陳芳有，陳志超，黃偉明，卞玉婷，雙鵬程，李宏?duì)c，羅永明

江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南昌 330004

金粟蘭科(Chloranthaceae)金粟蘭屬(ChloranthusSwartz)植物有13種和5個(gè)變種，主要分布于長江以南各省[1]。金粟蘭屬植物是江西民間廣泛使用的中草藥，有著悠久的民間用藥歷史，野生藥材資源豐富[2]。目前從金粟蘭屬植物中分離得到的化合物主要為倍半萜類、倍半萜二聚體類、二萜類等[3,4]，現(xiàn)代藥理研究表明金粟蘭屬植物具有良好的神經(jīng)保護(hù)[5]、抗炎[6]、抗腫瘤[7]等活性。絲穗金粟蘭Chloranthusfortunei(A.Gray)Solms-Laub又名四塊瓦，為金粟蘭屬植物，具有祛風(fēng)、除濕、活血、化瘀等功效[1]。

目前絲穗金粟蘭的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不夠清楚，嚴(yán)重制約了該江西特色藥用植物資源的開發(fā)和利用。為更好的闡明絲穗金粟蘭化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)和完善其生物活性研究內(nèi)容，本實(shí)驗(yàn)采用多種色譜分離方法和波譜學(xué)方法對絲穗金粟蘭95%乙醇提取物進(jìn)行了化學(xué)成分研究，并采用H2O2損傷的PC12細(xì)胞模型評估單體化合物的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用，期望為絲穗金粟蘭的藥物開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

Varian INOVA-500型核磁共振儀(美國瓦里安公司)；JEOL ECZ-400S核磁共振儀(日本電子株式會社)；Bruker AVANCE III HD 600 MHz型核磁共振儀(德國布魯克公司)；AB SCIEX Triple TOF5600+質(zhì)譜儀(美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司)；高效液相色譜儀(Agilent 1100，美國安捷倫公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Buchi R3，瑞士步琦公司)；Shimadzu LC-6AD型制備液相儀(日本島津公司)；制備液相色譜柱ODS-A C18(20 mm × 250 mm，5 μm，北京綠百草科技有限公司)；Sephadex LH-20凝膠(瑞士Amersham Pharmacia Biotech公司)；柱色譜硅膠為青島海洋化工廠產(chǎn)品；HPLC所用試劑(色譜純乙腈、甲醇)為Merck公司產(chǎn)品；其他試劑為分析純(西隴科學(xué)公司)。

絲穗金粟蘭采于江西宜春(2016年11月)，由鄧可眾副教授(江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院)鑒定為絲穗金粟蘭Chloranthusfortunei的全草，標(biāo)本(20161118)存放在江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥化學(xué)教研室。

1.2 提取分離方法

切碎后的絲穗金粟蘭(5.0 kg)用乙醇-水(V/V，95∶5)回流提取(50 L×2 h×3)，減壓濃縮后得絲穗金粟蘭總浸膏。將粗提物分散于水中，先用石油醚萃取(2 L×3)，得到石油醚部位12 g，然后用三氯甲烷(2 L×3)萃取，再分別采用乙酸乙酯(2 L×3)、正丁醇(2 L×3)萃取。石油醚部位(12 g)經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚-乙酸乙酯(V/V，50∶1→1∶1)梯度洗脫，TLC合并后得到流分A1～A7，其中A5部分(1.3 g)經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚-丙酮，9∶1)和制備液相得到化合物1(7 mg)和2(2 mg)。三氯甲烷萃取部分(40 g)經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚-丙酮(V/V，1∶0→1∶1)梯度洗脫，經(jīng)過TLC檢測合并之后共得到10個(gè)組分(B1～B10)。其中B2(0.9 g)組分經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚-丙酮，15∶1)得化合物3(5 mg)；B6組分(5.1 g)經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚-丙酮，5∶1)分離，再經(jīng)凝膠柱色譜和制備液相分離分別得4(2 mg)、5(13 mg)、6(3 mg)、7(3 mg)。乙酸乙酯萃取物(20 g)經(jīng)硅膠柱色譜(氯仿-甲醇，V/V，1∶0→2∶1)得到6個(gè)組分(C1～C6)。C4(3.2 g)經(jīng)硅膠柱色譜(氯仿-甲醇，9∶1)、凝膠柱色譜(甲醇)得8(17 mg)和9(20 mg)。C5(2 g)經(jīng)硅膠柱色譜(氯仿-甲醇，4∶1)得10(8 mg)和14(7 mg)。正丁醇部分(20 g)經(jīng)硅膠柱色譜分離(氯仿-甲醇，V/V，40∶1→1∶1)得D1～D8。D3部分(1.1 g)經(jīng)柱色譜(甲醇)、制備液相得到化合物11(6 mg)、12(8 mg)和13(10 mg)。

1.3 神經(jīng)保護(hù)活性研究

神經(jīng)保護(hù)活性實(shí)驗(yàn)采用H2O2損傷的PC12細(xì)胞模型，CCK8法檢測PC12細(xì)胞活力。將PC12細(xì)胞(1×104個(gè)/mL)接種到96孔板，每孔加入細(xì)胞混懸液100 μL，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。給藥組加入10 μL化合物(10 μM)，陽性藥組加入10 μL兒茶素(Catechin,50 μM) ，其他組加入等量的培養(yǎng)基。同時(shí)每孔加入雙氧水(H2O2，500 μM)，24 h后再加入CCK8(5 μL)培養(yǎng)2 h，測定OD值(450 nm處)，然后計(jì)算細(xì)胞存活率[5,8,9]。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1淡黃色油狀物;ESI-MS：m/z231 [M+H]+，分子式為C15H18O2。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：7.08(1H，s，H-12)，5.80(1H，dd，J= 18.0，10.8 Hz，H-1)，4.99(1H，m，H-3α)，4.95(1H，d，J= 17.4 Hz，H-2α)，4.94(1H，d，J= 10.8 Hz，H-2β)，4.74(1H，br s，H-3β)，3.00(1H，s，H-5)，2.91(1H，d，J= 17.4 Hz，H-9β)，2.76(1H，d，J= 17.4 Hz，H-9α)，2.17(3H，d，J= 1.8 Hz，H-13)，1.82(3H，dd，J= 1.2，0.6 Hz，H-15)，1.17(3H，s，H-14)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：145.6(C-1)，115.7(C-2)，113.1(C-3)，141.2(C-4)，64.2(C-5)，194.9(C-6)，119.3(C-7)，165.6(C-8)，33.7(C-9)，42.9(C-10)，120.2(C-11)，139.6(C-12)，9.1(C-13)，24.9(C-14)，25.0(C-15)。經(jīng)與文獻(xiàn)[10]對比鑒定該化合物為curzerenone(結(jié)構(gòu)見圖1)。

圖1 從絲穗金粟蘭中分離得到的化合物Fig.1 Compounds isolated from C.fortunei

化合物2白色粉末;ESI-MS：m/z247 [M+H]+，分子式為C15H18O3。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：7.08(1H，s，H-12)，5.48(1H，dd，J= 12.0，4.2 Hz，H-1)，3.81(1H，s，H-5)，3.75(1H，d，J= 16.2 Hz，H-9β)，3.68(1H，d，J= 16.2 Hz，H-9α)，2.52(1H，m，H-2α)，2.30(1H，m，H-3α)，2.23(1H，m，H-2β)，2.12(3H，d，J= 1.2 Hz，H-13)，1.60(3H，s，H-15)，1.34(3H，s，H-14)，1.28(1H，m，H-3β)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：131.4(C-1)，24.8(C-2)，38.1(C-3)，64.1(C-4)，66.7(C-5)，192.4(C-6)，123.4(C-7)，157.2(C-8)，42.0(C-9)，122.4(C-10)，131.2(C-11)，138.2(C-12)，10.4(C-13)，15.3(C-14)，15.9(C-15)。經(jīng)與文獻(xiàn)[11]對比鑒定該化合物為蓬莪術(shù)環(huán)氧酮。

化合物3白色無定形粉末;ESI-MS：m/z285 [M+Na]+，分子式為C15H18O4。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：7.11(1H，s，H-12)，3.06(1H，d，J= 18.0 Hz，H-9α)，2.93(1H，d，J= 18.0 Hz，H-9β)，2.89(1H，s，H-5)，2.72(1H，m，H-2β)，2.44(1H，m，H-2α)，2.19(3H，d，J= 1.2 Hz，H-13)，2.02(1H，m，H-3β)，1.90(1H，m，H-3α)，1.72(3H，s，H-15)，1.26(3H，s，H-14)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：211.1(C-1)，34.8(C-2)，39.0(C-3)，70.4(C-4)，62.2(C-5)，195.5(C-6)，119.1(C-7)，165.9(C-8)，35.7(C-9)，51.2(C-10)，119.4(C-11)，140.3(C-12)，9.1(C-13)，20.4(C-14)，23.9(C-15)。經(jīng)與文獻(xiàn)[12]對比鑒定該化合物為curcodione。

化合物4無色棱柱狀結(jié)晶(甲醇);ESI-MS：m/z285 [M+Na]+，分子式為C15H18O4。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：7.11(1H，s，H-12)，3.15(1H，d，J= 18.0 Hz，H-9α)，3.11(1H，m，H-2α)，2.80(1H，s，H-5)，2.78(1H，d，J= 18.0 Hz，H-9β)，2.22(1H，m，H-2β)，2.18(3H，d，J= 1.2 Hz，H-13)，2.16(1H，m，H-3α)，1.76(1H，m，H-3β)，1.53(3H，s，H-14)，1.41(3H，s，H-15)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：213.0(C-1)，33.7(C-2)，39.6(C-3)，69.8(C-4)，60.8(C-5)，196.3(C-6)，120.4(C-7)，165.1(C-8)，34.9(C-9)，52.7(C-10)，118.8(C-11)，140.2(C-12)，8.9(C-13)，30.4(C-14)，20.2(C-15)。經(jīng)與文獻(xiàn)[13]對比鑒定該化合物為chlorantene C。

化合物5無色顆粒狀結(jié)晶(甲醇);ESI-MS：m/z285 [M+Na]+，分子式為C15H18O4。1H NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：6.30(1H，s，H-5)，4.87(1H，m，H-1)，2.71(1H，d，J= 12.6 Hz，H-9α)，2.68(1H，m，H-3α)，2.39(1H，d，J= 12.6 Hz，H-9β)，2.16(1H，m，H-2α)，2.03(1H，m，H-2β)，2.01(1H，m，H-3β)，1.92(3H，s，H-13)，1.85(3H，s，H-14)，1.59(3H，s，H-15)；13C NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：128.2(C-1)，26.0(C-2)，29.9(C-3)，148.3(C-4)，129.5(C-5)，191.2(C-6)，155.2(C-7)，109.8(C-8)，48.7(C-9)，135.9(C-10)，135.9(C-11)，170.6(C-12)，10.4(C-13)，24.9(C-14)，18.3(C-15)。經(jīng)與文獻(xiàn)[14]對比鑒定該化合物為(1E,4Z)-8-hydroxy-6-oxogermacra-1(10),4,7(11)-trieno-12,8-lactone。

化合物6淡黃色油狀物;ESI-MS：m/z263 [M+H]+，分子式為C15H18O4。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：7.10(1H，br s，H-12)，3.78(1H，s，H-5)，3.69(1H，d，J= 16.8 Hz，H-9α)，2.93(1H，dd，J= 10.8，2.4 Hz，H-1)，2.82(1H，d，J= 16.8 Hz，H-9β)，2.41(1H，m，H-3α)，2.22(1H，m，H-2α)，2.18(3H，d，J= 1.8 Hz，H-13)，1.53(1H，m，H-2β)，1.49(1H，m，H-3β)，1.33(3H，s，H-14)，1.16(3H，s，H-15)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：69.1(C-1)，23.8(C-2)，36.1(C-3)，63.7(C-4)，63.3(C-5)，189.8(C-6)，122.6(C-7)，156.1(C-8)，39.6(C-9)，57.9(C-10)，123.4(C-11)，138.4(C-12)，10.5(C-13)，16.8(C-14)，15.3(C-15)。經(jīng)與文獻(xiàn)[15]對比鑒定該化合物為zederone epoxide。

化合物7淡黃色油狀物;ESI-MS：m/z307 [M+H]+，分子式為C20H34O2。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：5.89(1H，dd，J= 17.4，10.8 Hz，H-14)，5.18(1H，dd，J= 17.4，1.2 Hz，H-15a)，5.04(1H，dd，J= 10.8，1.2 Hz，H-15b)，4.78(1H，J= 1.2 Hz，H-17a)，4.47(1H，d，J= 1.2 Hz，H-17b)，3.73(1H，d，J= 10.8 Hz，H-19a)，3.36(d，J= 10.8 Hz，H-19b)，2.36(1H，m，H-7β)，1.91(1H，m，H-7α)，1.80(1H，m，H-6β)，1.78(1H，m，H-1β)，1.77(1H，m，H-12b)，1.69(1H，m，H-3β)，1.53(1H，m，H-9)，1.52(1H，m，H-11a)，1.48(2H，m，H-2)，1.34(1H，m，H-11b)，1.29(1H，m，H-6α)，1.25(1H，m，H-12a)，1.25(3H，s，H-16)，1.24(1H，m，H-5)，1.05(1H，m，H-1α)，1.03(1H，m，H-3α)，0.95(3H，s，H-18)，0.63(3H，s，H-20)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：39.1(C-1)，19.1(C-2)，35.5(C-3)，39.0(C-4)，56.4(C-5)，24.5(C-6)，38.7(C-7)，148.3(C-8)，57.4(C-9)，39.8(C-10)，17.9(C-11)，41.4(C-12)，73.8(C-13)，145.2(C-14)，111.8(C-15)，27.2(C-16)，106.8(C-17)，28.1(C-18)，65.1(C-19)，15.4(C-20)。經(jīng)與文獻(xiàn)[16]對比鑒定該化合物為13-epitorulosol。

化合物8淡黃色油狀物;ESI-MS：m/z225 [M+H]+，分子式為C13H20O3。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：5.89(1H，s，H-4)，5.85(1H，dd，J= 16.0，5.0 Hz，H-8)，5.76(1H，d，J= 16.0 Hz，H-7)，4.40(1H，m，H-9)，2.43(1H，d，J= 17.0 Hz，H-2α)，2.22(1H，d，J= 17.0 Hz，H-2β)，1.89(3H，s，H-13)，1.28(3H，d，J= 6.0 Hz，H-10)，1.06(3H，s，H-12)，0.99(3H，s，H-11)；13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ：41.3(C-1)，49.8(C-2)，198.6(C-3)，124.9(C-4)，163.6(C-5)，79.2(C-6)，129.1(C-7)，135.8(C-8)，68.1(C-9)，23.8(C-10)，23.0(C-11)，24.2(C-12)，19.1(C-13)。經(jīng)與文獻(xiàn)[17]對比鑒定該化合物為vomifoliol。

化合物9淡黃色油狀物;ESI-MS：m/z197 [M+H]+，分子式為C11H16O3。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：5.75(1H，s，H-3)，4.21(1H，m，H-6)，2.42(1H，dd，J= 14.0，4.0 Hz，H-7)，1.98(1H，dd，J= 14.5，3.5 Hz，H-5)，1.76(3H，s，7a-CH3)，1.73(1H，dd，J= 14.0，4.0 Hz，H-7)，1.53(1H，dd，J= 14.5，3.5 Hz，H-5)，1.47(3H，s，4-CH3)，1.28(3H，s，4-CH3)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：185.7(C-2)，113.3(C-3)，174.4(C-3a)，37.2(C-4)，48.0(C-5)，67.2(C-6)，46.4(C-7)，89.0(C-7a)，27.4(C-4-CH3)，27.0(C-4-CH3)，31.1(C-7a-CH3)。經(jīng)與文獻(xiàn)[18]對比鑒定該化合物為(-)-loliolide。

化合物10無色油狀物;ESI-MS：m/z323 [M+Na]+，分子式為C17H16O5。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：12.03(1H，s，5-OH)，7.38(2H，d，J= 9.0 Hz，H-3′，5′)，6.95(2H，d，J= 9.0 Hz，H-2′，6′)，6.07(1H，d，J= 2.4 Hz，H-8)，6.04(1H，d，J= 2.4 Hz，H-6)，5.36(1H，dd，J= 13.2，3.0 Hz，H-2)，3.81，3.83(各3H，s，7，4′-OCH3)，3.10(1H，dd，J= 16.8，12.6 Hz，H-3b)，2.78(1H，dd，J= 16.8，3.0 Hz，H-3a)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：79.2(C-2)，43.4(C-3)，196.2(C-4)，164.3(C-5)，95.2(C-6)，168.1(C-7)，94.4(C-8)，163.1(C-9)，103.3(C-10)，130.5(C-1′)，127.9(C-2′)，114.4(C-3′)，160.2(C-4′)，114.4(C-5′)，127.9(C-6′)，55.5，55.8(7，4′-OCH3)。經(jīng)與文獻(xiàn)[19]對比鑒定該化合物為7,4′-dimethylnaringenin。

化合物11黃色粉末;ESI-MS：m/z449 [M+H]+，分子式為C21H20O11。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.29(1H，s，H-2′)，7.27(1H，d，J= 8.5 Hz，H-6′)，6.87(1H，d，J= 8.5 Hz，H-5′)，6.30(1H，s，H-8)，6.14(1H，s，H-6)，5.31(1H，s，H-1′′)，0.91(3H，d，J= 6.0 Hz，H-6′′)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：158.4(C-2)，136.2(C-3)，179.6(C-4)，159.2(C-5)，99.8(C-6)，165.8(C-7)，94.7(C-8)，163.1(C-9)，105.8(C-10)，122.9(C-1′)，116.3(C-2′)，146.3(C-3′)，149.7(C-4′)，116.9(C-5′)，122.9(C-6′)，103.5(C-1′′)，72.0(C-2′′)，72.1(C-3′′)，73.2(C-4′′)，71.9(C-5′′)，17.6(C-6′′)。經(jīng)與文獻(xiàn)[20]對比鑒定該化合物為quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside。

化合物12黃色粉末;ESI-MS：m/z465 [M+H]+，分子式為C21H20O12。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ：7.71(1H，s，H-2′)，7.58(1H，d，J= 8.0 Hz，H-6′)，6.86(1H，d，J= 8.4 Hz，H-5′)，6.39(1H，s，H-8)，6.20(1H，s，H-6)，5.24(1H，d，J= 7.6 Hz，H-1′′)，3.70，3.57(各1H，m，H-6′′)，3.48(1H，m，H-3′′)，3.42(1H，m，H-4′′)，3.31(1H，m，H-2′′)，3.22(1H，m，H-5′′)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：158.4(C-2)，135.6(C-3)，179.5(C-4)，162.9(C-5)，99.9(C-6)，166.1(C-7)，94.7(C-8)，159.0(C-9)，105.6(C-10)，123.1(C-1′)，116.0(C-2′)，145.9(C-3′)，149.8(C-4′)，117.5(C-5′)，123.2(C-6′)，104.3(C-1′′)，75.7(C-2′′)，78.1(C-3′′)，71.2(C-4′′)，78.4(C-5′′)，62.5(C-6′′)。經(jīng)與文獻(xiàn)[21]對比鑒定該化合物為quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside。

化合物13白色粉末;ESI-MS：m/z313 [M+Na]+，分子式為C15H14O6。1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：6.74(1H，s，H-2′)，6.70(1H，d，J= 7.5 Hz，H-6′)，6.61(1H，d，J= 7.5 Hz，H-5′)，5.91(1H，s，H-8)，5.71(1H，s，H-6)，4.50(1H，d，J= 7.0 Hz，H-2)，3.84(1H，m，H-3)，2.65(1H，dd，J= 16.0，4.5 Hz，H-4a)，2.35(1H，dd，J= 16.0，8.0 Hz，H-4b)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：81.1(C-2)，66.5(C-3)，27.9(C-4)，156.3(C-5)，95.3(C-6)，156.6(C-7)，94.0(C-8)，155.5(C-9)，99.2(C-10)，130.8(C-1′)，114.7(C-2′)，145.0(C-3′)，145.0(C-4′)，115.3(C-5′)，118.6(C-6′)。經(jīng)與文獻(xiàn)[22,23]對比鑒定該化合物為兒茶素。

化合物14淡黃色粉末;ESI-MS：m/z163.2 [M-H]—，分子式為C9H8O3。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：7.50(2H，d，J= 8.0 Hz，H-2，6)，7.49(1H，d，J= 16.0 Hz，H-7)，6.77(2H，d，J= 8.0 Hz，H-3，5)，6.27(1H，d，J= 16.0 Hz，H-8)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：125.3(C-1)，130.1(C-2)，115.8(C-3)，159.6(C-4)，115.8(C-5)，130.1(C-6)，144.2(C-7)，115.4(C-8)，168.0(C-9)。經(jīng)與文獻(xiàn)[24]對比鑒定該化合物為香豆酸。

2.2 神經(jīng)保護(hù)活性篩選結(jié)果

在10 μM濃度下，化合物1～7和10使H2O2損傷的PC12細(xì)胞的細(xì)胞存活率從43.41%±1.59%分別提高到62.61%±5.23%、64.87%±8.42%、56.06%±6.65%、65.87%±5.34%、60.54%±3.32%、68.11%±4.76%、45.27%±2.12和54.96%±1.51%。結(jié)果(見圖2)顯示倍半萜類化合物(1～6)表現(xiàn)出較好的活性。

圖2 化合物1～7和10的神經(jīng)保護(hù)活性結(jié)果Fig.2 Neuroprotective effect of compounds 1-7 and 10

3 結(jié)果與討論

本文從絲穗金粟蘭全草95%乙醇部位中分離并鑒定了14個(gè)化合物，包括7個(gè)倍半萜類(1～6、8)、1個(gè)二萜(7)、1個(gè)單萜(9)、4個(gè)黃酮類(10～13)和1個(gè)酚酸(14)。同時(shí)考察了部分化合物對H2O2損傷的PC12細(xì)胞生長的影響，倍半萜類化合物(1～6)表現(xiàn)出中等的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用。結(jié)合前期對同屬植物的活性成分研究推測倍半萜類成分可能為絲穗金粟蘭神經(jīng)保護(hù)活性成分。目前從金粟蘭屬植物中分離得到的化合物主要為倍半萜類、倍半萜二聚體類、二萜類等[3]，特別是烏藥烷型倍半萜及其二聚體是該屬植物的特征性成分，但目前從絲穗金粟蘭里面發(fā)現(xiàn)的該類成分還較少。

阿爾茲海默病(Alzheimer’s disease，AD)是導(dǎo)致全球老年人死亡的神經(jīng)類重大疾病之一，臨床上多見AD患者腦功能逐漸減退同時(shí)伴有血瘀，因而采用活血化瘀中藥治療每每見效，從活血化瘀中藥中發(fā)掘抗AD創(chuàng)新藥物前景廣闊[25]。金粟蘭屬藥材作為江西省多種中藥制劑的原料藥應(yīng)用，具有祛風(fēng)除濕、活血散瘀等功效，從該屬植物中分離得到的倍半萜類化合物表現(xiàn)出良好的神經(jīng)保護(hù)活性[5,8]。后續(xù)我們將進(jìn)一步深入探討金粟蘭屬中倍半萜類化合物的腦神經(jīng)保護(hù)作用，將以目前分離得到的倍半萜及其二聚體為分子模板，采用分子印跡的方法進(jìn)行定向分離，以期獲得結(jié)構(gòu)新穎的化合物。然后在分子對接和構(gòu)效關(guān)系分析的指導(dǎo)下進(jìn)行化合物對PC12細(xì)胞的保護(hù)作用篩選，通過檢測ROS的含量以及p-AMPK、Sirt 1、p-Sirt 1和Sirt 3等蛋白的表達(dá)量，從緩解氧化應(yīng)激損傷等方面探討金粟蘭屬植物治療AD的作用機(jī)制，闡明該屬植物神經(jīng)保護(hù)活性物質(zhì)基礎(chǔ)。