□ 張浩鈺 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院
近年來(lái),隨著我國(guó)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,酶工程作為一種新型的、綠色、安全無(wú)害的果蔬加工與保鮮技術(shù)被廣泛應(yīng)用,優(yōu)化了傳統(tǒng)果蔬加工工藝,提高了果蔬產(chǎn)品品質(zhì),促進(jìn)了行業(yè)發(fā)展。本文介紹了酶在果蔬加工與保鮮中的一些應(yīng)用和進(jìn)展,為酶技術(shù)在果蔬行業(yè)推廣提供參考。
根據(jù)果蔬種類的不同,所使用的酶種類也有差別。果蔬加工中經(jīng)常用到的酶包括果膠酶、粥化酶、纖維素酶和淀粉酶等[1],利用它們進(jìn)行原料處理可將細(xì)胞中內(nèi)容物充分釋放,從而提高產(chǎn)品感官特性,增加產(chǎn)量。在果蔬保鮮工藝中,酶可以去除或減輕食品中的氧對(duì)果蔬品質(zhì)的損害,延長(zhǎng)保質(zhì)期,且部分生物酶可殺滅或抑制細(xì)菌繁殖,達(dá)到保鮮效果。常見(jiàn)的保鮮酶主要有葡萄糖氧化酶、溶菌酶等[2]。
酶的作用條件溫和,催化功能強(qiáng),專一性良好,反應(yīng)易控制,可避免劇烈反應(yīng),保持食物本身的色澤、香味和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,不影響果蔬外觀、質(zhì)地和口味,不會(huì)導(dǎo)致腐敗、破壞等問(wèn)題[3]。果蔬加工是一項(xiàng)非常復(fù)雜的工藝,在加工過(guò)程中通過(guò)用酶去除果蔬中影響品質(zhì)的物質(zhì),如淀粉、果膠和纖維素等,同時(shí)還要注意保留果蔬材料當(dāng)中的膳食纖維、維生素和糖分等營(yíng)養(yǎng)成分,保證加工產(chǎn)品的色香味品質(zhì)。下面就果蔬加工中常用的幾種酶的作用和機(jī)制作簡(jiǎn)要論述。
果膠酶是一種能使果膠質(zhì)解聚的復(fù)合蛋白酶,目前已廣泛應(yīng)用于橙汁、蘋果汁等果汁的加工,可降低果蔬汁中的膠體含量,使果汁易于澄清,增加果汁香氣,減少果渣產(chǎn)生,提高果汁的品質(zhì)[4]。任博等[5]用果膠酶對(duì)桑葚果汁加工工藝進(jìn)行改進(jìn),桑葚果汁出汁率顯著提高;賈鴻冰等[6]用復(fù)合果膠酶對(duì)藍(lán)莓進(jìn)行處理,使藍(lán)莓出汁率提高了大約40%;MARYAM等[7]用固定化果膠酶處理菠蘿汁,得到了更好的澄清效果,并為酸性果汁的澄清提供了新可能。果酒釀造中的果膠酶利用其絮凝作用使多聚物沉降,讓果酒原料充分浸漬,提高果酒的色、香及澄清度,豐富果酒的口感[8];周倩等[9]研究果膠酶對(duì)木瓜果酒釀造的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),果膠酶能夠浸提番木瓜中的糖,可有效提升酒精發(fā)酵的質(zhì)量;趙紅巖等[10]發(fā)現(xiàn)在葡萄酒生產(chǎn)發(fā)酵初期加入果膠酶可使葡萄酒中的多酚類、花色苷溶出,使葡萄酒澄清速度加快;SONG等[11]發(fā)現(xiàn)在110 ℃用果膠酶輔助乙醇水溶液處理按標(biāo)準(zhǔn)煮熟的牡丹籽,可獲得高出油率。
纖維素聚合度高,結(jié)構(gòu)堅(jiān)硬,能鎖住細(xì)胞內(nèi)容物,防止胞內(nèi)汁液流出。纖維素酶通過(guò)斷裂β—1,4糖苷鍵及其他低分子纖維糊精降解纖維素和去除果實(shí)的細(xì)胞壁,細(xì)胞內(nèi)容物在沒(méi)有細(xì)胞壁的支持保護(hù)后變得易于提取[12]。呂一舟等[13]研究發(fā)現(xiàn),用酶法去除板栗皮,去皮率能達(dá)到90%左右,而且能較好保持果肉的完整度,避免果肉的營(yíng)養(yǎng)成分及口感被破壞。研究表明,如果植物纖維素酶被廣泛應(yīng)用白酒的釀造中,可以直接提高5%左右的產(chǎn)量,淀粉和植物纖維的綜合利用率幾乎可以直接達(dá)到90%[14]。黃帥等[15]研究發(fā)現(xiàn),將0.2%纖維素酶和0.5%果膠酶用于橄欖油的提取時(shí),ABTS抗氧化活性顯著高于未經(jīng)酶處理的橄欖油樣品,儲(chǔ)藏時(shí)間也得到延長(zhǎng)。
粥化酶(Macerating enzymes)是一種由果膠酶、淀粉酶和纖維素酶等組成的混合物,是果蔬加工中的常用酶。粥化酶在果蔬加工中軟化植物細(xì)胞使其破碎,便于原料的加工處理,提高出汁率。王志偉[16]研究粥化酶對(duì)蘋果汁最佳出汁率中發(fā)現(xiàn),當(dāng)出酶率達(dá)到15 U/g時(shí)果汁的出汁率最高;Novo Nordisk公司研究發(fā)現(xiàn),用粥化酶處理的原料,如南瓜、山楂和胡蘿卜等出汁率大大提升,產(chǎn)品的質(zhì)量及穩(wěn)定性明顯提升。
果實(shí)成熟后,若不及時(shí)加工處理,果蔬中的淀粉長(zhǎng)期在低溫下不斷累積,在加工過(guò)程中易造成原料汁渾濁,穩(wěn)定性下降,影響整體感官。淀粉酶通過(guò)降解多糖物質(zhì),降低果蔬汁中的淀粉含量,使果汁易于澄清,提高出汁率,降低生產(chǎn)成本,取得良好的經(jīng)濟(jì)效益。陳杰華等[17]研究提高紫馬鈴薯出汁率的辦法時(shí)發(fā)現(xiàn),用0.05%果膠酶和0.03%淀粉酶水解得到的馬鈴薯汁,澄清度好、出汁率高,同時(shí)還有豐富的花色苷。夏慧玲等[18]研究發(fā)現(xiàn),用α—淀粉酶處理的紅薯漿漿液粘度低,出汁率高。
食品在保存過(guò)程中,由于受到氧氣、微生物和溫度等影響,破壞食品穩(wěn)定結(jié)構(gòu),使食品品質(zhì)改變,降低食品的價(jià)值。傳統(tǒng)化學(xué)保鮮方法造成食品營(yíng)養(yǎng)流失較多,不利于食品保鮮加工。酶工程作為一種新型的健康保鮮技術(shù)已逐漸進(jìn)入人們視野。生物酶保鮮主要是通過(guò)某些具有特定結(jié)合功能的酶與食品中的酶在特異性結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合,從而降低食品中酶的活性,抑制或降低其反應(yīng)速度,為食品提供一種有利的環(huán)境,延長(zhǎng)食品的保質(zhì)期[19]。
果蔬在儲(chǔ)存運(yùn)輸過(guò)程中,由于氧的作用易發(fā)生一系列化學(xué)反應(yīng),引起色、香、味的改變,且大部分細(xì)菌因氧的存在而繁殖生長(zhǎng),加快食品腐敗變質(zhì)。葡 萄 糖 氧 化 酶(Glucose Oxidase,GOD)作為一種天然安全、快速高效的食品保鮮劑,能有效延緩或阻止果蔬氧化變質(zhì),遏制褐變,延長(zhǎng)果汁保質(zhì)期,是一種新型保鮮劑[20]。酒精含量高易引起酒體的沉淀老化,R?CKER 等[21]在葡萄酒中加入葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶能有效去除酒中的溶解氧產(chǎn)生特殊酒香,延長(zhǎng)保質(zhì)期;周晶晶等[22]對(duì)百香果渾濁果汁褐變抑制研究發(fā)現(xiàn),
葡萄糖氧化酶能有效減緩果汁褐變,延緩了花青素的降解。
溶菌酶(Lysozyme),是一種化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定的糖苷水解酶,通過(guò)水解細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的β—1,4糖苷鍵,增加細(xì)菌內(nèi)部滲透壓致細(xì)胞脹裂死亡,而又不影響食品的其他成分[23]。溶菌酶對(duì)生活中常見(jiàn)的微生物、病毒等均有抑制作用,向果蔬中適量噴灑溶菌酶,可有效殺滅表面殘留的細(xì)菌,延長(zhǎng)果蔬貨架期。馮敘橋等[24]研究發(fā)現(xiàn),用0.08%溶菌酶對(duì)鮮切蘋果進(jìn)行涂膜保鮮效果最好,能有效抑制多酚氧化酶和過(guò)氧化氫酶的活性,控制菌落含量保持在較低水平,從而較長(zhǎng)時(shí)間保持蘋果的爽脆口感。邱朝坤等[25]研究溶菌酶、殼聚糖和氯化鈣的復(fù)配溶液適合于草莓保鮮的最佳復(fù)配濃度。通過(guò)正交復(fù)配實(shí)驗(yàn),在低溫下對(duì)草莓進(jìn)行涂膜處理發(fā)現(xiàn)保鮮效果最好的是0.05%溶菌酶、1%殼聚糖和0.5%氯化鈣復(fù)配保鮮液。通過(guò)與實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行對(duì)比,在貯藏相同時(shí)間后草莓新鮮程度依舊較高。吳汶飛等[26]研究鮮切荔枝果肉的保鮮發(fā)現(xiàn),低溫下0.025%溶菌酶和0.025%乳酸鏈球菌素復(fù)配保鮮液效果顯著,不僅可抑制果肉中微生物的生長(zhǎng)繁殖,還可減輕果肉褐變,使果肉保持較好的色澤與口感。
利用酶促褐變機(jī)制實(shí)現(xiàn)果蔬保鮮主要是通過(guò)抑制多酚氧化酶的活性,減少褐變的發(fā)生。多酚氧化酶(PPO)在新鮮的活組織中進(jìn)行快速而又激烈的催化,導(dǎo)致果蔬褐變物的生成,對(duì)果蔬的外觀及成品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值造成極大影響,降低了消費(fèi)者的接受度。鄭曉燕等[27]在抑制酶促褐變的研究中發(fā)現(xiàn),借助基因工程技術(shù)手段能對(duì)馬鈴薯多酚氧化酶基因的表達(dá)進(jìn)行干擾,有效減輕馬鈴薯褐變,為果蔬抗褐變提供新的參考;郭宇歡等[28]用0.1%生姜提取液和1%海藻酸鈉制備的復(fù)配液,能有效抑制多酚氧化酶的活性和丙二醛(MDA)的積累,減少紅富士蘋果的水分蒸發(fā),保持脆性,降低褐變程度;鄧維良等[29]研究發(fā)現(xiàn),利巴韋林可與PPO結(jié)合并與周圍氨基酸殘基形成氫鍵,對(duì)貢梨具有很好的保鮮效果,能夠有效降低鮮切梨塊的失重率和梨汁的褐變程度。
近年來(lái),隨著對(duì)酶特性的研究深入,更多的酶制劑被研發(fā)出來(lái)并應(yīng)用到食品加工保鮮中,為改善果蔬品質(zhì),延長(zhǎng)果蔬保鮮期提供了可靠的技術(shù)支撐??赏ㄟ^(guò)基因工程等手段,對(duì)酶基因進(jìn)行定向的切割或修飾,提高酶在果蔬加工保鮮中的適用性,擴(kuò)大酶的來(lái)源,降低生產(chǎn)成本。此外,還可通過(guò)對(duì)酶促褐變的機(jī)理進(jìn)行研究,將氧化酶及時(shí)從細(xì)胞內(nèi)分離,使其不再損害果蔬的品質(zhì),有效改善加工保鮮工藝??偠灾?,隨著消費(fèi)者對(duì)果蔬產(chǎn)品的種類、品質(zhì)等要求越來(lái)越高,果蔬產(chǎn)業(yè)對(duì)酶的市場(chǎng)需求也會(huì)越來(lái)越大,在未來(lái)酶工程會(huì)向更高水平、更高質(zhì)量和更廣泛的領(lǐng)域發(fā)展。