張圭珍 霍巧玲 王繼升 趙琦 李海松

摘要 目的：運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的分析方法探討淫羊藿-巴戟天治療勃起功能障礙的潛在機(jī)制。方法：從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（TCMSP）、生物信息學(xué)分析工具BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫篩選出淫羊藿、巴戟天的有效活性成分及作用靶點(diǎn)，運(yùn)用GeneCards、OMIM、NCBI數(shù)據(jù)庫獲取勃起功能障礙的疾病靶點(diǎn)，韋恩圖篩選藥對(duì)、疾病的共同的靶點(diǎn)。采用String數(shù)據(jù)庫進(jìn)行蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，Cystoscap 3.7.2進(jìn)行拓?fù)浞治?，?gòu)建藥對(duì)中藥-活性成分-疾病-靶點(diǎn)交集網(wǎng)絡(luò)，運(yùn)用R3.6.3軟件對(duì)共同靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書（KEGG）富集分析，篩選出潛在信號(hào)通路并分析其作用機(jī)制。結(jié)果：1）巴戟天、淫羊藿篩選出203個(gè)靶點(diǎn)。2）勃起功能障礙疾病篩選出1 004個(gè)靶點(diǎn)。3）淫羊藿-巴戟天藥對(duì)與勃起功能障礙的交集靶點(diǎn)共75個(gè)。4）通過PPI網(wǎng)絡(luò)篩選出IL6、VEGFA、CASP3等30個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)。5）GO分析的生物過程主要富集在對(duì)脂多糖的反應(yīng)等過程;細(xì)胞組分主要富集在膜筏、膜微區(qū)等部位;分子功能主要富集在腎上腺素能受體活性等。6）KEGG分析共富集到PI3K-AKT信號(hào)通路等17條信號(hào)通路。結(jié)論：淫羊藿-巴戟天藥對(duì)治療勃起功能障礙，主要通過影響PI3K-AKT等信號(hào)通路發(fā)揮作用，同時(shí)可能與降低精氨酸酶、乙酰膽堿酯酶和腺苷脫氨酶的活性，上調(diào)NO水平，抑制PDE-5活性及影響細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等機(jī)制相關(guān)。

關(guān)鍵詞 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);淫羊藿;巴戟天;藥對(duì);勃起功能障礙;陽痿;靶點(diǎn);PI3K-AKT通路

Mechanism Research of Epimedium-Morinda in Treating Erectile Dysfunction Based

on Network Pharmacological Method

ZHANG Guizhen，HUO QiaoLing，WANG Jisheng，ZHAO Qi，LI Haisong

（Dongzhimen Hospital of Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100029，China）

Abstract Objective：To study the target and signal pathway of Epimedium-Morinda in the treatment of erectile dysfunction，and to explore the potential mechanism of Epimedium-Morinda in the treatment of erectile dysfunction.Methods：The active components and targets of epimedium-Morinda were screened out from TCMSP and BATMAN-TCM database，the disease targets of erectile dysfunction were obtained by Genecards，OMIM and NCBI gene human database，and the common targets of drugs and diseases were screened by venntu.The PPI network was constructed by using String database，and the topological analysis was carried out by using Cystoscap 3.7.2.The intersection network of traditional Chinese medicine，active ingredient，disease and target was constructed.The common target was analyzed by using R3.6.3 software for GO analysis and KEGG pathway enrichment analysis，and the potential signal pathway was screened and its mechanism was analyzed.Results：1）Morinda has 20 chemical constituents and 43 targets.Epimedium has 23 chemical constituents and 202 targets.After merging and deleting，203 targets are obtained.Effective ingredients include quercetin，kaempferol，sitosterol，luteolin，etc.2）1004 targets were selected for erectile dysfunction.3）There were 75 intersection targets of Epimedium-Morinda and erectile dysfunction.4）A total of 30 key targets such as IL6，VEGFA and CASP3 were selected through PPI network.5）The biological process of GO analysis was mainly concentrated in the reaction to lipopolysaccharide，the reaction to bacterial source molecules，the vascular reaction in the circulatory system，etc; the cell components were mainly concentrated in the membrane raft，membrane micro area，membrane area，presynaptic membrane and posterior membrane，etc; the molecular function was mainly concentrated in the activity of adrenergic receptor，G protein coupled amine receptor，cytokine activity，nuclear receptor，transcription factor activity，etc.6）KEGG analysis enriched 17 signaling pathways，including PI3K AKT signaling pathway，neuroactive ligand receptor interaction，calcium signaling pathway，NF kappa B signaling pathway，cytokine cytokine receptor interaction，HIF-1 signaling pathway，p53 signaling pathway，cGMP-PKG signaling pathway.Conclusion：Epimedium-Morinda plays an important role in the treatment of erectile dysfunction by affecting PI3K AKT and other signaling pathways，and may be related to the mechanisms of reducing the activities of arginase，acetylcholinesterase and adenosine deaminase，increasing the level of NO，inhibiting the activity of PDE-5 and affecting the cell signaling.

Keywords Network pharmacology; Epimedium; Morinda; Couplet medicinals; Erectile dysfunction; Impotence; Target; PI3K AKT signaling pathway

中圖分類號(hào)：R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.15.011

勃起功能障礙（Erectile Dysfunction，ED）是指陰莖不能達(dá)到或不能維持充分的勃起而進(jìn)行滿意的性交的一類疾病，病程在6個(gè)月以上[1]。ED是男性最常見性功能障礙之一，有流行病學(xué)研究表明，ED主要影響40歲以上的男性其發(fā)病率隨年齡的增長而增高，70歲以上男性群體中發(fā)病率高50%以上[2]。ED的病因涉及多方面，如激素水平、神經(jīng)、內(nèi)分泌、血管、心理情緒狀態(tài)等[3-4]。目前西醫(yī)治療ED主要選用PDE-5抑制劑，雖然該藥治療ED臨床療效尚可，但治療成本相對(duì)較高，不良反應(yīng)亦較明顯。

ED在中醫(yī)學(xué)屬于“陽痿”范疇，中醫(yī)學(xué)依據(jù)其整體觀念及辨證論治的兩大特點(diǎn)治療陽痿有著自身不可替代的優(yōu)勢(shì)。陽痿發(fā)病以腎虛為本，治宜溫補(bǔ)腎陽，巴戟天-淫羊藿為溫腎強(qiáng)陽起痿之良藥，但具體的作用機(jī)制尚不明確。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作為一種較為科學(xué)、新興的研究方法，整合了系統(tǒng)生物學(xué)、網(wǎng)絡(luò)分析、藥理學(xué)等多學(xué)科技術(shù)，通過多靶點(diǎn)、多通路來探究藥物與疾病的關(guān)聯(lián)性，具有系統(tǒng)性及整體性的特點(diǎn)，與中醫(yī)學(xué)整體觀念相契合。因此，我們基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)挖掘淫羊藿-巴戟天治療ED的有效活性成分、作用靶點(diǎn)和關(guān)鍵通路，并進(jìn)一步探討其治療ED的潛在機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 篩選淫羊藿-巴戟天藥對(duì)活性成分和潛在作用靶點(diǎn)

在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（TCMSP）數(shù)據(jù)庫（http：//tcmspw.com/tcmsp.php）和中藥分子機(jī)制的生物信息學(xué)分析工具BATMAN-TCM中檢索巴戟天，淫羊藿，收集其化學(xué)成分以及靶點(diǎn)信息，設(shè)定成分篩選條件為口服生物利用度（OB）≥30%，類藥性（DL）>0.18[5]，篩選出有效活性成分及其作用靶點(diǎn)。

1.2 勃起功能障礙靶點(diǎn)篩選

以“Erectile Dysfunction”為關(guān)鍵詞，在GeneCard（https：//www.genecards.org/）數(shù)據(jù)庫和OMIM數(shù)據(jù)庫（https：//www.omim.org/）和NCBI基因人類數(shù)據(jù)庫（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/）進(jìn)行檢索。合并篩重后獲得勃起功能障礙疾病的相關(guān)靶點(diǎn)。

1.3 藥對(duì)-疾病共同靶點(diǎn)及網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將篩選過的“淫羊藿-巴戟天”藥對(duì)靶點(diǎn)和ED靶點(diǎn)輸入韋恩圖制作軟件Venny 2.1繪制韋恩圖并獲取藥對(duì)-疾病共同靶點(diǎn)，這些靶點(diǎn)基因可認(rèn)為是“淫羊藿-巴戟天”藥對(duì)治療ED的潛在靶點(diǎn)。利用cytoscape軟件構(gòu)建藥物-活性成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖。

1.4 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及拓?fù)浞治?/p>

將獲取到的藥對(duì)-疾病共同靶點(diǎn)基因上傳到STRING在線基因數(shù)據(jù)庫（https：//string-db.org/），物種選擇為人類（Homo sapiens），構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)。將PPI網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)入Cystoscap 3.7.2中，通過NetworkAnalyzer工具進(jìn)行拓?fù)浞治?，以Degree，Betweenness centrality，average shortest path length 和closeness centrality這4個(gè)參數(shù)為參考標(biāo)準(zhǔn)，通過Degree排序，選取分值大于平均分的基因作為關(guān)鍵靶點(diǎn)。并利用軟件內(nèi)置插件MCODE，分析PPI網(wǎng)絡(luò)，進(jìn)行關(guān)鍵核心通路過程描述。

1.5 基因本體（GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書（KEGG）富集分析

將“淫羊藿-巴戟天”藥對(duì)治療ED的潛在靶點(diǎn)基因?qū)隦3.6.3軟件進(jìn)行GO、KEGG富集分析。GO功能分析主要用于描述基因靶點(diǎn)的功能，其中包括細(xì)胞功能、分子功能和生物功能。藥對(duì)和ED共同靶點(diǎn)所富集的信號(hào)通路則可通過KEGG富集分析得到。GO和KEGG分析均以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 篩選淫羊藿-巴戟天藥對(duì)活性成分和潛在作用靶點(diǎn)

巴戟天篩選出20個(gè)化學(xué)成分，43個(gè)靶點(diǎn);淫羊藿篩選出23個(gè)化學(xué)成分，202個(gè)靶點(diǎn)。合并刪重后，得到203個(gè)靶點(diǎn)。其中有效成分包括槲皮素、山柰酚、谷甾醇、木犀草素等。見表1。

2.2 勃起功能障礙疾病靶點(diǎn)篩選

經(jīng)過檢索，在OMIM數(shù)據(jù)庫檢索到80個(gè)相關(guān)的基因，在GeneCards數(shù)據(jù)庫檢索到926條相關(guān)基因，NCBI基因數(shù)據(jù)庫得到87個(gè)基因，將這3個(gè)數(shù)據(jù)庫的基因合并刪重之后，得到1 004個(gè)勃起功能障礙相關(guān)基因。

2.3 藥對(duì)-疾病共同靶點(diǎn)預(yù)測(cè)及網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將篩選出的藥對(duì)靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)輸入韋恩圖制作軟件Venny 2.1，得到75個(gè)共有靶點(diǎn)。見圖1。藥物與疾病的交集靶點(diǎn)共75個(gè)，即淫羊藿-巴戟天治療ED的潛在靶點(diǎn)。為了更好的理解中藥、成分與其相應(yīng)靶點(diǎn)之間的復(fù)雜相互作用關(guān)系，以納入的復(fù)方中藥、對(duì)應(yīng)的中藥成分、治療疾病以及作用靶點(diǎn)為基礎(chǔ)，構(gòu)建了中藥-成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。見圖2。

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及拓?fù)浞治?/p>

將疾病ED的靶點(diǎn)與藥對(duì)淫羊藿-巴戟天的靶點(diǎn)進(jìn)行合并取得交集，從而得到了75個(gè)藥對(duì)治療疾病的交集靶點(diǎn)。運(yùn)用String數(shù)據(jù)庫導(dǎo)入這75個(gè)靶點(diǎn)，其物種選擇為“人”，得到PPI網(wǎng)絡(luò)圖。見圖3。PPI網(wǎng)絡(luò)圖中共有節(jié)點(diǎn)75個(gè)，687條邊，平均節(jié)點(diǎn)度18.3，其中節(jié)點(diǎn)表示靶標(biāo)蛋白，邊則代表蛋白和蛋白之間的關(guān)系。通過Degree排序，選取分值大于平均分18分的基因作為關(guān)鍵靶點(diǎn)，總共篩選出30個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)，將這30個(gè)靶點(diǎn)使用R 3.6.3進(jìn)行圖片繪制。見圖4。IL6、VEGFA、CASP3、CXCL8、IL1B、NOS3、CCL2、APP、ESR1、SERPINE1、ICAM1、CRP、CXCL10、IL2、VCAM1、IL4、HMOX1、MPO、CASP8、BCL2L1、IFNG、TGFB1、SELE、ACHE、SOD1、AR、CD40LG、F3、NOS2、OPRM1;結(jié)果表明以上這30個(gè)靶點(diǎn)可能是淫羊藿-巴戟天治療ED的核心靶點(diǎn)基因，說明這些靶點(diǎn)基因可能在治療勃起功能障礙中發(fā)揮著重要作用。

2.5 GO富集分析

將藥物疾病共有靶點(diǎn)進(jìn)行GO的生物過程（BP）、分子功能（MF）、細(xì)胞組分（CC）富集，引用DAVID數(shù)據(jù)庫，將校正P值<0.05的項(xiàng)目進(jìn)行篩選，總共富集到1 593條生物過程，80項(xiàng)分子功能相關(guān)，63項(xiàng)細(xì)胞組成相關(guān)。使用R 3.6.3進(jìn)行柱狀圖（圖5）和氣泡圖繪制（圖6）。GO分析結(jié)果提示淫羊藿-巴戟天藥對(duì)治療勃起功能障礙的基因生物過程（BP）顯著富集在對(duì)脂多糖的反應(yīng)、對(duì)細(xì)菌來源分子的反應(yīng)、循環(huán)系統(tǒng)中的血管反應(yīng)、對(duì)抗生素的反應(yīng)、第二信使介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、管徑調(diào)節(jié)、血管大小的調(diào)節(jié)、血管直徑的調(diào)節(jié)、管尺寸調(diào)節(jié)、G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)途徑，偶聯(lián)環(huán)核苷酸第二信使等過程;細(xì)胞組分（CC）主要富集在膜筏、膜微區(qū)、膜區(qū)、突觸前膜及后膜等部位;在分子功能（MF）主要富集在腎上腺素能受體活性、G蛋白偶聯(lián)胺受體活性、細(xì)胞因子活性、核受體活性、轉(zhuǎn)錄因子活性等。

2.6 KEGG富集通路分析

將藥物疾病共有靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析，引用String數(shù)據(jù)庫，將校正P值<0.05的項(xiàng)目進(jìn)行篩選，總共富集到PI3K-AKT信號(hào)通路、神經(jīng)活性配體受體相互作用、鈣信號(hào)通路、核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路、細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用、HIF-1信號(hào)通路、p53信號(hào)通路、cGMP-PKG信號(hào)通路等17條信號(hào)通路。見表2。其中PI3K-AKT信號(hào)通路為擊中靶點(diǎn)最多的通路，具體靶點(diǎn)包括：CHRM1、CHRM2、BCL-2、CASP9、CDK2、IKBKB、VEGFA、BCL2L1、IL-6、IL-2、IL-4、NOS3、COL1A1、IGF-2，淫羊藿-巴戟天對(duì)ED的治療作用可能是通過影響此通路而實(shí)現(xiàn)的。并將信號(hào)通路使用R 3.6.3進(jìn)行柱狀圖（圖7）和氣泡圖（圖8）繪制。并繪制PI3K-AKT信號(hào)通路作用機(jī)制圖（圖9）。

3 討論

隨著年齡的增長，ED發(fā)病率逐漸升高，老齡是ED發(fā)病的重要因素。從腎論治陽痿理論來源于《黃帝內(nèi)經(jīng)》中“腎藏精”“足少陰之筋，起于小指之下……結(jié)于陰器”“腎者，作強(qiáng)之官，伎巧出焉”?！吨T病源候論·卷四》：“腎開竅于陰，若勞傷于腎，腎虛不能榮于陰器，故痿弱也?！惫手侮栶舳嘤脺仃栄a(bǔ)腎之品?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》曰“淫羊藿主陰痿絕傷，莖中痛，利小便，益氣力，強(qiáng)志”，淫羊藿主入肝腎二經(jīng)，性辛甘而溫，故甘溫而溫腎補(bǔ)陽，為起痿之要藥;《神農(nóng)本草經(jīng)》曰“巴戟天主大風(fēng)邪氣，陰痿不起，強(qiáng)筋骨，安五臟，補(bǔ)中增志益氣”，巴戟天性辛甘微溫，入肝腎二經(jīng)，溫腎助陽、強(qiáng)筋健骨，主治命火不足、腎陽虛衰之陽痿、腰痛，為補(bǔ)腎助陽之良藥。臨床上常將兩藥合用治療腎陽虧虛之陽痿[6]。

淫羊藿-巴戟天治療ED的有效成分主要包括槲皮素、山柰酚、谷甾醇、木犀草素等。槲皮素與木樨草素是一種天然黃酮類化合物，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)它具有多重生物活性，如抗氧化、抗病毒、抗炎等作用[7]。研究表明槲皮素能降低精氨酸酶、乙酰膽堿酯酶和腺苷脫氨酶的活性，上調(diào)NO水平[8]。在陰莖勃起過程中，脂溶性的NO直接進(jìn)入海綿體SMC內(nèi)，激活鳥苷酸環(huán)化酶（cGMP），cGMP水平不斷增加，并調(diào)節(jié)SMC細(xì)胞膜上Ca2+、K+等通道，進(jìn)而SMC得到完全舒張，增加陰莖動(dòng)脈血流量，大量血液進(jìn)入海綿竇從而牽拉白膜使靜脈回流受壓以達(dá)到堅(jiān)挺勃起[9]。槲皮素對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠陰莖組織PDE5、精氨酸酶、AChE和ACE活性均有抑制作用[10]。Lines和Ono[11]報(bào)道槲皮素顯著降低PDE-5體外活性。此外，槲皮素的抑制作用與其結(jié)構(gòu)有關(guān)，槲皮素中碳-5和碳-7處的羥基增加了對(duì)PDE-5活性的抑制作用。黃酮類化合物對(duì)PDE-5活性的抑制作用將增加cGMP的水平，可能觸發(fā)陰莖平滑肌松弛、動(dòng)脈擴(kuò)張和陰莖勃起[12]。有研究表明山柰酚可顯著增加大鼠陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞的增殖[13]。和正常對(duì)照組勃起組織的40%～60%相比，ED患者勃起組織中的平滑肌含量僅占10%～36%，其中42.3%平滑肌細(xì)胞有顯著的病理改變[14]。海綿體平滑肌數(shù)量減少，結(jié)締組織數(shù)量增加可導(dǎo)致勃起功能障礙的發(fā)生。陰莖海綿體平滑肌在陰莖勃起過程中發(fā)揮著很重要的作用[15]。β-谷甾醇屬于植物甾醇類，廣泛存在于自然界中的各種植物油、堅(jiān)果等植物種子中，也存在于某些植物藥中。有研究通過性經(jīng)驗(yàn)不足的成年雄性大鼠口服β-谷甾醇，研究結(jié)果表明與對(duì)照組大鼠相比顯著改善勃起功能[16]。

在篩選的潛在靶點(diǎn)中，關(guān)鍵靶點(diǎn)分別是白細(xì)胞介素-6（IL-6）、血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）、細(xì)胞凋亡蛋白-3（CASP3）。白細(xì)胞介素-6是一種功效廣泛的多效性細(xì)胞因子。有報(bào)道顯示ED患者血液中的IL-6表達(dá)異常[17]，其可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞中的炎癥基因轉(zhuǎn)錄并抑制內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）表達(dá)[18];eNOS作為陰莖勃起過程中的一種重要信號(hào)分子，ED的發(fā)生與其產(chǎn)生減少相關(guān)[19]。此外，陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞（CSMCs）和上皮細(xì)胞（ECs）是勃起組織中的重要成分，CSMCs和ECs發(fā)生萎縮、纖維化和凋亡等變化時(shí)，會(huì)引起海綿體組織的充血異常而導(dǎo)致ED的發(fā)生[20-21]。有研究表明CSMCs和ECs中的IL-6表達(dá)增高[22]，這也說明炎癥介質(zhì)過表達(dá)可能會(huì)引起CSMCs的炎性損傷，從而其舒縮功能受限，以及增加ECs的通透性進(jìn)而加重血管炎性病變，從而對(duì)勃起功能產(chǎn)生影響而導(dǎo)致ED發(fā)生。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是一種參與血管生成的細(xì)胞因子，它可以刺激生成NO，而NO也可能刺激產(chǎn)生VEGF。VEGF與NO之間的相互作用可能是通過缺氧、損傷等因素使血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞中VEGF的表達(dá)增加，而表達(dá)增加的VEGF通過自分泌或旁分泌的方式作用于內(nèi)皮細(xì)胞，從而增加內(nèi)皮細(xì)胞中NO的產(chǎn)生，增加的NO又反過來作用于缺氧的平滑肌細(xì)胞使VEGF的表達(dá)降低[23]。VEGF對(duì)ED的影響除了通過血管生成作用，還很可能是通過增加NOS的表達(dá)，以及升高NO水平、神經(jīng)遞質(zhì)增高等作用來實(shí)現(xiàn)的[24]。細(xì)胞凋亡蛋白3（Caspase3）在血管平滑肌明顯表達(dá)，是細(xì)胞凋亡過程的主要執(zhí)行者，是各凋亡通路下游進(jìn)行底物酶解的共同的關(guān)鍵蛋白酶[25]。研究顯示，從糖尿病性ED大鼠陰莖平滑肌組織中Caspase3表達(dá)升高，介導(dǎo)了陰莖平滑肌細(xì)胞的凋亡[26]。

從結(jié)果可以得出，在PI3K-AKT信號(hào)通路中共涉及14個(gè)靶點(diǎn)，淫羊藿-巴戟天對(duì)ED是治療作用可能主要是通過此通路實(shí)現(xiàn)的。PI3K-AKT信號(hào)通路的失調(diào)與多種人類疾病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)[27]，并在細(xì)胞生長、增殖、分化的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用[28]。陰莖海綿體松弛是陰莖勃起機(jī)制中的一個(gè)重要因素;陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞（CCSMCs）中的縫隙連接（GJs）使陰莖勃起期間快速興奮和同步收縮[29]。在缺氧條件下，CCSMCs和血管內(nèi)皮細(xì)胞上調(diào)血小板源性生長因子（PDGF），通過與PDGFR結(jié)合，激活PI3K/AKT信號(hào)通路，刺激p-AKT的表達(dá)。反過來，p-AKT誘導(dǎo)下游因子β-catenin的表達(dá)，后者調(diào)節(jié)Cx43在細(xì)胞核的表達(dá)，從而改變GJs的功能。GJs是一種六聚體，由圍繞親水通道的6個(gè)Cx單體組成。大多數(shù)未興奮的陰莖平滑肌細(xì)胞經(jīng)歷了3個(gè)相互關(guān)聯(lián)的階段：自主神經(jīng)控制的陰莖勃起、GJs調(diào)節(jié)的平滑肌細(xì)胞同步收縮和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[30]。GJ結(jié)構(gòu)的損傷可導(dǎo)致ED。PI3K-AKT信號(hào)通路與Cx43密切相關(guān)[31-32]。Cx43是CCSMC GJs的主要成分[33]，是人類中表達(dá)最廣泛的Cx。Cx43由于其短暫的半衰期，在調(diào)節(jié)細(xì)胞間GJs方面發(fā)揮了關(guān)鍵作用[34]。ED患者CC中Cx43的表達(dá)和分布異常，提示Cx43與缺氧誘導(dǎo)ED密切相關(guān)[35]。

綜上所述，淫羊藿-巴戟天藥對(duì)治療勃起功能障礙，主要通過影響PI3K-AKT等信號(hào)通路發(fā)揮作用，同時(shí)可能與降低精氨酸酶、乙酰膽堿酯酶和腺苷脫氨酶的活性，上調(diào)NO水平，抑制PDE-5活性及影響細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等機(jī)制相關(guān)。運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的這一新興方法探究淫羊藿-巴戟天藥對(duì)治療ED的潛在作用機(jī)制，為臨證治療ED提供新思路和依據(jù)。本研究是對(duì)淫羊藿-巴戟天藥對(duì)治療ED的機(jī)制的初探，其具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究證實(shí)。

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（2020-09-21收稿 責(zé)任編輯：楊覺雄）

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81774320）

作者簡介：張圭珍（1987.03—），男，博士研究生在讀，住院醫(yī)師，研究方向：中醫(yī)男科學(xué)，E-mail：2865776671@qq.com

通信作者：李海松（1960.01—），男，博士，主任醫(yī)師，研究方向：中醫(yī)男科學(xué)，E-mail：1028bj@sina.com