曹顯永

摘? 要：為掌握中越邊境地區(qū)禽流感流行趨勢，2013年10月～2020年10月對轄區(qū)內(nèi)活禽銷售市場進(jìn)行系統(tǒng)監(jiān)測。監(jiān)測結(jié)果顯示：活禽市場內(nèi)常年都有病毒循環(huán)，呈多亞型病毒共存狀態(tài);環(huán)境樣品的陽性率高達(dá)30.82%，家禽樣品陽性率為20.77%。市場調(diào)查發(fā)現(xiàn)：東興市的活禽銷售市場規(guī)模不大而交易頻繁;市場交易活禽主要來自本地小型養(yǎng)殖場、廣西其他地區(qū)活禽交易批發(fā)市和規(guī)模養(yǎng)殖場以及邊境走私家禽;活禽市場生物安全措施不到位，也未嚴(yán)格執(zhí)行休市制度。監(jiān)測和調(diào)查結(jié)果表明，東興市活禽銷售市場管理水平低，家禽來源復(fù)雜;市場環(huán)境污染嚴(yán)重，多種亞型禽流感病毒共存，且存在家禽隱性帶毒現(xiàn)象，因而有病毒散播風(fēng)險(xiǎn)。因此需要加強(qiáng)禽流感監(jiān)測力度，提高活禽市場的管理水平和生物安全措施。

關(guān)鍵詞：活禽市場;禽流感病毒;監(jiān)測;流行病學(xué)調(diào)查;東興市

中圖分類號：S858.311.3? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B? ? ? ? 文章編號：1673-1085（2021）7-0033-04

東興市位于廣西壯族自治區(qū)南部，臨海臨邊，東南瀕臨北部灣，西南與越南接壤。東興活禽市場家禽交易頻繁，市場不休市，未銷售完的家禽會滯留在此數(shù)日，大量不同來源的雞、水禽、野鳥等在同一空間共處，給禽流感病毒基因變異、基因重組、跨種傳播提供了便利。為摸清東興市活禽市場家禽禽流感和市場帶毒情況，2013年以來國家和自治區(qū)就在東興市開展禽流感監(jiān)測和流行學(xué)調(diào)查工作，本研究對2013年10月～2020年10月東興市活禽市場禽流感監(jiān)測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，以期掌握東興市活禽市場禽流感流行狀況。

1 材料與方法

1.1 材料

H1～H16 亞型禽流感標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供;RNA 提取試劑盒 TaKaRa Mini BEST Viral RNA/DNA Extraction KitVer.5.0，購自大連寶生物工程有限公司;禽流感病毒熒光PCR 試劑盒（H1～H16亞型），購自上海之江生物科技股份有限公司;SPF 雞胚，購自北京梅里亞維通實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司。

1.2 方法

1.2.1 采樣地點(diǎn) 東興市轄區(qū)內(nèi)的6個(gè)活禽銷售市場。

1.2.2 采樣方法 對6個(gè)活禽銷售市場全部采樣，每個(gè)市場采集約100份家禽拭子（水禽80份、雞20份）和20份環(huán)境拭子。每季度1次。

1.2.3 流行病學(xué)調(diào)查 在采集樣品的同時(shí)，收集市場基本信息，包括樣品來源、家禽流通情況以及生物安全管理狀況等數(shù)據(jù)。

1.2.4 病毒分離和鑒定 在哈爾濱國家禽流感參考試驗(yàn)室進(jìn)行。將拭子樣品接種SPF雞胚進(jìn)行增毒，再用血凝試驗(yàn)（HA）、血凝抑制試驗(yàn)（HI）和熒光RT-PCR 方法鑒定流感病毒及亞型。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)分析 用Microsoft excel 軟件，統(tǒng)計(jì)分析樣品的病毒分離及亞型鑒定結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 廣西邊境地區(qū)活禽市場禽流感監(jiān)測結(jié)果

2.1.1 禽流感病毒分離情況 從2013年10月～2020年10月份，共進(jìn)行了25次采樣，共采集樣品3513份，共分離到禽流感病毒763株，陽性率達(dá)21.72%，分離到病毒亞型有H1、H3、H4、H6、H7、H9、H10和H11等多種亞型，其中以H3、H6和H9亞型最多。在763株禽流感病毒中，在市場環(huán)境中分離到102株，陽性率為30.82%（102/331）;在家禽中分離到661株，陽性率為20.77%（661/3182）。

2.1.2 群間分布 分離出病毒的陽性樣品來源包括雞、鴨、鵝和環(huán)境，其中水禽樣品的陽性率顯著高于雞（圖1）。

不同種類的家禽分離出禽流感病毒亞型及陽性率有所不同。雞源樣品分離到H3、H4、H6、H7、H9、H10等亞型病毒，陽性率為10.71%（156/1456）;鴨源樣品分離到H1、H3、H6、H7、H9、H11等亞型病毒，陽性率為32.13%（408/1270）;鵝源樣品分離到H3、H6、H9等亞型病毒，陽性率為21.27%（97/456）。

2.1.3 市場禽流感病毒時(shí)間分布情況 如果按季節(jié)區(qū)分，春季病毒分離率為16.14%（113/700），夏季為13.13%（125/952），秋季為18.70%（43/230），冬季為29.55%（482/1631），夏季的病毒分離率最低，顯著低于冬季。因此，東興市活禽市場一年四季都有病毒在循環(huán)。10～12月份樣品的陽性率處在一個(gè)較高的水平，3～6月份樣品的陽性率要低得多，詳見圖2。

2.2 活禽銷售市場基本狀況

2.2.1 家禽貿(mào)易 東興市民日常以活禽消費(fèi)為主，活禽貿(mào)易比較頻繁，呈常態(tài)化?；钋蒌N售市場每天都開放，未銷售完的家禽都會在市場留存過夜。東興市行政區(qū)域面積小，下轄3個(gè)鎮(zhèn)，2020年末常住人口16.54萬，活禽年交易量在40萬只左右，每個(gè)活禽市場每日交易量在幾十到幾百只之間。東興市活禽銷售市場的家禽來源：①本地養(yǎng)殖場（戶）：2020年東興市全年家禽出欄量為46萬羽，年未存欄60萬羽;有小規(guī)模養(yǎng)場50個(gè);由于海鴨蛋產(chǎn)品暢銷，東興市鴨的養(yǎng)殖數(shù)量達(dá)40萬～50萬，在家禽中占比較大;②區(qū)內(nèi)規(guī)模養(yǎng)殖場：主要來自相鄰的欽州、北海、南寧等市的規(guī)模養(yǎng)殖場，由養(yǎng)殖場定期送貨;③區(qū)內(nèi)各大活禽批發(fā)市場：包括南寧、玉林、欽州和貴港等市的大型活禽批發(fā)市場，主要是商販自行到防城港市防城區(qū)的活禽交易批發(fā)市場進(jìn)貨;④走私活禽、走親訪友攜帶活禽入境的行為時(shí)有發(fā)生，存在越南活禽流入市場的隱患。

2.2.2 活禽銷售市場的管理 市場準(zhǔn)入制度不完善，沒有安排專人對市場內(nèi)的活禽進(jìn)行查證驗(yàn)物，市場監(jiān)管機(jī)制存在欠缺。市場休市制度落實(shí)不到位，配備消毒、無害化處理設(shè)施設(shè)備不足，籠子器具清潔消毒不徹底。目前，東興市已有1個(gè)活禽市場完成升級改造，商戶之間分隔開，每戶內(nèi)部又設(shè)置獨(dú)立的銷售、待宰、屠宰“三分區(qū)”，地面墻壁鋪設(shè)瓷磚方便清洗消毒，這類設(shè)施改造將有利于切斷病原在活禽市場的循環(huán)，對禽流感防控起到積極作用。

3 討論

東興市活禽銷售市場禽流感病毒陽性率為21.27%，顯著高于廣西邊境地區(qū)活禽市場禽流感病毒平均陽性率15.95%，市場環(huán)境陽性率（30.82%）也顯著高于廣西邊境地區(qū)（23.65%）（鄒聯(lián)斌等，2018）[1]，這說明東興市活禽銷售市場流感病毒污染非常嚴(yán)重，這和活禽銷售市場老舊和長期不休市、不清洗消毒有很大關(guān)系。

監(jiān)測結(jié)果顯示，東興市活禽銷售市場出現(xiàn)多種亞型禽流感病毒共存的現(xiàn)象，不同亞型的流感病毒長期在市場里循環(huán)增殖，容易發(fā)生基因重組而變異，需要引起高度重視。

監(jiān)測結(jié)果顯示，在東興市活禽銷售市場中H3、H6和H9亞型禽流感病毒為優(yōu)勢毒株，而亞型H3、H6禽流感病毒又以水禽來源為主，雞源H9亞型禽流感病毒也遠(yuǎn)高于水禽。表明一些亞型AIV對宿主有一定的偏嗜性，這結(jié)論與莫?jiǎng)偬m[2]、黃建龍[3]等人研究結(jié)論一致。監(jiān)測結(jié)果也揭示水禽是流感病毒的重要宿主。雖然2013年12月和2014年10月兩次在鴨體內(nèi)分離到H7亞型禽流感病毒，但最終鑒定不是高致病性H7N9禽流感，而是常見的低致病性H7亞型禽流感。今后，我中心將繼續(xù)配合上級部門，以便更好地開展高致病性禽流感疫情風(fēng)險(xiǎn)評估工作。

根據(jù)東興市歷年氣象統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，12月至次年2月是一年中溫度較低的時(shí)期，其中1月份的平均氣溫最低。低溫有利于禽流感病毒的生存。但監(jiān)測結(jié)果顯示，10月和11月份的病毒分離率最高，這說明氣溫不是決定AIV分布的唯一因素，需要綜合考慮社會、環(huán)境和經(jīng)濟(jì)等多方面因素。

4 結(jié)論

經(jīng)過長期系統(tǒng)的流行病學(xué)調(diào)查和監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，東興市活禽銷售市場禽流感病毒污染嚴(yán)重，多種亞型病毒共存;市場上家禽交易頻繁、來源復(fù)雜，且市場管理水平低、生物安全措施不到位;加之東興市處于邊境和候鳥遷徙線上，地理位置特殊。因此，需要對東興市的禽流感防控多加關(guān)注，加強(qiáng)禽流感監(jiān)測力度，推行活禽市場升級改造，提高市場監(jiān)管力度。

參考文獻(xiàn)：

[1] 鄒聯(lián)斌，莫?jiǎng)偬m，屈素潔，等.廣西邊境地區(qū)活禽批發(fā)市場禽流感流行病學(xué)監(jiān)測[J].中國動物檢疫，2018，35（05）：1-4.

[2] 莫?jiǎng)偬m，尹彥文，施開創(chuàng)，等.廣西邊境地區(qū)家禽H9亞型流感病毒調(diào)查[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2018，40（09）：775-778.

[3] 黃建龍，王昌建，鄧國華，等.2015-2016年湖南省長沙市活禽批發(fā)市場禽流感流行病學(xué)調(diào)查[J].中國動物檢疫，2018，35（02）：5-8.

Abstract： In order to recognize the situation of Avian influenza in China-Vietnam border areas，a systematic monitoring towards AIV infection in live birds markets（LBMs）of Dongxing city was carried out during October 2013 to October 2020. The surveillance results showed that LBMs in Dongxing were seriously polluted by AIV，and multiple subtypes of AIV coexisted. the positive rate of environmental samples was 30.82%，while the positive rate of? birds samples was 20.77%. The market survey showed that LBMs in Dongxing were small-scale but the trading frequency was high. Birds in these LBMs were mainly from local small-scale farms，live birds wholesale markets and large-scale farms from other areas of Guangxi or other countries outside of China（by cross-border smuggling）. LBMs in Dongxing had poor bio-security measures， and closing-market system was not implemented strictly. Monitoring and survey results showed that management level of LBMs was low，and the sources of live poultry were complex. AIV pollution in these LBMs was serious，the multiple virus subtypes were accumulating in the markets for a long time，and the phenomenon of recessive infection existed，indicating there was a risk of virus spreading. Therefore，it was necessary to intensify the monitoring of AIV and to improve management and? bio-security measures in these LBMs.

Keywords： LBMs ; AIV ; surveillance ; epidemiological survey ; Dongxing