朱俊峰,于書云,楊建生
(1.江蘇省昆山市第一動(dòng)物防疫站,江蘇 蘇州 215334;2.江蘇省昆山市畜牧獸醫(yī)站,江蘇 蘇州 215300)
豬偽狂犬病是一種危害全球養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的重大疫病。該病的暴發(fā)主要與引進(jìn)帶毒種豬、不重視防疫工作、易感動(dòng)物多、消毒管理不當(dāng)及免疫接種不科學(xué)有關(guān)。由于豬偽狂犬病可導(dǎo)致新生仔豬死亡率、妊娠母豬流產(chǎn)率和產(chǎn)死胎率增高、育肥豬生長(zhǎng)發(fā)育遲緩以及種公豬不育等不良后果,嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)規(guī)?;同F(xiàn)代化發(fā)展。目前對(duì)豬偽狂犬病的診斷方法有很多種,可通過病毒分離鑒定、PCR或血清學(xué)診斷來提高診斷的準(zhǔn)確率。同時(shí),筆者結(jié)合生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),總結(jié)出豬偽狂犬病的綜合防治措施。
豬偽狂犬病的致病原為豬偽狂犬病病毒,該病毒直徑約150~180nm,受gE、gD和gI等多個(gè)基因調(diào)控。如果敲除主控基因,可有效降低病毒毒力,這也是豬偽狂犬基因缺失苗的制備原理。豬偽狂犬病病毒對(duì)外界具有一定的耐受力,在冬季干燥環(huán)境下可存活46 d,夏季可存活30 d。豬偽狂犬病病毒對(duì)酸堿具有一定的抵抗力,pH4~9均能穩(wěn)定存活,5%石炭酸溶液、1%氫氧化鈉溶液、乙醚或氯仿均能滅活,而且對(duì)紫外線具有較高的敏感性。
豬在冬季和春季氣溫較低時(shí)容易感染,如果處于分娩高峰期的母豬感染則仔豬出生也后會(huì)被感染。發(fā)病豬主要以15日齡內(nèi)的仔豬為主,發(fā)病最早為4日齡,死亡率超過85%。隨著豬群年齡增長(zhǎng)及抗病力增加,豬偽狂犬病的發(fā)病率和死亡率也會(huì)相應(yīng)下降,成年豬的感染癥狀也會(huì)較輕[1],大多數(shù)呈現(xiàn)輕微發(fā)病,死亡率極低。
除了豬是豬偽狂犬病的易感動(dòng)物外,牛、羊等反芻動(dòng)物,貓、犬等家養(yǎng)動(dòng)物也能夠感染,人偶爾也有發(fā)病報(bào)道。
偽狂犬病豬、偽狂犬帶毒豬及偽狂犬帶毒鼠類是該病的主要傳染源。豬偽狂犬病毒可隨著病豬的鼻液、唾液和乳汁等分泌物排出,也能夠通過尿液排出,動(dòng)物感染后可持續(xù)排毒長(zhǎng)達(dá)1年時(shí)間。帶毒鼠類也可作為傳染源將疫情擴(kuò)大。
豬偽狂犬病毒可通過胎盤垂直傳染給胎兒,泌乳母豬感染該病7 d左右乳中有病毒出現(xiàn),新生仔豬吸吮帶毒乳汁后即被感染;健康豬只直接接觸病豬破損的皮膚或與感染豬自然交配(或人工授精)均能感染;健康豬只接觸被病毒污的染物品(如飼料、飲水和用具)均能感染。
豬偽狂犬病的潛伏期為3~6 d,不同年齡豬只的發(fā)病率和死亡率不同,日齡越小的仔豬死亡率越高。
新生仔豬由于自身免疫力較低,感染后一旦出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,死亡率接近100%。仔豬感染后體溫升高至41~41.5℃,表現(xiàn)為興奮、流涎、流鼻涕、咳嗽、呼吸困難、全身肌肉痙攣及運(yùn)動(dòng)障礙,部分病仔豬狂躁不安、結(jié)膜發(fā)炎、眼球震顫及肌肉抽搐。病情嚴(yán)重的仔豬身體仰曲,最后昏迷衰竭死亡。如果治療及時(shí),可在7 d內(nèi)康復(fù),而耐過仔豬會(huì)發(fā)育不良,最終成為僵豬[2]。
病豬主要表現(xiàn)為呼吸系統(tǒng)癥狀,即體溫略微升高、咳嗽、打噴嚏、流涎及體重增長(zhǎng)緩慢,此外還會(huì)出現(xiàn)角弓反張和運(yùn)動(dòng)失調(diào)等精神癥狀。
適配母豬不發(fā)情或?qū)遗洳辉校登槁矢?;妊娠母豬流產(chǎn)率、產(chǎn)弱仔率和產(chǎn)死胎率均增高,同時(shí)伴有腹瀉和嘔吐癥狀,妊娠母豬流產(chǎn)率可達(dá)50%。
種公豬的睪丸萎縮或腫脹,精子活力下降,甚至完全失去種用價(jià)值。
剖檢后無典型病變。如果病豬出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)及抽搐等神經(jīng)癥狀,剖檢可見腦膜出現(xiàn)不同程度水腫、充血和出血癥狀;如果病豬有咳嗽癥狀,扁桃體可見多個(gè)灰白色病灶及化膿壞死性炎癥,肺部呈小葉性肺炎及出血性炎癥,肝臟有大量大小不等的壞死灶,腎有點(diǎn)狀出血炎癥,腦實(shí)質(zhì)有點(diǎn)狀出血癥狀;如果病豬臨死前有腹瀉癥狀,則大腸內(nèi)容物稀薄,仔豬腸內(nèi)容物存在許多未消化的凝乳塊,腸系膜有炎癥。
根據(jù)病豬的臨床癥狀和剖檢結(jié)果可進(jìn)行初步診斷,但是由于成年豬只的癥狀不典型,診斷難度較大,也容易誤診。因此需要在初步診斷的基礎(chǔ)上通過病毒分離鑒定、PCR檢測(cè)、免疫熒光標(biāo)記檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行確診。
采集病豬口腔及鼻腔分泌物,或流產(chǎn)組織或病變組織(若豬只未出現(xiàn)典型癥狀,可以采集病豬三叉神經(jīng)節(jié))分離病毒,接種至敏感細(xì)胞內(nèi),培養(yǎng)24~72 h。如果細(xì)胞的折光性增強(qiáng),而且細(xì)胞多呈葡萄串狀聚集在一起,表明細(xì)胞發(fā)生融合而形成合胞體。將上述細(xì)胞傳一代,制作細(xì)胞懸浮液給家兔(豬偽狂犬病陰性)皮下注射。如果注射后不久,家兔的注射部位出現(xiàn)搔癢、紅疹和潰爛等癥狀,而且3 d左右發(fā)生死亡,可確診為豬偽狂犬病。
根據(jù)豬偽狂犬病毒基因序列設(shè)計(jì)特異性引物,采集病料,PCR擴(kuò)增目的片段,或通過熒光定量PCR檢測(cè)熒光信號(hào)進(jìn)行快速判斷。
采集病料,帶分子標(biāo)記上熒光素的抗體與病料抗原發(fā)現(xiàn)結(jié)合反應(yīng),其反應(yīng)復(fù)合物帶有熒光,置于熒光顯微鏡下可檢測(cè)出病毒。免疫熒光標(biāo)記方法簡(jiǎn)單、快速,和病毒分離鑒定結(jié)果一樣具有較高的可靠性,但不適合育肥豬或隱性帶毒豬,也不適合免疫熒光標(biāo)記方法。
酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)是一種適合大量樣本篩選的檢測(cè)方法,檢測(cè)耗時(shí)短、成本低,特異性和靈敏度較高,可作為替代病毒中和實(shí)驗(yàn)的診斷方法。
豬場(chǎng)發(fā)現(xiàn)病豬后要及時(shí)采取隔離措施,緊急免疫豬偽狂犬病基因缺失弱毒活疫苗,30~45 d后加強(qiáng)免疫1次。為了降低豬群的感染風(fēng)險(xiǎn),要及時(shí)對(duì)被病豬污染的豬舍及用具用清水沖洗,用1%燒堿溶液帶豬噴霧消毒,豬舍地面和墻壁用5%燒堿溶液噴灑消毒。為了預(yù)防人員感染和帶毒出場(chǎng),必須對(duì)人員的衣物及鞋帽進(jìn)行噴霧和紫外線消毒。病死豬、流產(chǎn)組織、病死胎、排泄物和污染物必須經(jīng)過嚴(yán)格的無害化處理。
仔豬35~40日齡可通過滴鼻免疫接種偽狂犬基因缺失疫苗,每只豬注射1.0 mL。如果新生仔豬接種,滴鼻劑量減半。如果豬場(chǎng)有發(fā)病史,可在豬群80日齡注射接種2.0 mL。后備母豬配種前30 d肌肉注射偽狂犬基因缺失疫苗,妊娠母豬產(chǎn)前25~30 d注射2.0 mL,種公豬每半年肌肉注射2.0 mL。如果豬場(chǎng)疫情嚴(yán)重,需要每個(gè)季度免疫1次,并定時(shí)做好全群抗體檢測(cè)工作。如果豬只多次的檢驗(yàn)結(jié)果均為陽性,需要及時(shí)淘汰病豬[3]。
首先,豬場(chǎng)應(yīng)分群管理,根據(jù)不同豬群的生長(zhǎng)階段飼喂相應(yīng)的飼料,保障飼料營(yíng)養(yǎng)均衡,并有足量的維生素和礦物質(zhì)攝入。其次,定期驅(qū)蟲,每個(gè)季度對(duì)豬場(chǎng)驅(qū)蟲1次,可在每100 kg飼料中拌入15 g伊維菌素粉劑,連續(xù)喂服1周,能夠降低豬的寄生蟲感染風(fēng)險(xiǎn),縮短出欄時(shí)間。第三,豬場(chǎng)發(fā)現(xiàn)陽性豬只,隔離治療后要定期對(duì)病豬進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè),如果連續(xù)檢測(cè)仍為陽性感染豬,則對(duì)病豬淘汰處理,凈化豬群,阻斷豬偽狂犬病毒的傳播途徑。