田 琳 張海洋 祁智慧 唐 芳
(國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局科學(xué)研究院,北京 100037)
稻谷是我國(guó)重要的儲(chǔ)備糧品種,其儲(chǔ)藏安全受多種因素的影響。霉菌生長(zhǎng)引起糧堆霉變發(fā)熱,甚至產(chǎn)生毒素,是導(dǎo)致稻谷數(shù)量和質(zhì)量損失、引發(fā)儲(chǔ)藏安全問(wèn)題的主要因素之一[1-3]。霉菌生長(zhǎng)的早期檢測(cè)是霉變防控的基礎(chǔ)[4],只有盡早發(fā)現(xiàn),才能及時(shí)有效處理,將儲(chǔ)糧損失降到最低。
儲(chǔ)糧霉菌檢測(cè)方法多樣,原理各不相同,大體可分為直接檢測(cè)法和間接檢測(cè)法兩大類。直接法主要包括平板菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù)、真菌孢子計(jì)數(shù)法和電鏡觀察法等。儲(chǔ)糧真菌多屬絲狀真菌,具有典型的孢子結(jié)構(gòu),通過(guò)檢測(cè)糧食中真菌孢子數(shù)量的變化,可了解儲(chǔ)糧中真菌生長(zhǎng)情況。平板菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù)法[5,6]是通過(guò)洗脫糧食上的真菌,對(duì)萌發(fā)形成菌落的真菌孢子進(jìn)行觀察計(jì)數(shù),該方法操作繁瑣且耗時(shí)長(zhǎng)(一般需要5~7 d);真菌孢子計(jì)數(shù)法是通過(guò)洗脫獲得孢子,借助顯微技術(shù)直接對(duì)真菌孢子進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)[7,8],克服了平板培養(yǎng)耗時(shí)長(zhǎng)的問(wèn)題;掃描電子顯微鏡作為一種超微結(jié)構(gòu)的觀察手段,通過(guò)觀察糧食籽粒上霉菌孢子和菌絲生長(zhǎng)分布情況,輔助觀察和判定稻谷霉變程度[9],可以作為儲(chǔ)糧霉菌生長(zhǎng)情況研究較為直觀的對(duì)照方法。間接法主要通過(guò)檢測(cè)儲(chǔ)糧霉菌細(xì)胞特定成分[10-12]、真菌酶類[13-15]、揮發(fā)性物質(zhì)[16,17]及能量代謝產(chǎn)物等[18-20]間接反映霉菌生長(zhǎng)情況。間接法因操作復(fù)雜、檢測(cè)儀器昂貴,在實(shí)際儲(chǔ)糧中很少應(yīng)用,只有基于能量代謝的糧溫檢測(cè)技術(shù)被廣泛應(yīng)用,但對(duì)于儲(chǔ)糧霉菌的檢測(cè)有嚴(yán)重的滯后性[21-23]。近年來(lái),糧堆CO2氣體檢測(cè)技術(shù)逐漸被重視,但受糧堆生態(tài)系統(tǒng)中其他生物代謝或儲(chǔ)糧工藝的干擾較大,檢測(cè)結(jié)果雖可判斷糧堆是否有異常變化,但不能直接用于判定霉菌生長(zhǎng)情況。因此,在實(shí)際儲(chǔ)糧中,操作簡(jiǎn)單、快速的直接檢測(cè)方法仍是必需的。
本研究在15~35 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中對(duì)含水量為14.6%的優(yōu)質(zhì)粳稻進(jìn)行了模擬儲(chǔ)藏實(shí)驗(yàn),采用掃描電鏡觀察賦值法、真菌孢子計(jì)數(shù)法和平板菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù)法三種直接方法(分別簡(jiǎn)稱為電鏡賦值法、孢子計(jì)數(shù)法和平板培養(yǎng)法)定期檢測(cè)稻谷表面和糙米表面的霉菌生長(zhǎng)狀況,總結(jié)了不同儲(chǔ)藏溫度下稻谷和糙米表面霉菌的生長(zhǎng)規(guī)律,并對(duì)檢測(cè)方法的操作過(guò)程和檢出結(jié)果等方面進(jìn)行分析,比較其優(yōu)缺點(diǎn)。
稻谷樣品:2017年產(chǎn)優(yōu)質(zhì)粳稻,初始含水量14.6%,產(chǎn)自吉林榆樹(shù)。
HPS-250生化培養(yǎng)箱,PL3002-IC 電子分析天平,DJSFM-1糧食水分測(cè)試粉碎磨,HG-9246A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,JDMZ 100 稻谷出米率檢測(cè)儀,HERAsafe KS12 生物安全柜,MLS-3781L-PC高壓蒸汽滅菌器,E1010離子濺射儀,S-3000N掃描電子顯微鏡。
1.3.1 樣品處理
準(zhǔn)備5個(gè)8 L密封箱,清洗、晾干后,75%酒精消毒處理。稱取清理、除雜的稻谷樣品裝入5個(gè)密封箱中,每箱裝入4 kg。密封箱分別放置在15、20、25、30、35 ℃生化培養(yǎng)箱中儲(chǔ)藏180 d,儲(chǔ)藏期間定期取樣檢測(cè)稻谷和糙米上霉菌的生長(zhǎng)情況。
1.3.2 稻谷水分檢測(cè)
儲(chǔ)藏期間每30 d 在各密封箱中隨機(jī)取樣,按照GB 5497—85[24]中105 ℃的恒重法測(cè)定稻谷水分。
1.3.3 電鏡賦值法檢測(cè)
每30 d 在各密封箱中隨機(jī)取樣約20 g,隨機(jī)選出8粒作為掃描電鏡觀察樣品,其中4粒通過(guò)手工剝殼制成糙米。4粒稻谷和4粒糙米經(jīng)離子濺射儀噴金處理后,在掃描電鏡下觀察(放大倍數(shù)300倍)并記錄霉菌孢子及菌絲的生長(zhǎng)情況。
為了量化分析檢測(cè)結(jié)果,對(duì)稻谷或糙米表面按觀察到霉菌孢子或菌絲的狀態(tài)進(jìn)行污染程度分級(jí)(k)、區(qū)域劃分、并賦值(Vk)處理,具體方法如下:未觀察到霉菌孢子和菌絲的區(qū)域,污染程度定義為0級(jí),不做標(biāo)記并賦值0;觀察到零星分布的霉菌孢子的區(qū)域,污染程度定義為一級(jí),賦值20(見(jiàn)圖1a);觀察到密度較高但零散分布的孢子和菌絲的區(qū)域,污染程度定義為二級(jí),賦值 40(見(jiàn)圖1b);觀察到聚集性分生孢子和分生孢子梗結(jié)構(gòu)的區(qū)域,污染程度定義為三級(jí),賦值70(見(jiàn)圖1c);觀察到成堆的霉菌孢子及菌絲的區(qū)域,污染程度定義為四級(jí),賦值100(見(jiàn)圖1d)。在觀察過(guò)程中,評(píng)估霉菌孢子和菌絲污染等級(jí)(Vk)及其所占的面積百分比(Sk)。賦值結(jié)果(V)定義為污染等級(jí)面積百分比與等級(jí)賦值乘積之和。
圖1 掃描電鏡下觀察結(jié)果分級(jí)賦值依據(jù)
1.3.4 孢子計(jì)數(shù)法檢測(cè)
每10 d 在各密封箱中隨機(jī)取樣,采用 LS/T 6132—2018 《糧油檢驗(yàn)儲(chǔ)糧真菌的檢測(cè)孢子計(jì)數(shù)法》[8]檢測(cè)稻谷表面攜帶霉菌孢子數(shù)量(FSN/g)。采取手工分離稻殼和糙米的方式,獲得10 g糙米,參照上述方法對(duì)糙米攜帶的霉菌孢子進(jìn)行振蕩洗脫并檢測(cè),根據(jù)稻谷的出糙率數(shù)據(jù)將結(jié)果換算成每克稻谷攜帶的霉菌孢子數(shù)量。
1.3.5 平板培養(yǎng)法檢測(cè)
收集實(shí)驗(yàn)初始樣品和各溫度下儲(chǔ)藏180 d的稻谷樣品,參照GB 4789.15—2016[6],使用高鹽察式培養(yǎng)基(氯霉素含量200~400 mg/L),培養(yǎng)并檢查稻谷中攜帶的霉菌情況,結(jié)果使用菌落形成單位/克(CFU/g)表示。
設(shè)置碾米時(shí)間30 s,對(duì)上述稻谷樣品用稻谷出米率檢測(cè)儀處理,收集碾米過(guò)程中的糠皮層,用糠皮層的帶菌量表示糙米表面攜帶的霉菌情況,操作方法同上,對(duì)糠皮層進(jìn)行培養(yǎng),結(jié)果換算成每克稻谷的菌落形成單位。
采用SPSS 19.0、EXCEL 2010軟件處理數(shù)據(jù)。
實(shí)驗(yàn)收集到含水量為14.6%的優(yōu)質(zhì)粳稻,置于不同溫度下模擬儲(chǔ)藏180 d,期間稻谷水分變化見(jiàn)圖2。
圖2 儲(chǔ)藏期間稻谷水分變化情況
由圖2可知,稻谷水分隨儲(chǔ)藏溫度而變化,溫度越高水分丟失越嚴(yán)重。除35 ℃外,其他溫度條件下模擬儲(chǔ)藏前90 d稻谷水分變化幅度不大,90 d后由于儲(chǔ)藏環(huán)境進(jìn)入低濕度的秋冬季節(jié),環(huán)境相對(duì)濕度由60%左右下降至20%左右,即使儲(chǔ)藏在密閉的塑料箱中,每次因取樣等開(kāi)箱操作均會(huì)造成不同程度的水分損失。
機(jī)械礱谷脫殼過(guò)程中,由于機(jī)械摩擦振動(dòng)或風(fēng)力作用,會(huì)引起真菌的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)及孢子脫落,造成孢子數(shù)量減少,不能真實(shí)反映糙米表面霉菌的自然生長(zhǎng)狀態(tài)[9],因此本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)所用的糙米均采用手動(dòng)剝除稻殼,盡量降低稻殼對(duì)糙米表面霉菌的影響。
按照方法1.3.3的方法,對(duì)稻谷和糙米樣品觀察并賦值。初始樣品和15 ℃條件下,儲(chǔ)藏180 d各樣品的在稻谷和糙米表面均未觀察到霉菌孢子和菌絲結(jié)構(gòu),表明15 ℃低溫能有效抑制霉菌生長(zhǎng)。其他溫度條件下的賦值結(jié)果見(jiàn)圖3。
由圖3可知,無(wú)論是稻谷表面還是糙米表面,霉菌賦值隨儲(chǔ)藏溫度的升高呈上升趨勢(shì),表明適宜生長(zhǎng)條件下,霉菌生長(zhǎng)速度與儲(chǔ)藏溫度呈正相關(guān)。由圖中霉菌起始檢出點(diǎn)可知,20、25、30 ℃和35 ℃的儲(chǔ)藏條件稻谷樣品中開(kāi)始檢出霉菌孢子或菌絲的時(shí)間分別為90、60、30 d和30 d,表明在一定的溫度范圍內(nèi)霉菌起始生長(zhǎng)時(shí)間隨儲(chǔ)藏溫度升高而縮短。由圖3中各曲線增長(zhǎng)趨勢(shì)可知,霉菌孢子在檢出后都經(jīng)歷一段時(shí)間的快速增長(zhǎng),隨后生長(zhǎng)速度逐漸放慢或維持在一定水平,這與2.1中稻谷樣品的水分降低密切相關(guān)。水分是儲(chǔ)糧微生物生存的決定性條件,研究表明14.0%左右是真菌生長(zhǎng)的臨界水分,在此水分下,真菌生長(zhǎng)緩慢或停滯[1,25]。由圖2可知,20、25、30 ℃和35 ℃下樣品分別在儲(chǔ)藏150、120、120 d和60 d后降到14.0%及以下,與圖3中各溫度下霉菌生長(zhǎng)最大值基本吻合。其中25 ℃及以上電鏡賦值40以上,污染程度達(dá)到二級(jí),對(duì)應(yīng)真菌檢測(cè)達(dá)到106個(gè)/g[9],對(duì)儲(chǔ)糧會(huì)造成一定的危害。
圖3 稻谷和糙米表面電鏡賦值法霉菌檢出情況
實(shí)際觀察到稻谷表面的霉菌生長(zhǎng)量明顯多于糙米,因此稻谷表面賦值高于糙米表面。造成這種現(xiàn)象的原因,一是稻殼的天然保護(hù)作用,霉菌不容易侵入到糧粒內(nèi);二是儲(chǔ)糧霉菌大部分具有好氧特性,趨于向稻殼外生長(zhǎng)。
掃描電鏡放大倍數(shù)和分辨率高,可清晰的區(qū)分出糙米的胚和胚乳,因此,單獨(dú)賦值并計(jì)算。由圖3可見(jiàn),各溫度下胚部和胚乳的賦值結(jié)果基本一致,胚部略高于胚乳,尤其是在30 ℃和35 ℃中后期,這是由于糙米胚部營(yíng)養(yǎng)更豐富,更適于微生物的生長(zhǎng)。
因孢子計(jì)數(shù)法操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短,為更好地跟蹤稻谷樣品表面攜帶霉菌情況,稻谷的取樣檢測(cè)時(shí)間間隔設(shè)置為10 d。按1.3.4所述的方法,不同溫度條件下,稻谷表面的霉菌孢子檢測(cè)結(jié)果如圖4所示。
圖4 不同儲(chǔ)藏時(shí)間稻谷表面孢子計(jì)數(shù)法霉菌檢出情況
由圖4可知,霉菌孢子開(kāi)始檢出的時(shí)間隨儲(chǔ)藏溫度升高而逐漸縮短,在15~35 ℃條件下,分別是150、70、30、20和10 d。霉菌孢子起始檢出時(shí)間早于電鏡觀察賦值法10~30 d。15 ℃條件下,儲(chǔ)藏150 d 有少量檢出,20 ℃條件下,儲(chǔ)藏80 d開(kāi)始有檢出,120 d 后霉菌孢子數(shù)升至最高,之后基本保持不變,主要受其水分降低影響。15 ℃和20 ℃條件下,雖有霉菌孢子檢出,但檢出量水平低于106個(gè)/g,不足以對(duì)稻谷的品質(zhì)造成危害[1,2]。25、30 ℃和35 ℃條件下,儲(chǔ)藏初期水分和溫度適于真菌生長(zhǎng),霉菌檢出量分別在30、20 d和20 d達(dá)到106個(gè)/g以上,后期由于稻谷水分降低趨于平穩(wěn)狀態(tài)。由此可見(jiàn),14.6%含水量的稻谷長(zhǎng)期儲(chǔ)存在25 ℃及以上,存在較大風(fēng)險(xiǎn)。
各溫度下儲(chǔ)藏180 d及25 ℃條件下不同儲(chǔ)藏時(shí)間的稻谷和手剝糙米表面的霉菌生長(zhǎng)對(duì)比情況如圖5所示。
圖5 稻谷和糙米孢子計(jì)數(shù)法霉菌檢出情況比較
由圖5可知,同一儲(chǔ)藏時(shí)間(180 d)不同儲(chǔ)藏溫度和同一儲(chǔ)藏溫度(25 ℃)不同儲(chǔ)藏時(shí)間,霉菌孢子在稻谷表面的檢出量都大于糙米,基本相差1個(gè)數(shù)量級(jí)左右。此外,各溫度下儲(chǔ)藏180 d稻谷樣品,15 ℃下稻谷表面有霉菌孢子檢出,而糙米表面未檢出;25 ℃下稻谷表面在30 d開(kāi)始有霉菌孢子檢出,而糙米表面開(kāi)始檢出時(shí)間在60 d。以上結(jié)果表明,稻殼能阻擋一部分霉菌孢子進(jìn)入稻谷內(nèi),在加工過(guò)程中,脫殼處理能去除大部分的霉菌,將糙米的帶菌量降低1個(gè)數(shù)量級(jí)左右。
平板菌落培養(yǎng)法是一種微生物檢測(cè)的傳統(tǒng)方法,該方法主要使用不同營(yíng)養(yǎng)成分的固體培養(yǎng)基對(duì)樣品中可培養(yǎng)的微生物進(jìn)行分離培養(yǎng),根據(jù)菌落形態(tài)及菌落數(shù)來(lái)檢測(cè)微生物的數(shù)量及種類[5,26]。霉菌對(duì)儲(chǔ)糧危害最大,而儲(chǔ)糧霉菌普遍具有耐高滲透壓的特性。因此,在本實(shí)驗(yàn)中采用高鹽察式培養(yǎng)基對(duì)樣品攜帶的霉菌進(jìn)行培養(yǎng)。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖6。
圖6 平板培養(yǎng)法霉菌檢出情況(180 d)
由圖6可知,稻谷和糠皮層初始樣品的菌落形成單位(CFU/g)數(shù)量級(jí)分別在2.0和3.0左右,相差1個(gè)數(shù)量級(jí)范圍。在25 ℃及以上溫度儲(chǔ)藏,稻谷和糠皮層的霉菌檢出量出現(xiàn)增加且呈現(xiàn)緩慢增長(zhǎng)趨勢(shì),且稻谷的檢出量均高于糠皮層1~2個(gè)數(shù)量級(jí)。可見(jiàn),稻殼對(duì)糙米起到了一定的保護(hù)作用。
由2.2~2.4中三種方法的檢測(cè)結(jié)果可見(jiàn),在儲(chǔ)藏150~180 d內(nèi)霉菌的生長(zhǎng)基本趨于穩(wěn)定,且在實(shí)際儲(chǔ)糧中霉菌的檢測(cè)主要以稻谷原糧為主,因此,將不同溫度下儲(chǔ)藏180 d的稻谷樣品經(jīng)三種方法檢出的結(jié)果進(jìn)行Tukey檢驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表1。
由表1可知,隨著儲(chǔ)藏溫度的升高,三種方法的檢出量都呈增長(zhǎng)的趨勢(shì),即儲(chǔ)藏溫度越高,檢出量越大。電鏡賦值法在初始樣品和15 ℃下儲(chǔ)藏樣品中均無(wú)檢出,在20 ℃和25 ℃下的檢出量有顯著性差異;孢子計(jì)數(shù)法在原始樣品中無(wú)檢出,各溫度下儲(chǔ)藏180 d后均有檢出,且在15 ℃和20 ℃下的檢出量有顯著性差異;平板培養(yǎng)法在15 ℃和20 ℃下的檢出量與原始樣品之間無(wú)顯著性差異,在25 ℃及以上溫度檢出結(jié)果與原始樣品之間有顯著性差異。與平板培養(yǎng)法和電鏡賦值法相比較,真菌孢子計(jì)數(shù)法在霉菌生長(zhǎng)量較少的情況下即可檢出,且在檢出量較少的情況下能區(qū)分不同處理之間的差異性,因此,能更早地發(fā)現(xiàn)霉菌的生長(zhǎng)。從不同溫度下儲(chǔ)藏180 d 稻谷樣品的檢出情況來(lái)看,三種方法的靈敏度排序?yàn)殒咦佑?jì)數(shù)法>電鏡賦值法>平板培養(yǎng)法。
表1 不同溫度下儲(chǔ)藏180 d的稻谷樣品檢出情況的多重比較
掃描電子顯微鏡是一種大型精密儀器,廣泛用于觀察固體物質(zhì)表面的超微結(jié)構(gòu),所拍攝圖像的放大倍數(shù)和分辨率高,真實(shí)、清晰、并富有立體感。糧食行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的真菌孢子計(jì)數(shù)法因操作簡(jiǎn)單、快速,靈敏度高,成本低,已作為一種糧食霉變?cè)缙跈z測(cè)方法在各大糧庫(kù)中使用。平板菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù)法作為傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法,廣泛應(yīng)用于糧食儲(chǔ)藏期間不同霉菌種類的研究。對(duì)三種檢測(cè)方法的操作過(guò)程、儀器設(shè)備要求,以及在本實(shí)驗(yàn)中的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較,結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 三種檢測(cè)方法比較
掃描電子顯微鏡觀察賦值法在實(shí)驗(yàn)前需要做噴金處理,一批次可觀察的糧粒數(shù)量有限。因觀察視野放大倍數(shù)較大,單個(gè)樣品單面全范圍掃描觀察耗時(shí)較長(zhǎng)。掃描觀察過(guò)程中還發(fā)現(xiàn),霉菌菌絲和孢子在糧粒表面分布不均勻,不同視野內(nèi)分布密度有差異,在同一批次糧粒間生長(zhǎng)分布差異較大,造成檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性較差。此外,掃描電鏡屬大型精密儀器,設(shè)備的規(guī)范性操作要求高,設(shè)備本身的購(gòu)買和維護(hù)費(fèi)用很高,單個(gè)樣本的檢測(cè)成本偏高。因此,掃描電子顯微鏡更適用于糧食表面附著霉菌結(jié)構(gòu)的精細(xì)觀察,針對(duì)不同區(qū)域分布密度的賦值累加比較的分析方法還有待進(jìn)一步優(yōu)化。
孢子計(jì)數(shù)法分為孢子洗脫和孢子計(jì)數(shù)兩部分[8],操作簡(jiǎn)單,在孢子識(shí)別計(jì)數(shù)過(guò)程中需要具備一定的微生物學(xué)基礎(chǔ),糧食儲(chǔ)藏從業(yè)人員有一定的霉菌基礎(chǔ)知識(shí),稍加培訓(xùn)即可獨(dú)立操作。收集糧食樣品后,在3~5 min內(nèi)便能得到檢測(cè)結(jié)果。檢測(cè)所需的設(shè)備主要是生物顯微鏡,儀器成本低,單個(gè)樣品檢測(cè)成本不到1元,在糧食儲(chǔ)備庫(kù)檢化驗(yàn)室普及的可能性高。因此,孢子計(jì)數(shù)法更適用于儲(chǔ)糧霉變的早期檢測(cè),但該方法主要對(duì)洗脫出的所有霉菌孢子進(jìn)行檢測(cè),無(wú)法判斷洗脫出的霉菌孢子是否有活性,檢測(cè)結(jié)果偏高。
平板培養(yǎng)法的操作步驟主要有孢子洗脫和孢子培養(yǎng),檢測(cè)過(guò)程需要提供無(wú)菌環(huán)境,對(duì)檢測(cè)人員的專業(yè)技能及實(shí)驗(yàn)條件要求較高,糧食行業(yè)操作難度較大[27-29]。平板培養(yǎng)法將樣品表面洗脫的有活性的霉菌培養(yǎng)成菌落,可對(duì)感染的真菌進(jìn)行初步鑒定。但由于培養(yǎng)條件與實(shí)際倉(cāng)儲(chǔ)環(huán)境和以糧食為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的環(huán)境有較大差別,不能真實(shí)反映儲(chǔ)糧環(huán)境中正常生長(zhǎng)霉菌的類群,檢測(cè)結(jié)果偏低,且培養(yǎng)時(shí)間至少在5~7 d,檢測(cè)結(jié)果存在一定的滯后性,檢測(cè)時(shí)效性較差[30]。
綜上所述,本研究所使用的三種檢測(cè)技術(shù)各有優(yōu)缺點(diǎn),在應(yīng)用中需根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行選擇,多種方法相結(jié)合可更準(zhǔn)確地反映儲(chǔ)糧中霉菌的生長(zhǎng)情況。
綜合上述三種方法的檢測(cè)結(jié)果可知,含水量為14.6%的稻谷在15 ℃低溫條件下儲(chǔ)藏,可有效地抑制霉菌生長(zhǎng),20 ℃條件下雖有少量霉菌生長(zhǎng),但不會(huì)造成較大的危害,而在25 ℃及以上長(zhǎng)期儲(chǔ)藏,存在較大的風(fēng)險(xiǎn)。霉菌的生長(zhǎng)與稻谷的水分密切相關(guān),當(dāng)?shù)竟群拷抵?4.0%以下,霉菌生長(zhǎng)基本趨于停滯。控制儲(chǔ)藏溫度和稻谷水分可有效降低霉菌的污染程度。
稻殼對(duì)稻谷具有天然保護(hù)作用。同一儲(chǔ)藏條件下,儲(chǔ)藏霉菌在稻谷表面的檢出時(shí)間早于糙米表面;同一儲(chǔ)藏時(shí)間,稻谷表面的檢出量大于糙米表面,相差1個(gè)數(shù)量級(jí)左右。稻谷加工過(guò)程中經(jīng)脫殼處理可顯著降低糙米的帶菌量。
掃描電鏡觀察賦值法、真菌孢子計(jì)數(shù)和平板菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù)法三種方法在本研究中的霉菌檢出情況基本一致。三種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),相比較而言,真菌孢子計(jì)數(shù)法在霉菌生長(zhǎng)量較少的情況下可檢出,且在檢出量較少的情況下能區(qū)分不同處理之間的差異性,能更早、更快地發(fā)現(xiàn)霉菌的生長(zhǎng),從而為糧食的安全儲(chǔ)藏提供預(yù)警信息。