◆作者：唐超 周佳 吳景恩 趙世元 冼欣彤

◆單位：佛山市雷米高動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)保健科技有限公司

動(dòng)物淚液的正常排出需要依靠結(jié)構(gòu)、功能正常的淚液引流系統(tǒng)。正常情況下（無(wú)病理、情緒因素的影響），動(dòng)物每天都會(huì)分泌大量淚液，用以沖洗并稀釋眼睛接觸到的灰塵，殺滅進(jìn)入眼睛的細(xì)菌等，同時(shí)還潤(rùn)滑眼球，使之能夠靈活轉(zhuǎn)動(dòng)，然后隨著鼻淚管從眼部進(jìn)入鼻腔。當(dāng)鼻淚管堵塞或者分泌的淚液來(lái)不及通過(guò)鼻淚管流入鼻腔時(shí)就會(huì)順著眼角流下，俗稱(chēng)“流淚”，如果不能及時(shí)清理就形成了淚痕。犬的淚痕通常呈咖啡色或深棕色，因?yàn)檠蹨I含有一種稱(chēng)為卟啉的化學(xué)物質(zhì)，當(dāng)暴露于空氣中時(shí)會(huì)變成銹色。另外，眼淚導(dǎo)致的潮濕環(huán)境也會(huì)使細(xì)菌大量滋生，形成棕色、褐色或粉色淚痕，嚴(yán)重時(shí)可能伴有不良?xì)馕?、濕性皮炎、皮膚潰爛等。引起犬淚痕的原因有很多，如疾?。I腺炎、鼻淚管堵塞、耳道感染、眼瞼外翻等）、品種（吉娃娃，小鹿犬、法斗、貴賓、比熊等鼻淚管彎曲程度較大）、遺傳（淚腺敏感或者鼻淚管過(guò)細(xì)）、外界刺激（環(huán)境、食物）。

淚痕的形成對(duì)寵物犬的外觀有著不良影響，特別是對(duì)淺色被毛的寵物犬影響更大?？偟膩?lái)說(shuō)，犬的淚痕可以認(rèn)為是一種由生理特點(diǎn)引起的眼部炎癥，因此在控制外界刺激因素的同時(shí)，在日糧中添加天然的活性抗炎物質(zhì)，抑制炎癥的發(fā)生和惡化，對(duì)緩解犬的淚痕可能有一定的作用。萬(wàn)壽菊、枸杞、決明子、夏枯草、桑葉、蔓荊子是常見(jiàn)的名目類(lèi)中草藥，并且其提取物中含有的活性成分具有抗炎、抗氧化的作用。因此，我們希望通過(guò)對(duì)這些活性物質(zhì)進(jìn)行組合配比，并進(jìn)行試驗(yàn)，篩選出對(duì)緩解犬淚痕有明顯作用的植物復(fù)合物配方，為植物提取物在犬糧開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

萬(wàn)壽菊提取物：購(gòu)自西安某生物科技有限公司，葉黃素≥5%；枸杞子提取物：購(gòu)自西安某生物科技有限公司，枸杞多糖≥10%；決明子提取物：購(gòu)自西安某生物科技有限公司，30∶1（%）；夏枯草提取物：購(gòu)自西安某生物科技有限公司，20∶1（%）；桑葉提取物：購(gòu)自西安某生物科技有限公司，20∶1（%）；蔓荊子提取物：購(gòu)自西安某生物科技有限公司，30∶1（%）；水解雞肝粉：購(gòu)自江西某生物科技有限公司，≥95%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì)

試驗(yàn)一挑選了48 只有淚痕的貴賓和比熊成犬，試驗(yàn)開(kāi)始之前，將所有犬只的淚痕清洗干凈（必要時(shí)用剃刀將眼部周?chē)l(fā)以及淚痕沾染的毛發(fā)剃掉）。預(yù)飼兩周，以7 天為一個(gè)周期，每個(gè)周期最后一天對(duì)所有試驗(yàn)犬進(jìn)行淚痕評(píng)分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參照楊紫嫣等（2016），如表1。按品種和淚痕評(píng)分對(duì)犬進(jìn)行隨機(jī)分組。

表1 淚痕分級(jí)

48 只試驗(yàn)犬分為8 個(gè)處理，每個(gè)處理6 只犬（4 只貴賓和2只比熊）。所有試驗(yàn)犬飼喂基礎(chǔ)日糧，日糧配方見(jiàn)表2。

所有試驗(yàn)犬在飼喂基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上，對(duì)照組每只犬每天飼喂3.0 g 雞肝粉（誘食劑和稀釋劑），試驗(yàn)I-VII 組飼喂相應(yīng)重量的復(fù)合物，見(jiàn)表3。

試驗(yàn)二挑選20 只有淚痕的貴賓犬，飼喂試驗(yàn)一中效果最明顯的復(fù)合物，基礎(chǔ)日糧參照表2。

表2 基礎(chǔ)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

表3 復(fù)合物配方組成

1.3 飼養(yǎng)管理及指標(biāo)測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)在潔凈的動(dòng)物房中完成。試驗(yàn)期保持通風(fēng)，維持室溫在25~30℃；每只試驗(yàn)犬單獨(dú)飼養(yǎng)在0.5 m×0.6 m×0.6 m的飼養(yǎng)籠中，并于每天下午在室內(nèi)空地自由活動(dòng)，17：00 飼喂雞肝粉或者復(fù)合物，18:00 定量飼喂日糧。試驗(yàn)期間正常驅(qū)蟲(chóng)和清潔，且保證各組試驗(yàn)動(dòng)物相同處理。

如表1 展示的淚痕分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，正式試驗(yàn)開(kāi)始后，以7 天為一個(gè)周期對(duì)所有犬只的淚痕進(jìn)行評(píng)分，隨后清洗干凈進(jìn)入下一個(gè)周期。試驗(yàn)二中計(jì)算對(duì)應(yīng)周期中淚痕評(píng)分與試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)（第0周）的淚痕評(píng)分差值，以差值≥1分記為顯著效果；差值≥0.5分，記為一般效果，以有顯著效果和一般效果的犬只數(shù)除以總試驗(yàn)犬?dāng)?shù)得到相應(yīng)的比例。試驗(yàn)一和試驗(yàn)二的正式試驗(yàn)均為35 天。

1.4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”來(lái)表示。P< 0.05表示差異顯著，以P< 0.10 表示具有顯著性趨勢(shì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 評(píng)分周期的確定

目前，幾乎沒(méi)有關(guān)于測(cè)定寵物犬淚痕的公認(rèn)試驗(yàn)方法，本研究團(tuán)隊(duì)在前期的研究中發(fā)現(xiàn)，多數(shù)貴賓犬淚痕在清理后4 d 就出現(xiàn)，并且7 d 更為明顯。如圖1 中示例。因此，由圖1 可知，7 天作為一個(gè)淚痕測(cè)量周期，是完全符合淚痕形成過(guò)程的。

2.2 不同復(fù)合物對(duì)淚痕評(píng)分的影響

由表4 可知,不同植物提取物對(duì)貴賓和比熊犬淚痕的形成在第2 周以后具有緩解作用，其中以試驗(yàn)V 組的效果最為明顯。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)V 組在第2-5 周的淚痕評(píng)分顯著降低（P< 0.05）；試驗(yàn)I、IV 和VI 組在第4 周的淚痕評(píng)分顯著降低（P< 0.05）。

表4 植物提取物復(fù)合物對(duì)犬淚痕形成的影響

2.3 效果驗(yàn)證

由表4 可知，試驗(yàn)V 組的效果最為明顯，由于試驗(yàn)一中樣本數(shù)量少（每個(gè)處理6 只犬），故為進(jìn)一步驗(yàn)證試驗(yàn)- 中植物復(fù)合物效果，復(fù)合物進(jìn)行試驗(yàn)二進(jìn)行大樣品驗(yàn)證。由表5 可知，試驗(yàn)V組的復(fù)合物在第二周后出現(xiàn)明顯效果，平均淚痕評(píng)分隨著時(shí)間的增加而逐漸減少。在第3 周以后，出現(xiàn)顯著效果的比例超過(guò)60%，一般效果的比例超過(guò)70%。

表5 驗(yàn)證試驗(yàn)中淚痕等級(jí)評(píng)分及占比

3 討論

隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)水平的提高，養(yǎng)寵家庭和寵物數(shù)量飛速增長(zhǎng)，寵物的角色也開(kāi)始轉(zhuǎn)變?yōu)榫窦耐?、伴侶和家人，越來(lái)越多的寵物飼主開(kāi)始關(guān)注寵物食品的營(yíng)養(yǎng)和愛(ài)寵的健康。傳統(tǒng)的寵物食品主要是基于各種營(yíng)養(yǎng)成分配方而成、以維持寵物日常生命活動(dòng)和生長(zhǎng)發(fā)育為主，近年來(lái)隨著市場(chǎng)需要，功能性寵物食品開(kāi)始被廣泛開(kāi)發(fā)和銷(xiāo)售。通過(guò)查詢(xún)國(guó)內(nèi)外的資料，根據(jù)犬的生理特點(diǎn)，我們系統(tǒng)分析犬淚痕形成的原因和因素，并據(jù)此展開(kāi)了多次試驗(yàn)。前期試驗(yàn)結(jié)果表明，抗氧化和抗菌類(lèi)物質(zhì)對(duì)緩解淚痕具有一定的作用，因此開(kāi)展本次試驗(yàn)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加萬(wàn)壽菊、枸杞子和決明子提取物的復(fù)合物對(duì)緩解貴賓和比熊犬淚痕形成的效果最好。萬(wàn)壽菊提取物中的活性物質(zhì)為葉黃素，是一種天然的抗氧化劑，被譽(yù)為“眼黃金”，能夠提升視網(wǎng)膜黃斑色素密度，保護(hù)黃斑，抑制晶狀體、黃斑等組織氧化損傷。另一方面，葉黃素屬于胡蘿卜素的一種，具有抑制和清除自由基活性的作用。而枸杞子提取物的主要活性物質(zhì)為枸杞多糖，其生物活性已在抗氧化、免疫調(diào)節(jié)中得到廣泛證明。除此之外，體外試驗(yàn)表明枸杞子提取物具有較強(qiáng)的抑菌作用。決明子提取物的主要活性成分為游離蒽醌類(lèi)，其在動(dòng)物體內(nèi)具有清熱明目、消炎抑菌的作用。我們將三種植物提取物混合配比后發(fā)現(xiàn)，在抑制犬淚痕形成上具有一定作用。并且隨著添加劑量的增加，效果愈發(fā)明顯。本試驗(yàn)中添加的復(fù)合物水平也許還不能達(dá)到植物提取物復(fù)合物緩解犬淚痕形成的最佳劑量，該劑量有待進(jìn)一步試驗(yàn)探索。

淚痕的形成可能與犬體內(nèi)的炎癥反應(yīng)有關(guān)，連續(xù)7 天飼喂菊花提取物能夠有效減少犬眼部的分泌物。本試驗(yàn)中，植物提取物復(fù)合物對(duì)犬淚痕形成的緩解作用出現(xiàn)在第二周，有可能是本試驗(yàn)中復(fù)合物飼喂量小于上述試驗(yàn)中菊花提取物飼喂量所致。因此，試驗(yàn)V 組中萬(wàn)壽菊提取物的含量最高，效果也最為明顯。即便如此，本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明植物提取物復(fù)合物能夠緩解寵物犬的淚痕形成，這種作用可能是其中活性物質(zhì)的抗炎效果所導(dǎo)致的。

4 結(jié)論

綜上所述，植物提取物復(fù)合物能夠有效緩解寵物犬的淚痕形成，其中以萬(wàn)壽菊提取物、枸杞子提取物、決明子提取物的復(fù)合物效果最好，可以作為一種緩解寵物犬淚痕形成的功能性添加劑開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：（略）