王睿 高秉紅 李平，3

1.蘭州大學(xué)第二醫(yī)院，甘肅 蘭州 730030；2.濟(jì)川藥業(yè)集團(tuán)有限公司，江蘇 泰興 225441；3.甘肅省消化系腫瘤重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730030

隨著大數(shù)據(jù)和循證醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展，藥物對(duì)人體器官的干預(yù)影響更加明確［1-2］。研究表明，化學(xué)藥品、生物制品對(duì)肝損傷基因具有明顯的干預(yù)影響作用，保護(hù)肝損傷作用肯定。本文就化學(xué)藥品和生物制品對(duì)肝損傷的干預(yù)影響作一簡(jiǎn)要綜述，并對(duì)其分子生物學(xué)和基因表達(dá)研究進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。

1 化學(xué)藥品

左卡尼汀單獨(dú)使用以及聯(lián)合葡醛內(nèi)酯可通過(guò)降低ALT、AST 含量及 MDA 水平，升高 SOD 水平，而對(duì)相應(yīng)肝損傷有一定的保護(hù)作用，機(jī)制與左卡尼汀的抗氧化作用相關(guān)［3-4］；氫生理鹽水通過(guò)抗氧化以及抗炎作用減輕對(duì)乙酰氨基酚引起的肝損傷［5］；過(guò)氧化氫酶（CAT）抑制劑氨基三唑降低大鼠血漿中ALT、AST 及乳酸脫氫酶（LDH）水平、CAT 活性、H2O2水平及 MDA 含量，下調(diào)腫瘤壞死因子-α 水平、下調(diào)白介素-6 水平，從而減輕酒精造成的肝損傷［6］；甘草酸單銨明顯下調(diào)異煙肼誘導(dǎo)的肝損傷大鼠肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)體Ntcp 及Mrp2 表達(dá)，對(duì)Isoniazid 引起的肝損傷具備保護(hù)效用［7］；復(fù)方甘草酸單銨［8］抑制恩諾沙星聯(lián)合LPS 所致肝損傷雞TNF-α、IL-1、IL-6 炎性因子釋放，雙向調(diào)控 T 細(xì)胞亞群而起到保肝作用；二氯乙酸二異丙胺使結(jié)核藥物引起的肝損傷患者血清總膽固醇、高密度脂蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白水平顯著提高，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性降低，對(duì)抗結(jié)核藥物所致肝損傷有治療作用［9］；丁基苯酞刺激Nrf2 活化、調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激等，而改善糖尿病肝損傷［10］；烏司他丁阻礙CCl4所引起的肝損傷大鼠肝臟中致炎因子的釋放，從而減輕肝損傷［11］；沙利度胺通過(guò)其抗氧化、抗炎作用以及下調(diào) TNF－α mRNA、TGF－β1 的表達(dá)及作用對(duì)免疫性肝損傷具備保護(hù)作用［12］。

糖皮質(zhì)激素使重癥藥物性肝損傷血清中ALT、AST、TBil、DBil、ALP 水平顯著降低且早期小劑量、短療程使用糖皮質(zhì)激素，對(duì)重癥藥物肝損傷有很好的療效［13］。褪黑激素通過(guò)抗氧化應(yīng)激、抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及激活SIRT1 基因，減輕異煙肼合用利福平引起的肝損傷［14］。地塞米松通過(guò)阻礙T 細(xì)胞發(fā)揮作用，調(diào)控T 細(xì)胞亞群分化，對(duì)急性炎性肝損傷有改善作用［15］。外源性瘦素通過(guò)下調(diào)NF-κB 的表達(dá)［16］，盡量避免肝細(xì)胞的凋亡，對(duì)肝損傷有改善作用。此外還有研究報(bào)道，非生物人工肝［17］對(duì)重癥藥物性肝損傷有更好的輔助治療作用。

2 生物制品

2.1 氨基酸類生物制品 有研究證明，小牛血去蛋白提取物通過(guò)抗氧化、干預(yù)細(xì)胞凋亡通路中的差異表達(dá)基因，對(duì)四氯化碳和乙醇所引起的肝損傷具備保護(hù)效用［18］；富硒花生分離蛋白和硒代蛋氨酸抑制酒精激活的乙醇脫氫酶和細(xì)胞色素同工酶，調(diào)節(jié)Nrf-2，增加GCLC 表達(dá)量、增加HO-1 的表達(dá)量，減輕酒精引起的損傷［19］；36 個(gè)氨基酸多肽片段和16 個(gè)氨基酸多肽片段均可使四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠血清ALT、AST 含量降低，纖維化指標(biāo)HA、IV-C 水平降低，肝纖維化相關(guān)基因表達(dá)水平降低以及小鼠肝細(xì)胞內(nèi)活性氧含量下降，兩個(gè)多肽片段對(duì)小鼠肝纖維化均具備保護(hù)效用，該作用可能與減少氧化應(yīng)激、影響基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）、金屬蛋白酶組織抑制劑（TIMP-1）和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）表達(dá)有關(guān)（源Ⅰ型膠原Col1a1、Ⅲ型膠原Col3a1）［20-21］；金屬硫蛋白可通過(guò)調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激程度、抑制肝細(xì)胞凋亡而達(dá)到其保護(hù)砷［21］中毒性肝損傷的目的［22-23］，此外，金屬硫蛋白還可劑量依賴性降低鎳［22］致肝損傷小鼠血清 AST、ALT、GGT 及總膽汁酸，增強(qiáng)GSH-Px 和SOD 生物活性，減少M(fèi)DA 和肝組織GSH 含量，對(duì)鎳致小鼠肝損傷有保護(hù)效果。肝再生增強(qiáng)因子可使調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞數(shù)量增加，肝組織中Foxp3 mRNA 表達(dá)水平升高，下調(diào)IL-6 mRNA 表達(dá)，下調(diào)TNF-α mRNA 表達(dá)，所以ALR 對(duì)肝損傷有保護(hù)作用［24］；肝素通過(guò)使小鼠血漿 ALT、T-BIL、AST、細(xì)胞外組蛋白、TNF-α 和IL-6 水平下降，而減輕D-氨基半乳糖與脂多糖合用引起的肝損傷［25］。Salub-rinal 通過(guò)介導(dǎo)PERK/e IF2α 通路來(lái)減慢腦死亡大鼠肝細(xì)胞的凋亡進(jìn)程，達(dá)到保護(hù)肝損傷的目的［26］。激活素A 結(jié)合蛋白卵泡抑素明顯減少ALT 和AST 的量，且敲低Smad3 基因?qū)Ω螕p傷的修復(fù)有輔助效果，對(duì)刀豆蛋白所致肝損傷有保護(hù)作用［27］。

2.2 干細(xì)胞類生物制品 MSCs 下調(diào)Bax 的表達(dá)，升高bcl-2 基因mRNA 水平，升高VEGF A 基因的mRNA水平，降低α-平滑肌肌動(dòng)蛋白細(xì)胞數(shù)量，升高Ki-67細(xì)胞數(shù)量，由此緩解環(huán)磷酰胺［28］引起的大鼠藥物性肝損傷。此外，有研究證實(shí) UCMSCs 分化后，HNF-4α 基因表達(dá)明顯上調(diào)，LBK1 蛋白、AMPK 蛋白表達(dá)量減少，且UCMSCs 分化得來(lái)的細(xì)胞［29］具備部分肝細(xì)胞作用；還有研究表明HGF 基因修飾［30］的MSC 對(duì)慢性肝損傷也有很好的治療效果。

c-met 基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）［31］、Bcl-2 基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞［32］和Akt1 基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞［33］對(duì)肝損傷有治療作用，這與BMSCs 能夠在肝損大鼠肝臟歸巢，且與表現(xiàn)出保護(hù)作用有關(guān)。研究證明，穩(wěn)定表達(dá)sh RNA 的mi MSC 細(xì)胞系［34］阻礙乙型肝炎病毒的轉(zhuǎn)錄，對(duì)乙型肝炎肝損傷有很好的保護(hù)效果。此外HGF/KGF 基因［35］修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞使四氯化碳所致肝損傷動(dòng)物的AST、ALT和TBIL 含量顯著下降，對(duì)大鼠肝損傷的有治療作用。白介素-17 介導(dǎo)肝損傷過(guò)程，而自體骨髓源干細(xì)胞通過(guò)阻礙IL-17 作用加快四氯化碳所致肝損傷修復(fù)過(guò)程［36］。

3 小結(jié)

從相關(guān)文獻(xiàn)回顧可以看出，化學(xué)藥品、生物制品對(duì)肝損傷的治療作用大多是通過(guò)降低肝臟指數(shù)、減輕肝組織病理?yè)p害、抗氧化等實(shí)現(xiàn)的，對(duì)肝損傷基因的干預(yù)大多是通過(guò)干預(yù)肝損傷細(xì)胞凋亡基因、肝損傷炎癥相關(guān)基因，即下調(diào)肝損傷細(xì)胞凋亡相關(guān)基因而抑制肝損傷細(xì)胞凋亡，下調(diào)肝損傷炎癥相關(guān)因子基因的表達(dá)，減少炎癥介質(zhì)的釋放，從而減輕肝損傷。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)，這兩類藥物對(duì)肝損傷基因具有明顯的干預(yù)作用，尤其是生物制品，研究前景廣闊。

隨著基因組學(xué)的發(fā)展，基因技術(shù)在肝損傷保護(hù)方面也展現(xiàn)了獨(dú)特的影響作用。Smad3 shRNA 表達(dá)質(zhì)?？墒筍mad3 基因沉默，使四氯化碳誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠肝組織中Smad3 mRNA 及蛋白表達(dá)水平均明顯下降，肝臟病理?yè)p傷減輕，ALT、AST、IL-1β 及 IL-6 含量減少，Macrophages 及Neutrophil 含量明顯降低，肝細(xì)胞凋亡明顯下降，這表明Smad3 shRNA 具有治療肝損傷的能力［37］。研究顯示基因敲除［38-39］可減輕肝損傷的程度，IL-17A［38］基因敲除（KO）的脂多糖肝損小鼠血漿中的ALT 和AST 水平以及炎癥因子水平明顯下降，炎癥細(xì)胞含量明顯降低，肝臟中與過(guò)氧化氫代謝有關(guān)的基因的mRNA 水平明顯上調(diào)，肝臟的氧化應(yīng)激水平下調(diào)，凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯減少，即白介素-17A 基因敲除緩解脂多糖引起肝損傷與其促過(guò)氧化氫代謝有關(guān)；CD36 基因敲除，通過(guò)抑制CD36 在刀豆蛋白所致免疫性肝損傷和對(duì)乙酰氨基酚所致藥物性肝損傷小鼠的促進(jìn)炎癥應(yīng)答作用而發(fā)揮保肝效果［39］。5’-磷酸腺苷使AST 生物活性減弱、ALT 及LDH 生物活性減弱，明顯降低肝細(xì)胞壞死的數(shù)量，降低MDA 數(shù)量，升高GSH數(shù)量；使肝臟的炎癥因子基因表達(dá)明顯下調(diào)，肝臟的ATP含量明顯增加，同時(shí)UCP2 基因和PPARa 的基因表達(dá)明顯下調(diào)，可見(jiàn)5’-AMP 對(duì)急性肝損傷具備保護(hù)作用［40］。

另外，值得一提的是近年來(lái)菌類抗肝損傷的研究也顯示了其確切的抗肝損傷效果。研究表明，鼠李糖乳桿菌（LGG）液對(duì)黃曲霉毒素B1（AFB1）具有顯著的降解作用，是因其能顯著改善大鼠肝功能和肝組織抗氧化指標(biāo)異常，有效避免因黃曲霉素B1 造成的肝損傷［41］。富納米硒沼澤紅假單胞菌通過(guò)使血清ALT、AST、AKP、LDH 含量以及肝組織 MDA 含量下降，SOD、CAT、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPx）活性增強(qiáng)，減輕四氯化碳造成的肝損害［42］。

展望未來(lái)，隨著分子生物學(xué)、基因組學(xué)和蛋白組學(xué)的深入研究，在大數(shù)據(jù)、云計(jì)算及智能網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的支撐下，除以上化學(xué)藥品、生物制品保護(hù)肝損傷藥物外，可以預(yù)見(jiàn)的是將會(huì)有更多的諸如中藥、天然藥物中的抗肝損傷活性成分被發(fā)現(xiàn)并轉(zhuǎn)化為新藥產(chǎn)品［43］，服務(wù)于臨床。同時(shí)也會(huì)有更加智能化、人性化的分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用于抗肝損傷的干預(yù)治療。