祁海龍,王斯璐

（1.寶雞市中醫(yī)院,陜西寶雞 721000; 2.渭南市第一醫(yī)院,陜西渭南 714000）

牙周炎是一種因炎性反應(yīng)而導(dǎo)致牙周支持組織病變的慢性疾病，該癥極易因牙齒咬合功能障礙而導(dǎo)致咬合創(chuàng)傷[1]。正常情況下，咬合力有利于維持牙周組織健康和穩(wěn)定，當(dāng)咬合創(chuàng)傷發(fā)生時(shí)常會(huì)引起牙周組織的病理改變，促進(jìn)牙周炎病情進(jìn)展[2]。過去學(xué)者們對(duì)牙周炎的研究大多停留在牙周組織的病理變化上，隨著咬合創(chuàng)傷被人們逐漸深入地認(rèn)識(shí)，咬合創(chuàng)傷下牙周炎病理變化的形成機(jī)制也日益受到關(guān)注。牙周組織由細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)組成，是細(xì)菌生存和活動(dòng)的重要環(huán)境，其中炎性環(huán)境及骨代謝功能在其中可起到關(guān)鍵性的作用，如咬合創(chuàng)傷下牙周炎病理變化中的咬合能力重建就是通過改善炎性環(huán)境及骨代謝功能而實(shí)現(xiàn)的。HOWARD 等[3]通過牙周膜成纖維細(xì)胞體外加力實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)牙周炎模型大鼠認(rèn)為制作咬合創(chuàng)傷24h 后，炎性反應(yīng)更強(qiáng)，骨代謝水平也受限。劉晨等[4]的研究顯示，伴咬合創(chuàng)傷時(shí)，慢性牙周炎患者的牙周組織可分泌多種炎性細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α 等可促進(jìn)細(xì)胞因子有絲分裂和促進(jìn)膠原纖維基質(zhì)分泌，在促進(jìn)慢性牙周炎病情進(jìn)展中可發(fā)揮重要的作用。另外也有研究認(rèn)為，對(duì)齦溝液中炎性反應(yīng)和骨代謝水平進(jìn)行控制，是慢性牙周炎病情康復(fù)過程順利進(jìn)行的保障[5]。但既往前人研究，并未涉及伴咬合創(chuàng)傷的慢性牙周炎患者齦溝液炎性因子表達(dá)是否與骨代謝指標(biāo)具有相關(guān)性，故本研究觀察慢性牙周炎伴咬合創(chuàng)傷患者齦溝液炎性因子表達(dá)情況及與骨代謝指標(biāo)的相關(guān)性，以期為慢性牙周炎伴咬合創(chuàng)傷患者的臨床治療提供參考。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意，選取2020年1～4月收治的52 例慢性牙周炎伴咬合創(chuàng)傷患者為伴咬傷組，另選取同期慢性牙周炎52 例為不伴咬傷組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有受試病例均簽定研究知情同意書，且病例年齡不低于18 周歲；②所有受試對(duì)象均無骨質(zhì)疏松癥[6](骨密度檢測(cè)T 值不低于-2.5)。排除標(biāo)準(zhǔn)：慢性心、肝、腎疾病及內(nèi)分泌系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病的病例，6 個(gè)月內(nèi)曾服用雌激素、鈣劑、糖皮質(zhì)激素、雙磷酸鹽類藥物的病例，排除意識(shí)不清、不能正常交流的病例。不伴咬傷組：男性26 例，女性26 例；平均年齡47.18±3.03 歲；平均牙周炎病程13.87±2.71天。伴咬傷組：男性24 例，女性28 例；平均年齡46.93±3.05 歲；平均牙周炎病程13.56±2.48 天。伴咬傷組和不伴咬傷組病例的一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 儀器與試劑 Periopaper 濾紙條購(gòu)自四川謙德醫(yī)藥有限公司；微離心管和低溫冰箱均購(gòu)自蘇州康民醫(yī)藥有限公司；人腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)試劑盒、人白細(xì)胞介素1β(interleukin - 1β,IL-1β)試劑盒、人C-反應(yīng)蛋白(capacity requirements planning,CRP)試劑盒、人白細(xì)胞介素1(interleukin - 6,IL-6)試劑盒、人血清骨堿性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)試劑盒、人I 型膠原交聯(lián)C 端肽(ciguatoxin-1,CTX-1)試劑盒和人總I 型膠原氨基端延長(zhǎng)肽(total NondeterministicPolynomial,tPINP) 試劑盒均購(gòu)自武漢博士德公司；人骨鈣素(border gateway protocol,BGP)試劑盒購(gòu)自美國(guó)Roche Diagnostic 公司。

1.3 研究方法 伴咬傷組和不伴咬傷組均于治療前行齦溝液炎性因子和骨代謝指標(biāo)檢測(cè)。以側(cè)切牙近中舌側(cè)作為標(biāo)本采集點(diǎn)，隔濕受試牙面并暴露牙齦溝后，采用Periopaper 濾紙條輕輕插入側(cè)切牙的牙齦溝，靜置30s 取出，若發(fā)現(xiàn)濾紙條上有血跡則采集失敗，重新采集。齦溝液標(biāo)本采集后放入微離心管中-5℃低溫冰箱保存待檢。于微離心管中取出濾紙條標(biāo)本，解凍后采用酶聯(lián)免疫吸附法行炎性因子(TNF-α，IL-1β，CRP和IL-6)和骨代謝指標(biāo)(BALP，CTX-1 和tPINP)檢測(cè)，采用放射免疫法行骨代謝指標(biāo)BGP 檢測(cè)，檢測(cè)嚴(yán)格按照各檢測(cè)項(xiàng)目試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 以SPSS 22.0為統(tǒng)計(jì)學(xué)分析工具。性別等計(jì)數(shù)資料以n(%)描述，χ2檢驗(yàn)分析差異。齦溝液炎性相關(guān)因子等計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)描述，獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析差異。以Pearson相關(guān)系數(shù)分析齦溝液炎性因子與骨代謝指標(biāo)的相關(guān)性。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 齦溝液炎性因子表達(dá)分析 見表1。伴咬傷組的齦溝液炎性因子(TNF-α，CRP，IL-1β 和IL-6)、骨形成指標(biāo)(BGP)、骨吸收指標(biāo)(CTX1 和tPINP)表達(dá)值均高于不伴咬傷組，伴咬傷組的骨形成指標(biāo)(BALP)表達(dá)值低于不伴咬傷組，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

表1 齦溝液炎性因子及骨代謝指標(biāo)表達(dá)情況分析(±s)

表1 齦溝液炎性因子及骨代謝指標(biāo)表達(dá)情況分析(±s)

觀察指標(biāo)不伴咬傷組（n=52）伴咬傷組（n=52）tP TNF-α(ng/L)78.69±13.1494.68±16.345.4990.000 CRP(mg/L)18.22±2.3826.34±3.1414.8610.000 IL-1β(ng/L)19.38±2.4328.46±3.2616.1030.000 IL-6(ng/L)32.69±2.9449.46±3.1328.1610.000 BALP(U/L)82.43±14.5621.26±3.854.0540.000 BGP(ng/ml)14.43±2.6421.26±3.8510.5510.000 CTX1(ng/L)44.68±8.6157.18±9.297.1160.000 tPINP(ng/ml)39.47±8.6057.07±9.3210.0080.000

2.2 齦溝液炎性因子與骨代謝指標(biāo)的相關(guān)性分析 見表2。Pearson 相關(guān)分析顯示：齦溝液炎性因子(TNF-α，CRP，IL-1β 和IL-6) 表達(dá)值與齦溝液BALP 表達(dá)值呈負(fù)相關(guān)(r= - 0.813 ～ - 0.694，均P<0.05)，與齦溝液BGP 表達(dá)值呈正相關(guān)(r=0.708 ～ 0.767，均P<0.05)，與齦溝液CTX1 表達(dá)值呈正相關(guān)(r=0.709 ～ 0.791，均P<0.05)，與齦溝液tPINP 表達(dá)值呈正相關(guān)(r=0.695 ～ 0.842，均P<0.05)。

表2 齦溝液炎性因子與骨代謝指標(biāo)的Pearson 相關(guān)分析

3 討論

慢性牙周炎病理發(fā)展過程是一個(gè)以局部炎性反應(yīng)為主的病變過程，由于患者口腔局部炎性反應(yīng)，可使大量炎性介質(zhì)被釋放到牙周組織及齦溝液中，以組織降解、組織損傷等形式參與慢性牙周炎病理發(fā)展過程[7-8]。慢性牙周炎并發(fā)咬合損傷不僅會(huì)增加患者病理疼痛，更可進(jìn)一步促進(jìn)機(jī)體炎性反應(yīng)[9]。而在慢性牙周炎的牙齒松動(dòng)、牙弓變形等病變中，也會(huì)引起骨代謝指標(biāo)變化[10]。因此，炎性因子和骨代謝指標(biāo)均在慢性牙周炎病情恢復(fù)中也具有重要作用[11-12]。但臨床對(duì)于伴咬合損傷是否可加重慢性牙周炎病情進(jìn)展未見報(bào)道，同時(shí)臨床也缺乏伴咬合損傷的慢性牙周炎患者炎性因子與骨代謝指標(biāo)之間關(guān)系的報(bào)道。

由于慢性牙周炎的早期急性炎癥病變，以大量炎性介質(zhì)是否到牙周組織及齦溝液中為臨床表現(xiàn)，而TNF-α，IL-1β，CRP 和IL-6 等炎性因子均是慢性牙周炎病理發(fā)展過程中早期代表性炎癥反應(yīng)的核心介質(zhì)[13]。本研究中，伴咬合損傷患者齦溝液炎性因子表達(dá)值均高于不伴咬合創(chuàng)傷患者，說明伴咬合損傷可導(dǎo)致齦溝液炎性反應(yīng)加重。另外，骨代謝水平與慢性牙周炎病理發(fā)展中的牙齒咬合功能有著密切的關(guān)系，在慢性牙周炎患者病情恢復(fù)過程中，骨吸收相關(guān)指標(biāo)和骨形成相關(guān)指標(biāo)也可起到關(guān)鍵性作用[14-15]。本研究也證實(shí)了咬合損傷也可對(duì)慢性牙周炎患者骨代謝指標(biāo)產(chǎn)生影響，這在促進(jìn)慢性牙周炎病理發(fā)展中和抑制病情恢復(fù)過程中均有關(guān)鍵的作用，臨床也應(yīng)予以重視。

本研究顯示，齦溝液炎性因子表達(dá)水平與齦溝液BALP 表達(dá)值呈負(fù)相關(guān)，與齦溝液BGP 表達(dá)值，CTX1 表達(dá)值，tPINP 表達(dá)值呈正相關(guān)。提示，骨代謝指標(biāo)可與炎性因子細(xì)胞共同作用，從而形成互相作用的網(wǎng)絡(luò)，從而促進(jìn)病情進(jìn)展[16]。查閱相關(guān)文獻(xiàn)并未見伴咬合損傷患者炎性因子、骨代謝指標(biāo)之間的相關(guān)性報(bào)道。但學(xué)者楊捷等[17]研究顯示，BALP 下調(diào)或BGP 上調(diào)均可延長(zhǎng)慢性牙周炎患者病情恢復(fù)時(shí)間。學(xué)者劉偉等[18]研究顯示，骨吸收指標(biāo)CTX-1，tPINP 上調(diào)均可促進(jìn)慢性牙周炎病理發(fā)展和延遲病情恢復(fù)時(shí)間，且有文獻(xiàn)認(rèn)為這與CTX-1，tPINP 上調(diào)而提升骨吸收速率相關(guān)[19-20]。IL-6，IL-β 等炎性因子可介導(dǎo)骨代謝指標(biāo)形成一個(gè)互相作用的網(wǎng)絡(luò)，不僅可促進(jìn)牙周組織炎癥加重，也可促進(jìn)牙周周圍組織病變[21]。綜合本研究炎性反應(yīng)和骨代謝失衡相關(guān)性研究結(jié)果與既往文獻(xiàn)研究結(jié)果可見，伴咬合創(chuàng)傷導(dǎo)致的炎性反應(yīng)可對(duì)慢性牙周炎患者骨代謝水平產(chǎn)生影響，同時(shí)伴咬合創(chuàng)傷的慢性牙周炎患者的炎性反應(yīng)和骨代謝失衡可共同促進(jìn)病情進(jìn)展。

綜上所述，本研究在觀察慢性牙周炎伴咬合創(chuàng)傷患者齦溝液炎性因子及骨代謝指標(biāo)表達(dá)情況的基礎(chǔ)上，分析了炎性因子、骨代謝指標(biāo)之間的相關(guān)性。伴咬合創(chuàng)傷可加重慢性牙周炎患者機(jī)體炎性反應(yīng)，而伴咬合創(chuàng)傷導(dǎo)致的炎性反應(yīng)也可對(duì)慢性牙周炎患者骨代謝水平產(chǎn)生影響，伴咬合創(chuàng)傷對(duì)慢性牙周炎病情的促進(jìn)作用需給予臨床重視。本研究雖然有一定的臨床參考價(jià)值，但本研究樣本量仍然較小，仍需要進(jìn)一步大樣本后續(xù)證實(shí)。