高珊,祝梓淳,徐學(xué)兵,鄭妍,高霓思,殷寶茹,鐘宇*
(1.上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院,上海200240;2.豐益(上海)生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司,上海200137)
小麥?zhǔn)俏覈?guó)僅次于水稻的第二大糧食作物,麥麩是小麥加工過(guò)程中的主要副產(chǎn)物,約占籽實(shí)總重的10%,包括小麥麥粒果皮、外果皮、種皮、珠心層和部分糊粉層[1]。2018年我國(guó)小麥產(chǎn)量約為1.3億噸[2],推算麥麩理論產(chǎn)量為1 300萬(wàn)噸,產(chǎn)量大,成本低,且具有良好的營(yíng)養(yǎng)和功能特性。麥麩中的可溶性戊聚糖具有降低血清膽固醇的作用[3];低聚糖具有益生元活性,能夠選擇性增加糞便雙歧桿菌數(shù)量[4],有效減少腸道感染;貯藏蛋白相較胚乳蛋白含有更多的必需氨基酸和條件必需氨基酸[5];酚酸具有清除自由基、抑制單線態(tài)氧生成的作用[6]。近年來(lái)隨著消費(fèi)者對(duì)于健康飲食的重視,麥麩回添食品的需求顯著提升[7]。
然而,麥麩以細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)為主,可溶性物質(zhì)含量很低,麥麩中的蛋白、酚酸等物質(zhì)常與不溶性復(fù)合碳水化合物相結(jié)合,難以釋放利用,影響其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[8];此外在面包的加工過(guò)程中,麥麩會(huì)干擾面筋形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),導(dǎo)致面團(tuán)彈性降低、烘焙質(zhì)量變差等[5]。這些問(wèn)題限制了麥麩在食品中的應(yīng)用。因此,物理處理、化學(xué)處理、生物加工等方法常被用于改善不溶成分對(duì)于麥麩感官、營(yíng)養(yǎng)、應(yīng)用等方面的不利影響[9-10]。蒸汽爆破(steam explosion,SE)是一種水熱加工方法,高壓(0.7 MPa~4.8 MPa)和高溫(160℃~240℃)下的蒸汽在幾分鐘內(nèi)充滿物料,然后對(duì)其進(jìn)行瞬間泄壓,通過(guò)高溫蒸煮階段的熱反應(yīng)和瞬時(shí)減壓階段的物理撕裂的共同作用,打破生物質(zhì)材料各組分的結(jié)合[11-12]。研究表明,SE是一種低成本、節(jié)能、耗時(shí)短、無(wú)溶劑殘留的處理技術(shù),可以有效處理各種木質(zhì)纖維素原料,是半纖維素增溶的首選方法[13]。文獻(xiàn)指出,使用SE方法處理玉米秸稈,可以提高玉米秸稈的消化性[14];經(jīng)SE處理的麥麩可以提高酚類化合物的得率,且具有較強(qiáng)的抗氧化性[15];研究表明在2.5 MPa壓力下保壓60 s,可以破壞麥麩中的植酸,最佳工藝下植酸降解率可達(dá)87%[16]。
本文比較了SE前后麥麩的組分和微觀形貌變化,并采用單因素試驗(yàn)探究SE條件(蒸汽壓力、保壓時(shí)間、水添加量)對(duì)麥麩中可溶性成分(可溶性戊聚糖、可消化碳水化合物、可溶性蛋白)含量和總戊聚糖含量的影響。
麥麩:上海豐益國(guó)際公司;5-甲基間苯二酚(分析純):東京化成工業(yè)株式會(huì)社;苯酚(分析純):上海易恩化學(xué)技術(shù)有限公司;D(+)葡萄糖(分析純)、牛免疫球蛋白G:上海源葉生物科技有限公司;考馬斯亮藍(lán)G-250蛋白染料:上海麥克林生化科技有限公司;木糖、鹽酸、濃硫酸、NaOH、丙酮(均為分析純):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
QBS-80蒸汽爆破工藝試驗(yàn)臺(tái):河南鶴壁正道重型機(jī)械廠;Triad冷凍干燥機(jī):美國(guó)Labconoco公司;JP-500C型粉碎機(jī):久品電器有限公司;Sirion 200高分辨場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡:美國(guó)FEI公司;Multiskan Go酶標(biāo)儀:美國(guó)賽默飛世爾科技公司;LabScan XE色度儀:HunterLab公司。
1.3.1 麥麩基本成分測(cè)定
水分含量:直接干燥法,依據(jù)GB 5009.3—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測(cè)定》;灰分含量:馬弗爐高溫灼燒法,依據(jù)GB 5009.4—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測(cè)定》;脂肪含量:索氏抽提法,依據(jù)GB5009.6—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測(cè)定》;蛋白質(zhì)含量:凱氏定氮法,依據(jù)GB 5009.5—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》。選取對(duì)照組樣品及SE處理后(蒸汽壓力1.5 MPa、保壓時(shí)間180 s、水添加量10%)樣品進(jìn)行上述成分測(cè)定,除水分含量外均由干物質(zhì)含量表示。
1.3.2 麥麩SE處理
稱取200 g麥麩,加入一定量水,通入高溫飽和蒸汽。待缸內(nèi)壓力達(dá)到預(yù)設(shè)值時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí),保持一定時(shí)間后泄壓回收物料。麥麩經(jīng)過(guò)SE處理后,置于60℃下熱風(fēng)干燥24 h(物料厚度1 cm),粉碎過(guò)60目篩,備用。
探究蒸汽壓力影響時(shí),固定保壓時(shí)間180 s,水添加量 30%,蒸汽壓力依次為 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 MPa;探究保壓時(shí)間影響時(shí),固定蒸汽壓力1.5 MPa,水添加量30%,保壓時(shí)間依次為 90、120、150、180、210、240 s;探究水添加量影響時(shí),固定蒸汽壓力1.5 MPa,保壓時(shí)間180 s,麥麩原料水添加量依次為10%、20%、30%、40%、50%、60%。未經(jīng)SE處理的麥麩作為對(duì)照組。
1.3.3 色度值
采用色度儀對(duì)粉碎后樣品進(jìn)行測(cè)定,測(cè)定重復(fù)3次,取平均值。
1.3.4 可溶性戊聚糖含量測(cè)定
準(zhǔn)確稱取樣品0.3 g,加入蒸餾水200 mL,沸水浴加熱2 h,趁熱過(guò)濾,定容至250 mL。吸取水提液10 mL,加入10 mL 4 mol/L鹽酸溶液,沸水浴酸解2 h,過(guò)濾,采用地衣酚-鹽酸法測(cè)定可溶性戊聚糖含量(以木糖計(jì))。
1.3.5 總戊聚糖含量測(cè)定
準(zhǔn)確稱取樣品0.1 g,加入20 mL 4 mol/L鹽酸溶液,沸水浴酸解2 h,過(guò)濾,取過(guò)濾后上清液5 mL,定容至50 mL。采用地衣酚-鹽酸法測(cè)定總戊聚糖含量(以木糖計(jì))。
1.3.6 可消化碳水化合物含量測(cè)定
參考DEANS等[17]的方法,準(zhǔn)確稱取樣品20 mg,加入1 mL 0.1 mol/L H2SO4溶液,沸水浴加熱1 h后置于溫水浴中冷卻,15 000×g離心10 min。收集上清液,采用苯酚-硫酸法測(cè)定可消化碳水化合物含量。
1.3.7 可溶性蛋白含量測(cè)定
參考DEANS等[17]的方法,稱取樣品20 mg,加入500 μL 0.1 mol/L NaOH溶液,超聲處理30 min后沸水浴加熱15 min,離心10 min后轉(zhuǎn)移上清液,用300 μL 0.1 mol/L NaOH溶液洗滌沉淀并離心后,合并上清液。使用5.8 mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)上清液pH值至7。加入90 μL 100%三氯乙酸溶液并在冰上孵育30 min,4℃離心10 min后除去上清液。使用100 μL 20℃丙酮快速洗滌沉淀后,放入通風(fēng)櫥中使丙酮蒸發(fā)。向管中加入1 mL 0.1 mol/L NaOH溶液,通過(guò)加熱、渦旋和超聲處理使其完全溶解。采用Bradford法測(cè)定可溶性蛋白含量。
1.3.8 微觀結(jié)構(gòu)表征—掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM)法
選取對(duì)照組樣品,中度SE處理麥麩樣品(蒸汽壓力1.5 MPa、保壓時(shí)間180 s、水添加量10%)及重度SE處理麥麩樣品(蒸汽壓力2.5 MPa、保壓時(shí)間180 s、水添加量10%),使用掃描電子顯微鏡在5 kV下觀察樣品微觀結(jié)構(gòu),放大倍數(shù)5 000倍。
各試驗(yàn)重復(fù)3次,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用Origin 2016軟件繪圖,IBM SPSS 24軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并通過(guò)單因素ANOVA檢驗(yàn)下的Duncan’s test進(jìn)行顯著性差異比較,P<0.05表示差異顯著。
選取對(duì)照組樣品及SE處理樣品(蒸汽壓力1.5 MPa)進(jìn)行基礎(chǔ)成分測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 SE前后麥麩基礎(chǔ)成分變化Table 1 Basic components contents of wheat bran before and after SE
由表1可知,對(duì)照組麥麩中碳水化合物含量最高,為74.23%干基。SE處理之后,麥麩的灰分、脂肪和蛋白質(zhì)含量顯著增加,碳水化合物含量顯著降低至70.70%干基,這與冉福等[18]得出的結(jié)果相似,這可能是由于SE過(guò)程中半纖維素等分解產(chǎn)物在高溫下?lián)]發(fā),干物質(zhì)損失,從而間接造成其它組分含量增加[19]。
SE處理前后麥麩粉末色度值測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 不同SE處理?xiàng)l件對(duì)于麥麩色度值影響Table 2 Effect of SE on the color values of wheat bran
SE對(duì)麥麩的影響普遍在于使麥麩亮度(L*)值降低,紅度(a*)值增大,黃度(b*)值增大,麥麩粉末顏色由棕黃色轉(zhuǎn)為黃褐色,這可能是由于麥麩在SE過(guò)程中發(fā)生美拉德反應(yīng)[20],生成的羧甲基糠醛等物質(zhì)會(huì)進(jìn)一步縮合生成褐色可溶物乃至生成類黑精[21]。由表2可知,麥麩樣品亮度值整體上隨蒸汽壓力的增大而減小,當(dāng)蒸汽壓力為1.5 MPa時(shí),亮度值較對(duì)照組下降了28.87%,當(dāng)蒸汽壓力進(jìn)一步增大時(shí),亮度值迅速降低,蒸汽壓力到達(dá)2.5 MPa時(shí)亮度值為對(duì)照組的54.68%。秦曉潔等[11]在瞬時(shí)彈射式汽爆法制備速溶牦牛骨粉的研究中同樣發(fā)現(xiàn)牦牛骨隨蒸汽壓力增大色澤逐漸加深,當(dāng)蒸汽壓力大于1.5 MPa時(shí),懸浮液呈黃褐色。
戊聚糖在麥麩中含量可達(dá)20%~25%,占總膳食纖維的60%以上,是麥麩膳食纖維的主要功能組分[22]。圖1為蒸汽壓力、保壓時(shí)間、水添加量對(duì)麥麩總戊聚糖含量的影響。
由圖1可知,與對(duì)照組相比,SE處理組麥麩總戊聚糖含量均降低,在SE處理的3個(gè)因素中,影響較大的是蒸汽壓力。隨著蒸汽壓力的上升,麥麩樣品總戊聚糖含量逐漸下降,對(duì)照組麥麩總戊聚糖含量為420.77 mg/g,2.5 MPa壓力時(shí)總戊聚糖含量降低至282.27 mg/g,相較對(duì)照組降低了約30%;保壓時(shí)間超過(guò)150 s后麥麩總戊聚糖含量與對(duì)照組存在顯著性差異,但各SE處理組之間沒(méi)有明顯差別;不同水添加量的SE處理組間的總戊聚糖含量變化不顯著,但均顯著低于對(duì)照組。經(jīng)過(guò)SE處理之后麥麩總戊聚糖含量下降,可能是在高溫高壓過(guò)程中,麥麩結(jié)構(gòu)被破壞,部分戊聚糖發(fā)生化學(xué)反應(yīng),例如戊聚糖脫水反應(yīng)產(chǎn)生糠醛,進(jìn)一步發(fā)生縮合、裂解反應(yīng)等[23]。
圖1 SE處理對(duì)麥麩總戊聚糖含量的影響Fig.1 Effect of SE on total pentosan content of wheat bran
SE處理對(duì)麥麩可溶性戊聚糖含量的影響見(jiàn)表3。
表3 SE處理對(duì)麥麩可溶性戊聚糖含量的影響Table 3 Effect of SE on soluble pentosan content of wheat bran
由表3可得,對(duì)照組麥麩可溶性戊聚糖含量較少,為14.06 mg/g,SE處理對(duì)于可溶性戊聚糖含量有提升作用。在SE處理的3個(gè)因素中,蒸汽壓力對(duì)于可溶性戊聚糖含量的影響較明顯,其含量隨著蒸汽壓力的增大呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在1.5 MPa壓力下達(dá)到峰值172.55 mg/g,約為對(duì)照組的1 200%。在保壓時(shí)間150 s時(shí)麥麩可溶性戊聚糖含量增至對(duì)照組的1 400%左右,保壓時(shí)間180 s時(shí),麥麩可溶性戊聚糖含量達(dá)到最大值,為209.53 mg/g。不同水添加量的SE處理組麥麩的可溶性戊聚糖含量無(wú)顯著性差異。
圖2為SE處理對(duì)麥麩可消化碳水化合物與可溶性蛋白比值的影響。
圖2 SE處理對(duì)麥麩可消化碳水化合物與可溶性蛋白比值的影響Fig.2 Effect of SE on the ratio of digestible carbohydrate to soluble protein of wheat bran
可消化碳水化合物經(jīng)過(guò)胃腸道的物理、化學(xué)消化,逐步降解成為葡萄糖、果糖、半乳糖等單糖及少量雙糖??扇苄缘鞍字敢孕》肿訝顟B(tài)溶于水或其它溶劑的蛋白,其含量對(duì)生物體的消化吸收也有著重要的影響,是食品加工的重要指標(biāo)之一,兩者的比值可以反映食物的消化性。隨著蒸汽壓力的增加,該比值呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢(shì),蒸汽壓力為1.5 MPa時(shí)出現(xiàn)峰值,相較對(duì)照組增加約35%;而隨著保壓時(shí)間的延長(zhǎng),該比值呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)。不同水添加量對(duì)SE處理樣品的可消化碳水化合物與可溶性蛋白比值沒(méi)有顯著性影響。
本研究采用SEM對(duì)對(duì)照組麥麩、中度SE處理麥麩以及重度SE處理麥麩進(jìn)行了觀察,結(jié)果見(jiàn)圖3。
圖3 SE處理前后麥麩微觀結(jié)構(gòu)Fig.3 Microstructure of wheat bran before and after SE
從圖3中可以看出,對(duì)照組麥麩雖然經(jīng)過(guò)粉碎但顆粒仍比較完整,平均粒徑較大,表面光滑,邊緣整齊,其結(jié)構(gòu)沒(méi)有受到影響。而經(jīng)過(guò)SE處理后的兩個(gè)樣品,由于SE沖擊作用粒徑變小,同時(shí)由于半纖維素和木質(zhì)素的降解,纖維結(jié)構(gòu)不再緊密,出現(xiàn)不規(guī)則撕裂,導(dǎo)致表面呈蜂窩狀[16]。相較1.5 MPa蒸汽壓力下的中度SE處理的麥麩顆粒,2.5 MPa蒸汽壓力下的重度SE處理的麥麩結(jié)構(gòu)被完全破壞成碎片,表面褶皺狀更深,剝離感更強(qiáng)。樣品微觀形貌變化表明,蒸汽壓力與物料破壞程度呈正相關(guān),蒸汽壓力越大,半纖維素與木質(zhì)素降解、纖維結(jié)構(gòu)破壞程度越深。
本研究考察不同汽爆參數(shù)(蒸汽壓力、保壓時(shí)間、水添加量)對(duì)麥麩組分及微觀形貌的影響。麥麩經(jīng)SE處理后顏色改變較大,隨著蒸汽壓力增加,整體來(lái)看,樣品L*值減小,a*值增大,這與美拉德反應(yīng)有關(guān)?;A(chǔ)組分分析顯示SE處理后灰分、脂肪和蛋白質(zhì)含量增大,可能是麥麩SE分解產(chǎn)物在高溫下?lián)]發(fā),干物質(zhì)損失,從而間接造成組分含量增加。微觀結(jié)構(gòu)顯示SE處理能夠破壞麥麩結(jié)構(gòu),破壞程度與蒸汽壓力呈正相關(guān),這促進(jìn)了麥麩中的可溶性物質(zhì)釋放,尤其是可溶性戊聚糖釋放量顯著增大,對(duì)于麥麩實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用具有一定現(xiàn)實(shí)意義。綜合微觀特征、可溶物含量和總戊聚糖含量,蒸汽壓力1.5 MPa、保壓時(shí)間180 s、水添加量10%時(shí)麥麩品質(zhì)較好,后續(xù)試驗(yàn)將在此條件下進(jìn)一步探究SE處理對(duì)麥麩功能特性及加工特性的影響。