熊 穎,謝美曉,侯惠嬋,顧利紅,栗建明
(廣州市藥品檢驗(yàn)所,國家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州 510160)
藥材小葉榕為??浦参镩艠銯icus microcarpaL.f.的干燥葉,別名細(xì)葉榕,落地金錢等,分布在廣東、廣西、福建、海南、貴州、浙江、云南等地。小葉榕是嶺南常用中草藥,始載于《南方草木狀》,有著廣泛的民間用藥基礎(chǔ)[1-2]。味苦、澀,性微寒。具有清熱祛濕、止咳化痰、活血散瘀、祛風(fēng)止癢的功效,臨床用于治療感冒發(fā)熱、濕熱瀉痢、痰多咳嗽,尤其在止咳平喘療效上有顯著效果,外用治療跌打瘀腫、濕疹、痔瘡等[2]。小葉榕主要含黃酮、三萜、脂肪族和甾體等類型化學(xué)成分[3-6],小葉榕干浸膏具有止咳、祛痰、抗炎、平喘等功效[7-8],是中成藥咳特靈制劑的主要原料。由于用量大,小葉榕的采收、收集中常有混淆品混入,常見混淆品垂葉榕為??浦参锎谷~榕Ficus benjaminaL.的干燥葉,別名吊絲榕,垂葉榕無記載藥用,也未見其藥材標(biāo)準(zhǔn)。本實(shí)驗(yàn)對小葉榕及其混淆品垂葉榕進(jìn)行詳細(xì)的性狀與顯微比較鑒別研究,為完善小葉榕質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及鑒別小葉榕與垂葉榕提供依據(jù)。
在生長健壯的小葉榕與垂葉榕植株上,選取生長發(fā)育良好、無病蟲害感染的葉片,經(jīng)廣州市藥品檢驗(yàn)所侯惠嬋主任中藥師鑒定分別為桑科植物榕樹Ficus microcarpaL.f.的葉和垂葉榕Ficus benjaminaL.的葉,樣品信息見表1。
FUJIFILM FINEPIX S8100 型相機(jī)(18x OPTICAL ZOOM,日本富士公司);OLYMPUS BX53 型顯微鏡及成像系統(tǒng)(UPlanFLN,日本奧林巴斯株式會社)。
稀甘油、水合氯醛均為分析純(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。
從形狀、大小、不同部位顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面特征等方面進(jìn)行性狀鑒別的系統(tǒng)觀察,并利用相機(jī)結(jié)合微距鏡頭記錄影像數(shù)據(jù)。分別對藥材橫切面、表面撕片、粉末進(jìn)行透視化后裝片,置于顯微鏡下觀察,并用數(shù)碼成像系統(tǒng)記錄其組織特征。
2.2.1 性狀鑒別 小葉榕葉片呈褐色、黃褐色或褐綠色,卷縮成筒狀或不規(guī)則狀,有的破碎。展平后呈橢圓形、卵狀橢圓形或倒卵形,長3.5 ~ 10 cm,寬2 ~ 5.5 cm;先端鈍,短漸尖,基部狹或楔尖,全緣,兩面光滑?;雒}3 條,主脈背面突起;側(cè)脈纖細(xì),在背面較明顯。葉柄顏色多比葉片深,棕褐至深褐色,長0.5 ~ 1 cm。革質(zhì),體輕,稍韌。氣微,味苦、澀,見圖1。
圖1 小葉榕藥材性狀及局部放大圖Fig. 1 The characteristics and local enlargement of Fici Microcarpae Folium
垂葉榕葉片與小葉榕相似,呈黃綠色,較薄,薄革質(zhì),體輕,稍韌,氣微,味苦、澀。闊卵狀橢圓形、卵形或橢圓形,長3.5 ~ 10 cm,寬2 ~ 5.8 cm;先端長漸尖或短漸尖,微彎,基部圓形或?qū)捫ㄐ危?,有光澤;?cè)脈較多較明顯,多數(shù)平行,纖細(xì)而密,網(wǎng)結(jié)達(dá)近葉邊緣,網(wǎng)結(jié)成邊脈。葉柄長0.7 ~ 2 cm,多不與主脈在同一直線上,有較密細(xì)環(huán)紋,下表面中間多有縱溝,見圖2。兩者的性狀鑒別要點(diǎn),見表2。
表2 小葉榕與垂葉榕的性狀鑒別Tab. 2 The characteristics identification of Fici Microcarpae Folium and Fici Benjaminae Folium
圖2 垂葉榕藥材性狀及局部放大圖Fig. 2 The characteristics and local enlargement of Fici Benjaminae Folium
2.2.2 葉的橫切面 小葉榕具復(fù)表皮。上下表皮細(xì)胞各1 列,外被角質(zhì)層。上下表皮內(nèi)均有下皮層細(xì)胞,可見較大的鐘乳體,上表皮稍多。上表皮內(nèi)有1 ~ 3列下皮細(xì)胞,柵欄細(xì)胞1 ~ 3 列;下表皮內(nèi)有下皮細(xì)胞和柵欄細(xì)胞各1 列。海綿組織細(xì)胞排列疏松。主脈維管束外韌型,近環(huán)狀,也有被分割為2 至數(shù)個(gè)外韌型維管束,束鞘纖維多數(shù)排列成環(huán)。主脈下表皮內(nèi)側(cè)有厚角細(xì)胞。柵欄組織、海綿組織、韌皮部、下皮層散有草酸鈣簇晶,偶見草酸鈣方晶、非腺毛和乳汁管,見圖3。
圖3 小葉榕葉橫切面圖Fig. 3 The cross-cutting characteristics of Fici Microcarpae Folium
垂葉榕上下表皮細(xì)胞各1 列,外被角質(zhì)層。上下表皮內(nèi)均有1 列下皮層細(xì)胞,可見較大的鐘乳體,上表皮稍多。上表皮內(nèi)柵欄細(xì)胞1 ~ 2 列,下表皮內(nèi)柵欄細(xì)胞1 列。海綿組織細(xì)胞排列疏松。主脈維管束外韌形,呈月牙形或淺“U”字形,“U”形的凹部另有1 ~ 2 個(gè)較小的維管束。束鞘纖維排列成環(huán)。主脈下表皮內(nèi)側(cè)有較多厚角細(xì)胞,柵欄組織、海綿組織、韌皮部、下皮層散有草酸鈣簇晶,偶見草酸鈣方晶、非腺毛和乳汁管,見圖4。
圖4 垂葉榕橫切面圖Fig. 4 The cross-cutting characteristics of Fici Benjaminae Folium
2.2.3 葉的表面觀 小葉榕上下表皮細(xì)胞均呈類多角形,垂周壁較平直,草酸鈣簇晶散在,偶見草酸鈣方晶。下皮層可見較大的鐘乳體,上表皮皮層稍多。上表皮氣孔較少,下表皮氣孔眾多,氣孔下陷,被明顯突起的類圓形角質(zhì)拱蓋緣完全包圍,氣孔不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4 ~ 6 個(gè)。偶見非腺毛,見圖5。
圖5 小葉榕葉表面觀圖Fig. 5 The surface micrograph of Fici Microcarpae Folium
垂葉榕上下表皮細(xì)胞均呈類多角形,垂周壁微連珠狀,草酸鈣簇晶散在,偶見草酸鈣方晶,均可見較大的鐘乳體,上表皮稍多,下表皮少見。上表皮氣孔較少,下表皮氣孔眾多,氣孔下陷,被明顯突起的類圓形角質(zhì)拱蓋緣完全包圍,不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4 ~6 個(gè)??梢姺窍倜?,見圖6。
圖6 垂葉榕葉表面觀圖Fig. 6 The surface micrograph of Fici Benjaminae Folium
2.2.4 粉末特征 小葉榕粉末黃綠色。表皮細(xì)胞均呈類多角形,氣孔下陷,被明顯突起的類圓形角質(zhì)拱蓋緣完全包圍,氣孔不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4 ~ 6 個(gè)。下皮層薄壁細(xì)胞有鐘乳體,長20 ~ 130 μm,呈圓形,圓錐形或橢圓形,表面平滑或有乳突狀或刺狀突起。草酸鈣簇晶及草酸鈣方晶散在或排列成行,草酸鈣簇晶較多。纖維散在或成束,有的纖維束周圍細(xì)胞中含草酸鈣簇晶或草酸鈣方晶,形成晶纖維。導(dǎo)管多為螺紋導(dǎo)管。偶見非腺毛和黃棕色的乳汁管,見圖7。
圖7 小葉榕粉末顯微圖Fig. 7 The powder characteristics of Fici Microcarpae Folium
垂葉榕粉末黃綠色。表皮細(xì)胞均呈類多角形,氣孔下陷,被明顯突起的類圓形角質(zhì)拱蓋緣完全包圍,氣孔不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4 ~ 6 個(gè)。下皮層薄壁細(xì)胞有鐘乳體,長30 ~ 100 μm,呈圓形、圓錐形或橢圓形,表面平滑或有乳突狀或刺狀突起。草酸鈣簇晶和草酸鈣方晶,散在或排列成行,草酸鈣簇晶較多。纖維散在或成束,壁稍厚,有的纖維束周圍細(xì)胞中含草酸鈣簇晶或草酸鈣方晶,形成晶纖維。導(dǎo)管多為螺紋導(dǎo)管。偶見非腺毛、乳汁管和柱晶,見圖8。兩者的顯微鑒別要點(diǎn),見表3。
表3 小葉榕與垂葉榕的橫切面顯微鑒別Tab. 3 The cross-cutting characteristics of Fici Microcarpae Folium and Fici Benjaminae Folium
圖8 垂葉榕粉末顯微圖Fig. 8 The powder characteristics of Fici Benjaminae Folium
小葉榕與垂葉榕的原植物是南方地區(qū)常見的綠化和景觀喬木樹,常見于馬路邊、公園與山區(qū)等地,廣東與廣西都是主產(chǎn)區(qū),本次實(shí)驗(yàn)用的廣州與廣西各6 批樣品有一定的代表性。小葉榕有記載藥用,收載于廣東省和湖南省藥材標(biāo)準(zhǔn),標(biāo)準(zhǔn)描述小葉榕氣孔為不定式,稍凸起;主脈維管束為周韌型[2,13]。小葉榕生藥學(xué)方面的文獻(xiàn)較少,且顯微特征大部分為繪制圖[9-12],本研究提供了詳細(xì)的性狀與顯微彩色圖譜。本研究發(fā)現(xiàn)小葉榕氣孔不同于常見葉類藥材的氣孔類型,小葉榕的表皮氣孔下陷,被明顯突起的類圓形角質(zhì)拱蓋緣完全包圍,氣孔不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4 ~ 6個(gè);其不同部位橫切面的主脈維管束有差異,大部分近環(huán)狀,也有被分割為2 至數(shù)個(gè)外韌型維管束,而非質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)描述的周韌型維管束[2,13],筆者認(rèn)為小葉榕質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高中,小葉榕表皮氣孔描述為不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4 ~ 6 個(gè),氣孔下陷,被明顯突起的類圓形角質(zhì)拱蓋緣完全包圍;主脈維管束描述為近環(huán)狀的外韌型維管束更為準(zhǔn)確與妥當(dāng)。此外,通過對小葉榕及其常見的混淆品垂葉榕比較研究,發(fā)現(xiàn)小葉榕葉柄顏色多比葉片深,先端較鈍,較短,側(cè)脈較少,上述性狀特征與垂葉榕有明顯區(qū)別。
本研究通過對小葉榕生藥學(xué)特征及與其易混淆品垂葉榕鑒別比較研究,比對兩者性狀和顯微區(qū)別點(diǎn),研究結(jié)果為小葉榕藥材標(biāo)準(zhǔn)中性狀、顯微精準(zhǔn)描述提供依據(jù),可望改進(jìn)提高小葉榕藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),也為鑒別小葉榕藥材與其易混淆品垂葉榕提供依據(jù)。兩者其它方面(成分、含量、指紋圖譜及藥效等)的差異區(qū)別有待進(jìn)一步研究。