■陳 婷 韓冰瑩 孫雪飄 付莉莉 譚德冠 張家明，3*

（1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，江蘇南京 210059；2.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所，海南海口 571101；3.海南省熱帶生物質(zhì)能源工程技術(shù)研究中心，海南海口 571101）

羅非魚屬麗魚科羅非魚屬，原產(chǎn)于非洲，別名福壽魚、非洲鯽魚、南洋鯽等。其生長速度快，食性雜，抗病力強(qiáng)，適應(yīng)性廣，可在淡水或半咸水池塘及網(wǎng)箱中高密度集約化養(yǎng)殖。羅非魚肉質(zhì)鮮美嫩滑，刺少，烹飪方式多樣，深受廣大消費(fèi)者的喜愛，被譽(yù)為未來動物性蛋白質(zhì)的主要來源之一，是一種優(yōu)良的水產(chǎn)品種[1]。根據(jù)美國亞利桑那大學(xué)Fitzsimmons教授測算，2020年全球羅非魚產(chǎn)量為693萬噸。雖然受新冠疫情和中美貿(mào)易戰(zhàn)的影響，2020年，中國羅非魚年總產(chǎn)量雖然比2019年有所下降（3%），但仍是羅非魚第一生產(chǎn)大國，總產(chǎn)量達(dá)到170萬噸，占世界羅非魚總產(chǎn)量的24.5%[2]。根據(jù)2017年統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，中國羅非魚產(chǎn)量占全國淡水養(yǎng)殖魚類產(chǎn)量的5.45%[1]。在全國26個養(yǎng)殖羅非魚的?。▍^(qū)）中，廣東、海南、廣西、云南、福建5?。▍^(qū)）由于氣候適宜，是我國羅非魚主產(chǎn)區(qū)，總產(chǎn)量占全國的90%[3]。

在羅非魚養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展的同時(shí)，羅非魚飼料的需求量也不斷增加，飼料蛋白源日趨緊張，飼料成本逐年提高。如何提高水產(chǎn)動物對各類蛋白源的利用率，降低養(yǎng)殖成本越來越引起人們的關(guān)注[4]。篩選成本更低、安全性更有保障的蛋白質(zhì)替代品是重要的研究方向。

浮萍是常見的水生飼料植物，全球共有5屬37種[5-6]。廣泛分布于河流、湖泊和稻田，具有生長速度快、營養(yǎng)價(jià)值高的特點(diǎn)[7-8]。其蛋白質(zhì)含量高，氨基酸組成平衡，是很有前景的植物蛋白源。目前已作為飼料蛋白源被廣泛研究應(yīng)用[9-10]。多年來，以色列和孟加拉國的農(nóng)民種植浮萍作為魚飼料，或?qū)⒑娓傻母∑汲隹跉W洲，據(jù)說產(chǎn)值是種水稻的10倍[11]。此外，浮萍還可利用養(yǎng)殖廢水和市政廢水作為肥料生長繁殖，在凈化水質(zhì)的同時(shí)積累生物質(zhì)[12-14]，是潛力巨大的新型非糧生物質(zhì)原料之一。

不過，野生浮萍的含水量高，通常為89%～91%，原生環(huán)境水體質(zhì)量一般較差，可能含有細(xì)菌和寄生蟲，因此，直接飼喂禽畜等動物有一定風(fēng)險(xiǎn)[4]，通常采用人工養(yǎng)殖的浮萍作為飼料原料。

本研究測試在羅非魚基礎(chǔ)飼料中添加不同比例的人工養(yǎng)殖的紫萍新品種中萍4701的干粉，研究其對羅非魚生長性能和消化酶活性的影響，為浮萍成為新型蛋白質(zhì)替代品提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

羅非魚幼魚購于海南省澄邁縣瑞溪鎮(zhèn)上瓊村幼魚養(yǎng)殖場。幼魚平均體質(zhì)量為（1.89±0.19）g/尾。養(yǎng)殖網(wǎng)箱規(guī)格為100 cm×100 cm×50 cm。浮萍干粉為本實(shí)驗(yàn)室的試驗(yàn)基地池塘大規(guī)模培育的海南本地篩選培育的高產(chǎn)、高蛋白浮萍品種中萍4701(Spirodela polyrhizaZP4701)?；A(chǔ)飼料為通威魚用配合飼料1038，購自通威集團(tuán)（中國成都）。

1.2 試驗(yàn)條件

試驗(yàn)所用3個池塘位于海南省海口市瓊山區(qū)永朗村，為南北走向的長方形池塘。每個池塘為25 m×10 m。池底淤泥厚約30 cm，池深1.5 m。平時(shí)水深保持在60 cm，進(jìn)排水使用潛水泵完成。2個池塘用于養(yǎng)殖浮萍，1個用于魚飼料對比試驗(yàn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 浮萍的收集與處理

從池塘定期撈取浮萍，用帶蓋的塑料桶封裝后運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。自來水清洗后裝入尼龍網(wǎng)袋，用甩干機(jī)甩干，然后置于烘干機(jī)中60℃烘干。使用粉碎機(jī)將其打磨成粉，過60目網(wǎng)篩，用塑封袋密封于低溫干燥柜中保存。

1.3.2 飼料的配制

以通威魚用配合飼料1038為對照飼料，經(jīng)檢測，該飼料含粗蛋白31.2%、粗脂肪8.35%、粗纖維4.2%、賴氨酸2%，是海南羅非魚養(yǎng)殖企業(yè)常用的配方飼料。將飼料顆粒用粉碎機(jī)打成粉，分別添加不同比例[0（對照組）、10%、15%、20%、25%和30%]的浮萍干粉，混合均勻，用制粒機(jī)制成直徑約3 mm的顆粒飼料。待飼料冷卻后分裝，于常溫下避光保存?zhèn)溆谩Ｃ看沃屏弦? d左右的投喂量為宜。

1.3.3 幼魚投放

幼魚投放前2 d，將池塘里的水抽出至深約30 cm，整齊安放網(wǎng)箱，確保固定養(yǎng)殖箱的竹竿足夠牢固。每個網(wǎng)箱內(nèi)投放大小均勻的羅非魚幼魚15尾。每種飼料喂3個網(wǎng)箱（3個重復(fù)），共18個網(wǎng)箱，其中以不添加浮萍的飼料為對照組。另外設(shè)置2個網(wǎng)箱養(yǎng)殖相同大小的候補(bǔ)幼魚，用來補(bǔ)充在開食前的適應(yīng)階段死亡的幼魚；開食后不再補(bǔ)充。

1.3.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)期間每天投喂相當(dāng)于魚體質(zhì)量3%的配方飼料，分兩次在上午9：00～10：00和下午17：00～18：00投喂。2～3 d換水1次，并不定時(shí)捕撈水面雜物，保持水面清潔。定期觀察魚的活動、攝食情況。若發(fā)現(xiàn)病魚，及時(shí)采取相應(yīng)的治療措施。養(yǎng)殖期間，每20 d稱重一次，根據(jù)羅非魚體質(zhì)量的變化，及時(shí)改變投喂量[15]。

1.3.5 生長指標(biāo)的測定

幼魚投放前測定并記錄初始體質(zhì)量。投放后停喂2 d，待羅非魚適應(yīng)池塘環(huán)境后開始喂食。飼養(yǎng)60 d后，停喂24 h，第2 d統(tǒng)計(jì)每個網(wǎng)箱內(nèi)羅非魚尾數(shù)并稱總重。計(jì)算增重率、成活率。每個網(wǎng)箱隨機(jī)取3尾接近平均體質(zhì)量的羅非魚，置于冰盒上，測量其體長、體質(zhì)量，計(jì)算特定生長率。取其內(nèi)臟及肝胰臟，用預(yù)冷的0.85%生理鹽水沖洗，濾紙吸干表面水分，稱重，計(jì)算肝體比、臟體比以及肥滿度。增重率（WGR）、特定生長率（SGR）、肝體比（HSI）、臟體比（VSI）、肥滿度（CF）和成活率（SR）通過下列公式計(jì)算[16]。

增重率（WGR，%）=（Wt-W0）/W0×100

特定生長率（SGR，%/d）=（lnWt-lnW0）/t×100

肥滿度（CF，g/cm3）=Wt/L3×100

肝體比（HSI，%）=Wh/W×100

臟體比（VSI，%）=Wv/W×100

成活率（SR，%）=100×（試驗(yàn)?zāi)~尾數(shù)/試驗(yàn)初魚尾數(shù)）

式中：Wt——魚終末體質(zhì)量(g)；

W0——魚初始體質(zhì)量(g)；

t——試驗(yàn)天數(shù)；

L——魚體體長(cm)；W——魚體質(zhì)量(g)；

Wh——魚體肝臟質(zhì)量(g)；

Wv——魚體內(nèi)臟質(zhì)量(g)。

1.3.6 消化酶活性的測定

消化器官樣品的采集：將魚體置于冰盒上解剖，分別取出胃、腸道、肝胰臟。剪除內(nèi)臟表面附著的脂肪，用預(yù)冷的4℃蒸餾水沖洗掉黏附的血塊以及內(nèi)臟內(nèi)容物，并用濾紙擦干。稱重后剪碎（精確至0.01 g），在液氮中速凍后，放在-80℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

酶液的制備：從-80℃的冰箱取出樣品，放入玻璃勻漿器中，加入適量的4℃蒸餾水，在冰浴中勻漿。用相當(dāng)于樣品重量10倍的4℃蒸餾水將勻漿液沖洗至離心管中，分3次進(jìn)行。然后在4℃條件下以6 000 r/min的轉(zhuǎn)速將組織勻漿液離心15 min。取上清液分裝，放在4℃冰箱中保存，在24 h內(nèi)測定完畢。蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性的測定采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒，按照使用說明書的步驟進(jìn)行測定。

1.3.7 飼料指標(biāo)測定

飼料在水中穩(wěn)定性（溶失率）測定：稱取試樣10 g(準(zhǔn)確至0.1 g)，放入自制的圓筒形網(wǎng)篩內(nèi)，置于水深5.5 cm的容器中，水溫為(25±2)℃。浸泡5 min后，把網(wǎng)篩從水中緩慢提至水面，又緩慢沉入水中，使飼料離開篩底，如此反復(fù)3次后取出網(wǎng)篩，瀝干水分。把網(wǎng)篩連同飼料置于105℃烘箱內(nèi)烘干至恒重，稱重。同時(shí)，稱一份未浸水的同樣飼料，置于105℃烘箱內(nèi)烘干至恒重，稱重。

樣品溶失率（%）=（樣品溶失前烘干重-樣品溶失后烘干重）/樣品溶失前烘干重×100

樣品含水量按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6435—2014直接干燥法進(jìn)行測定；水中穩(wěn)定性按照標(biāo)準(zhǔn)SC/T 1077—2004中漁用配合飼料通用技術(shù)要求進(jìn)行測定；灰分含量按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6438—2007馬弗爐灼燒法進(jìn)行測定；粗纖維含量按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6434—2006進(jìn)行測定；粗脂肪含量按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433—2006進(jìn)行測定；粗蛋白含量按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6432—2018凱氏定氮法進(jìn)行測定；氨基酸含量、微生物指標(biāo)及重金屬含量委托海南省檢驗(yàn)檢疫局的檢測中心檢測。其中氨基酸含量按照國標(biāo)GB/T 18246—2000測定，霉菌總數(shù)按照國標(biāo)GB/T 13092—2006檢測，沙門氏菌按照國標(biāo)GB/T 13091—2018檢測。總砷含量按照國標(biāo)GB/T 13079—2006檢測，鎘含量按照國標(biāo)GB/T 13082—1991檢測，汞含量按照國標(biāo)GB/T 13081—2006第一法檢測，鉛含量按照國標(biāo)GB/T 13080—2018檢測。

采用Excel計(jì)算三次重復(fù)的平均值和SPSS Sta?tistics 17軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行t測驗(yàn)，試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。檢驗(yàn)差異顯著性，顯著性水平為P<0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中添加浮萍對羅非魚幼魚生長的影響

幼魚投入網(wǎng)箱后停喂2 d，個別網(wǎng)箱有1～2條羅非魚死亡。推測是由于幼魚運(yùn)輸或?qū)Νh(huán)境不適應(yīng)造成的。補(bǔ)充養(yǎng)在同一池塘候補(bǔ)的幼魚。開食后沒有再出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，因此投喂飼料后，各處理的成活率均為100%。

飼料中添加不同比例的浮萍，對羅非魚幼魚的生長性能的影響（見表1）。由表1可知，在浮萍干粉添加比例為0～30%的范圍內(nèi)，隨著添加比例的提高，羅非魚終末體質(zhì)量、增重率、特定生長率、肥滿度、肝體比、臟體比等生長性能均呈先升高后下降的趨勢。添加20%浮萍干粉的飼料組，羅非魚幼魚終末體質(zhì)量、增重率、特定生長率、肥滿度、臟體比、肝體比等指標(biāo)都最高，分別比對照提高18.42%、19.61%、6.20%、20.37%、17.33%、395.00%，除臟體比外，均顯著高于對照組(P<0.05)。進(jìn)一步提高浮萍添加量，所有指標(biāo)都比添加20%浮萍的試驗(yàn)組下降，其中終末體質(zhì)量、增重率和特定生長率下降到與對照組相當(dāng)?shù)乃?。但肥滿度、肝體比和臟體比仍高于對照組。用添加浮萍的飼料養(yǎng)殖的羅非魚幼魚，其肝臟呈紫紅色，與對照組肝臟沒有區(qū)別。因此，添加浮萍后肝體比成倍增大不屬于肝腫大的病理現(xiàn)象。魚類不同生長時(shí)期肝體比會發(fā)生變化，養(yǎng)殖兩個月的羅非魚幼魚正處于快速生長時(shí)期，肝臟發(fā)育較快[17]。因此，在飼料中添加浮萍，促進(jìn)了肝臟的發(fā)育，這一點(diǎn)在后面的分析中還會提及。

表1 飼料中添加浮萍干粉對羅非魚幼魚生長性能的影響

2.2 飼料中浮萍干粉對羅非魚幼魚消化酶活性的影響

2.2.1 添加浮萍對羅非魚淀粉酶活性的影響（見圖1）

圖1 不同浮萍添加水平對羅非魚幼魚消化道淀粉酶活性的影響

由圖1所示，無論飼料中添加多大比例的浮萍，羅非魚胃中淀粉酶活性均遠(yuǎn)高于其他器官，肝胰臟次之，腸中的淀粉酶活性最低，說明胃可能是羅非魚消化淀粉的主要器官。浮萍添加比例對同一器官中淀粉酶活性有影響。隨著添加水平的升高，胃、腸、肝胰臟等3個器官中淀粉酶活性均呈先上升后下降的趨勢。其中，添加量為20%的飼料組，在胃、腸、肝胰臟中的淀粉酶活性都達(dá)最高值，分別比對照組高46.67%、81.81%、26.19%(P<0.05)。因此在飼料中適量添加浮萍干粉，可以促進(jìn)羅非魚消化道淀粉酶的分泌，提高飼料中淀粉的利用率。

2.2.2 添加浮萍對羅非魚幼魚蛋白酶活性的影響（見圖2）

圖2 不同浮萍添加水平對羅非魚幼魚消化道蛋白酶活性的影響

由圖2可知，用對照飼料飼喂羅非魚，胃中蛋白酶活性最高，肝胰臟次之，腸中最低。在飼料中添加10%的浮萍，顯著提升腸道蛋白酶活性，而胃及肝胰臟蛋白酶活性沒有顯著變化，結(jié)果導(dǎo)致3種器官中蛋白酶活性基本持平。當(dāng)浮萍添加比例達(dá)到20%時(shí)，胃、腸及肝胰臟中的蛋白酶活性都得到顯著增加（P<0.05），分別比對照組提高35.91%、127.87%、27.73%。當(dāng)浮萍添加量大于25%時(shí)，蛋白酶活性呈下降趨勢。說明在飼料中添加適當(dāng)比例的浮萍干粉，可以促進(jìn)羅非魚幼魚蛋白酶的分泌，添加比例以20%最佳。

2.2.3 添加浮萍對羅非魚幼魚脂肪酶活性的影響（見圖3）

圖3 不同浮萍添加水平對羅非魚幼魚消化道脂肪酶活性的影響

由圖3可知，用對照飼料喂養(yǎng)羅非魚幼魚，胃中脂肪酶活性遠(yuǎn)高于腸和肝胰臟。在飼料中添加10%～30%的浮萍干粉，對胃中脂肪酶活性沒有顯著影響，但顯著提高了添加15%～25%浮萍干粉時(shí)腸及肝胰臟的脂肪酶活性。隨著浮萍添加水平的升高，肝胰臟脂肪酶活性總體呈先上升后下降的趨勢，當(dāng)浮萍添加量為15%和20%時(shí)，肝胰臟脂肪酶活性分別比對照提高57.36%和64.64%（P<0.05)。當(dāng)添加量為25%，肝胰臟脂肪酶活性達(dá)到最高，較對照提高97.33%（P<0.05)。這一結(jié)果從酶活性的角度說明食用浮萍飼料的羅非魚肝胰臟脂肪酶活性高，表明肝胰臟中脂肪代謝率高[18]，說明前述研究所發(fā)現(xiàn)的肝體比增大不屬于肝腫大或者脂肪肝等病理現(xiàn)象，也說明在飼料中添加浮萍，促進(jìn)了肝臟的發(fā)育。腸道脂肪酶活性在浮萍不同添加水平間沒有顯著差異，但均顯著高于對照，其中30%添加量時(shí)活性最高，比對照提高了238.22%（見圖3）。

以上結(jié)果說明在飼料中添加浮萍干粉能顯著提高羅非魚幼魚腸道及肝胰臟脂肪酶活性。

3 討論

3.1 添加浮萍干粉飼料的營養(yǎng)價(jià)值、效用及安全性評價(jià)

木質(zhì)素一般為植物細(xì)胞壁中僅次于纖維素的組成成分。然而，浮萍科植物由于其木質(zhì)素合成相關(guān)代謝通路不活躍[19]，導(dǎo)致其細(xì)胞壁中木質(zhì)素含量很低[20]，因此，浮萍作為飼料容易被動物消化。與此同時(shí)，由于木質(zhì)素合成的弱化，木質(zhì)素合成的起始物苯丙氨酸流向了黃酮和黃酮類合成途徑[19]，導(dǎo)致浮萍富含黃酮類物質(zhì)[21]。而黃酮類對魚體的生長具有促進(jìn)作用，尤其是異黃酮類，具有抗氧化和促進(jìn)生長激素分泌的作用，因此能促進(jìn)魚類生長[22]。

浮萍20種氨基酸的組成與FAO所推薦的人類食物氨基酸最佳配比相似，具有促進(jìn)攝食的作用，可以被動物高效利用[23]。尤其是浮萍含有高含量的賴氨酸和含硫氨基酸。賴氨酸和含硫氨基酸等是養(yǎng)殖動物的必需氨基酸[24]。

營養(yǎng)成分測定結(jié)果表明，對照組及添加20%ZP4701干粉的飼料各項(xiàng)營養(yǎng)指標(biāo)均符合國家標(biāo)準(zhǔn)。添加20%ZP4701干粉的飼料中賴氨酸、含硫氨基酸、粗脂肪含量分別達(dá)到2.30%、1.10%和10.50%，比對照高12.7%、17.0%和26.5%（見表2）。但粗蛋白略低于對照飼料，為28.90%，比對照低7.4%，但仍高于國家標(biāo)準(zhǔn)（見表2）。ZP4701干粉的蛋白質(zhì)含量為40%，高于通威配方飼料中的31.20%，添加20%ZP4701干粉到飼料中，理論上蛋白質(zhì)含量應(yīng)該高于對照。其實(shí)際檢測結(jié)果低于對照的原因可能是飼料在再加工過程中，高溫導(dǎo)致部分蛋白質(zhì)損失。此類損失在前人研究中也有報(bào)道[25]。添加20%ZP4701干粉的飼料，其賴氨酸與含硫氨基酸的含量均略高于對照組飼料，這與ZP4701本身的氨基酸特性相符，其氨基酸含量均高于FAO（2010）推薦的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)。另外，對照飼料的溶失率和水分偏高，可能與對照飼料保存時(shí)間更長有關(guān)。

表2 飼料穩(wěn)定性及營養(yǎng)成分測定結(jié)果(%)

本研究發(fā)現(xiàn)，添加ZP4701干粉復(fù)合飼料保存一個月后，表觀顏色與對照飼料一致，顆粒大小均勻，無發(fā)霉變質(zhì)、結(jié)塊、蟲害現(xiàn)象，具有飼料正常氣味，無霉味和酸敗味。沙門氏菌、霉菌等是飼料中的主要微生物危害因素[26]。降低有害微生物指標(biāo)是提高飼料質(zhì)量與安全性的重要途徑。微生物學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果表明，添加ZP4701的復(fù)合飼料中沒有檢出沙門氏菌，霉菌總數(shù)為240 CFU/g，比對照組高，但遠(yuǎn)低于國家標(biāo)準(zhǔn)（見表3）。因此，添加20%ZP4701干粉的復(fù)合飼料在微生物指標(biāo)方面符合國家標(biāo)準(zhǔn)要求。

表3 飼料微生物學(xué)檢測結(jié)果

砷、鎘、鉛和汞是影響動物健康的四類主要重金屬元素[27]，動物及人類與其進(jìn)行微量接觸就可能產(chǎn)生明顯的傷害，因此被稱作“有毒貴金屬”[28]。飼料中重金屬超標(biāo)會給人類以及環(huán)境帶來嚴(yán)重危害，因此在飼料加工中必須十分重視這一問題。重金屬含量測定結(jié)果表明，對照組及添加20%ZP4701的飼料中砷、鎘、鉛和汞均遠(yuǎn)低于國家標(biāo)準(zhǔn)（見表4）。說明飼料中添加20%的ZP4701對羅非魚養(yǎng)殖是安全的，同時(shí)對環(huán)境亦不會造成重金屬污染。

表4 重金屬含量測定結(jié)果（mg/kg）

浮萍在魚類飼料中的應(yīng)用已有一些報(bào)道。張植元等[29]在飼料中添加0～14%浮萍干粉，研究對錦鯉生長發(fā)育的影響。當(dāng)浮萍添加量為14%時(shí)，錦鯉特定生長率顯著高于對照組。同時(shí)，與黑色素合成相關(guān)的限速酶——絡(luò)氨酸酶TYR基因在錦鯉皮膚中的表達(dá)量也顯著上調(diào)[30]。不過，兩項(xiàng)報(bào)道所用的浮萍添加量都較低。埃及研究人員用5%～100%浮萍干粉替代魚粉制備顆粒飼料飼喂羅非魚。結(jié)果表明，替代率為20%時(shí)，羅非魚的日增重、特定生長率、飼料轉(zhuǎn)換率、蛋白質(zhì)效率比值等參數(shù)與對照無差異，說明浮萍可替代20%的魚粉[31]。Bairagi等[32]利用10%、20%、30%和40%的經(jīng)過發(fā)酵和不發(fā)酵的浮萍干粉飼喂野鯪幼魚，在不發(fā)酵的飼料組合中，10%添加量最好；在發(fā)酵的飼料組合中，30%的添加量最好。說明通過發(fā)酵，可以提高浮萍的添加量。

本研究結(jié)果表明，ZP4701干粉的添加量也不是越多越好。在10%～30%的添加水平內(nèi)，隨著添加水平的提高，羅非魚生長性能總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，添加水平達(dá)到20%時(shí)生長狀況最佳。這一結(jié)果與黃斌等[33]的研究結(jié)果類似。他們在紅色草金魚的日糧中添加蕪萍，發(fā)現(xiàn)添加量為20%時(shí)，草金魚不僅生長速度快，而且蛋白質(zhì)效率達(dá)到最高，飼料系數(shù)降到最低。當(dāng)蕪萍添加比例超過30%時(shí)，飼料蛋白質(zhì)效率降低，飼料系數(shù)增高。Hassan等[34]的研究也表明，當(dāng)浮萍的飼喂量不超過魚體質(zhì)量的4%時(shí)，羅非魚可以更高效地利用浮萍。

3.2 浮萍對羅非魚消化酶活性的影響

評價(jià)配合飼料營養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)之一是飼料的表觀消化率。魚類攝食后，飼料成分作為消化酶的底物，影響消化酶的分泌和活力[35-38]。羅非魚的消化酶主要有淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等[39]。胃、腸和肝胰臟黏膜是羅非魚消化酶分泌的主要部位，有胃魚類胃中的消化酶活性最高[40]。其中，淀粉酶能夠水解糖原、淀粉和相關(guān)多糖糖苷鍵[41]。魚類的脂肪酶主要由肝胰臟分泌，其活性隨著魚攝食食物脂肪含量的升高而增強(qiáng)[39]。脂肪在脂肪酶的作用下，分解成三酰甘油和自由脂肪酸的混合物而被魚類吸收[42]。本研究添加20%ZP4701干粉的復(fù)合飼料中，粗脂肪含量比對照飼料提高了26.5%。這可能是羅非魚肝胰臟和腸道脂肪酶活性顯著提高的原因，其中肝胰臟和腸道脂肪酶活性分別比對照提高64.46%和238.22%（圖3）。消化道脂肪酶活性的提高，促進(jìn)了脂肪代謝[26]，從而加快羅非魚的生長。

黃酮類物質(zhì)被魚體吸收后主要儲藏在胃、腸和肝胰臟黏膜。由于黃酮類物質(zhì)具有保護(hù)臟器并提升功能的作用。因此，飼料中黃酮類含量的提高也可能是羅非魚消化酶活性提高的原因之一。這一推測得到其他研究的支持[22]。也有研究表明，轉(zhuǎn)氨酶活性的增強(qiáng)有利于提高蛋白質(zhì)代謝效率[43]，而浮萍中豐富的類胡蘿卜素可以提高羅非魚轉(zhuǎn)氨酶的活性[44]，從而進(jìn)一步增強(qiáng)消化酶的活性。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明在飼料中添加適量的浮萍品種ZP4701干粉，能夠顯著提高羅非魚消化酶活性，促進(jìn)羅非魚的生長。當(dāng)添加水平為20%時(shí)，養(yǎng)殖效果最佳。因此，ZP4701是具有很高推廣價(jià)值的飼料浮萍品種。