古力鮮·馬合木提 任莉莉 米拉·巴依肯 汪文娟 賀麗麗

支氣管哮喘(BA)是慢性氣道炎癥性疾病，臨床以反復(fù)發(fā)作的喘息、胸悶、氣急和咳嗽等為主要癥狀[1]。BA的反復(fù)發(fā)作影響患者的身體健康，嚴(yán)重者還會(huì)誘發(fā)呼吸衰竭、肺性腦病等并發(fā)癥，因此早期評(píng)估BA患者的病情嚴(yán)重程度，對(duì)BA的臨床治療及預(yù)后具有重要意義[2]。有研究發(fā)現(xiàn)，BA的病理改變包括嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞等參與的慢性氣道炎癥，且隨著病程延長(zhǎng)，逐漸出現(xiàn)氣道高反應(yīng)性和氣道重構(gòu)[3]。上皮源性細(xì)胞因子白介素-25(IL-25)、白介素-33(IL-33)可促進(jìn)Th2型細(xì)胞因子產(chǎn)生，使Th1/Th2型免疫應(yīng)答失衡，嗜酸細(xì)胞趨化因子參與BA的發(fā)生發(fā)展[4]；嗜酸細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)可促使嗜酸粒細(xì)胞性氣道炎癥的發(fā)生，是導(dǎo)致氣道慢性炎癥持續(xù)存在主要因素之一[5]。本研究分析血清IL-25、IL-33和嗜酸細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)與BA患者氣道炎性反應(yīng)的相關(guān)性，以期為臨床BA的診斷及治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年3月至2020年3月我院收治的BA患者146例，根據(jù)病情進(jìn)展情況將患者分為急性期組(患者處于支氣管哮喘急性發(fā)作期，n=85)和緩解期組(患者處于支氣管哮喘緩解期，n=61)，另選取同期體檢健康志愿者65例為對(duì)照組。急性期組：男36例，女49例；年齡30～53歲，平均年齡(41.28±6.73)歲；體重指數(shù)(BMI)23～26 kg/m2，平均(24.51±1.38)kg/m2。緩解期組：男29例，女32例；年齡30～55歲，平均年齡(42.53±8.44)歲；BMI 23～27 kg/m2，平均(25.03±1.61)kg/m2。對(duì)照組：男34例，女31例；年齡30～55歲，平均年齡(41.87±7.46)歲；BMI 22～26 kg/m2，平均(24.36±1.52)kg/m2。3組的性別比、年齡、BMI等一般臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①急性期組和緩解期組患者的臨床檢查符合支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，對(duì)照組為我院接受體檢的健康人群，且1個(gè)月內(nèi)無(wú)呼吸道感染史；②性別不限，年齡≥18歲；③患者及其家屬知情同意，自愿參與。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)檢查合并其他呼吸系統(tǒng)疾病患者；③合并肺結(jié)核、肺部感染患者；④存在嚴(yán)重心、肝、腎等重要臟器功能障礙患者；⑤近期存在糖皮質(zhì)激素、抗IgE藥物服用史患者。

1.3 研究方法

1.3.1 肺功能檢測(cè):采用肺功能檢測(cè)儀對(duì)研究對(duì)象的肺功能進(jìn)行評(píng)估，包括用力肺活量(FVC)、最大深呼吸后第1秒呼除氣量容積(FEV1)和最大呼氣峰流速值(PEF)。

1.3.2 氣道炎癥標(biāo)志物檢測(cè):檢測(cè)研究對(duì)象的氣道炎癥標(biāo)志物水平，包括呼出氣一氧化氮(FeNO)濃度和血清總免疫球蛋白E(IgE)水平。其中，F(xiàn)eNO濃度采用Exhaled NO分析儀(NIOXMINO型，瑞典尼爾斯公司)進(jìn)行檢測(cè)，連續(xù)檢測(cè)3次，取平均值；血清總IgE水平采用免疫比濁法進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.3 血清IL-25、IL-33、Eotaxin檢測(cè):取研究對(duì)象肘靜脈血4 ml，3 500 r/min離心3 min后，低溫保藏待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清IL-25、IL-33、Eotaxin水平，所有試劑盒購(gòu)于武漢華美生物公司，嚴(yán)格按照操作流程進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 3組肺功能指標(biāo)比較 3組FVC、FEV1和PEF水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且對(duì)照組>緩解期組>急性期組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3組肺功能指標(biāo)比較

2.2 3組氣道炎癥標(biāo)志物水平比較 3組研究對(duì)象的FeNO和血清總IgE水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且FeNO和血清總IgE水平比較，對(duì)照組<緩解期組<急性期組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 3組炎癥標(biāo)志物水平比較

2.3 3組血清IL-25、IL-33、Eotaxin水平比較 3組研究對(duì)象的血清IL-25、IL-33、Eotaxin水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且IL-25、IL-33、Eotaxin水平比較，對(duì)照組<緩解期組<急性期組(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 3組血清IL-25、IL-33、Eotaxin水平比較

2.4 血清IL-25、IL-33、Eotaxin水平與氣道炎癥標(biāo)志物水平相關(guān)性分析 血清IL-25、IL-33、Eotaxin表達(dá)水平均與FeNO、IgE水平呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 血清IL-25、IL-33、Eotaxin水平與氣道炎癥標(biāo)志物水平相關(guān)性分析

3 討論

氣道上皮細(xì)胞是機(jī)體呼吸系統(tǒng)與外界環(huán)境接觸的第一道屏障，越來(lái)越多的研究表明，氣道上皮細(xì)胞因各種損傷因素釋放的大量炎性因子和介質(zhì)，在BA的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。目前，BA的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，主流觀點(diǎn)認(rèn)為2型輔助性T細(xì)胞(Th2)、固有淋巴樣2型細(xì)胞(ILC2)和Th2型細(xì)胞因子參與了BA的發(fā)病[7]。IL-25由Th2細(xì)胞產(chǎn)生，可直接誘導(dǎo)ILC2細(xì)胞產(chǎn)生IL-4、IL-13等細(xì)胞因子，參與氣道炎性反應(yīng)；此外，IL-25還可誘導(dǎo)Th細(xì)胞向Th2細(xì)胞分化，進(jìn)而增加Th2型細(xì)胞因子的表達(dá)，介導(dǎo)免疫應(yīng)答，促進(jìn)炎性反應(yīng)的發(fā)生[8]。IL-33主要由受刺激后的上皮細(xì)胞分泌，該細(xì)胞因子可與ST2L受體結(jié)合，激活下游絲裂原活化蛋白激酶，使核因子κB被釋放，最終啟動(dòng)Th2型細(xì)胞因子的表達(dá)，參與BA的發(fā)生發(fā)展[9]。Eotaxin可選擇性趨化嗜酸性粒細(xì)胞，使后者向炎癥部位靠攏，加重炎性反應(yīng)。有研究發(fā)現(xiàn)，嗜酸性粒細(xì)胞與BA之間存在緊密聯(lián)系，通過(guò)檢測(cè)Eotaxin水平，或可反映BA病情的嚴(yán)重程度[10]。

本研究分析不同病程進(jìn)展的BA患者，其血清IL-25、IL-33和Eotaxin水平與氣道炎性反應(yīng)的相關(guān)性，研究結(jié)果顯示，對(duì)照組的血清IL-25、IL-33和Eotaxin水平均低于緩解期組和急性期組，緩解期組的血清IL-25、IL-33和Eotaxin水平低于急性期組，提示IL-25、IL-33和Eotaxin在BA患者的血清中表達(dá)增強(qiáng)，與BA的發(fā)作及進(jìn)展相關(guān)，可在一定程度上反映疾病的嚴(yán)重程度。分析原因：(1)Th2細(xì)胞產(chǎn)生IL-25，當(dāng)其水平達(dá)到一定程度后可通過(guò)IL-5對(duì)對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞進(jìn)行趨化聚集，進(jìn)而出現(xiàn)氣道高反應(yīng)性特征；(2)IL-33可誘導(dǎo)ILC2增殖并產(chǎn)生大量IL-13，從而引起氣道嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，與IL-25一起發(fā)揮協(xié)同增效作用；(3)Eotaxin在多種細(xì)胞因子的刺激下，由滲出性炎性細(xì)胞產(chǎn)生，可與嗜酸性粒細(xì)胞表面的CCR3受體結(jié)合，通過(guò)ERK2通路實(shí)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞脫顆粒，并黏附于血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生跨膜運(yùn)動(dòng)，產(chǎn)生大量毒性蛋白引起組織損傷。

BA急性發(fā)作可導(dǎo)致支氣管炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、分泌物增多，從而阻塞患者氣道，增加呼吸阻力，加重患者呼吸困難，引發(fā)肺功能通氣過(guò)程障礙[11]。本研究中，急性期組患者的FVC、FEV1和PEF水平均小于緩解期組和對(duì)照組，亦證實(shí)這一結(jié)論。FeNO和血清總IgE是反映氣道炎癥的常用標(biāo)志物，全球哮喘處理和預(yù)防策略(GINA)強(qiáng)調(diào)，高FeNO水平可提示BA急性發(fā)作的風(fēng)險(xiǎn)增加[12]。本研究結(jié)果顯示，3組研究對(duì)象的FeNO和血清總IgE水平比較有明顯差異，且急性期組的FeNO和血清總IgE水平明顯高于緩解期組和對(duì)照組，提示BA患者存在明顯的氣道炎性反應(yīng)，與既往研究結(jié)果[13]類(lèi)似。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，IL-25、IL-33、Eotaxin水平均與FeNO、IgE水平呈顯著正相關(guān)，提示IL-25、IL-33、Eotaxin表達(dá)水平與BA患者氣道炎性反應(yīng)存在相關(guān)性。這主要由于IL-25、IL-33、Eotaxin水平的變化，可介導(dǎo)早期炎性反應(yīng)，趨化嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞，釋放大量炎性介質(zhì)，加重氣道炎癥[14]。因此，臨床可通過(guò)見(jiàn)檢測(cè)血清IL-25、IL-33、Eotaxin水平，進(jìn)而協(xié)助評(píng)估BA病情嚴(yán)重程度。倪凱華[15]分析了哮喘兒童血清中IL-25、IL-33和Eotaxin的表達(dá)及意義，發(fā)現(xiàn)IL-25、IL-33水平與Eotaxin呈正相關(guān)，三者在兒童哮喘發(fā)病過(guò)程中起到重要作用，進(jìn)一步提示其可作為潛在靶點(diǎn)應(yīng)用于哮喘的臨床診斷與治療中。

綜上所述，BA患者存在血清IL-25、IL-33和Eotaxin表達(dá)水平明顯升高現(xiàn)象，三者的表達(dá)水平與BA患者氣道炎性反應(yīng)存在相關(guān)性，臨床可用于BA發(fā)作及病情嚴(yán)重程度的輔助診斷。