孫冷冰，龔堅(jiān)，劉巧

銀屑?。╬soriasis，PS）是一種臨床常見(jiàn)的慢性炎癥性皮膚疾病，全球患病率高達(dá)0.2%~11.4%［1］。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，組織病理改變?yōu)榻琴|(zhì)形成細(xì)胞（keratinocytes，KCs）過(guò)度增生、新生血管形成及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)［2］。特征性皮損為皮膚局部或廣泛分布的鱗屑性紅斑或斑塊，皮疹常反復(fù)發(fā)作，難以痊愈，嚴(yán)重影響患者的日常生活［3-4］。因此，積極探索銀屑病的發(fā)病機(jī)制及中醫(yī)藥在其中的干預(yù)作用具有重要意義。KCs作為皮膚表皮層的主要組成部分，在抵抗外界環(huán)境損害及維持皮膚穩(wěn)態(tài)方面具有重要的作用；其異常增殖與PS的發(fā)生密切相關(guān)［5］。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)銀屑病KCs增殖機(jī)制的研究主要集中于炎性細(xì)胞因子、氧化應(yīng)激、微小RNA（miRNA）等方面，而中醫(yī)藥在其中發(fā)揮了重要干預(yù)作用。因此，本文著重從以上幾個(gè)方面進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述，為進(jìn)一步研究銀屑病的發(fā)病機(jī)制及臨床精準(zhǔn)治療提供參考。

1 炎性細(xì)胞因子的作用

銀屑病是一種自身炎癥性角化疾?。?］，炎癥反應(yīng)貫穿整個(gè)疾病的發(fā)病過(guò)程，其皮損部位KCs可通過(guò)釋放趨化因子吸引T細(xì)胞聚集，繼而分泌干擾素（IFN）-γ、白細(xì)胞介素（IL）-8、IL-22、IL-17A等炎性細(xì)胞因子，促進(jìn)表皮KCs增殖［7］。Goldie等［8］首次發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄類顆粒狀因子3（Grainyhead-like 3，GRHL3）與胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子（TARC）的促增殖信號(hào)之間的聯(lián)系，敲低人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞（human keratinocytes，HaCaT）中的GRHL3因子，皮膚出現(xiàn)具有TARC被激活的炎癥反應(yīng)特征，如肥大細(xì)胞和促炎性T細(xì)胞的浸潤(rùn)增加，進(jìn)而促進(jìn)KCs增殖，并可見(jiàn)促增殖/促炎癥標(biāo)志物T細(xì)胞標(biāo)記CD3和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子3（STAT3）的表達(dá)。近年來(lái)，多項(xiàng)研究表明炎性細(xì)胞因子可通過(guò)多種基因調(diào)控或者信號(hào)通路對(duì)KCs增殖起著正、負(fù)調(diào)控的作用。

1.1 炎性細(xì)胞因子的正調(diào)控作用 炎性細(xì)胞因子可刺激其他細(xì)胞因子，誘導(dǎo)角蛋白（keratin，K）高表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)KCs增殖。Yang等［9］認(rèn)為，與KCs增殖相關(guān)的K6、K16和K17是銀屑病發(fā)生的標(biāo)志物，其分子機(jī)制為：在IL-17或IL-22等炎性細(xì)胞因子刺激下，轉(zhuǎn)錄因子核因子E2相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核并啟動(dòng)靶向K6、K16、K17高表達(dá)，從而促進(jìn)KCs增殖，參與銀屑病的發(fā)病。

同時(shí)，一些炎性細(xì)胞因子通過(guò)上調(diào)凋亡蛋白分子參與銀屑病KCs的增殖。Wang等［10］探討了凋亡抑制蛋白家族分子Livin在炎性細(xì)胞因子抑癌素M刺激KCs中的調(diào)控作用，結(jié)果表明經(jīng)抑癌素M刺激后Livin分子表達(dá)上調(diào)，且通過(guò)細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）和STAT3信號(hào)通路調(diào)控Livin的表達(dá)和促進(jìn)HaCaT細(xì)胞的增殖。

1.2 炎性細(xì)胞因子的負(fù)調(diào)控作用 某些炎性細(xì)胞因子可通過(guò)激活激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活信號(hào)通路抑制銀屑病KCs增殖。Yin等［11］研究發(fā)現(xiàn)，與鄰近非病變組織皮損相比，斑塊狀銀屑病患者皮損組織中IL-28受體α（IL-28RA）的表達(dá)顯著降低；體外研究證明，在IL-28RA基因被敲除后，HaCaT細(xì)胞增殖速度加快，S期和G2/M期細(xì)胞占比增加；相反，IL-28RA過(guò)表達(dá)抑制HaCaT細(xì)胞的增殖，使細(xì)胞周期停滯在G0/G1期；進(jìn)一步機(jī)制研究顯示IL-28RA通過(guò)激活Janus激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活信號(hào)通路發(fā)揮其抗增殖作用。以上研究說(shuō)明IL-28RA通過(guò)激活Janus激酶信號(hào)通路抑制銀屑病KCs增殖。然而，一些炎性細(xì)胞因子還可以作用于某些信號(hào)通路，從而調(diào)控銀屑病KCs的增殖和分化。Buerger等［12］研究表明，炎癥依賴性mTORC1信號(hào)傳導(dǎo)可干擾KCs的增殖和分化，即在健康狀態(tài)下，當(dāng)KCs從增殖轉(zhuǎn)為終末分化時(shí)，mTOR信號(hào)被阻斷，而在銀屑病等炎癥情況下，炎性細(xì)胞因子［IL-1β、IL-17A、腫瘤壞死因子（TNF）-α］通過(guò)PI3-K/Akt信號(hào)通路持續(xù)性激活mTORC1信號(hào)，導(dǎo)致KCs異常增殖及分化；相反，如果mTORC1信號(hào)被阻斷，則可以控制其異常增殖及分化。

2 氧化應(yīng)激的作用

氧 化 應(yīng) 激（oxidative stress，OS）是 活 性 氧（reactive oxygen species，ROS）與人體抗氧化分子數(shù)量不平衡所致［6］。Barygina等［13］認(rèn)為，在銀屑病患者體內(nèi)OS標(biāo)志物水平較高，說(shuō)明銀屑病中有氧化應(yīng)激反應(yīng)的參與。Skutnik-Radziszewska等［14］研究了40例年齡、性別相匹配的斑塊狀銀屑病患者和健康受試者，與健康組相比，銀屑病組未刺激性唾液、刺激性唾液和血漿中晚期氧化蛋白產(chǎn)物、晚期糖基化終產(chǎn)物、丙二醛和脂氫過(guò)氧化物水平顯著升高，總蛋白和唾液淀粉酶濃度明顯降低，說(shuō)明銀屑病的發(fā)生普遍伴隨著氧化還原不平衡及氧化反應(yīng)的存在。上述研究表明，OS在銀屑病的發(fā)生機(jī)制中起著不可或缺的作用。

Xu等［15］研究表明，銀屑病OS時(shí)可產(chǎn)生高水平的ROS，促使炎性細(xì)胞因子釋放，誘導(dǎo)KCs過(guò)度增殖和血管生成。Lai等［16］認(rèn)為，ROS還可通過(guò)誘導(dǎo)Th17/Th1/Th22細(xì)胞的增殖及分化，抑制調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞的抗炎活性及促炎性細(xì)胞因子，如IL-17、IL-22、TNF-α、IFN-γ和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的分泌，進(jìn)而刺激KCs增殖和血管生成。Barygina等［13］研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞外培養(yǎng)液中成纖維細(xì)胞逐漸產(chǎn)生的ROS顯著影響KCs；成纖維細(xì)胞可引起KCs中ERK1/2磷酸化增加，細(xì)胞內(nèi)ROS升高，細(xì)胞周期加速，進(jìn)而導(dǎo)致KCs增殖。以上研究說(shuō)明ROS誘導(dǎo)OS可通過(guò)炎性細(xì)胞因子釋放、信號(hào)通路等多種途徑影響銀屑病KCs的增殖。

此外，還有一些信號(hào)分子可抑制氧化應(yīng)激通路抗銀屑病KCs增殖。Xu等［15］研究表明，沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）被激活后可抑制促分裂原活化的蛋白激酶（MAPK）、核因子（NF）-κB和STAT3氧化應(yīng)激信號(hào)通路，并下調(diào)炎性細(xì)胞因子，進(jìn)而抑制炎癥、血管生成及KCs過(guò)度增殖。Woodby等［17］研究表明，磷酸二酯酶4抑制劑CHF6001可抑制磷酸化NF-κB亞基p65易位，使煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶失活而降低氧化應(yīng)激，從而抑制KCs增殖。

3 miRNA的作用

miRNA（miR）是小的非蛋白質(zhì)編碼核糖核酸，在基因表達(dá)調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用［18］。自Sonkoly等［19］于2007年首次提出miRNA失調(diào)參與銀屑病的發(fā)病機(jī)制后，多種銀屑病miRNA的變化及其潛在分子機(jī)制逐漸被提出，如miRNA對(duì)KCs增殖起著正、負(fù)調(diào)控的作用，而這種調(diào)控失衡可能是銀屑病發(fā)病的關(guān)鍵。

3.1 miRNA的正調(diào)控作用 目前已發(fā)現(xiàn)多個(gè)miRNA參與銀屑病KCs增殖的調(diào)控機(jī)制。Zhang等［5］研究發(fā)現(xiàn)，在KCs中細(xì)胞因子通過(guò)激活STAT1信號(hào)通路增加miR-17-92簇的表達(dá)，其過(guò)表達(dá)可抑制細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B，進(jìn)而促進(jìn)KCs的增殖和細(xì)胞周期進(jìn)程，說(shuō)明細(xì)胞因子誘導(dǎo)的miR-17-92簇過(guò)表達(dá)可以促進(jìn)KCs的增殖和免疫功能。Zhao等［20］研究發(fā)現(xiàn)，在IL-22介導(dǎo)的銀屑病中，KCs增殖失調(diào)且miR-548a-3p的表達(dá)上調(diào)，miR-548a-3p的過(guò)表達(dá)可通過(guò)靶向蛋白磷酸酶3調(diào)節(jié)亞基B促進(jìn)KCs增殖。Wang等［21］研究發(fā)現(xiàn)，miR-223過(guò)表達(dá)促進(jìn)了IL-22刺激的HaCaT細(xì)胞增殖，并減少凋亡；其機(jī)制可能是miR-223通過(guò)PTEN/Akt通路促進(jìn)IL-22刺激的KCs增殖并抑制其凋亡。Feng等［22］研究發(fā)現(xiàn)，miR-126與銀屑病患病風(fēng)險(xiǎn)及病情嚴(yán)重度相關(guān)，miR-126上調(diào)可促進(jìn)KCs增殖及炎癥反應(yīng)，抑制其凋亡。Wang等［23］發(fā)現(xiàn)，miR-744-3p在銀屑病皮損組織中上調(diào)，且促進(jìn)KCs增殖，抑制其分化；而p53調(diào)節(jié)的DNA復(fù)制抑制劑killin（KLLN）的過(guò)度表達(dá)阻止了miR-744-3p對(duì)KCs增殖和分化的影響；說(shuō)明miR-744-3p可通過(guò)靶向KLLN調(diào)節(jié)銀屑病KCs的增殖和分化。以上研究表明，miRNA可通過(guò)影響炎性細(xì)胞因子的分泌或通過(guò)某些信號(hào)通路參與銀屑病KCs增殖的調(diào)控。

3.2 miRNA的負(fù)調(diào)控作用 在銀屑病中，miRNA除了對(duì)KCs進(jìn)行正調(diào)控，還發(fā)揮著負(fù)調(diào)控的作用。Li等［24］研究發(fā)現(xiàn)，SFMBT1是miR-20a-3p的直接靶點(diǎn)，在HaCaT細(xì)胞中，過(guò)表達(dá)miR-20a-3p或敲除SFMBT1基因可抑制細(xì)胞增殖或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。研究表明，血管生成素-1（Ang-1）可調(diào)節(jié)銀屑病細(xì)胞中PI3K、AKT、mTOR和ERK的磷酸化水平，且miR-876-5p在銀屑病患者的組織和血液中表達(dá)下調(diào)，miR-876-5p對(duì)Ang-1的3'非翻譯區(qū)（UTR）具有靶向作用，且通過(guò)抑制Ang-1的表達(dá)來(lái)抑制增殖［25］。Zheng等［26］研究表明，miR-125b-5p或miR-181b-5p上調(diào)可靶向Akt3抑制人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞（human epidermal keratinocytes，HEKs）的增殖。Xiao等［27］研究表明，miR124-3p/成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2（FGFR2）軸可能抑制KCs的增殖和遷移，并改善銀屑病的炎癥微環(huán)境，其機(jī)制可能是在重組IL（rIL）-22刺激下，HaCaT細(xì)胞內(nèi)FGFR2沉默或miR124-3p的過(guò)表達(dá)明顯抑制細(xì)胞增殖和遷移能力，降低IL-17A和TNF-αmRNA的表達(dá)，同時(shí)也降低FGFR2、K6、K16、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-1、MMP-9、p-PI3K、p-Akt和p-ERK的蛋白水平。此外，也有研究報(bào)道m(xù)iR-125b［28］、miR-187［29］、miR-145-5p［30］、miR-320b［31］等miRNA也有抑制銀屑病KCs增殖的作用。

4 其他因素

生長(zhǎng)因子、激肽、抗菌肽、長(zhǎng)鏈非編碼RNAs（LncRNAs）、機(jī)械牽張等因素與KCs增殖有關(guān)。Yu等［32］研究表明，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子19（FGF19）通過(guò)FGFR4促進(jìn)pGSK-3β和β-catenin表達(dá)，從而激活Wnt/GSK-3β/β-catenin信號(hào)通路，進(jìn)而維持KCs高增殖能力。Soley等［33］研究表明，B1和B2激肽受體均會(huì)影響KCs的增殖和免疫病理，從而加劇疾病的進(jìn)展。C10orf99是最近發(fā)現(xiàn)的一種人類抗菌肽。Chen等［34］研究表明，C10orf99通過(guò)加快G1/S期轉(zhuǎn)換促進(jìn)KCs增殖，其促增殖作用與ERK1/2和NF-κB的激活有關(guān)，而與Akt途徑無(wú)關(guān)。Suzuki等［35］研究表明，YKL-40既是細(xì)胞因子又是生長(zhǎng)因子，可促進(jìn)HaCaT細(xì)胞的增殖。Duan等［36］研究表明，LncRNARP6-65G23.1在M5（一種細(xì)胞因子的混合物，包括IL-17A，TNF-α，IL-1α，IL-22和腫瘤抑制素-M）刺激的KCs中顯著上調(diào)，通過(guò)激活ERK1/2和Akt信號(hào)通路，刺激KCs增殖并抑制其凋亡。同時(shí)，Qiao等［37］研究表明，機(jī)械拉伸也可以通過(guò)促進(jìn)KCs增殖和增加KCs產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子而加重銀屑病的損害，其機(jī)制是持續(xù)拉伸使得KCs增殖和皮膚屏障相關(guān)基因表達(dá)顯著增加，且誘導(dǎo)原代人角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生銀屑病相關(guān)的炎性細(xì)胞因子、抗菌肽和趨化因子。這可能也是銀屑病常發(fā)生在受到強(qiáng)烈機(jī)械拉伸摩擦部位的原因。

5 中醫(yī)藥對(duì)KCs增殖的影響

近年來(lái)，中醫(yī)藥在銀屑病的治療中發(fā)揮了重要作用。中藥、針灸可通過(guò)下調(diào)炎性細(xì)胞因子發(fā)揮抗KCs增殖的作用，且其效用與中醫(yī)藥下調(diào)炎性細(xì)胞因子的水平呈正相關(guān)，如電針降低局部病變炎癥反應(yīng)的作用較強(qiáng)，故其抗增殖作用較針刺、火針作用明顯。Li等［38］發(fā)現(xiàn)，水煮松香通過(guò)下調(diào)IL-23、IL-17A和IL-17F等相關(guān)炎性細(xì)胞因子，進(jìn)而抑制Th1/Th17細(xì)胞和表皮KCs的增殖。Wang等［39］研究發(fā)現(xiàn)，針刺、電針、火針均能改善銀屑病皮損，減少皮損厚度，抑制KCs增殖，減少CD3+T細(xì)胞浸潤(rùn)及炎性細(xì)胞因子的分泌（包括IL-1β、IL-17A和IL-23p40）；其中，電針治療效果最好，其原因可能是電針降低神經(jīng)激肽A的表達(dá)水平，并與局部病變炎性細(xì)胞因子水平的降低呈正相關(guān)。另外，中藥通過(guò)調(diào)控機(jī)體的氧化應(yīng)激通路，下調(diào)炎性細(xì)胞因子，進(jìn)而抑制銀屑病KCs增殖。Xu等［15］研究表明，紅景天苷可能通過(guò)激活SIRT1抑制MAPK、NF-κB和STAT3氧化應(yīng)激信號(hào)通路，并下調(diào)炎性細(xì)胞因子，進(jìn)而抑制炎癥、血管生成及KCs過(guò)度增殖。有些中藥還可通過(guò)作用于某些信號(hào)通路來(lái)影響mRNA的表達(dá)，進(jìn)而抑制銀屑病KCs的增殖。王建鋒等［40］研究發(fā)現(xiàn)，200 mg/L黃芩苷能顯著抑制KCs的活性并促其凋亡、阻滯于S期、抑制Ki67的mRNA表達(dá)、增加Fas和caspase-3的mRNA水平、下調(diào)jag-1蛋白表達(dá)、上調(diào)Notch-1和Hes蛋白水平，說(shuō)明黃芩苷可能通過(guò)激活Notch信號(hào)通路，顯著抑制KCs的活力并促進(jìn)其凋亡。Li等［41］研究表明，中藥白芍的主要成分白芍總苷可改善咪喹莫特誘導(dǎo)的小鼠銀屑病癥狀，抑制其KCs增殖，其機(jī)制可能是通過(guò)抑制STAT1和STAT3的磷酸化來(lái)抑制Th17的細(xì)胞分化及KCs的增殖。此外，也有研究表明人參皂甙化合物［42］、紫草素［43］、苦參素［44］等中藥均可通過(guò)抑制KCs增殖來(lái)參與銀屑病的治療。

綜上所述，炎性細(xì)胞因子、氧化應(yīng)激、miRNA、生長(zhǎng)因子、激肽、抗菌肽、LncRNAs、機(jī)械牽張等多種因素可通過(guò)影響KCs增殖參與銀屑病的發(fā)生。在此過(guò)程中，炎性細(xì)胞因子發(fā)揮了不可或缺的作用，貫穿整個(gè)疾病的發(fā)展過(guò)程，可直接引起KCs增殖；或通過(guò)多種基因調(diào)控、信號(hào)通路、氧化應(yīng)激時(shí)產(chǎn)生的高水平ROS，刺激炎性細(xì)胞因子釋放，誘導(dǎo)KCs過(guò)度增殖；中醫(yī)藥則通過(guò)拮抗KCs增殖治療銀屑病。這些研究有助于進(jìn)一步明確銀屑病的發(fā)病機(jī)制及實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)靶點(diǎn)治療。盡管目前對(duì)一些細(xì)胞因子、基因調(diào)控的研究已取得了一定的進(jìn)展，但中藥、針灸等如何通過(guò)影響KCs的增殖治療銀屑病仍需深入研究。