朱鄭霞壽堅(jiān)

1蕭山醫(yī)院婦產(chǎn)科，杭州311201；2蕭山醫(yī)院婦科，杭州311201

宮頸癌是臨床較為常見的婦科生殖惡性腫瘤，盡早進(jìn)行篩查對防治該病、采取有效合理的治療手段及患者預(yù)后具有較好的臨床意義[1-2]。現(xiàn)階段，臨床上關(guān)于宮頸癌的篩查方式包括液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）及高危型HPV E6/E7 mRNA檢測，這些方法雖然具有高靈敏度和高特異性等優(yōu)勢，但由于檢測時間長，篩查成本高，因而難以推廣[3-5]。宮頸特殊染色法（FRD）是一種新型的宮頸癌篩查手段，主要通過葉酸受體介導(dǎo)，具有經(jīng)濟(jì)、方便、無創(chuàng)及檢測時間短等優(yōu)勢，在低收入和中等收入國家中篩查具有一定優(yōu)勢[6]。為進(jìn)一步提高宮頸癌的診斷效果，及時為患者提供有效的防治措施，本探究探討了FRD、HPV E6/E7 mRNA和TCT三種檢測方法對宮頸癌患者的診斷效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

對象與方法

一、研究對象

選取2018年10月至2019年11月在蕭山醫(yī)院行宮頸癌篩查的734例疑似宮頸癌患者作為研究對象，年齡21～69歲，平均年齡（41.30±7.42）歲。全部受試者已簽署知情同意書，并經(jīng)蕭山醫(yī)院倫理委員會審批通過（倫理審批號：2016）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：有性生活史；有白帶分泌異常、白帶出血、接觸性出血、外陰瘙癢等宮頸癌疑似癥狀；依從性高者；年齡20～70歲。

排除標(biāo)準(zhǔn)：已確診為宮頸癌者；近期接受陰道藥物治療者；存在宮頸手術(shù)史及其他婦科腫瘤者；處于月經(jīng)期、急性炎癥期及孕期者。

二、研究方法

1.FRD檢查

按照FRD試劑盒（陜西高源體外診斷試劑有限公司）說明書操作步驟嚴(yán)格執(zhí)行，取膀胱截石位，使患者暴露宮頸，用大棉簽蘸取染色液后，涂抹于宮頸表面5圈，按壓5 s后取出觀察顏色變化情況；用小棉簽蘸取染色液插入宮頸管約3 cm位置，貼壁進(jìn)行旋轉(zhuǎn)5圈后拉出，觀察顏色變化情況。FRD檢查評估標(biāo)準(zhǔn)：以淺藍(lán)色、藍(lán)黑色和黑色為陽性檢測結(jié)果，提示存在宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）Ⅱ級以上病變；以棕色、綠色為陰性檢測結(jié)果，提示宮頸未發(fā)生異常病變。

2.HPV E6/E7 mRNA檢查

通過宮頸刷在宮頸外口，旋轉(zhuǎn)5圈行HPV E6/E7 mRNA取樣，按照支鏈DNA試劑盒（浙江殷欣生物技術(shù)有限公司）說明書操作步驟檢測高危型HPV E6/E7 mRNA，檢測評估標(biāo)準(zhǔn)：以HPV E6/E7 mRNA超過1拷貝/mL作為陽性檢測結(jié)果。

3.TCT檢查

通過宮頸刷在宮頸外口，旋轉(zhuǎn)5圈采集脫落細(xì)胞，取出保存，由病理科醫(yī)師對其制片、讀片。檢測評估標(biāo)準(zhǔn)[7]：以非典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）作為陽性檢測結(jié)果。

4.陰道鏡檢查

所有研究對象均行陰道鏡檢查，取可疑病變組織進(jìn)行活組織檢查，結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。組織病理學(xué)診斷，由婦科專業(yè)醫(yī)師按照宮頸癌相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[8]分析并出具結(jié)果報(bào)告：將結(jié)果分為

5.FRD、HPV E6/E7 mRNA與TCT聯(lián)合檢查

3種檢查方法只要存在一種陽性結(jié)果則確定為陽性；3種方法全部檢測結(jié)果均為陰性，則確定為聯(lián)合檢測為陰性。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 25.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，正態(tài)分布的計(jì)量資料用x±s表示。對FRD、HPV E6/E7 mRNA和TCT三種檢查結(jié)果一致性進(jìn)行比較分析，兩種檢查方法一致性通過Kappa檢驗(yàn)，Kappa系數(shù)值<0.20為一致性較差；0.21~0.40為一致性一般；0.41~0.60為一致性中等；0.61~0.80為一致性較強(qiáng)；0.81~1.00為一致性強(qiáng)，并比較這三種檢查及聯(lián)合檢查結(jié)果的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值。

結(jié) 果

一、不同方法與病理學(xué)結(jié)果的比較

734例疑似宮頸癌病變患者，病理活組織檢查共檢出陽性病例72例，陽性檢出率為9.81%；FRD、HPV E6/E7 mRNA和TCT的陽性檢出率分別為11.99%、12.53%和14.44%，符合率分別為93.46%、92.37%和89.92%。FRD、HPV E6/E7 mRNA與病理學(xué)診斷結(jié)果的Kappa值分別為0.664和0.616，TCT與病理學(xué)診斷結(jié)果的Kappa值為0.529。具體檢查結(jié)果見表1。

表1 FRD、HPV E6/E7 mRNA、TCT檢查結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較

二、不同方法的診斷效能比較

FRD、HPV E6/E7 mRNA和TCT的靈敏度分別為77.78%、75.00%和72.22%，其中FRD與其他兩種方法的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.714和0.079，P均＞0.05）。FRD+HPV E6/E7 mRNA+TCT檢查的靈敏度優(yōu)于FRD、HPV E6/E7 mRNA和TCT單獨(dú)檢查，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.957、9.391和8.139，P均<0.05）。見表2。

表2 FRD、HPV E6/E7 mRNA、TCT的診斷效能比較（%）

討 論

據(jù)報(bào)道，宮頸癌發(fā)病率居高不下[8-9]，屬婦科惡性腫瘤，目前臨床上常通過TCT及HPV E6/E7 mRNA等方法進(jìn)行篩查，但以上方法檢測時間較長，且對操作技能要求較高，一定程度上增加了推廣普及的難度[10-11]。近些年來，研究發(fā)現(xiàn)HPV E6/E7 mRNA對宮頸癌的診斷價值較高，E6和E7屬于HPV的癌基因，HPV E6/E7 mRNA表達(dá)情況與宮頸病變嚴(yán)重程度存在一定相關(guān)性[5]，然而該方法仍具有一定的局限性，如對人員和設(shè)備依賴性強(qiáng)、成本高、報(bào)告出具慢等[12]。因此，找到一種適合我國國情，簡單、經(jīng)濟(jì)、便捷及高效的篩查方式至關(guān)重要。

FRD是近些年來發(fā)現(xiàn)的一種新型宮頸癌檢測手段，其原理是通過腫瘤細(xì)胞表面葉酸受體高表達(dá)及胞內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)，利用葉酸衍生物將還原態(tài)亞甲藍(lán)作為活細(xì)胞染色劑，腫瘤細(xì)胞可將染色劑攝取，接著葉酸衍生物參與反應(yīng)，致使還原態(tài)亞甲藍(lán)發(fā)生氧化從胞外逸出，進(jìn)而通過觀察診斷前后顏色改變來判斷宮頸病變的程度，對患者病情防治及預(yù)后具有一定的指導(dǎo)意義[13]。本研究結(jié)果顯示，734例疑似宮頸癌患者中，病理活組織檢查的陽性率為9.81%；FRD陽性率為11.99%，HPV E6/E7 mRNA陽性檢出率為12.53%，TCT陽性率為14.44%。FRD、HPV E6/E7 mRNA與病理學(xué)診斷結(jié)果的一致性較強(qiáng)，TCT與病理學(xué)診斷結(jié)果的一致性中等，說明三種檢查方法在宮頸癌的診斷上均具有較高的診斷價值，與患者病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。同時，本研究還發(fā)現(xiàn)FRD與其他兩種檢查方法的靈敏度相似，三者聯(lián)合能顯著提高對宮頸癌檢測的靈敏度，提示FRD不僅具有類似其他2種方式的診斷效能，且聯(lián)合檢測具有更高的診斷效能。

綜 上 所 述，F(xiàn)RD具 有TCT、HPV E6/E7 mRNA類似的診斷效果，加之其方便、快捷及成本低的優(yōu)勢，推廣意義更高，且與其他兩種檢查方式聯(lián)合檢測靈敏度度更高，有助于提高宮頸癌的篩查率。但由于血液對染色液的變色具有一定的干擾，對于宮頸出血嚴(yán)重的患者FRD篩查法并不適用，且不同檢驗(yàn)醫(yī)師之間具有主觀判讀差異，在一定程度上存在缺陷，有待進(jìn)一步完善。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突