慢性乙型肝炎(CHB)若不及時治療可逐漸進展到肝纖維化

。肝纖維化是CHB向肝硬化及肝癌發(fā)展的關鍵環(huán)節(jié)，但肝纖維化在一定程度上可逆轉，因此積極治療和逆轉肝纖維化對延長CHB患者的生存周期至關重要

。目前，肝組織學活檢仍是評估肝纖維化嚴重程度的“金標準”，但因其屬于有創(chuàng)檢查且無法動態(tài)監(jiān)測CHB肝纖維化的變化程度，故而對于部分臨床患者應用較為局限。IL-33屬于IL-1家族中的一種新型炎性因子

，近年來研究發(fā)現(xiàn)IL-33與CHB、肝硬化及肝癌的發(fā)病機制密切相關

。我們通過檢測CHB患者血清IL-33的表達水平并探討其診斷肝纖維化的臨床效能，為CHB患者肝纖維化的診斷、治療及動態(tài)檢測提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至2019年6月于新鄉(xiāng)醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院感染科住院治療的98例CHB患者作為研究對象，其中男性45例，女性53例，平均年齡(55.23±10.78)歲，病程(14.22±5.39)年。另納入35例健康體檢者作為對照組，其中男性20例，女性15例，平均年齡(54.25±8.93)歲，兩組研究對象在性別、年齡方面比較，差異無統(tǒng)計學意義。上述所有研究對象對本研究均知情同意且簽署知情同意協(xié)議書。

1.2 納入標準 ①慢性乙型肝炎診斷符合2015年中華醫(yī)學會肝病學分會制定的慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)

；②均完成肝臟穿刺組織學活檢和B超檢查者；③納入研究時1年內未進行抗病毒和抗纖維化藥物治療者；④臨床資料完整者。

1.3 排除標準 ①CHB近期急性加重者；②合并丙型肝炎、自身免疫性肝病、藥物性肝損傷、脂肪肝、肝癌等患者；③哺乳、妊娠及精神類疾病者；④3個月內采用激素治療者。

1.4 檢測指標

1.4.3 肝組織活檢 CHB患者入院時在B超引導下行肝臟穿刺活檢，肝纖維化程度采用S0～S4分期評估，其中S0為無纖維化、S1～S2代表中度纖維化、S3～S4代表重度纖維化

。

“巴洛克”是一種代表歐洲文化的典型藝術風格，追求宏偉、奔放、夸張的效果，而巴洛克音樂的特色便是“速度與激情”！維瓦爾第是當時意大利巴洛克音樂的“高產大戶”，他一生創(chuàng)作過六百多首作品，其中最出名、最有新意的就是《四季》。維瓦爾第給《四季》中的每首協(xié)奏曲都單獨取了名字，分別是《春》《夏》《秋》《冬》，這就是最早的“標題音樂”。相傳他還巧妙地為每首作品配上了唯美的十四行詩，這也是之前的音樂家沒做過的（至于那詩到底是不是他本人寫的，就無從知曉了）。

1.4.2 肝臟B超檢查 CHB患者入院時采用超聲儀檢查肝臟的光滑度和肝實質回聲情況。根據(jù)肝臟表面光滑、欠光滑、不光滑及有結節(jié)分別計0分、1分、2分和3分，肝臟實質回聲均勻、略粗、較粗和粗糙分別計0分、1分、2分和3分

。通過B超檢測結果計算肝纖維化程度評分，B超評分越高，說明肝纖維化程度越嚴重。

1.4.1 生化指標檢查 檢測各組研究對象血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、總膽紅素(TBil)、谷氨酰轉肽酶(GGT)水平；檢測各組研究對象血清肝纖維化指標如Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、透明質酸(HA)、層黏蛋白(LN)水平；檢測各組研究對象WBC和PLT水平；計算肝纖維化評估模型S指數(shù)=1000×GGT/PLT×WBC2，F(xiàn)IB-4=年齡×AST/PLT×ALT1/2。

洞庭湖地處長江中游荊江南岸，地跨湘、鄂兩省，是我國第二大淡水湖，天然湖泊面積2 625km2，流域面積26.3萬km2。洞庭湖生態(tài)經濟區(qū)覆蓋湖南省岳陽市、常德市、益陽市及長沙市望城區(qū)和湖北省荊州市33個縣（市、區(qū)）。作為長江流域重要的調蓄性湖泊、生態(tài)凈化池（前置庫）和亞洲最大的內陸濕地，洞庭湖在調節(jié)長江徑流、維護生態(tài)平衡、保護生物多樣性等方面具有不可替代的重要作用，素有“長江之腎”之稱。

2.3 CHB患者血清IL-33表達水平與肝纖維化指標的相關性 所有CHB患者B超評分、FIB-4和S指數(shù)分別為(2.81±0.34)、(1.57±0.47)和(0.21±0.11)。相關性分析結果顯示，CHB患者血清中IL-33表達水平與PCⅢ、Ⅳ-C、HA、LN、B超評分、FIB-4和S指數(shù)均呈顯著正相關性，結果見表3。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 22.0軟件進行數(shù)據(jù)處理。計量資料若符合正態(tài)分布，以均數(shù)±標準差表示，采用

檢驗，若不符合正態(tài)分布，以中位數(shù)表示M(P25，P75)，采用Mann-Whitney

檢驗，多組間比較采用方差分析；計數(shù)資料以頻數(shù)表示，組間比較采χ

檢驗；相關性分析采用

檢驗；以受試者操作特征(ROC)曲線探討血清IL-33診斷肝纖維化的臨床效能。以

<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.4 血清IL-33、FIB-4、S指數(shù)及B超評分診斷CHB患者肝纖維化的效能 將所有CHB患者血清IL-33水平、FIB-4、S指數(shù)及B超評分數(shù)值作為檢驗變量，其中S1～S4期CHB患者血清IL-33水平、FIB-4、S指數(shù)及B超評分作為狀態(tài)變量，繪制ROC曲線圖。血清IL-33、FIB-4、S指數(shù)及B超評分診斷CHB患者發(fā)生肝纖維化的AUC分別為0.951(95%

：0.905～0.996)、0.893(95%

：0.830～0.955)、0.889(95%

：0.826～0.951)和0.744(95%

：0.641～0.847)，與FIB-4、S指數(shù)和B超評分相比，血清IL-33診斷CHB患者發(fā)生肝纖維化的AUC較高，差異均有統(tǒng)計學意義(

=24.03，

=24.86，

=40.21，

<0.05)，提示血清IL-33診斷CHB患者發(fā)生肝纖維化的臨床效能較高。當IL-33截斷值為563.52 pg/ml時，此時敏感度和特異度分別為92.14%和96.33%。結果見圖1和表4。

CHB可逐漸發(fā)展為肝纖維化，而持續(xù)的肝纖維化可導致肝硬化及肝癌的發(fā)生，故對CHB患者發(fā)生肝纖維化進行早期診斷和及時治療具有重要意義。血清學標志物具有無創(chuàng)性、易于檢測和操作等多種優(yōu)勢，且在一定程度上能反映肝臟整體的病變情況，使得血清學標志物診斷CHB患者發(fā)生肝纖維化的研究成為近年來的熱點。

1.4.4 血清IL-33表達水平 所有研究對象均檢測IL-33水平。

2.1 兩組研究對象生化指標及血清IL-33水平的比較 見表1。

以上述2個主成分因子為變量繪制載荷圖和得分圖，詳見圖5。由圖5可知，載荷圖結果與初始因子載荷矩陣結果相同，距離原點較遠的點為主成分因子1和主成分因子2中權重值較大的成分；由得分圖可知，10批藥材樣品分散在不同區(qū)域，表明藥材樣品質量與地域分布有關。

3 討論

2.2 不同肝纖維化程度CHB患者血清IL-33的表達水平 見表2。

IL-33于2005年被發(fā)現(xiàn)，屬于IL-1家族中的一員，主要在機體的上皮細胞及成纖維細胞高表達

，研究認為IL-33與機體多種臟器纖維化的發(fā)生發(fā)展均密切相關

。本研究對CHB患者肝纖維化嚴重程度進行不同分期后發(fā)現(xiàn)，不同分期患者血清中IL-33表達水平存在顯著差異，且IL-33水平隨著肝纖維化分期的升高而升高；此外，F(xiàn)IB-4、S指數(shù)及肝臟B超評分均是既往評估肝纖維化的指標，相關性分析結果同樣證實血清IL-33水平與FIB-4、S指數(shù)及B超評分均呈現(xiàn)顯著正相關性，提示IL-33能顯著促進CHB患者肝纖維的進展。研究證實IL-33通過其受體作用于Th2細胞從而促進IL-4、IL-13等Th2型細胞因子的高表達，而IL-4及IL-13對維持肝臟炎癥和介導肝纖維化的發(fā)生具有重要作用

；另一方面，IL-33與其受體ST2，即IL-33/ST2信號通路參與肝纖維化的調控進程

，Marvie等

發(fā)現(xiàn)，小鼠和人肝臟纖維化組織中IL-33 mRNA和ST2 mRNA表達水平均顯著上調，在肝纖維化進程中扮演重要作用且異常活化的肝星狀細胞是IL-33主要來源，對IL-33受體ST2進行特異性敲除后能顯著改善肝纖維化的程度。固有淋巴樣2型細胞(ILC2)屬于IL-33的一個經典效應細胞，ILC2在受IL-33刺激后能誘導Th2細胞炎性反應從而參與肝纖維的發(fā)生發(fā)展

。朱海軍等

發(fā)現(xiàn)采用IL-33抗體對肝纖維化小鼠模型進行干預后能顯著改善肝纖維化嚴重程度和降低血清ALT和AST水平，且小鼠肝臟勻漿組織中IL-4和IL-13水平顯著降低，肝臟組織中MMP9表達水平同樣降低，而MMP9早已被證實促進了肝纖維化的發(fā)病機制

。本研究中對反映肝纖維化的血清學指標如PCⅢ、Ⅳ-C、HA、LN檢測后發(fā)現(xiàn)，IL-33與上述指標均呈現(xiàn)顯著正相關性，提示IL-33可作為診斷肝纖維的一項血清學指標。

將飼料粉碎至一定粒度（過40目篩），放置陰涼干燥處密閉保存。將所需用的磷酸鹽緩沖溶液、氫氧化鈉溶液、鹽酸溶液、磺基水楊酸溶液配好備用，實驗所需的胃蛋白酶溶液、胰液素和氯霉素溶液在做實驗前配制。

蔡元培對但采爾赴北平的要求表示支持，2月9日致許壽裳的信中說：“但采爾夫婦既往北平，使我等減少責任，亦復甚好?！盵11]14考慮到北平沒有民族學組，蔡元培又要求許壽裳等把但采爾介紹到歷史語言研究所，因為這個所的人類學“與民族學密接，且考古學與語言學，亦與民族學有關”[11]14。

CHB患者血清IL-33水平顯著升高，同時在一定程度上可反映肝纖維的嚴重程度。本研究結果顯示，血清IL-33診斷CHB患者肝纖維化的AUC為0.951，提示血清IL-33診斷CHB患者肝纖維化的臨床效能較高，敏感度和特異度分別為92.14%和96.33%。另一方面，F(xiàn)IB-4、S指數(shù)、B超評分也是臨床上常用于評估CHB患者肝纖維化的指標，但FIB-4和S指數(shù)受到的影響因素較多，而血清中IL-33水平較為穩(wěn)定，受到影響因素較少。我們對比IL-33與FIB-4、S指數(shù)和B超評分在診斷CHB患者肝纖維化臨床效能的差異，發(fā)現(xiàn)IL-33診斷CHB患者肝纖維化的臨床效能均顯著高于FIB-4、S指數(shù)和B超評分，提示IL-33診斷CHB患者肝纖維化的準確率較高，可在臨床推廣。

綜上所述，CHB患者血清IL-33水平促進了肝纖維的發(fā)生發(fā)展，且能夠較為準確的評估CHB患者發(fā)生肝纖維化，這一結果對于臨床上動態(tài)檢測CHB患者肝纖維化的進展程度具有一定參考意義。然而，也需要大樣本量的結果來證實我們的結論，同時IL-33如何參與CHB患者肝纖維化的作用機制還有待進一步研究。

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