呂顏枝,陳永亮,朱廣琴,王善輝
(徐州生物工程職業(yè)技術學院,江蘇 徐州 221006)
沙門氏菌病是由腸桿菌科沙門氏菌屬中一種或多種細菌所引起雞的一組急性或慢性傳染病的總稱,主要包括雞白痢、雞傷寒、雞副傷寒及亞利桑那菌病。其血清型較多,我國已發(fā)現(xiàn)有201個血清型[1]。該病可以單獨感染,也可以繼發(fā)或并發(fā)感染[2]。有調(diào)查發(fā)現(xiàn)[3],家禽腸道疾病主要是大腸桿菌病、沙門氏菌病及壞死性腸炎等的單獨和混合病毒或寄生蟲的復雜多樣的感染情況。隨著抗生素在家禽生產(chǎn)中的限用和禁用政策的實施,抗生素替代產(chǎn)品[4-5](益生菌、噬菌體等)或飼料添加劑對沙門氏菌病有一定的治療作用。有研究表明[6-7],中藥或天然提取物可以發(fā)揮對病原菌的直接抑殺作用,或通過增強免疫力達到防治感染性疾病的效果,一些中藥復方對雞源致病性沙門菌病具有良好的防治效果。該文主要把純中藥復方、中西聯(lián)合用藥對比于純西藥抗生素來治療自然感染雞的沙門氏菌病,實際驗證中藥復方的治療效果,為獸醫(yī)臨床用藥提供參考資料和奠定基礎。
自擬純中藥復方及重量組分:白頭翁42份、黃連30份、黃柏17份、秦皮27份、蒲公英20份、訶子30份、黃芪20份、黨參30份、白術25份、焦山楂22份、枳殼15份,打成細粉備用。
西藥抗生素及配比組分:頭孢噻呋50份、恩諾沙星20份、阿莫西林30份;中西藥結合:將上述中藥復方和3種抗生素減量相結合用藥。
選擇徐州市賈汪區(qū)養(yǎng)殖場自然感染沙門氏菌病的雞,癥狀典型,經(jīng)過實驗室檢查診斷為沙門氏菌病,共計200只。
2.1.1 臨床癥狀及剖檢 病雞出現(xiàn)精神沉郁,顏面部蒼白,雙翅下垂,羽毛松亂、無光澤,蹲伏于地上,部分患雞排黃白稀便,采食明顯減少。隨機選擇10只病雞進行剖檢,見肝臟腫大,呈古銅色,脾腫大,腎臟腫大,心臟出現(xiàn)白色壞死結節(jié)。
2.1.2 病原的分離鑒定 采取病雞肝臟組織,接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)18~24 h,觀察培養(yǎng)基上長出的菌落是否為沙門氏菌,然后顯色培養(yǎng)基鑒定分離、菌落涂片,革蘭氏染色鏡檢鑒定。
2.1.3 細菌凝集試驗 取1滴細菌懸液與雞白痢多價陽性血清在潔凈的玻璃平板上進行均勻混合,幾分鐘后,凝集成塊,判定為陽性反應。
2.1.4 動物試驗 將純培養(yǎng)物用無菌生理鹽水稀釋,以0.2毫升/羽口服感染幼雛,觀察可否引起急性敗血癥、白痢糊肛、很快死亡。
將確診病雞選取200只雞,隨機分4組,每組50只,分別設為中藥組、西藥組、中西藥結合組、空白對照組,具體見表1。各組雞自由采食,連續(xù)給藥5 d,同時各組給予相同的飲水、光照、溫度等飼養(yǎng)環(huán)境,停藥后連續(xù)觀察7 d。治療期間密切關注各組雞只的發(fā)病和恢復情況。記錄患病雞的精神狀態(tài)、食欲、糞便狀態(tài),對死亡雞只進行剖檢,觀察內(nèi)臟病變,取病料進行病原分離培養(yǎng)與鑒定,同時記錄治愈數(shù)、有效數(shù)、無效數(shù)和死亡數(shù)等。采用SPSS 21.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,采用F檢驗對正交試驗結果進行差異顯著性分析,P<0.05表示差異顯著,P>0.05表示差異不顯著,P<0.01表示差異極顯著。
表1 試驗病雞分組及處理
用藥后每天定期觀察病雞的臨床恢復情況,其效果判定依據(jù)主要有,臨床癥狀觀察、剖解病理變化、實驗室檢查等幾個方面,進而判定其屬于治愈、有效和無效。
3.1.1 病雞臨床癥狀與剖檢 病雞約80日齡,癥狀見食欲減退或廢絕,翅膀下垂,閉眼昏睡,冠髯萎縮蒼白貧血,腹瀉,拉黃白色稀糞。剖檢可見肝臟腫大、呈棕綠色(典型的青銅肝)膽囊內(nèi)充滿膽汁,脾臟腫大,肝臟和心肌上有灰白色小的壞死點,有卡他性腸炎;采集肝臟組織做細菌的分離培養(yǎng)及鑒定。
3.1.2 病原的分離鑒定 取病雞肝臟組織,無菌接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)18~24 h,見培養(yǎng)基上長出細小、露珠狀、無色通明的薄層菌落。在麥康凱瓊脂上長出透明、無色,有時帶有暗色中心的菌落。顯色培養(yǎng)基鑒定分離,挑取菌落涂片,革蘭氏染色鏡檢,發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性、兩端稍圓的細小桿菌。
3.1.3 細菌凝集試驗 取1滴細菌懸液與雞白痢多價陽性血清在潔凈的玻璃平板上均勻混合,2 min后,凝集成塊,呈現(xiàn)為陽性反應。
3.1.4 動物試驗 將沙門氏菌純培養(yǎng)物用無菌生理鹽水稀釋后,以0.2毫升/羽口服感染幼雛,之后3 h出現(xiàn)急性敗血癥、拉黃白色稀糞、糊肛,8 h后見大量死亡。經(jīng)剖解采取病料做涂片、染色鏡檢及分離培養(yǎng),其結果與前相同。
根據(jù)上述臨床診斷及剖檢、病原分離與鑒定、細菌凝集實驗及動物試驗等的結果,最終確診為雞沙門氏菌病。
各藥物試驗組:A組、B組和C組,病雞在用藥1~2 d間死亡較多,3 d后精神開始好轉,5 d后采食飲水逐漸恢復正常。空白對照組:D組,在整個試驗期間大部分精神不振、食欲減少,出現(xiàn)死亡。治療5 d后,試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計結果如表2。
表2 藥物對自然感染雞沙門氏菌病的治療效果(單位:只,%)
由表2可見,純中藥復方治療的A組與純西藥抗生素治療的B組相比較,B組對于自然感染的沙門氏菌病的治愈數(shù)及有效數(shù)上表現(xiàn)稍優(yōu)于A組,但是在治愈率、有效率及死亡率方面差異不顯著(P>0.05),而中西藥結合治療的C組,在治愈率、有效率及死亡率上均優(yōu)于A、B組,且差異顯著(P<0.05)。以上A、B、C3個治療組相對于空白對照(不用藥)的D組,在治療效果上存在極顯著的差異(P<0.01)。整體來講,中西藥結合組有效率最高、療效最好、死亡率最低。
按照中獸醫(yī)辨證論治的理論,雞沙門氏菌病是由于濕熱毒邪通過種蛋傳給雛雞或雛雞感染直接感受外界毒邪,若遇外界不良因素,如氣候多變,雞舍擁擠等不良刺激使有機體正氣虛弱,衛(wèi)外能力下降時即可引起家禽發(fā)病。邪在衛(wèi)分則體溫升高,精神委靡,羽毛蓬亂,飲水增加,呼吸加快;邪入氣分則見下痢,拉黃綠色或泡沫狀糞便[8]。熱邪直中營血可不見癥狀而死亡;濕熱結于腸道可見拉白色水樣下痢,肛門周圍被糞便嚴重污染。治宜清熱解毒、燥濕止?。?]。
因此該試驗選用的復方中藥,以善于治療熱毒血痢的白頭翁湯為基礎方劑,利用白頭翁、黃連、黃柏等具有清熱解毒、燥濕止痢功效對因治療,配合訶子澀腸止瀉屬對癥治療,再輔以黃芪、白術、黨參、焦山楂、枳殼等補中益氣、疏肝健脾來增強和協(xié)調(diào)臟腑功能。從而標本兼治,從根本上解決家禽腸道健康問題。試驗結果顯示,復方中藥組的治療效果與頭孢噻呋等3種抗生素合用的效果無顯著差異,尤其是在死亡率的控制方面。但是兩者的臨床效果均不抵兩者減量后合用的好。這說明中藥復方制劑可以有效治療雞沙門氏菌病,若與抗生素聯(lián)合使用,中西藥結合治療能取得更滿意的臨床效果。對于雞只來講,不同品種或品系之間由于不同的遺傳背景和環(huán)境,其抗病力也會呈現(xiàn)出一定的差異[10]。藥物對于沙門氏菌的臨床治療效果,也與雞只的品種、日齡大小、感染情況及自身條件有著密切關系。故在臨床上使用藥物治療時要綜合考慮,選取合適的治療藥物及方案?!?/p>