙酸乙酯、氨水，色譜純；其余均為分析純；高純氮；高純氬；試驗(yàn)用水均為一級(jí)水；固相萃取柱：Oasis HLB(3cc/60 mg)，美國(guó)Waters公司。

1.3 儀器條件

1.3.1 液相色譜條件 色譜柱：ACQUITY UPLC?BEH C18(1.7 μm，2.1×100 mm)；流動(dòng)相：A 為 0.1%的甲酸水，B 為 0.1%的甲酸乙腈。采用梯度洗脫，柱溫：30 ℃；流速：0.3 mL/min；進(jìn)樣量：5 μL，梯度洗脫方法見表1。

表1 梯度洗脫表Tab 1 Gradient elution table

1.3.2 質(zhì)譜條件 離子源：電噴霧正離子模式(ESI+)；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；電離電壓：2.7 kV；源溫：150 ℃；脫溶劑溫度：350 ℃；脫溶劑氣流量：800 L/h；錐孔氣流量：150 L/h；碰撞氣流量：0.15 mL/min；15種獸藥的定性/定量離子對(duì)、錐孔電壓及碰撞能量見表2。

表2 15種獸藥的質(zhì)譜參數(shù)Tab 2 Mass spectrometric parameters of 15 veterinary drugs

1.4 樣品制備

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

1.4.1.1 單標(biāo)儲(chǔ)備液的配制 分別精密稱取適量的各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)共計(jì)15種，分別置于10 mL容量瓶中，加甲醇超聲使其溶解，放至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成1 mg/mL的單標(biāo)儲(chǔ)備液。

1.4.1.2 混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制 精密吸取上述15種1 mg/mL的單標(biāo)儲(chǔ)備液，各0.1 mL，置同一100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得1 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

1.4.1.3 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制 分別精密吸取1 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10、20、50、100、200、500、1000 μL，置于不同10 mL容量瓶中，用復(fù)溶液定容，搖勻，即得濃度為1、2、5、10、20、50、100 ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.4.2 試液的制備

1.4.2.1 提取液的配制 分別取2%氨化乙腈50 mL和0.1 mol/L氫氧化鈉溶液50 mL，充分混勻，即得。

1.4.2.2 磷酸鹽緩沖液的配制 精密稱取0.8 g磷酸二氫鉀和0.2 g磷酸氫二鉀，加80 mL水充分溶解后，定容至100 mL，混勻，即得。

1.4.2.3 酸性洗脫液的配制 取1 mL甲酸，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，混勻，即得。

1.4.2.4 堿性洗脫液的配制 取2 mL的濃氨水，加入50 mL甲醇、50 mL乙酸乙酯，混勻，即得。

1.4.2.5 復(fù)溶液的配制 取20 mL乙腈，加入80 mL 0.1%甲酸水，混勻。

1.4.3 空白糞污樣品的篩選 選擇太原市及周邊多家豬、雞、牛、羊養(yǎng)殖場(chǎng)，通過現(xiàn)場(chǎng)確認(rèn)以及畜禽用藥原始記錄，有針對(duì)性地選取30 d內(nèi)未使用過磺胺類和氟喹諾酮類藥物的養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行新鮮空白糞污樣品的采集，方法確立前使用顧欣等建立的豬糞便中獸藥殘留量檢測(cè)方法[6]進(jìn)行樣品前處理，上液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)，選擇對(duì)15種獸藥均無(wú)明顯干擾的樣品作為相應(yīng)基質(zhì)的空白樣品。

1.4.4 樣品溶液的制備 采集的新鮮糞污樣品，充分混勻，置-20 ℃冷凍保存。檢測(cè)時(shí)，稱取完全解凍的糞污樣品1.00±0.02 g(精確到 0.01 g)，置于50 mL離心管中，準(zhǔn)確加入提取液10 mL，充分渦旋30 s，震蕩5 min，4 ℃下8000 r/min離心5 min，移出上清液。剩余殘?jiān)偌?0 mL提取液重復(fù)提取一次，合并兩次上清液，混勻，作為備用液1。

精密吸取2 mL備用液1于10 mL離心管中，40 ℃水浴條件下氮吹至近干。加入3 mL磷酸鹽緩沖液溶解，渦旋30 s，4 ℃下8000 r/min離心5 min，取上清液作為備用液2。

取HLB 固相萃取小柱(3cc/60 mg)依次用3 mL甲醇、3 mL磷酸鹽緩沖液進(jìn)行活化。取備用液2過柱，用3 mL5%甲醇水溶液進(jìn)行淋洗，抽干。用2 mL酸性洗脫液洗脫，抽干，作洗脫液1。再用2 mL堿性洗脫液洗脫，抽干，作洗脫液2。收集洗脫液1、2于同一個(gè)15 mL離心管中。于40 ℃水浴條件下氮吹至近干，用1 mL復(fù)溶液溶解殘?jiān)?，溶液過0.22 μm濾膜(聚四氟乙烯膜)，供UPLC-MS/MS檢測(cè)分析。

1.4.5 基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 準(zhǔn)確稱取豬、雞、牛、羊空白糞污樣品各6份，每份1.00 g(精確至0.01 g)，按照1.4.4項(xiàng)下的方法進(jìn)行提取、凈化、氮吹，于六份空白樣品中分別加入1 mL 的 1、2、5、10、20(豬、雞、羊糞污)、50(牛糞污)、100 ng/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液復(fù)溶，充分震蕩，使殘?jiān)芙?，制成濃度?1、2、5、10、20(豬、雞、羊糞污)、50(牛糞污)、100 μg/mL的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。進(jìn)行超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定，每個(gè)濃度溶液重復(fù)進(jìn)樣三次。獲得15種獸藥的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和峰面積，分別作為橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)，繪制出相對(duì)應(yīng)的目標(biāo)獸藥標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4.6 空白樣品溶液的制備 準(zhǔn)確稱取已初步篩選好的空白豬、雞、牛、羊糞污樣品1.00±0.02 g(精確到 0.01 g)，置于50 mL離心管中，照1.4.4項(xiàng)下步驟同步平行操作，得空白樣品溶液。

1.4.7 檢出限(LOD)與定量限(LOQ) 分別稱取豬、雞、牛、羊糞污空白樣品各1 g，精密加入一定體積的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，按照1.4.4項(xiàng)下步驟處理樣品，上機(jī)，計(jì)算信噪比(S/N)，以響應(yīng)值最弱的組分信噪比為3時(shí)，對(duì)應(yīng)的添加濃度為方法的檢出限，以響應(yīng)值最弱的組分信噪比為10時(shí)，對(duì)應(yīng)的添加濃度為方法的定量限。

1.4.8 準(zhǔn)確度和精密度樣品溶液的制備 稱取豬、雞、牛、羊空白糞污樣品各54份，每份1 g，分成3批，每批均精密加入一定體積的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，渦旋混勻，制成50、100、500 μg/kg低、中、高三個(gè)不同添加濃度的加標(biāo)樣品，每個(gè)濃度做6個(gè)平行樣，按1.4.4項(xiàng)下步驟處理樣品，照1.3項(xiàng)下儀器條件上機(jī)測(cè)定，用單點(diǎn)外標(biāo)法定量，計(jì)算回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差；其中采用同批6個(gè)回收率數(shù)據(jù)計(jì)算批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，采用3批平均回收率數(shù)據(jù)計(jì)算批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 基質(zhì)效應(yīng) 取上述1.4.5項(xiàng)下制備的10 ng/mL各基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，以及1.4.1.3項(xiàng)下純?nèi)軇┡渲频南嗤瑵舛鹊幕旌蠘?biāo)準(zhǔn)工作液，按照1.3項(xiàng)下儀器條件注入液質(zhì)聯(lián)用儀，以兩者同一種獸藥質(zhì)譜響應(yīng)值比值的百分?jǐn)?shù)來評(píng)價(jià)基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect，ME)，若ME大于100%，則存在基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)；若ME小于100%，則存在基質(zhì)抑制效應(yīng)；若ME接近100%，則不存在基質(zhì)效應(yīng)。結(jié)果顯示，15種獸藥除磺胺嘧啶(SD)和諾氟沙星(Nor.)部分結(jié)果出現(xiàn)基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)外，其余獸藥均存在不同程度的基質(zhì)抑制效應(yīng)，尤其是磺胺喹噁啉(SQ)、磺胺二甲氧嘧啶(SDM)以及沙拉沙星(Sara.)基質(zhì)抑制效應(yīng)略微顯著(圖1)。為盡可能減少基質(zhì)效應(yīng)干擾，本實(shí)驗(yàn)采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量，雖然各個(gè)待測(cè)物存在不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，但不影響檢測(cè)結(jié)果。

圖1 15種獸藥在豬、雞、牛、羊糞污中的基質(zhì)效應(yīng)Fig 1 Matrix effect of 15 veterinary drugs in pig, chicken, cattle and sheep manure

2.2 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線 按照1.4.5項(xiàng)下步驟，豬、雞、羊糞污制成濃度為 1、2、5、10、20、100 μg/mL基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，牛糞污制成濃度為 1、2、5、10、50、100 μg/mL基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，供超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。X軸為基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度C，Y軸為定量離子對(duì)應(yīng)的色譜峰面積A，繪制15種獸藥基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明：豬、雞、牛、羊糞污中15種獸藥在1～100 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系均較良好，試驗(yàn)結(jié)果見表3。15種獸藥基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液及對(duì)應(yīng)空白基質(zhì)樣品溶液色譜圖見圖2～圖9。

表3 豬、雞、牛、羊糞污中15種獸藥基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程及決定系數(shù)Tab 3 Regression equation and coefficient of determination of matrix matching standard curve for 15 veterinary drugs in pig, chicken, cattle and sheep manure

圖2 空白豬糞污樣品溶液色譜圖Fig 2 Chromatogram of sample solution of blank pig manure

圖3 豬糞污基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖(濃度50 μg/kg)Fig 3 Chromatogram of matched standard solution of pig manure matrix (concentration 50 μg/kg)注：1-SD、2-Nor.、3-O.、4-Cipro.、5-Pe.、6-Dano.、7-Lome.、8- SM2、9-Enro.、10-SMP、11-Sara.、12-SMM、13-SMZ、14-SQ、15-SDM。

圖4 空白雞糞污樣品溶液色譜圖Fig 4 Chromatogram of sample solution of blank chicken manure

圖5 雞糞污基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖(濃度50 μg/kg)Fig 5 Chromatogram of matched standard solution of chicken manure matrix (concentration 50 μg/kg)注：1-SD、2-Nor.、3-O.、4-Cipro.、5-Pe.、6-Dano.、7-Lome.、8- SM2、9-Enro.、10-SMP、11-Sara.、12-SMM、13-SMZ、14-SQ、15-SDM。

圖6 空白牛糞污樣品溶液色譜圖Fig 6 Chromatogram of sample solution of blank cattle manure

圖7 牛糞污基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖(濃度50 μg/kg)Fig 7 Chromatogram of matched standard solution of cattle manure matrix (concentration 50 μg/kg)1-SD、2-Nor.、3-O.、4-Cipro.、5-Pe.、6-Dano.、7-Lome.、8- SM2、9-Enro.、10-SMP、11-Sara.、12-SMM、13-SMZ、14-SQ、15-SDM。

圖8 空白羊糞污樣品溶液色譜圖Fig 8 Chromatogram of sample solution of blank sheep manure

圖9 羊糞污基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖(濃度50 μg/kg)Fig 9 Chromatogram of matched standard solution of sheep manure matrix (concentration 50 μg/kg)1-SD、2-Nor.、3-O.、4-Cipro.、5-Pe.、6-Dano.、7-Lome.、8- SM2、9-Enro.、10-SMP、11-Sara.、12-SMM、13-SMZ、14-SQ、15-SDM。

2.3 檢出限(LOD)和定量限(LOQ) 測(cè)定結(jié)果表明，豬、雞、牛、羊糞污中15種獸藥殘留檢測(cè)方法的檢出限為20.0 μg/kg，定量限為50.0 μg/kg。

2.4 準(zhǔn)確度與精密度 分別取3批制備好的50、100、500 μg/kg低、中、高三個(gè)不同添加濃度各6個(gè)平行的加標(biāo)樣品溶液，上機(jī)測(cè)定，計(jì)算回收率和RSD，結(jié)果見表4。

表4 豬、雞、牛、羊糞污中15種獸藥添加回收率與精密度Tab 4 Recovery and RSD of 15 veterinary drugs added to pig, chicken, cattle and sheep manure

續(xù)表

結(jié)果顯示，在50、100、500 μg/kg三個(gè)添加濃度下，豬、雞、牛、羊糞污中15種獸藥平均回收率為60.5%～115.5%，批內(nèi)RSD(n=6)為1.2%～17.6%，批間RSD(n=3)為0.2%～17.6%。結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確度、精密度良好。

2.5 樣品測(cè)定 隨機(jī)抽取從養(yǎng)殖場(chǎng)采回的8個(gè)畜禽糞污樣品，用已建立的分析方法進(jìn)行測(cè)定，每份樣品取2個(gè)平行樣，結(jié)果取平均值(表5)。

表5 畜禽糞污樣品中15種獸藥殘留檢測(cè)結(jié)果(n=2)Tab 5 Detection results of 15 veterinary drug residues in livestock and poultry manure samples (n=2)

由表5結(jié)果可知，恩諾沙星檢出率75%，環(huán)丙沙星檢出率62.5%，磺胺間甲氧嘧啶和諾氟沙星檢出率均為25%，磺胺二甲基嘧啶、達(dá)氟沙星和氧氟沙星檢出率均為12.5%，其余組分未檢出。因數(shù)據(jù)有限無(wú)法體現(xiàn)山西省畜禽糞污獸藥殘留真實(shí)狀況，需積累更多的樣品數(shù)據(jù)，利用專業(yè)的統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行全方位多角度地分析。

3 討論與結(jié)論

3.1 提取條件的選擇 目前抗菌藥物的提取主要采用有機(jī)試劑，部分使用無(wú)機(jī)試劑進(jìn)行提取。甲醇、乙腈等有機(jī)試劑極性強(qiáng)，但是有一定的毒性作用，試驗(yàn)過程中曾采用水相提取試劑，分別采用磷酸鹽緩沖液兩次提取以及EDTA溶液和磷酸鹽緩沖液分步提取的方式，后者較前者的回收率高，但ND代表未檢出或檢測(cè)結(jié)果低于檢出限。

是回收率未達(dá)到60%以上，考慮與提取試劑的使用順序有關(guān)，決定將EDTA和磷酸鹽緩沖液區(qū)分前后順序進(jìn)行提取。結(jié)果：先用EDTA溶液再用磷酸鹽緩沖液提取時(shí)，整體回收率未達(dá)到60%以上，先用磷酸鹽緩沖液再用EDTA溶液提取時(shí)，磺胺類回收率達(dá)60%，氟喹諾酮仍然無(wú)法達(dá)到60%以上，因此，決定采用有機(jī)試劑進(jìn)行提取，根據(jù)磺胺類和氟喹諾酮類抗菌藥物的理化特性，采用堿性有機(jī)試劑進(jìn)行提取，并對(duì)提取液和震蕩時(shí)間進(jìn)行考察。改變單一變量，以回收率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定最終前處理方法。試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)震蕩時(shí)間過長(zhǎng)回收率略有降低，可能是震蕩時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致抗菌藥物發(fā)生降解，影響提取效果，同涂宏建，錢詩(shī)穎等研究結(jié)果一致[8-9]。最終通過對(duì)比回收率確定將2%氨化乙腈+0.1 mol/L氫氧化鈉溶液(50∶50，V/V)作為提取液，震蕩5 min進(jìn)行提取，回收率能夠滿足要求。

3.2 凈化條件的選擇 為了確定固相萃取方法步驟，課題組先后對(duì)固相萃取柱類型(C18柱、HLB3cc、HLB6cc)、復(fù)溶液、洗脫液以及淋洗液進(jìn)行了一一考察。在保持其他前處理方法步驟一致的情況下，只改變單一變量，以回收率結(jié)果作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，選回收率高的變量為最終確定的方法。其中針對(duì)洗脫液的篩選優(yōu)化，程家興驗(yàn)證不同種類洗脫液對(duì)磺胺類和氟喹諾酮類的洗脫效果不同，結(jié)果酸性甲醇的洗脫效果總體較好[10]。但本試驗(yàn)單獨(dú)采用酸性洗脫液或者堿性洗脫液，均不能使磺胺類和氟喹諾酮類的回收率達(dá)到“雙贏”的結(jié)果，經(jīng)多次反復(fù)試驗(yàn)，考慮到目標(biāo)抗菌藥物具有酸堿兩性，最終采取酸性、堿性洗脫液分步洗脫的方式，兩類目標(biāo)抗菌藥物的回收率均能同時(shí)滿足要求。最終確定最佳的凈化方式是提取液過HLB3cc固相萃取柱，5%甲醇水溶液淋洗，酸性洗脫液(1%甲酸甲醇)和堿性洗脫液(甲醇/乙酸乙酯/氨水，50/50/2，V/V/V)分步洗脫，濃縮，最后選用乙腈：0.1%甲酸水(20/80，V/V)進(jìn)行復(fù)溶。

3.3 方法優(yōu)化 本課題建立的檢測(cè)方法能兼顧磺胺類及氟喹諾酮類藥物均達(dá)到滿意的回收率，且方法穩(wěn)定性、精密度良好。對(duì)比國(guó)內(nèi)外抗菌藥物殘留液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法[11-12]，后期需要在確保雜質(zhì)凈化效果的前提下，進(jìn)一步簡(jiǎn)化前處理步驟，提高方法的檢測(cè)限，以便能建立更加高效、準(zhǔn)確、快速、靈敏的畜禽糞污抗菌藥殘留檢測(cè)方法。

本研究建立了一種SPE-UPLC-MS/MS同時(shí)適用于豬、雞、牛、羊糞污中7種磺胺類、8種氟喹諾酮類獸藥殘留檢測(cè)方法。通過考察，該方法準(zhǔn)確度、精密度良好，方法可行。該方法的建立為后期進(jìn)行山西省不同地區(qū)不同規(guī)模的養(yǎng)殖場(chǎng)糞污中的抗菌藥物檢測(cè)提供技術(shù)支撐，并為進(jìn)一步研究獸藥在環(huán)境中的遷移，對(duì)環(huán)境的影響提供檢測(cè)方法和數(shù)據(jù)支持。