王純?nèi)~，李文斌，黃雪霞，鄺燕蘭 (惠州市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心，廣東惠州 516007)

流感嗜血桿菌(Haemophilusinfluenzae, Hi)是一種沒有運(yùn)動(dòng)力的革蘭陰性菌，于1892年由費(fèi)佛博士在流行性感冒患者中發(fā)現(xiàn)，是一類兼性厭氧生物[1]。流感嗜血桿菌是寄生在人咽喉及口腔黏膜的條件致病菌，主要引起腦膜炎、肺炎、鼻咽炎等[2]。在發(fā)展中國家，流感嗜血桿菌是引起<5歲兒童急性呼吸道感染死亡的重要病原菌[3]。既往報(bào)道流感嗜血桿菌檢出季節(jié)以冬春季(1-3月)為主[4-5]，廣西柳州曾報(bào)道流感嗜血桿菌的流行以春秋兩季為高峰期，最高分離率出現(xiàn)在5月和9月，分別為15. 87%及16. 92%，最低分離率出現(xiàn)在7月和8月，為2. 67%和1. 63%[6]。本研究回顧性分析廣東省惠州市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心2017年1月至2019年 3月送檢標(biāo)本中分離的475株流感嗜血桿菌的時(shí)間分布規(guī)律及耐藥特點(diǎn)，旨在為惠州地區(qū)臨床合理使用抗菌藥物提供參考。

1 資料和方法

1.1 菌株來源

475株流感嗜血桿菌均分離于我院2017年1月至2019年3月門急診及住院患者送檢標(biāo)本，剔除同一患者單次入院不同時(shí)間分離出的相同菌株。

1.2 方法

1.3 細(xì)菌鑒定及藥敏

細(xì)菌鑒定采用法國梅里埃VITEK2 COMPACT全自動(dòng)微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng)，NH鑒定卡(法國梅里埃)，嗜血桿菌巧克力平板(廣州市迪景生物科技有限公司)；藥敏試驗(yàn)采用K-B法：HTM藥敏試驗(yàn)瓊脂平板(重慶龐通醫(yī)療器械有限公司)，抗生素紙片(溫州市康泰生物科技有限公司)。質(zhì)控菌株為流感嗜血桿菌ATCC49247，藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)[7-8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用WHONET 5.6軟件進(jìn)行耐藥率分析，應(yīng)用SPSS 19.0軟件對病原菌耐藥率變遷進(jìn)行分析，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 流感嗜血桿菌的標(biāo)本來源分布

475株流感嗜血桿菌中，465株來源于痰液，5株來源于眼分泌物，2株來源于血液，3株來源于陰道分泌物。流感嗜血菌桿菌檢出以痰液為主(97.89%)。

2.2 流感嗜血桿菌科室分布

475株流感嗜血桿菌中，467株來源于兒科病區(qū)(98.31%)，8株來源于婦產(chǎn)科及門診眼科等。

2.3 流感嗜血桿菌時(shí)間季節(jié)分布

每年第1、2季度流感嗜血桿菌檢出率最高，第3季度明顯下降，第4季度最低。初步判斷流感嗜血桿菌的時(shí)間分布具有明顯規(guī)律，見表1。

表1 流感嗜血桿菌的時(shí)間(季節(jié))分布

2.4 流感嗜血桿菌時(shí)間(月)分布及與同期平均氣溫關(guān)系

475株流感嗜血桿菌主要分布于每年3-6月，與同時(shí)期平均氣溫密切相關(guān)。平均最高氣溫20～30 ℃且平均最低氣溫14～25 ℃時(shí)，流感嗜血桿菌最活躍。見圖1。

圖1 流感嗜血桿菌時(shí)間(月)分布與同期平均氣溫

2.5 流感嗜血桿菌藥敏分析

表2 2017年至2019年1季度475株流感嗜血桿菌對抗菌藥物耐藥率 %

3 討論

流感嗜血桿菌屬嗜血桿菌屬，為條件致病菌，常定植于人類鼻咽部，以飛沫傳播多見，對嬰幼兒致病力較強(qiáng)。我院是地級市婦幼保健院，流感嗜血桿菌標(biāo)本主要來源于兒科病區(qū)的痰液。有報(bào)道顯示，免疫功能紊亂是正常菌群易感的高危因素[9-11]，尤其是<2歲嬰幼兒因機(jī)體特異性抗體水平低下，流感嗜血桿菌易在呼吸道發(fā)生定植，也是嬰幼兒容易發(fā)生呼吸道感染的重要原因[12]。嬰幼兒流感嗜血桿菌的檢出率較高，有研究顯示流感嗜血桿菌在新生兒肺炎的致病菌中排名第5位。國外流感嗜血桿菌導(dǎo)致的新生兒肺炎為1.6‰～4.9‰，約占侵入性細(xì)菌感染的5.0%，多繼發(fā)于病毒感染及免疫力低下[13-14]。流感嗜血桿菌感染有一定的季節(jié)特點(diǎn)，本研究結(jié)果顯示惠州地區(qū)流感嗜血桿菌主要分布于每年3-6月，與國內(nèi)部分研究不同[4-6]。國內(nèi)不同地區(qū)流感嗜血桿菌活躍期不同可能與氣候有關(guān)。提示根據(jù)本地區(qū)流感嗜血桿菌流行時(shí)間，給予嬰幼兒接種流感嗜血桿菌疫苗具有重要意義。

近年來有研究報(bào)道流感嗜血桿菌對氨芐西林耐藥率為21%～48%[15-17]。本研究結(jié)果顯示，氨芐西林、頭孢呋辛耐藥率逐年上升，流感嗜血桿菌耐藥率的增加與抗菌藥物的不合理應(yīng)用相關(guān)。2019年第1季度流感嗜血桿菌對氨芐西林的耐藥率已達(dá)到78.57%，提示我院氨芐西林已不能用于流感嗜血桿菌引起的感染。流感嗜血桿菌對阿莫西林/克拉維酸鉀耐藥率低于對氨芐西林耐藥率，提示流感嗜血桿菌產(chǎn)酶是耐藥的原因之一。有研究報(bào)道產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶是流感嗜血桿菌對氨芐西林的主要耐藥機(jī)制[18]。常見的β-內(nèi)酰胺酶有TEM-1和ROB-1型兩種，其中90%以上為TEM-1[19]。我院未開展流感嗜血桿菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶項(xiàng)目，根據(jù)流感嗜血桿菌對氨芐西林耐藥率>75%以及對阿莫西林克拉維酸鉀較高耐藥率可推測，本地區(qū)兒童流感嗜血桿菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶株逐年增加，耐藥情況嚴(yán)峻。第二代頭孢菌素在兒童使用的安全性較高，且不必做皮試，一直是兒童流感嗜血菌感染的一線用藥。2019年第1季度流感嗜血桿菌對頭孢呋辛耐藥率上升到62.5%，提示第二代頭孢菌素已不能用于本地區(qū)兒童流感嗜血桿菌感染的經(jīng)驗(yàn)用藥。第三代頭孢菌素頭孢曲松耐藥也呈逐年上升趨勢，表明流感嗜血桿菌對β-內(nèi)酰胺抗菌藥物耐藥形式嚴(yán)峻。流感嗜血桿菌對喹諾酮類藥物耐藥率一直偏低，可能與這類藥物在兒童群體的限制用藥相關(guān)。

綜上所述，流感嗜血桿菌檢出主要以兒童為主，且有明顯的時(shí)間分布規(guī)律，不同地區(qū)流行時(shí)間不同，惠州地區(qū)以每年3-6月最流行，建議醫(yī)護(hù)人員在每年3-6月兒童呼吸道感染時(shí)應(yīng)該經(jīng)驗(yàn)性考慮流感嗜血菌感染病原體，并且提醒家長及時(shí)給兒童接種流感嗜血桿菌疫苗。經(jīng)驗(yàn)性抗感染治療時(shí)需要考慮本地區(qū)及兒童病原菌特殊性，及時(shí)了解本地區(qū)細(xì)菌流行病學(xué)特點(diǎn)及耐藥性，對于治療兒童呼吸道感染意義重大。流感嗜血桿菌對β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥率連續(xù)3年呈上升趨勢，應(yīng)引起臨床高度重視。