孫傲楠，林圣華，趙濤，李晴，劉秀河*

（1.齊魯工業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，山東 濟南 250353；2.山東省科學(xué)院生物研究所，山東 濟南 250103）

抗生素是一類天然、半合成或人工合成的化合物，具有抗微生物活性。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)或作用機制不同，可分為四環(huán)素類、β-內(nèi)酰胺類、喹諾酮類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類等[1]。抗生素被廣泛用于預(yù)防和治療人類或動物由細菌感染而引起的疾病，并作為生長促進劑添加到動物飼料中，促進動物的生長發(fā)育、控制繁殖周期和育種性能等[2]。由于部分人工飼養(yǎng)員缺乏專業(yè)知識，不合理地使用抗生素，從而導(dǎo)致環(huán)境以及動物源性食品中抗生素大量殘留?？股貧埩敉ㄟ^食物鏈進入人體后，可能導(dǎo)致某些器官的功能、神經(jīng)、肝臟和血液系統(tǒng)受到損害，對兒童、孕婦或腎功能不全的患者危害更大[3]。此外，抗生素殘留會誘導(dǎo)抗性細菌和抗性基因的產(chǎn)生，導(dǎo)致對抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性的病原體增加，對公共衛(wèi)生安全帶來較大隱患。世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）指出，即使是低濃度的抗生素也可以使耐藥菌株茁壯成長，動物源性食品中抗生素殘留是近幾年國際社會普遍關(guān)注和研究的問題之一[4-5]。

動物源性食品中抗生素殘留分析檢驗是保障食品安全的重要組成部分，歐盟和食品法典委員會等監(jiān)管機構(gòu)規(guī)定了最大殘留限量（maximum residue limits，MRLs）[6-7]。我國于2020年4月1日起正式實施GB 31650—2019《食品安全國家標準食品中獸藥最大殘留限量》，在該標準中明確規(guī)定了四環(huán)素類、多肽類、頭孢菌素類等抗生素在動物源性食品中的MRLs[8]。隨著科學(xué)技術(shù)的日益發(fā)展，高效液相色譜以及液相色譜-質(zhì)譜設(shè)備的普及提高了痕量抗生素多殘留檢測的準確性和靈敏度。但動物源性食品的基質(zhì)復(fù)雜（包括蛋白質(zhì)、脂肪、無機鹽、糖和重金屬離子等物質(zhì)），嚴重的基質(zhì)效應(yīng)影響高分辨儀器對抗生素殘留定性和定量分析的準確性和靈敏度[9]。樣品前處理可以減少基質(zhì)背景物的干擾，純化樣品和預(yù)濃縮目標物，并根據(jù)檢測方法將目標物轉(zhuǎn)化為合適的形式，動物源性食品中抗生素殘留檢測前處理技術(shù)的研究對提高動物源性食品中抗生素殘留檢測的準確性以及靈敏度至關(guān)重要。因此，本文綜述近年來動物源性食品中抗生素殘留檢測中前處理研究的進展，特別是新材料和新方法在解決傳統(tǒng)前處理方法存在的弊端方面的應(yīng)用，對高效、靈敏的動物源性食品中抗生素殘留檢測方法的研究具有重要意義。

1 抗生素殘留分析中樣品前處理方法

樣品前處理的步驟一般包括取樣、提取、凈化和濃縮等。樣品前處理方法的選擇主要取決于樣品基質(zhì)、檢測方法和分析物的性質(zhì)[10]。動物源性食品基質(zhì)中抗生素多殘留檢測通常采用基于相吸附原理和相分配原理的樣品前處理方法，包括固相萃?。╯olid-phase extraction，SPE）、基質(zhì)分散固相萃?。╩atrix solid-phase dispersion，MSPD）、磁性固相萃?。╩agnetic solid-phase extraction，MSPE）、固相微萃?。╯olid-phase microextraction，SPME）、液液萃?。╨iquid-liquid extraction，LLE）、QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）法等。

2 基于相吸附原理

2.1 固相萃取

高分辨質(zhì)譜檢測儀具有高效和高靈敏等特點，近年來動物源性食品中抗生素多殘留檢測多采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，UHPLC-MS/MS）或液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LCMS/MS）[11]。但在儀器分析之前，對樣品的純化和富集有很高的要求，固相萃取技術(shù)是樣品凈化和預(yù)濃縮過程中應(yīng)用最廣泛的萃取技術(shù)之一[12]。相對于傳統(tǒng)的萃取方法（索氏提取法），具有樣品處理時間較短、不易出現(xiàn)乳化或起泡等優(yōu)點，分析物在痕量濃度水平下也有較高的回收率，且易于實現(xiàn)自動化操作。適用于動物源性食品的固相萃取吸附劑，包括C18、石墨化碳黑和二乙烯基苯-N-乙烯基吡咯烷酮（hydrophile-lipophile balance，HLB）固相萃取柱等[13-14]。常規(guī)的固相萃取技術(shù)在動物源性食品前處理應(yīng)用中，存在樣品提取步驟繁瑣、凈化不徹底以及處理樣品單一等缺點。近年來新型固相萃取吸附劑以及新型固相萃取技術(shù)的開發(fā)改善了傳統(tǒng)固相萃取技術(shù)的缺點。

Yan等[15]采用混合型強陽離子交換反相固相萃取柱，對雞蛋、牛奶和動物組織（肌肉、腎臟、肝臟和脂肪）中的加米霉素進行凈化和富集。該方法使用乙腈提取樣品，樣品提取液經(jīng)混合型強陽離子交換反相固相萃取柱凈化和富集后，采用UHPLC-MS/MS進行檢測。實現(xiàn)在 1.0 μg/kg～200 μg/kg范圍內(nèi)，加米霉素的高效、靈敏檢測。該方法的最低檢出限（limit of detection，LOD）和定量限（limit of quantitation，LOQ）分別為0.30 μg/kg～0.40μg/kg和0.80μg/kg～1.0μg/kg，加標回收率為84.2%～115.9%，相對標準偏差（relative standard deviation，RSD）小于10%。相比于傳統(tǒng)的C18、石墨化碳黑和HLB固相萃取柱，新型陽離子交換反相吸附劑能夠簡化樣品提取步驟，提高動物源性食品中加米霉素分析效率，該方法適用于快速篩選雞蛋、牛奶和動物組織中是否存在加米霉素殘留。Shen等[16]采用QuEChERS/96孔SPE平板法提取魚肉樣品中的糖肽類抗生素（萬古霉素和去甲萬古霉素），并通過UHPLC-MS/MS進一步分析。對陽離子交換樹脂吸附劑、萃取劑中乙腈的比例、流動相水/乙腈等參數(shù)進行優(yōu)化。在最佳條件下，LOD和LOQ 分別為 0.51 μg/kg和 1.73 μg/kg，日內(nèi)和日間精密度分別小于5.19%和6.30%，回收率為86.7%～98.6%。該方法結(jié)合QuEChERS法和酶聯(lián)免疫檢測的優(yōu)勢，實現(xiàn)了動物源性食品中抗生素的高通量、多殘留的檢測，滿足萬古霉素和去甲萬古霉素的日常監(jiān)測要求。Lu等[17]通過直通式固相萃取凈化程序去除脂肪和磷脂等基質(zhì)背景物，并結(jié)合UHPLC-MS/MS實現(xiàn)雞肉和雞蛋樣品中11種喹諾酮類抗生素的檢測。樣品用EDTA-Mcllvaine緩沖溶液作為提取液，以釋放和提取目標物。雞肉樣品的回收率為70.4%～98.4%，雞蛋樣品的回收率為66.9%～99.0%，檢測下限為0.1 μg/kg～0.16 μg/kg。該方法成功應(yīng)用于60份雞肉和110份雞蛋樣品中11種喹諾酮類抗生素殘留的篩查。

SPE技術(shù)在復(fù)雜的基質(zhì)或含有多種不同性質(zhì)的抗生素樣品處理中，存在特異性、效率較低且吸附劑的微孔結(jié)構(gòu)會被樣品中固體顆粒或膠體物質(zhì)堵塞等缺點，導(dǎo)致樣品凈化不完全[18]。為了進一步改進，在SPE技術(shù)的基礎(chǔ)上，分子印跡聚合物固相萃?。╩oleculary imprinted polymer solid-phase extraction，MIP-SPE）[19]、基質(zhì)分散固相萃?。╩atrix solid-phase dispersion，MSPD）[20]、磁性固相萃?。╩agnetic solid-phase extraction，MSPE）[21-22]、固相微萃?。╯olid-phase micro extraction，SPME）[23]等技術(shù)逐漸被應(yīng)用。

2.2 分子印跡聚合物固相萃取

MIP-SPE中的分子印跡聚合物（molecular imprinted polymer，MIP）是將印跡分子、功能單體與交聯(lián)劑聚合作為模板分子的目標分析物，通過洗滌或化學(xué)鍵斷裂保留MIP中的結(jié)合位點，留下特異的識別位點。MIP模擬“抗體-抗原”的作用機理，通常被用作固相萃取中選擇性吸附材料[24]。

Feng等[25]以四環(huán)素為模板分子，甲基丙烯酸為功能單體，合成了四環(huán)素印跡聚合物。建立了MIP-SPE結(jié)合高效液相色譜（high-performance liquid chromatography，HPLC）測定動物源性食品中四環(huán)素類抗生素殘留的方法。制備的固相萃取柱具有高吸附容量（3 560 ng～4 700 ng）和高回收率（＞87%）等優(yōu)點。該方法同時分析3種動物源性食品中4種四環(huán)素類抗生素殘留，具備納克級別的超靈敏檢測限，LOD和回收率分別為20 ng/g～40 ng/g和 74%～93%。Baeza等[26]制備了能夠同時識別6種頭孢菌素的MIP作為分子印跡固相萃取吸附劑，利用MIP-SPE提取目標物并結(jié)合UHPLC-MS/MS建立在牛奶樣品中測定頭孢硫呋、頭孢唑林、頭孢喹肟、頭孢匹林、頭孢氨芐和頭孢噻吩等抗生素多殘留檢測方法。該方法的 LOD 為 1.7 μg/kg～12.5 μg/kg，遠遠低于牛奶樣品中頭孢菌素類抗生素的MRLs。相對于傳統(tǒng)的MIP-SPE只針對模板分子的特異識別的缺點，該方法開發(fā)的新型MIP能夠同時對6種頭孢菌素類抗生素進行分析測定，拓寬了MIP-SPE在動物源性食品抗生素殘留分析中的應(yīng)用。Yang等[27]采用MIPSPE結(jié)合LC-MS/MS同時測定蜂蜜、牛奶和豬肉樣品中潮霉素、鏈霉素、阿米卡星和帕羅霉素等11種氨基糖苷類抗生素。采用50 mmol/L磷酸二氫鉀提取蜂蜜樣品中的氨基糖苷類抗生素，采用含有2%三氯乙酸、10 mmol/L磷酸二氫鉀和0.4 mmol/L乙二胺四乙酸二鈉組成的溶液，提取牛奶和勻漿肉類樣品中的氨基糖苷類抗生素。提取物采用分子印跡固相萃取柱凈化。該方法成功應(yīng)用于3種不同基質(zhì)的樣品，LOD為2 μg/kg～30 μg/kg，LOQ 為 7 μg/kg～100 μg/kg，平均回收率為78.2%～94.8%。

新型MIP克服了傳統(tǒng)SPE吸附劑單一目標物特異性強的缺點，具備更高的負載量和選擇性，可以實現(xiàn)結(jié)構(gòu)相似的一系列目標物的識別，提高了樣品的處理能力。傳統(tǒng)分子印跡固相萃取劑正向高負載量、選擇性、生物相適性以及重現(xiàn)性和穩(wěn)定性方向發(fā)展。

2.3 基質(zhì)分散固相萃取

傳統(tǒng)色譜分析法要求樣品及成分以無黏性、無顆粒和相對均勻的液體進入色譜柱的頂部，但是大多數(shù)動物源性食品組織，特別是肌肉和器官組織并非排列均勻[28]。MSPD適用于大量固體、半固體或高黏性生物樣品的制備和提取[29]。在MSPD過程中，將樣品與黏結(jié)相或其他固體支撐材料一起研磨，然后將得到的混合相作為裝柱的填料。

Kim等[30]開發(fā)MSPD結(jié)合LC-MS/MS同時測定肉類、牛奶和雞蛋中20種氨基糖苷類抗生素的分析方法。使用乙酸銨緩沖溶液和分散固相吸附劑（C18）對樣品進行凈化和富集，得到的線性相關(guān)系數(shù)良好（r2＞0.98），平均回收率和精確度為70%～118%和1%～27%。該方法提供了篩選和定量多種食品基質(zhì)中20種氨基糖苷類抗生素殘留的方法。Huang等[31]基于MSPD結(jié)合UHPLC-MS/MS同時測定豬肉中15種β-內(nèi)酰胺類抗生素，同時針對動物源性食品的基質(zhì)效應(yīng)進行研究。該方法采用己烷淋洗肌肉組織和Oasis HLB吸附劑組成的萃取柱，然后用乙腈洗脫，將提取液用于UHPLCMS/MS分析。結(jié)果表明，基質(zhì)匹配校準曲線的相關(guān)系數(shù)均高于0.99，RSD小于12%，β-內(nèi)酰胺類抗生素的LOD 和 LOQ 為 0.02 μg/kg～0.63 μg/kg 和 0.07 μg/kg～0.97 μg/kg，平均回收率為92%～111%。該方法已成功應(yīng)用于中國豬肉市場中15種β-內(nèi)酰胺類抗生素的檢測。

MSPD簡化了傳統(tǒng)樣品前處理過程中組織細胞裂解、均質(zhì)、提取和凈化等多個步驟并將樣品分散成較小的顆粒，為之后目標物的分析提供了更大的表面積。MSPD避免了有機溶劑的消耗，具有簡單性、靈活性和低廉性等優(yōu)點[32]。但是，MSPD技術(shù)實現(xiàn)自動化操作較為困難，方法不易標準化應(yīng)用[33]。

2.4 磁性固相萃取

MSPE是一種以磁性納米粒子為改性吸附劑的新型固相萃取技術(shù)[34]。磁性吸附劑主要由磁性無機材料（如磁鐵礦、磁赤鐵礦等）和非磁性材料（有機和無機分子、聚合物等）組成。在磁場作用下，磁性納米粒子可以實現(xiàn)目標分子與樣品基質(zhì)的高效分離以及富集，極大地簡化了萃取過程，提高了萃取性能[35]。MSPE因其具有吸附效率高、操作簡便、分離速度快、省時、成本低等優(yōu)點而受到了廣泛關(guān)注。

Zhao等[36]采用分步水熱法合成了一種基于二硫化鉬基核殼磁性納米復(fù)合材料（Fe3O4@MoS2）的磁性吸附劑，并結(jié)合HPLC-MS/MS；用于牛奶、豬肉和魚肉中磺胺類抗生素的分析；系統(tǒng)地研究了萃取參數(shù)，其中包括酸堿度、Fe3O4@MoS2的用量、萃取時間、溫度和解吸條件；在1.0 ng/L～1 000 ng/L線性范圍內(nèi)，LOD為0.20 ng/L～1.15 ng/L，回收率為85.50%～111.5%，相對于傳統(tǒng)的磁性納米粒子，合成的Fe3O4@MoS2復(fù)合材料對磺胺負載量的提取效率明顯提升。Ye等[37]合成了一種新型高氟硼吸附劑（fluoride boron adsorbent，F(xiàn)BA），用作 MSPE的萃取相，并將FBA/MSPE與高效液相色譜-二極管陣列檢測（high performance liquid chromatography-diode array detection，HPLC-DAD）聯(lián)用，定量分析環(huán)境中的水和牛奶樣品中的痕量喹諾酮類抗生素。此方法展現(xiàn)了良好的線性關(guān)系和精密度，其中水樣品和牛奶樣品LOD 為 0.004 9 μg/kg～0.016 0 μg/kg 和 0.010 μg/kg～0.046 μg/kg，回收率分別為 80.1%～120%和 78.9%～119%。所建立的FBA/MSPE-HPLC/DAD方法適用于測定水和牛奶樣品中的痕量喹諾酮類抗生素。

2.5 固相微萃取

SPME是一種采用熔融硅質(zhì)纖維涂覆固定相或內(nèi)涂層，基于固定相-水相之間達到分配平衡控制來吸附、預(yù)濃縮樣品中的目標物，可應(yīng)用于液體、固體和氣體樣品的無溶劑樣品前處理技術(shù)[38-39]。由于其獨特的微型裝置設(shè)計，具備操作簡便、有機試劑消耗量少等優(yōu)點。此外，SPME可以與氣相色譜、高效液相色譜和毛細管電泳儀等大型儀器實現(xiàn)在線聯(lián)用，并且能夠?qū)崿F(xiàn)完全自動化操作。在線聯(lián)用的檢測模式能夠簡化檢測步驟，減少人為處理導(dǎo)致的誤差，實現(xiàn)小樣本食品的快速高效檢測[40]。Sadeghi等[41]建立基于SPME和聚離子液體膜吸附劑對分析物預(yù)濃縮，然后使用銅納米團簇（Cu NCs）進行分子熒光光譜測定牛奶和蜂蜜中磺胺噻唑的新方法。在吸附和解吸的最佳條件下，線性濃度為 0.13 μg/mL～25.5 μg/mL，LOD 和 LOQ 分別為0.07 μg/mL和0.23 μg/mL，牛奶和蜂蜜樣品中磺胺噻唑的回收率分別為84.5%～104%和96.6%～107%。該方法通過固相微萃取結(jié)合熒光快速分析，極大縮短了檢測時長，可以用日常監(jiān)管過程中大批量樣品的抗生素殘留篩選。

2.6 QuEChERS法

Anastassiades等[42]引入了一種快速、簡單、廉價、有效、耐用和安全的快速樣品前處理技術(shù)，即QuEChERS法。QuEChERS法基于鹽析效應(yīng)，通常包括鹽析溶劑萃取和分散固相萃取（dispersive solid-phase extraction，DSPE）凈化等步驟[43]。QuEChERS法可以從樣品基質(zhì)中去除水和不需要的基質(zhì)組分，有效消除基質(zhì)效應(yīng)并獲得目標分析物良好的回收率，具有高重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，更符合綠色分析化學(xué)原則。

Zhou等[44]將響應(yīng)面法優(yōu)化的QuEChERS法與HPLC-MS/MS相結(jié)合，同時分析牛奶中16種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和4種代謝物。該方法使用羅紅霉素作為內(nèi)標以獲得最大的準確度和精密度。研究結(jié)果表明，大多數(shù)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素及其代謝物相關(guān)系數(shù)良好（r2＞0.998），在濃度為 1 ng/mg～100 ng/mg均可檢測到。所有分析物的回收率為62.27%～115.28%，LOD和LOQ分別為 0.30 μg/kg～0.85 μg/kg 和 1.1 μg/kg～4.0 μg/kg，日內(nèi)和日間精密度分別低于10%和15%。Wen等[45]優(yōu)化QuEChERS法中鹽析溶劑萃取和凈化管的凈化步驟，結(jié)合LC-MS/MS分析多種可食用動物組織中磺胺類抗生素。在QuEChERS的清理步驟中，使用無滴落過濾板（Captiva ND-lipid），去除動物源性食品的蛋白和脂質(zhì)。牛肉、豬肉和雞肉樣品的LOD為0.01 ng/g～0.03 ng/g，牛肚和豬肝樣品的碘含量范圍分別為0.02 ng/g～0.04ng/g，日內(nèi)和日間精密度范圍分別為1.0%～10.5%和0.4%～8.0%，準確度分別為95.2%～107.2%和97.8%～102.1%。采用響應(yīng)面分析優(yōu)化，進一步提升了QuEChERS方法的準確度和靈敏性；新組件（Captiva ND-lipid）的采用，解決了動物源食品中脂質(zhì)和蛋白去除難的問題，Captiva ND-lipid可去除樣品中99%以上的脂類和蛋白，確保痕量分析的精確度和重復(fù)性，特別適用于對樣品潔凈程度以及回收率要求高的樣品分析。

3 基于相分配原理

3.1 液液萃取

LLE是基于分析物在兩種不相容的液體或相（通常是水溶劑和有機溶劑）之間分配比或溶解度不同來進行分離、提取或純化的預(yù)處理方法，也是最常用的萃取技術(shù)之一[46]。與傳統(tǒng)的SPE相比，LLE可以通過多種形式的裝置實現(xiàn)連續(xù)操作，處理大批量樣品，具有分離效果好、成本低等優(yōu)點。但LLE不易實現(xiàn)自動化操作，需要大量昂貴且有毒的有機溶劑，繁瑣、耗時且對環(huán)境不友好。

Jank等[47]采用LLE結(jié)合液相色譜-電噴霧-串聯(lián)質(zhì)譜（liquid chromatogram-electrospray ionization-mass spectrometry/mass spectrometry，LC-ESI-MS/MS）建立了一種高通量、快速檢測牛、豬、雞肉和牛奶中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素（紅霉素、阿奇霉素、泰樂菌素、替米考星和螺旋霉素）和林可酰胺類抗生素（林可霉素和克林霉素）的多殘留分析方法。樣品前處理過程中無任何提純、凈化等步驟，僅采用少量乙腈對樣品提取，并詳細優(yōu)化提取參數(shù)，最大限度地減少基質(zhì)效應(yīng)和共存物的干擾。進而使用C18柱和由酸化乙腈和水組成的流動相實現(xiàn)色譜分離。結(jié)果表明，以變異系數(shù)表示的再現(xiàn)性值均低于19.1%，回收率和LOD分別為60%～107%和5 μg/kg～25 μg/kg。該方法避免了動物源食品中抗生素殘留分析過程的固相萃取過程，具有分析時間短、成本低、樣品制備簡單等優(yōu)點。

3.2 液相微萃?。╨iquid-phase microetraction，LPME）

LPME是一種基于相平衡原理用于樣品前處理的LLE微型化方法。在LPME中，受體相的液滴保持在微型注射器針頭的尖端，然后直接浸入樣品中或懸浮在其表面之上，樣品中的溶劑可以置于疏水膜的孔中，或者通過膜界面與供體相分離。LPME克服了LLE方法的局限性，提高了樣品凈化能力，減少了有機溶劑的消耗并可以使用多種液體萃取劑，如有機溶劑、水溶液和離子液體等[48]。LPME技術(shù)主要包括分散液液微萃?。╠ispersion liquid-liquid microextraction，DLLME）和中空纖維液相微萃?。╤ollow fiber liquid-phase microextraction，HF-LPME）。

DLLME因其溶劑消耗少、提取速度快、高富集倍數(shù)等優(yōu)點，可用于在不同樣品基質(zhì)中精確提取和定量痕量分析物[49]。然而，DLLE應(yīng)用于復(fù)雜樣品基質(zhì)時，由于常規(guī)提取液極性的限制，DLLME導(dǎo)致選擇性和萃取效率較差。Wang等[50]采用離子液體1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽（[C4MIM][PF6]）建立了DLLME結(jié)合HPLC測定肉類中4種喹諾酮類抗生素的方法。在最優(yōu)條件下，該方法獲得了4種喹諾酮類抗生素（諾氟沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、恩諾沙星）的不同富集因子（11倍～42倍）。結(jié)果表明，4種藥物的LOD為0.5 ng/mL～1.1 ng/mL，雞肉、豬肉和魚肉中的加標回收率為60.4%～96.3%，變異系數(shù)小于11.5%。Arroyo-Manzanares等[51]將DLLME和QuEChERS結(jié)合，采用HPLC-熒光檢測法對牛奶樣品中9種磺胺類抗生素的極性進行測定。該方法的提取和回收率為90.8%～104.7%和83.6%～104.8%。LOD分別低于1.21μg/L和2.73 μg/L。新型離子液體提取液以及多種前處理方法的有機結(jié)合提高了DLLME的萃取效率。

HF-LPME是一種由管壁纖維孔內(nèi)的有機溶劑形成的支撐液膜進行傳質(zhì)，再利用聚丙烯制成和微型注射器支撐的多孔中空纖維內(nèi)腔進行微萃取的技術(shù)。由于受體相與樣品溶液無直接接觸，因此避免了溶劑的損失[52]。HF-LPME還具有突出的樣品純化功能，因此擴大了分析基質(zhì)的范圍，使其可用于復(fù)雜基質(zhì)樣品的直接分析[53]。Tajabadi等[54]采用HF-LPME結(jié)合HPLCDAD用于測定4種四環(huán)素類抗生素和5種喹諾酮類抗生素。將中空纖維切成8 cm的長度，用含有10%Alijat-336的1-辛醇溶液浸漬以填充外部的孔隙，然后將1 mol/L NaOH-NaCl水溶液注射到纖維腔內(nèi)，采用HPLC對富含分析物的受體相進行檢測。在最佳參數(shù)條件下，不同抗生素的LOD和LOQ分別為0.5 ng/g～20 ng/g和1.25 ng/g～40 ng/g，日內(nèi)和日間重復(fù)性分別為3.4%～10.7%和5.0%～11.5%。該方法適用于多種動物源性食品樣品如魚、牛奶和蜂蜜，以及羊肉和雞肉的肝臟和肌肉等中9種抗生素的提取和測定。

4 結(jié)論與展望

本文主要介紹動物源性食品抗生素的高通量、多殘留檢測方法的相關(guān)研究進展。盡管高效和高分辨大型儀器的普及，提高了動物源性食品抗生素多殘留檢測的靈敏度和準確性。動物源性食品樣品具有種類繁多、基質(zhì)復(fù)雜和時效性強等特性，因此如何提高樣品的取樣、提取和凈化等步驟效率仍需進一步研究。特別是針對食品安全監(jiān)管的需求，開發(fā)更為簡單快速、靈敏、低成本、可實現(xiàn)自動化操作的樣品前處理方法是提高動物源性食品中痕量抗生素殘留分析檢測效率的必要手段。在樣品前處理過程中，新型吸附劑、新前處理方法以及不同類型前處理方法的結(jié)合，在近年來動物源性食品抗生素殘留中超靈敏檢測研究中體現(xiàn)尤為突出。新型固相吸附劑的開發(fā)，如混合型強陽離子交換反相吸附劑、高選擇性MIP吸附劑、納米復(fù)合磁性吸附劑和新型高氟硼吸附劑等，解決了傳統(tǒng)吸附劑存在的特異性弱、洗脫不徹底等問題，具備了選擇性強、高親和力等優(yōu)點，同時展現(xiàn)了更好的回收率，提高了動物源性食品中抗生素的分析效率；同時，新型前處理方法的開發(fā)以及前處理方法的有機結(jié)合，如QuEChERS/96孔SPE平板法、液液微萃取與QuECh-ERS法的有機結(jié)合等，解決了處理樣品單一和處理步驟繁瑣等問題，具有廉價、高效、省時、便捷等優(yōu)點。動物源性食品中抗生素多殘留的檢測仍存在以下問題有待解決：1）新型吸附劑對目標物的分離和富集機制不清晰，大部分仍停留在應(yīng)用效果的研究上，對于機制研究不夠深入；2）動物源性食品基質(zhì)效應(yīng)研究不夠詳細，除了通過基質(zhì)校正曲線和標準加入方法以外，評價基質(zhì)效應(yīng)的新方法亟待研究；3）盡管無滴落過濾板（Captiva ND-lipid）等新前處理組件的出現(xiàn)，促進了動物源性食品基質(zhì)中蛋白和脂類的處理效率，但標準化和自動化設(shè)備和組件的開發(fā)仍需進一步加強。