周序鋒 鄒良英 黃 鶴 鐘文婷 王 碑

1.贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院心內科，江西贛州 341000；2.贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院超聲醫(yī)學科，江西贛州 341000

心肌肥厚是多種心血管疾病共有的病理特征之一，源于長期機械刺激、內分泌因子改變或機體代謝紊亂，促使心臟超負荷工作而發(fā)生的損傷性反應[1-4]。有研究顯示[5-6]，病理性心肌肥厚是心血管疾病發(fā)生及死亡的獨立危險因素，其病情嚴重程度對進行性心臟疾病具有重要預測作用。臨床已發(fā)現(xiàn)許多重要參與調控心肌肥厚發(fā)生、發(fā)展的信號通路，但其發(fā)生的分子機制還有待深入研究，因此探索新的心肌肥厚調控基因，為心肌肥厚治療尋找新的靶標，對防治心臟疾病有重要意義。微小RNA（microRNA，miRNA）是一類長度為19~23 nt 的內源性單鏈非編碼微小RNA 分子，其表達或功能異常可介導病理性心肌肥厚的觀點已得到普遍認同[7-8]。 有研究表明[9]，miRNA-365 在病理性心肌肥厚進展過程中也發(fā)揮著重要作用， 但目前miRNA-365 的表達及功能研究多集中在動物模型上，較少在臨床患者中研究。 前期動物預實驗已明確miRNA-365 對于心肌肥厚的作用機制，基于此，本研究進一步探究心肌肥厚患者中miRNA-365 表達水平與臨床心肌肥厚的相關性，旨在為臨床治療心肌肥厚尋找新的診斷及治療靶點。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年6 月至2021 年2 月贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院收治的100 例高血壓患者為研究對象，其中高血壓合并左心室肥厚的患者分為觀察組（50 例），單純高血壓患者分為對照2 組（50 例），另選取同期進行體檢的健康者50 名為對照1 組。 觀察組中，男26 例，女 24 例；年齡 43~61 歲，平均（50.06±5.46）歲；平均受教育年限（9.4±3.4）年；平均病程時間（4.5±1.3）年。 對照 2 組中，男 24 例，女 26 例；年齡 42~60歲，平均（50.10±5.50）歲；平均受教育年數(shù)（8.6±2.8）年；平均病程時間（4.8±1.5）年。 對照 1 組中，男 25 例，女 25例；年齡 41~62 歲，平均（51.00±5.50）歲；平均受教育年數(shù)（8.5±2.7）年。 三組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。 本研究獲取醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審查批準。

1.2 納入及排除標準

納入標準：①符合《中國高血壓防治指南》[10]中相關診斷標準； ②左心室質量指數(shù)， 男性＞115 g/m2，女性＞95 g/m2；③所有研究對象自愿簽署知情同意書。

排除標準：①肥厚型、限制型心肌病或繼發(fā)性高血壓者；②合并中重度瓣膜病、甲狀腺功能異常者；③合并惡性心律失常、先天性心臟病者。

1.3 方法

受試者均進行動態(tài)血壓、診室血壓檢測及心臟彩超檢查，記錄相關參數(shù)數(shù)據(jù)。采集受試者外周靜脈血，采用RT-PCR 法檢測 miRNA-365 表達。 依據(jù) Trizol試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）說明書提取細胞總RNA，逆轉錄總RNA 至cDNA，之后行RT-PCR（SYBR Green 法），以 U6 為內參。 miRNA-365 正向引物序列：5′-TAATGCCCCTAAAAATCCTTAT-3′；反向引物序列：5′-CACTTCCTCAGCACTTGTTGGTAT-3′。

診室血壓檢測采用聽診法用水銀柱血壓計測得血壓讀數(shù)， 動態(tài)血壓采用動態(tài)血壓測量儀進行測量，設置定時測量，白天每15~30 分鐘1 次，夜間睡眠，每30~60 分鐘1 次；日間有效血壓測量次數(shù)至少為14次，夜間7 次。 左心室質量指數(shù)為左心室質量除以體表面積。

1.4 觀察指標

①記錄并比較三組的動態(tài)血壓、日間血壓、診室血壓及左心室質量指數(shù)。 ②比較三組的miRNA-365表達情況。 ③分析miRNA-365 表達與血壓參數(shù)及左心室質量指數(shù)的相關性。

1.5 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 24.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析， 計量資料用均數(shù)±標準差（）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q 檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson 檢驗。 以 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三組動態(tài)血壓、日間血壓、診室血壓及左心室質量指數(shù)的比較

觀察組動態(tài)血壓（24 h 平均收縮壓、舒張壓、脈壓）、日間血壓（白天收縮壓、舒張壓、脈壓）、診室血壓（診室收縮壓、舒張壓、脈壓）及左心室質量指數(shù)均高于對照1 組、對照 2 組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），對照 2組動態(tài)血壓、日間血壓、診室血壓及左心室質量指數(shù)均高于對照 1 組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）（表1~4）。

表1 三組動態(tài)血壓的比較（mmHg，）

表1 三組動態(tài)血壓的比較（mmHg，）

與對照 1 組比較，aP＜0.05；與對照 2 組比較，bP＜0.05

組別 24 h 平均收縮壓 24 h 平均舒張壓 24 h 平均脈壓對照 1 組（n=50）對照 2 組（n=50）觀察組（n=50）F 值P 值119.21±10.01 152.17±11.37a 158.29±10.30ab 197.506<0.001 80.16±6.37 86.27±8.06a 89.90±8.51ab 20.423<0.001 93.17±8.19 108.24±9.71a 111.36±9.40ab 56.835<0.001

表2 三組日間血壓的比較（mmHg，）

表2 三組日間血壓的比較（mmHg，）

與對照 1 組比較，aP＜0.05；與對照 2 組比較，bP＜0.05；1 mmHg=0.133 kPa

組別 白天收縮壓 白天舒張壓 白天脈壓對照 1 組（n=50）對照 2 組（n=50）觀察組（n=50）F 值P 值121.26±10.13 154.27±11.56a 159.76±10.51ab 187.624<0.001 82.40±5.20 90.16±8.14a 93.17±8.90ab 26.849<0.001 95.35±7.66 111.53±9.85a 115.37±9.70ab 67.791<0.001

表3 三組診室血壓的比較（mmHg，）

表3 三組診室血壓的比較（mmHg，）

與對照 1 組比較，aP＜0.05；與對照 2 組比較，bP＜0.05；1 mmHg=0.133 kPa

組別 診室收縮壓 診室舒張壓 診室脈壓對照 1 組（n=50）對照 2 組（n=50）觀察組（n=50）F 值P 值123.34±9.34 155.29±11.59a 158.36±10.07ab 174.679<0.001 83.20±6.08 90.27±8.02a 94.29±9.01ab 25.913<0.001 96.58±7.71 111.94±9.80a 115.65±9.54ab 62.208<0.001

表4 三組左心室質量指數(shù)的比較（）

表4 三組左心室質量指數(shù)的比較（）

與對照 1 組比較，aP＜0.05；與對照 2 組比較，bP＜0.05

組別 例數(shù) 左心室質量指數(shù)對照1 組對照2 組觀察組F 值P 值50 50 50 97.84±5.27 104.24±4.21a 123.28±5.06ab 369.433＜0.001

2.2 三組miRNA-365 表達情況的比較

觀察組miRNA-365 表達水平高于對照1 組、對照2 組，對照2 組miRNA-365 表達水平高于對照1組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）（表 5）。

表5 三組 miRNA-365 表達情況的比較（）

表5 三組 miRNA-365 表達情況的比較（）

與對照 1 組比較，aP＜0.05；與對照 2 組比較，bP＜0.05

組別 例數(shù) miRNA-365 表達對照1 組對照2 組觀察組F 值P 值50 50 50 0.84±0.16 1.02±0.27a 1.22±0.31ab 27.852＜0.001

2.3 miRNA-365 表達與血壓參數(shù)及左心室質量指數(shù)的相關性

miRNA-365 表達與觀察組動態(tài)血壓、 左心室質量指數(shù)均呈正相關（P＜0.05），與日間血壓、診室血壓均無明顯相關性（P＞0.05）（表 6）。

表6 miRNA-365 表達與觀察組血壓參數(shù)及左心室質量指數(shù)的相關性

3 討論

心肌肥厚是一種基因異常而導致的心肌病理性增厚，可發(fā)生于各個年齡段，人群發(fā)生率約為0.2%，臨床有胸悶、頭暈、心前區(qū)不適等癥狀，部分患者出現(xiàn)心力衰竭、房顫等嚴重并發(fā)癥，更有甚者出現(xiàn)心源性猝死，不利于個體生命健康[11-12]。 研究顯示[13]，心肌肥厚嚴重程度對于進行性心臟病具有重要預測作用，且病理性心肌肥厚最終發(fā)展為心力衰竭是導致心肌肥厚患者死亡的重要原因。目前臨床對心肌肥厚病理機制尚未完全明確，為心肌肥厚診治尋找新的靶點仍是臨床試驗重點研究方向。

研究證實[14]，心肌細胞自噬與心肌肥厚密切相關， 臨床可通過調控自噬相關miRNA 表達影響心肌肥厚。 miRNA 通過與相關下游靶基因結合，調控細胞基因轉錄后水平，參與細胞增殖、分化等生理過程，其表達或功能異?？山閷Р±硇孕募》屎竦挠^點已得到普遍認同。 miRNA-365 是miRNA 的重要成員之一，既往多被認為參與惡性腫瘤發(fā)生及發(fā)展。 新近研究表明[15]，miRNA-365 可能在病理性心肌肥厚進展中發(fā)揮重要作用。 前期動物預實驗已明確miRNA-365對于心肌肥厚的作用機制，此次在前期動物實驗的基礎上，進一步去探究在臨床心肌肥厚患者中miRNA-365 的表達水平與心肌肥厚的相關性， 結果顯示，miRNA-365 表達與高血壓合并心肌肥厚患者動態(tài)血壓、左心室質量指數(shù)均呈正相關，表明miRNA-365 表達在高血壓心肌肥厚病理機制中有重要作用，猜測源于miRNA-365 在RNA 聚合酶作用下形成較長的莖環(huán)結構，在相關復合體作用下形成含有核苷酸的發(fā)夾狀RNA，經(jīng)復合物作用被轉運出胞核，作為轉錄因子中重要的靶分子在細胞功能調控中發(fā)揮核心作用，進而影響疾病進展。

綜上所述，動態(tài)血壓、左心室質量指數(shù)可輔助診斷高血壓心肌肥厚疾病，且高血壓心肌肥厚患者機體miRNA-365 表達與動態(tài)血壓、 左心室質量指數(shù)呈正相關，可為臨床診治高血壓合并心肌肥厚提供新的治療靶點。