吳亮，康安，鄧海山，裴玉瓊

1南京中醫(yī)藥大學藥學院；2南京中醫(yī)藥大學中藥品質與效能國家重點實驗室(培育) (南京 210023)

體內藥物分析是藥學專業(yè)領域中一門比較重要的專業(yè)課，是藥物分析在生物體內應用的重要分支學科，是采用現代分析方法，對生物機體內的藥物及其代謝物和內源性物質的質與量的變化規(guī)律進行分析研究的課程[1]。作為一門新興交叉學科，該門課程的內容與藥物分析、臨床藥學、生物藥劑學、藥代動力學和儀器分析等學科的內容之間均有著密切的聯(lián)系。

在前期調研中，筆者發(fā)現部分醫(yī)學及藥學院校已針對臨床藥學專業(yè)和藥物分析專業(yè)(方向)開設了體內藥物分析課程[2-5]，而絕大多數中醫(yī)藥院校的藥學專業(yè)并未在本科階段開設該門課程。在南京中醫(yī)藥大學藥學專業(yè)的現行培養(yǎng)方案中，體內藥物分析課程設置在大四上學期，類別為專業(yè)限選課，由16課時理論、16課時實驗和4課時指導性自學構成。該培養(yǎng)方案體現了南京中醫(yī)藥大學藥學專業(yè)作為國家級一流本科專業(yè)在課程設置上的先進性。在課程建設和教學過程中，教學團隊也持續(xù)對教學內容、教學方法和教學效果等進行設計、實踐和優(yōu)化。結合高等教育教學改革，本文闡述在體內藥物分析課程建設和教學過程中的探索與體會。

1 教材和教學內容的選擇

南京中醫(yī)藥大學的體內藥物分析課程開設于2013年，選用李好枝主編的《體內藥物分析》(第2版，中國醫(yī)藥科技出版社)作為教材。從2020年秋季學期開始，教材變更為趙云麗主編的《體內藥物分析》(第4版，中國醫(yī)藥科技出版社)。該教材于2019年12月出版，與上一版本相比有著較大的改變，部分內容已隨《中國藥典》(2020年版)、藥品注冊審批等相關政策進行了相應調整，能夠更好地體現該門學科的基本概念、專業(yè)理論與前沿動態(tài)。因此，在課程教學的過程中，教師也應結合教材，及時對教學內容進行調整和補充。

體內藥物分析課程的授課對象為大四上學期的藥學專業(yè)學生，該時期學生已學過藥物化學、藥理學、藥劑學、藥物分析等藥學專業(yè)課程，對藥物的結構、理化性質、藥理作用、劑型加工、分析檢測等內容已有所了解。該課程的理論教學課時數有限，僅有16課時，因此，對于教學內容的選擇，教學團隊需重新進行合理的設計與規(guī)劃，既要突出體內藥物分析這門課程的特色，又要避免不同課程之間教學內容的重復。例如，學生在大三已學過藥理學課程，對藥代動力學的一些基本概念已有一定的把握。大四上學期，學生正在學習生物藥劑學與藥代動力學這門課程，對于藥物的吸收、分布、代謝、排泄，生物利用度、生物等效性評價等內容都有涉及(筆者任教該課程藥代動力學部分)，故體內藥物分析課程教材中的相關內容就不必再納入本課程的教學范圍。教材的總論是體內藥物分析的基礎部分，所對應的一至三章的內容，也是課程教學過程中的核心內容，占用一半以上的理論教學課時。考慮到學生已經學習過分析化學、儀器分析、藥物色譜分析等課程，對高效液相色譜法的原理、組成和基本操作已有較好的把握，因此，在第二篇分析方法中，教學團隊僅選擇了色譜聯(lián)用技術這一章進行講解。在第三篇各論中，受制于課時，教學團隊僅選擇了臨床治療藥物監(jiān)測這一章來做介紹。

在具體的教學內容安排方面，教師在實際授課時并未完全按照教材中各章的順序進行教學，而是根據每一章之間的邏輯關聯(lián)適當做了一些調整。第一章為緒論，主要介紹體內藥物分析的性質與任務、對象與內容、特點與要求等基本內容，旨在讓學生掌握體內藥物分析的基本情況，了解學科領域的研究熱點及相關期刊文獻；第二章介紹臨床治療藥物監(jiān)測，使學生進一步理解藥物的體內過程對其臨床效應的影響、掌握有效血藥濃度的概念以及治療藥物監(jiān)測的目的和實施情況，讓學生更深刻地體會體內藥物分析的工作內容和實際意義；第三章為生物樣品與分析樣品的制備，主要講解生物樣品的制備與貯存以及常見的分析樣品制備方法(即生物樣品預處理方法)；第四章為生物樣品分析方法的建立與驗證，主要講解生物樣品分析方法建立的步驟，以及生物樣品色譜定量分析方法完整驗證的內容和要求；第五章為色譜聯(lián)用技術，教師在介紹儀器系統(tǒng)組成和一些質譜術語的基礎上，著重對四極桿質量分析器、飛行時間質量分析器及它們所組成的串聯(lián)質量分析器的工作原理、特點和應用進行講解。課程教學過程中，教師需合理規(guī)劃教學課時，圍繞教學大綱進行教學設計。在講授各章節(jié)知識點內容的同時，還需適當拓展學生的專業(yè)視野，并注意培養(yǎng)其分析問題和解決問題的能力。

2 教學互動與課程思政

在常規(guī)的課程教學過程中，教師往往會采用講授法進行教學，這種以教師為主導的教學模式，可以在有限的時間內有目的、有計劃地將既定的教學內容傳授給學生。但這種模式卻容易使學生成為被動的接受容器，不能很好地發(fā)揮學生主觀能動性，難以準確地反饋教學情況。在教學過程中，筆者發(fā)現大多數中醫(yī)藥院校的學生性格較為內向，不善于自我表達，課后也較少有學生能夠主動與任課教師進行溝通和交流。這種情況下，更需要教師在課堂教學的過程中加強對學生的引導，通過多種形式反饋其真實的學習狀況，以便教師更好地安排和調整課堂教學的進程[6]。前期，教學團隊已圍繞課外自主學習的內容和要求進行了設計，并通過翻轉課堂、討論交流等模式，加深學生對學科知識的認識，提高學生的學習興趣，取得了一定的成效[7]。然而現行培養(yǎng)方案理論課時卻非常有限，如何圍繞各章節(jié)的知識點進行教學設計，合理安排教學互動的方式和內容，并適時結合案例對學生進行思政教育，顯得尤為重要。體內藥物分析課程具有很強的實踐性和應用性，在教學過程中，教師應圍繞一個貫穿始終的核心問題，即如何根據實際需要設計和開展實驗，選用合適的方法對不同生物樣品中的特定成分進行準確的分析測定。教師也會結合自身的科研經歷，與學生分享實驗過程中的心得體會和經驗教訓，拉近與學生之間的距離。

在教學互動的實施過程中，除了進行簡單的提問之外，教師還需靈活地將案例式、啟發(fā)式、探究式等多種教學方法融入各章節(jié)知識點的教學過程中。例如，在講解體內藥物分析概念時，教師可以讓學生思考和闡述體內藥物分析和藥物分析之間的區(qū)別與聯(lián)系，并結合藥物研發(fā)的基本流程，請學生探究和討論體內藥物分析在藥物研發(fā)與臨床用藥中能夠起到哪些作用，從而加深學生對體內藥物分析相關概念的認識和把握。在講解分析樣品制備方法時，可以讓學生結合特定的藥物總結和比較蛋白沉淀法、液-液萃取法和固相萃取法等常用方法的原理、要求、特點和適用范圍，安排學生自主查閱文獻，整理和分享這些方法在不同情形和目的下使用的案例。教師在講解生物樣品分析方法建立的一般步驟時，可以先啟發(fā)學生思考，如果生物基質中存在干擾、待測樣品與標準物質的基質不一致，或者待測樣品與校正標樣的處理方法不同時，是否會對特定成分定量分析的結果產生影響，再和學生一起討論應該采取什么措施來消除這些影響，最后結合教材，分析每個步驟的目的、意義和注意事項。在講解三重四極桿質譜時，教師可以先通過提問的方式，請學生回顧四極桿質量分析器的工作原理和掃描模式；再在此基礎上介紹三重四極桿的不同掃描模式，從而啟發(fā)學生思考各種掃描模式有何特點，分別適用于什么情形；最后通過實例，幫助學生分析如何合理運用這些不同的掃描模式，解決藥學研究中的實際問題。總的來說，教師需根據課程教學目標，將多種形式的教學互動與知識點的講授有機結合，以活躍課堂氣氛，達到更好的教學效果。

2020年6月，教育部印發(fā)了《高等學校課程思政建設指導綱要》。綱要中明確提出推進課程思政建設的意義和重要性，以及落實課程思政的要求和舉措。體內藥物分析的課程思政目標，重點是要培養(yǎng)學生求真務實的觀念、嚴謹細致的作風、勇于實踐的精神和開拓創(chuàng)新的品質。因此，在課程思政建設的過程中，教師需要將這些價值導向與相關的課程知識點進行融合，并通過對具體案例的分析，樹立學生的專業(yè)信念、激發(fā)學生的學習動力、強化學生的責任擔當，向學生傳達嚴謹求實、傳承創(chuàng)新、積極向上等理念，引領學生樹立正確的職業(yè)價值觀。以“生物樣品與分析樣品的制備”這一章為例，在介紹完唾液樣品之后，教學團隊結合相關知識進行了拓展，分析了口腔咽拭子的采集流程和注意事項，并和學生共同探討疫情防控的現狀和趨勢、在疫情期間應該如何做好個人防護，以及學科和專業(yè)知識在“抗疫”中能夠發(fā)揮什么樣的作用。筆者還結合頭發(fā)樣品的相關內容，結合案例進行設計，開展課程思政。在講解完頭發(fā)樣品的性質之后，引導學生思考，和常見的血漿、尿液等生物樣品相比，頭發(fā)樣品有何特點，在什么情況下會用到頭發(fā)樣品；接著結合具體案例，介紹頭發(fā)樣品在用藥史驗證、濫用藥物的監(jiān)測及打擊毒品犯罪等領域的應用[8-9]。通過案例，一方面加深學生對知識點的理解，另一方面也警醒學生：法網恢恢，疏而不漏。先進的樣品分析技術是維持社會穩(wěn)定、人民安居樂業(yè)的有力保障。作為藥學專業(yè)的學生，大家應該珍愛生命、遠離毒品，切不可為了短淺的利益或出于好奇接觸毒品；同時也應當樹立正確的道德觀和職業(yè)價值觀，踐行為人類的健康事業(yè)而服務的光榮使命。

3 實驗內容的設計和安排

在教學過程中，教學團隊深刻地意識到，實驗教學對于培養(yǎng)和提高學生的專業(yè)技能及綜合素質有著重要的意義。因此，在體內藥物分析的課程教學過程中，除理論教學外，教學計劃也安排了實驗教學，設置了綜合性實驗和開放性實驗。前期，教學團隊已經以課題研究的模式，開設了體內藥物分析綜合性設計型實驗，并分析了實驗的設計思路以及實施過程中存在的問題[10]。為了進一步突出本課程的特色，做好該課程與藥學專業(yè)其他課程之間的銜接，避免實驗內容的相似或重復，體內藥物分析實驗教學主要圍繞分析樣品的制備、生物樣品分析方法驗證與試驗樣品的分析這三方面開展，通過溶液配制、樣品處理、儀器進樣、數據分析等多種操作形式進行。根據實際選課情況，課程一般安排3-4名學生作為一個實驗小組，小組成員之間相互協(xié)作，共同完成所有實驗?？傮w而言，通過實驗，學生可以更好地掌握體內藥物分析的相關技能，進一步加深對相關理論知識的理解。同時實驗也能培養(yǎng)學生分析問題和解決問題的能力、團隊合作精神和創(chuàng)新精神，使學生具備基礎的科研素養(yǎng)。

在綜合性實驗中，教學團隊選取了丙酸睪酮這一在高效液相色譜儀中分析條件相對成熟的藥物，教師發(fā)放給每個小組一份高濃度(10mg/mL)的標準貯備液。學生需通過計算，將其稀釋成一系列不同濃度的標準溶液，再分別吸取適量，加入至一定量的空白血清中，配制成標準曲線中所需的校正標樣。在血清樣品的制備過程中，教學團隊選取了較常用、易操作的蛋白沉淀法，學生需按照實驗步驟對空白血清樣品及校正標樣進行處理，再通過高效液相色譜儀進樣，得到本組的實驗結果。記錄色譜圖后，學生需對實驗數據進行處理和分析，考察空白血清樣品中基線噪聲的情況，判斷方法的選擇性是否合格；再以丙酸睪酮的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，結合回歸方程、相關系數、線性范圍、準確度等參數，建立標準曲線并進行評價。在第二次實驗中，學生需基于之前的實驗結果，擬定合適的濃度，制備低、中、高三個濃度水平的質控樣品，同時領取教師提前準備好的未知濃度的試驗樣品，進行樣品處理和含量測定。學生再根據實驗結果，計算每個質控樣品的準確度，判斷各樣品是否符合要求。最后，學生報告每個試驗樣品中丙酸睪酮的實測濃度，并評價濃度測定的結果是否可靠。

整個綜合性實驗的內容相對比較基礎，主要結合教材中相關的概念和操作展開。然而，由于學生之前未接觸或較少接觸生物樣品，因此，教師需在實驗流程和操作細節(jié)等方面對學生進行耐心的講解和指導。在數據分析方面，雖然各項考察指標的評價標準都是明確的，但在實際的結果處理過程中，仍有著較強的靈活性。例如，在標準曲線的建立部分，有學生通過計算發(fā)現某個校正標樣的準確度不符合要求，但在報告標準曲線時，未能將該點去除，用剩下的校正標樣重新建立標準曲線并進行再評價。

由于課時數的限制，在綜合性實驗中，教學團隊統(tǒng)一規(guī)定了運用甲醇沉淀的方法讓學生對血清樣品進行處理，也給出了既定的色譜條件讓學生進行進樣分析。為了激發(fā)學生的探索精神及創(chuàng)新能力，教學團隊還設置了開放性實驗，鼓勵學生進行自主研究，記錄、分析和比較不同的樣品前處理過程、不同的色譜條件等各個環(huán)節(jié)對樣品檢測結果的影響。學生可自行選取感興趣的部分查閱文獻，設計具體的實驗方案，交由任課教師審閱之后再開展實驗，記錄實驗結果，完成實驗報告。例如學生可以考察蛋白沉淀法中沉淀劑的種類、生物樣品與有機溶劑的體積比等參數對實驗結果的影響；也可以比較蛋白沉淀法、液-液萃取法和固相萃取法等樣品預處理方法在操作過程的難易程度、耗時情況及各種方法對實驗結果的影響。在色譜條件方面，學生可以通過改變流動相的組成、流動相的比例、流速、檢測波長等參數，從保留時間、峰形、峰面積、空白基質中是否存在干擾等因素考察不同條件的變化對樣品出峰的影響。開放性實驗可以進一步鍛煉學生合作交流和邏輯思維的能力，提升其科研素養(yǎng)。

4 課程考核與教學效果評價

體內藥物分析課程具有較強的實踐性，因此，不能僅通過單一的卷面成績反饋學生的實際學習情況[2，5，7]。在課程考核評價方面，教學團隊采用了形成性評價與終結性評價相結合的方式，從而更加綜合、全面地評價學生的成績。形成性評價部分，既包含課堂成績(如考勤、課堂提問、課堂討論等，占總成績的20%～30%)，也包含實驗成績(如實驗操作、實驗結果、實驗報告等，占總成績的30%～40%)。在終結性評價中，本課程通過開卷筆試的方式，考查學生對學科知識的掌握和運用情況，占總成績的40%。由于本課程是專業(yè)限選課，且在大四上學期才開設，因此選課的學生大多是對課程內容感興趣，或有意向報考藥物分析、藥物代謝動力學、臨床藥學等方向的研究生，有一定的學習動力。總體來說，本課程在近幾年的教學效果良好，課程教學能夠得到學生的普遍認可，課程評教的測評得分均在95分以上。但不同學生在專業(yè)基礎、對知識點的掌握情況、課后的鉆研程度和對課程的重視程度等方面，均不可避免地存在著一定的差異。在今后的課程教學過程中，任課教師仍需注重對專業(yè)知識和學科前沿動態(tài)的積累，不斷提升自身的教學能力，通過多種形式全面調動學生的學習積極性，引導學生基于知識點進行思考和討論，培養(yǎng)學生的質疑精神和創(chuàng)新精神，以及結合相關理論解決實際問題的能力，進而為學生后繼從事基礎研究、醫(yī)院臨床、藥品研發(fā)等相關工作打下堅實的基礎。

5 結語

體內藥物分析是南京中醫(yī)藥大學藥學專業(yè)的一門專業(yè)限選課。在課程教學過程中，任課教師需要熟悉藥學專業(yè)學生的人才培養(yǎng)方案，針對專業(yè)特點和學科特色合理優(yōu)化教學內容；強調學生在教學過程中的中心地位和主體地位，激發(fā)學生學習的積極性和主動性；將高校案例式、啟發(fā)式和探究式等多種教學方法在教學過程中靈活運用，創(chuàng)造良好的課堂互動環(huán)境，并注重課程思政與專業(yè)知識的融合以及在職業(yè)道德教育中的應用；理論聯(lián)系實際，通過實驗教學提高學生的實驗技能和動手能力，加強學生之間的合作交流，培養(yǎng)學生的學習興趣和科研能力；注重課程考核方式的多樣性和形成性評價，對學生的成績進行客觀、綜合的評判。課程團隊通過課程教學，構建了積極、和諧的師生關系，促進了師生教學相長，提升了學生的培養(yǎng)質量和競爭力。