黨鵬程，劉長(zhǎng)彬， *，李守江，谷紅偉，李 軍，王智鵬，郭延華，，倪建宏，王 萌

（1.佛山守仁生物技術(shù)有限公司，廣東 佛山 528000；2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國(guó)建重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室）

胚胎工程技術(shù)包含了超數(shù)排卵、胚胎冷凍、胚胎鑒定、胚胎移植等技術(shù)環(huán)節(jié)，其中，同期發(fā)情技術(shù)是胚胎移植中關(guān)鍵的技術(shù)環(huán)節(jié)之一[1]。綿羊同期發(fā)情常用的藥品主要有PGF2a、CIDR 和海綿栓+PMSG 或海綿栓+PGF2a等。有研究表明，CIDR 對(duì)動(dòng)物的發(fā)情紊亂、周期延遲、卵巢靜止等具有較好的療效[2]。CIDR 法對(duì)羊、牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，取得了較好的同期發(fā)情效率。另外，歐美等一些國(guó)家也傾向于選擇CIDR 進(jìn)行動(dòng)物的同期發(fā)情處理[3]。該技術(shù)是綿羊重要的養(yǎng)殖環(huán)節(jié)，也是縮短產(chǎn)羔間歇的一個(gè)重要技術(shù)手段。目前，同期發(fā)情技術(shù)在規(guī)?；图s化養(yǎng)羊場(chǎng)的應(yīng)用已逐漸成熟，在批量化羔羊育肥、上市和屠宰方面取得了一定的成效，在規(guī)模效益方面具有潛在的推廣應(yīng)用價(jià)值。而隨著技術(shù)的進(jìn)步，同期發(fā)情處理的裝置和藥品也在發(fā)生著不斷的變化。因此，本試驗(yàn)通過(guò)研究國(guó)產(chǎn)化CIDR[4]掉栓率、發(fā)情率、折斷率和受胎率等，旨在建立一套綿羊同期發(fā)情控制技術(shù)方案，以期能夠獲得同期發(fā)情處理的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，更好地為中國(guó)畜牧業(yè)生產(chǎn)服務(wù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)羊

選擇無(wú)繁殖系統(tǒng)疾病且有產(chǎn)羔經(jīng)歷的成年母羊757只，用于國(guó)產(chǎn)化CIDR同期發(fā)情試驗(yàn)研究。

1.2 試驗(yàn)藥品

國(guó)產(chǎn)化孕酮控制釋放器CIDR 購(gòu)自鹽城燕瑞生物科技有限公司；海綿栓（45 mg/個(gè)）購(gòu)自北京綠欣康有限公司；孕馬血清促性腺激素（PMSG）和氯前列希醇（PGF2a），由寧波三生藥業(yè)生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1同期發(fā)情

將試驗(yàn)羊隨機(jī)分成5 組，國(guó)產(chǎn)化CIDR 處理組618 只，海綿栓處理組89 只，PGF2ɑ處理組50只。埋置CIDR 或海綿栓前，需蘸取土霉素液，埋栓當(dāng)天為0 天，第13 天撤栓，同時(shí)肌肉注射PMSG 330～450 IU，撤栓后24～48 h 公羊試情，記錄發(fā)情羊數(shù)和撤栓后發(fā)情時(shí)間，在發(fā)情后12 h 和24 h 分別輸精，共計(jì)輸精2次，統(tǒng)計(jì)發(fā)情結(jié)果。

PGF2ɑ注射當(dāng)天為0 天，注射后24 h 公羊試情，記錄發(fā)情時(shí)間和數(shù)量，輸精時(shí)間同上。

在人工授精后35～45 d 進(jìn)行B 超妊娠檢查，懷孕羊記為陽(yáng)性，空胎羊記為陰性。統(tǒng)計(jì)受胎數(shù)量。

1.3.2發(fā)情鑒定

在國(guó)產(chǎn)化CIDR 撤栓或PGF2ɑ注射后24～48 h進(jìn)行公羊試情，如出現(xiàn)被爬跨母羊靜立、塌腰或母羊緊緊圍繞公羊并嗅公羊，或母羊緊跟公羊排成一線，公羊停止前進(jìn)母羊也隨之停止前進(jìn)，并且母羊外陰充血發(fā)紅，或有透明拉絲粘液流出陰門等反應(yīng)，即可認(rèn)定為發(fā)情。

1.3.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

同期發(fā)情試驗(yàn)分3 次進(jìn)行，數(shù)據(jù)用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)偏差（Mean ± SD）表示，用SAS 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，當(dāng)P ＜0.05時(shí)表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 國(guó)產(chǎn)化CIDR的折損率和同期發(fā)情率

從母羊埋栓當(dāng)天計(jì)，在埋栓過(guò)程中，CIDR 栓折斷率平均1.50% ± 0.46%，掉栓率平均5.30% ±1.51%，母羊發(fā)情率平均88.98% ± 6.25%。埋栓35～45 d 進(jìn)行B 超妊娠檢查，母羊受胎率平均57.38% ± 2.40%。結(jié)果如表1 所示，國(guó)產(chǎn)化CIDR埋栓組之間掉栓率、發(fā)情率、栓折斷率和受胎率差異不顯著（P ＞0.05）。

表1 國(guó)產(chǎn)化CIDR同期發(fā)情效果及栓折斷情況

2.2 不同同期發(fā)情處理方法的效果

將289 只母羊隨機(jī)分成CIDR+PMSG、海綿栓+PMSG 和PGF2a3 個(gè)處理組。從表2 可知：CIDR +PMSG 和海綿栓+PMSG 組掉栓率和發(fā)情率差異顯著（P ＜0.05）；CIDR+PMSG、海綿栓+PMSG 和PGF2a3 組之間發(fā)情率差異顯著（P ＜0.05）；受胎率之間差異不顯著（P ＞0.05）。

表2 不同同期發(fā)情處理方法的效果比較

3 討論

影響同期發(fā)情效果的因素較多，包括飼料、營(yíng)養(yǎng)、季節(jié)條件和激素產(chǎn)品等[5]。在綿羊同期發(fā)情過(guò)程中，埋置孕酮陰道栓以提高血液中孕酮水平，一方面抑制卵泡的發(fā)育，另一方面促使優(yōu)勢(shì)卵泡發(fā)生黃體化。孕酮陰道栓還可以促進(jìn)早期黃體的形成和發(fā)育，從而在撤除海綿栓時(shí)，血液中孕酮含量急劇下降，優(yōu)勢(shì)卵泡快速形成并發(fā)育排卵[6]。韓志強(qiáng)[7]等研究表明，CIDR+PMSG、CIDR+PGF2a等方法對(duì)同期發(fā)情后的妊娠率無(wú)顯著影響，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似。肖國(guó)亮[8]等研究表明，進(jìn)口CIDR 與國(guó)產(chǎn)化CIDR 在秋季的同期發(fā)情處理效果上優(yōu)于春季，可能是因?yàn)榍锛局饾u進(jìn)入短日照，而大部分羊是短日照季節(jié)性發(fā)情，因此受季節(jié)影響，CIDR 秋季處理效果優(yōu)于春季。合麥提江[9]選用CIDR+PMSG處理方法，在秋季對(duì)多浪羊進(jìn)行同期發(fā)情處理，發(fā)情率為93.1%，受胎率為96.3%，同時(shí)不同季節(jié)對(duì)發(fā)情率的影響試驗(yàn)表明，春秋兩季進(jìn)行同期發(fā)情處理，在發(fā)情率方面無(wú)顯著差異（P ＞0.05），秋季受胎率顯著高于春季（P ＜0.05）。馬世昌[10]等研究顯示，同期發(fā)情率在72 h內(nèi)CIDR+氯前列烯醇（PG）組高于CIDR+PMSG組。

受胎率的高低直接影響?zhàn)B羊生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益，也是衡量生產(chǎn)效率的重要指標(biāo)。劉長(zhǎng)彬[11]等在春季采用陰道栓+PMSG 的同期發(fā)情方法處理小尾寒羊，受胎率為47.99%。試驗(yàn)結(jié)果表明，季節(jié)不同可能對(duì)同期發(fā)情產(chǎn)生了一定的影響。同時(shí)也表明寒羊和湖羊等國(guó)內(nèi)多胎品種雖然能夠在一年內(nèi)多次發(fā)情，但秋季的發(fā)情率和受胎率明顯高于春季。

本研究發(fā)現(xiàn)，國(guó)產(chǎn)化CIDR在使用過(guò)程中，羊產(chǎn)道在異物的刺激下，分泌物會(huì)明顯增加，少部分CIDR栓在撤栓時(shí)可以看到栓的表面粘有白色或膿性分泌物，為了解決炎癥反應(yīng)，在試驗(yàn)后期埋栓時(shí)，在CIDR栓表面涂抹鹽酸土霉素制劑或土霉素粉劑+植物油混合劑，可有效解決炎癥反應(yīng)問(wèn)題，減少因炎癥反應(yīng)造成的陰道炎癥，同時(shí)還可提高人工授精技術(shù)的成功率。