解明華 ， 魯富有 ， 張容萍 ， 張 瀟 ， 張海楠

(1.云南省普洱市寧洱縣動物疫病預(yù)防控制中心 ， 云南 寧洱 665199 ； 2.云南省普洱市動物疫病預(yù)防控制中心 ， 云南 普洱 665100)

2019年7月，在非洲豬瘟防控期間，筆者偶遇某鎮(zhèn)護林員巡山發(fā)現(xiàn)的2頭死亡野豬。經(jīng)現(xiàn)場剖檢、采樣和調(diào)查，后將病料送普洱市動物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實驗室檢測非洲豬瘟病毒、豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒，結(jié)果顯示，非洲豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒均為陰性，豬瘟病毒為陽性，確診野豬因感染豬瘟野毒引起急性死亡。

1 地理環(huán)境調(diào)查

該村僅有5個村民小組，面積27 km2，有農(nóng)戶81戶共303人，人口密度為11.22人/km2。海拔1 540 m，年平均氣溫 19 ℃，年降水量1 550 mm。地廣人稀，森林覆蓋率達85.86%。

2 家豬環(huán)境調(diào)查

2.1 家豬飼養(yǎng)情況調(diào)查 全村81戶農(nóng)戶中有62戶農(nóng)戶飼養(yǎng)家豬，生豬存欄412頭。建立有病死畜禽挖坑深埋和辦事購買本村畜禽產(chǎn)品的村規(guī)民約，近期該村無生豬異常死亡情況。

2.2 家豬免疫背景調(diào)查 家豬每年春、秋兩季實行重大動物疫病集中強制免疫，生豬應(yīng)免密度達到100%，群體免疫密度達到90%以上；免疫抗體水平監(jiān)測均達到70%以上。

3 野豬發(fā)病情況調(diào)查

3.1 野豬活動調(diào)查 野豬死亡地點10 km范圍為無人居住的深山密林區(qū)，山果豐富，估計野豬數(shù)量超過30頭，在深山樹林間常能看到野豬窩。

3.2 野豬死亡情況調(diào)查 護林員陳述，當(dāng)天下午發(fā)現(xiàn)第1頭死亡野豬，在返程途中又發(fā)現(xiàn)第2頭死亡野豬，相距約1 km，大小基本一致，判斷屬同一活動區(qū)域的同窩野豬。

3.3 放山飼養(yǎng)家豬情況調(diào)查 距離野豬死亡地點約1 km處有常年放山飼養(yǎng)的家豬17頭，其中較小的2頭時常跑出豬舍到山中覓食。據(jù)畜主陳述，該群家豬健康，無異常情況，已實施免疫，處于免疫保護期。

4 剖檢病變

4.1 外觀檢查 現(xiàn)場檢查死于野豬窩中的死豬，體重約35 kg，雄性，營養(yǎng)中下，毛色棕黑。豬尸僵硬，腹圍輕度腫脹，有少許尸臭味，蒼蠅卵遍布豬尸天然孔及豬體表，但無蛆(中插彩版圖1)，推算死亡時間在12 h左右。

圖1 野豬死于山林間

4.2 剖檢病變 死豬全身各組織無黃染；全身淋巴結(jié)輕度腫脹、出血；喉頭及氣管有少量白色泡沫，會厭軟骨等輕度充血；左肺高度腫脹、出血、實變，右肺輕度腫脹、有散在胰肉樣病變灶和出血斑；心包液增多，內(nèi)混有血液，心外膜及心內(nèi)膜有大面積出血點、出血斑，心冠脂肪部有連片大量出血帶，冠狀動脈充血怒張(中插彩版圖2)，心腔內(nèi)充滿大量凝固血液；肝臟表面粗糙，中度腫脹，與胸膈膜接觸部色變深變黑，出血明顯，膽汁濃稠量少；與肝臟相近的大腸和空腸漿膜有明顯紅色出血斑(中插彩版圖3)；脾臟不腫大，色變黑變深，有出血小點；腎臟土灰色，有細小出血點；膀胱、直腸色白，無可見病變；回盲口附近有多量散在的紅色充血點、充血斑，有少量米粒大潰瘍斑點(中插彩版圖4)；各胃區(qū)顏色分界明顯，有多處黑色潰瘍斑。

圖2 心臟外膜出血、血管充血

圖3 腸漿膜出血

圖4 回盲口附近有充血斑和潰瘍斑點

4.3 病料采取 采取心包液、心腔血于真空抗疑管中，采取淋巴結(jié)、肺臟、脾臟、腎臟各約20 g于5號自封袋，標注，保存于有冰袋的冷藏箱中。

5 實驗室PCR檢測

病料送普洱市動物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實驗室，取脾臟、淋巴結(jié)組織混合進行非洲豬瘟病毒(ASFV)PCR檢測、豬瘟病毒(CSFV)巢式PCR檢測和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)RT-PCR檢測。電泳結(jié)果觀察及判定顯示，非洲豬瘟陰性(圖5A)，豬繁殖與呼吸綜合征陰性(圖5B)，豬瘟陽性(圖5C)。

圖5 野豬病料PCR檢測A: 非洲豬瘟陰性; B:豬繁殖與呼吸綜合征陰性; C:豬瘟陽性M: 2 000 bp marker; +:陽性對照(省級中心實驗室提供); S: 檢測樣品，陰性對照設(shè)于整塊板中，本圖未剪取

6 診斷結(jié)果

6.1 根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，在同一區(qū)域發(fā)現(xiàn)2頭野豬死亡，且實施過強制免疫的家豬健康，表明野豬感染野毒株，病程為急性，不排除強毒株的可能。

6.2 剖檢發(fā)現(xiàn)，回盲口附近有充血斑點且有小潰瘍病變，但無明顯的解剖癥狀，驗證病程為急性，感染發(fā)病時間不長并引起急性死亡。

6.3 經(jīng)實驗室PCR檢測非洲豬瘟病毒、豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒，確診野豬因感染豬瘟野毒引起急性死亡；擬送云南省動物疫控中心進行基因測序確診是否為強毒株。

6.4 對死亡野豬在剖檢地挖坑深埋，剖檢區(qū)域撒布大量消特靈(二氯異氰脲酸鈉粉)；對村民飼養(yǎng)家豬實施豬瘟緊急免疫；加強聯(lián)防聯(lián)控，群防群控，農(nóng)業(yè)部門負責(zé)防控和監(jiān)測家豬，林業(yè)部門負責(zé)監(jiān)控野豬；加強疫情排查和疫情報告。