韓志豪 ， 李松林 ， 黃旭雄

(1.上海海洋大學(xué) 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部魚(yú)類(lèi)營(yíng)養(yǎng)與環(huán)境生態(tài)研究中心 ， 上海 浦東 201306；2.上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)科學(xué)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心 ， 上海 浦東 201306)

動(dòng)物標(biāo)本種類(lèi)繁多，按照制作方法可將動(dòng)物標(biāo)本分為剝制標(biāo)本、浸制標(biāo)本、骨骼標(biāo)本、干制標(biāo)本(Dry specimen)和玻片標(biāo)本等[1]。不同的標(biāo)本制作方法適用于不同的動(dòng)物類(lèi)群，如鳥(niǎo)和獸類(lèi)大多采用剝制方法，而昆蟲(chóng)和甲殼類(lèi)則大多制成干制標(biāo)本。

蟹類(lèi)干制標(biāo)本是高等農(nóng)業(yè)院校水生生物學(xué)教學(xué)中的重要教學(xué)材料，具有直觀、生動(dòng)、不受季節(jié)和區(qū)域限制的優(yōu)點(diǎn)，能讓學(xué)生更深刻的了解蟹類(lèi)外部結(jié)構(gòu)?，F(xiàn)在蟹類(lèi)標(biāo)本的制作大多都是使用浸制法，此法可方便、快速、長(zhǎng)時(shí)間的保存蟹類(lèi)標(biāo)本，但是該方法存在以下缺點(diǎn)：使用的浸制液多為5%～10%的福爾馬林溶液或95%的乙醇溶液，浸制液的揮發(fā)會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生危害；同時(shí)，因?yàn)闃?biāo)本在浸制液中保存，所以很難對(duì)其進(jìn)行定型，并且運(yùn)輸困難、成本高；標(biāo)本長(zhǎng)時(shí)間保存于福爾馬林浸制液中往往會(huì)有多聚甲醛形成，使浸制液體變的渾濁，影響觀察[2]。相比之下，干制標(biāo)本就僅需拿標(biāo)本針將其固定在標(biāo)本盒中就可四處攜帶。若螃蟹標(biāo)本后期遇到損傷或蟹腿脫落等問(wèn)題，干制標(biāo)本用適當(dāng)方法就可進(jìn)行修復(fù)，而浸制標(biāo)本很難進(jìn)行后期修復(fù)。最重要的是，浸制標(biāo)本中無(wú)論使用哪一種浸制液都會(huì)對(duì)蟹類(lèi)甲殼中的色素造成溶解，標(biāo)本會(huì)隨著浸泡時(shí)間的增長(zhǎng)體色越來(lái)越淡，會(huì)誤導(dǎo)觀看者對(duì)蟹類(lèi)體色的認(rèn)知。目前常用的標(biāo)本干制方法主要有以下2種：(1)使用防腐粉的干制法：將防腐粉放入蟹類(lèi)體內(nèi)，抑制蟹類(lèi)的腐爛，從而達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的，但是該方法不能徹底去除甲殼內(nèi)肌肉，導(dǎo)致標(biāo)本做成之后粘附在甲殼內(nèi)部的肌肉氧化后變黑、變臭，大大影響觀賞效果；(2)舊殼定型法：利用螃蟹自身新陳代謝脫下來(lái)的殼，將其定型干燥即可。此法雖然方便且殼中幾乎沒(méi)有肌肉，但是標(biāo)本外殼硬度極低，甲殼中色素含量也少，只能供觀看者了解該蟹的大致形狀，且標(biāo)本不易保存，極易造成標(biāo)本的不可修復(fù)性損傷。使用范圍窄，僅當(dāng)有蟹脫殼時(shí)才能使用。

為克服上述弊端，本文介紹了一種新型蟹類(lèi)干制標(biāo)本制作方法，可使蟹類(lèi)標(biāo)本甲殼中的色素得以最大保留，標(biāo)本也可呈原生形態(tài)展現(xiàn)給觀眾，標(biāo)本硬度高，且不易損壞，有助于推動(dòng)國(guó)內(nèi)蟹類(lèi)標(biāo)本制作的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與器材 螃蟹、切割墊板、牙簽、棉簽、標(biāo)本針(根據(jù)螃蟹大小而改變)、白乳膠(標(biāo)本粘膠)、1 mL注射器(帶針頭)、紙巾、泡沫板、速干膠(UHU德國(guó)產(chǎn))、小刷子、死皮鉗、細(xì)頭鑷、吹風(fēng)機(jī)、樟腦、活性炭、大小適宜的標(biāo)本盒、手術(shù)刀(或壁紙刀)、亮油、金剛噴劑(承中牌)、錫絲、KOH(分析純)、胰蛋白酶(10萬(wàn)單位)以及75%乙醇溶液。

1.2 標(biāo)本制作之前的準(zhǔn)備

1.2.1 觀察并測(cè)量螃蟹 在制作任何蟹類(lèi)干制標(biāo)本之前，首先應(yīng)該在網(wǎng)絡(luò)、書(shū)籍中盡可能多的觀察其自然形態(tài)的照片以及視頻(圖1、2、3)。例如，螯足和步足在自然狀態(tài)下的姿勢(shì)；眼睛在自然情況下與眼窩的相對(duì)位置；螃蟹正視圖中眼睛與頭胸甲之間的角度；這些參數(shù)在后期整姿中發(fā)揮著巨大的作用，甚至還要了解它們的生活習(xí)性以便設(shè)計(jì)標(biāo)本姿態(tài)[3]。若觀察活體時(shí)，盡可能多的在不同角度進(jìn)行拍照，以方便后期整姿。

圖1 中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)形態(tài)模式圖[4]1: 頭胸甲; 2: 螯足; 3: 第2步足; 4: 第3步足; 5: 第4步足; 6: 第5步足

圖2 中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)的步足[4]1: 長(zhǎng)節(jié); 2: 腕節(jié); 3: 前節(jié); 4: 指節(jié)

圖3 中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)的螯足[4]1: 長(zhǎng)節(jié); 2: 腕節(jié); 3: 掌節(jié); 4: 指節(jié)

1.2.2 定種及標(biāo)簽的制作 借助書(shū)籍、網(wǎng)絡(luò)和詢問(wèn)蟹類(lèi)專家，以獲得該蟹基本信息[5]，如中文名、俗名等。在Word文檔中，插入文本框，中文用宋體5號(hào)，加粗；英文用宋體5號(hào)，加粗(拉丁學(xué)名需用斜體)，設(shè)置文本框邊框線條顏色為黑色，粗細(xì)為2磅(標(biāo)簽如圖4)。將其打印出來(lái)，進(jìn)行過(guò)塑，沿標(biāo)簽邊緣5 mm剪下，與螃蟹標(biāo)本配套存放。

圖4 標(biāo)簽?zāi)０?/p>

注意：如有添加特殊內(nèi)容可自行更改標(biāo)簽格式。

1.2.3 相關(guān)溶液的配制 胰蛋白酶溶液配制方法：50 mL水中加入2 g胰蛋白酶(10萬(wàn)單位)，然后在100 mL容量瓶中定容后轉(zhuǎn)移至燒杯中，用KOH溶液調(diào)節(jié)至pH8(胰蛋白酶溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用)。在肌肉溶解過(guò)程中最好放入38 ℃的恒溫箱，可加速肌肉溶解。在肌肉溶解時(shí)應(yīng)多觀察，不能過(guò)度浸泡，防止組織連接部分也被溶解，對(duì)后期粘連造成麻煩。

5%KOH溶液的配制方法：50 mL水中加入5 g KOH固體(分析純)，然后將其轉(zhuǎn)入 100 mL容量瓶，用水添加至刻度線，塞上塞子，搖勻，轉(zhuǎn)移至燒杯即可使用。

1.3 標(biāo)本制作前螃蟹的處理

1.3.1 蟹的麻醉 將螃蟹放入冰水混合物中浸泡10～20 min，待抓起后無(wú)劇烈反抗，即可進(jìn)行下一步操作。

1.3.2 殺蟹 用1 mL注射器吸取1 mL 95%乙醇溶液，找到螃蟹嘴部偏下的位置，用注射針頭輕輕試探(勿傷及螃蟹口前板結(jié)構(gòu))。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有一處針頭可輕松插入時(shí)，將針頭快速插入并將1 mL乙醇溶液完全注射其內(nèi)，螃蟹1 min左右死亡，這時(shí)可能會(huì)有螃蟹肢體掉落，屬正常現(xiàn)象，對(duì)掉落肢體進(jìn)行標(biāo)記即可。若為死蟹，當(dāng)時(shí)卻無(wú)條件制作標(biāo)本，可用塑料器皿加水沒(méi)過(guò)螃蟹進(jìn)行冷凍，待有條件時(shí)，在自來(lái)水流沖刷下進(jìn)行解凍，解凍后立即進(jìn)行標(biāo)本制作[6]。

1.3.3 固定 將已經(jīng)死亡的螃蟹放入75%乙醇溶液中浸泡至少24 h，進(jìn)行固定，防止后期長(zhǎng)時(shí)間制作時(shí)腐爛。

1.4 螃蟹的肢解

1.4.1 螯足、步足(泳足)與胸部腹甲之間的分離 參照?qǐng)D5，有一條環(huán)繞于附肢的淺溝(也就是蟹類(lèi)每受到危險(xiǎn)時(shí)，螃蟹會(huì)有斷腿現(xiàn)象的分離點(diǎn))，用手術(shù)刀的尖端刻該淺溝，然后嘗試輕掰是否能斷。如果不能則重復(fù)上述步驟，此方法可以輕易地將附肢分離，而且分離處邊緣十分整齊，有利于后期無(wú)縫粘合。

圖5 蟹類(lèi)步足基部折斷處[4]1: 分解前； 2： 分解后

注意：因?yàn)轶π凡阶愕拇笮?、形態(tài)極其相似，所以一定要記住每個(gè)螃蟹步足的位置，切忌混淆，以防給后來(lái)的粘合環(huán)節(jié)造成極大的困擾。務(wù)必在肢解下每一個(gè)步足時(shí)做好標(biāo)記(例如左1、左2、右1、右2等)。因?yàn)橹夂笠^續(xù)泡在酒精中，所以可通過(guò)腿上綁繩的顏色和圈數(shù)來(lái)辨識(shí)是螃蟹哪個(gè)部位的步足。例如：紅色繩子代表右邊，白色繩子代表左邊；綁1圈代表是從上往下第1個(gè)步足，綁2圈代表是從上往下第2個(gè)步足，以此類(lèi)推。

1.4.2 頭胸甲與胸部腹甲的分離及胸部腹甲和腹臍的分離 固定螃蟹頭胸甲，將螃蟹胸部腹甲輕輕掰開(kāi)，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有裂縫出現(xiàn)時(shí)，用手術(shù)刀尖端輕輕插入將里面鏈接頭胸甲和胸甲的薄膜組織全部劃斷。此時(shí)用手可以更輕松的將其掰開(kāi)，再用手術(shù)刀將腹臍左右兩端的連接處割斷，再將腹臍從胸部腹甲上慢慢地剝離。

注意：分離時(shí)，切勿損壞螃蟹各個(gè)部位，螃蟹的每個(gè)部位都可能會(huì)是粘合的重要部位，若其破碎將會(huì)給標(biāo)本的整體效果帶來(lái)嚴(yán)重的不良影響。

1.5 螃蟹甲殼中肌肉的去除

1.5.1 螯足、步足及泳足中肌肉的去除 分別在步足上的長(zhǎng)節(jié)、腕節(jié)、前節(jié)以及指節(jié)連接處可找到類(lèi)似薄膜的半透明組織(都是成對(duì)存在的，每個(gè)連接處上下都有，一般上面的較小，下面的較大)，用手術(shù)刀將其劃開(kāi)，沿著垂直關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)方向慢慢進(jìn)行手掰(力量漸增，不可用力一下掰開(kāi)，這樣會(huì)對(duì)關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)有較大的破壞，不利于之后的粘合)。然后使用尖頭鑷、大頭針、棉簽以及紙巾將里面肌肉盡可能地剔除干凈，在胰蛋白酶溶液中浸泡約6 h，觀察其中是否還有肌肉殘留，若有，適當(dāng)增加浸泡時(shí)間，最后用清水沖洗干凈，螯足的肌肉去除環(huán)節(jié)就完成了。螯足的肌肉去除與步足處理方法相同。若是泳足則需相同的方法處理長(zhǎng)節(jié)、腕節(jié)和前節(jié)，指節(jié)則直接浸泡胰蛋白酶溶液處理即可。

1.5.2 頭胸甲中肌肉的去除 先拿捏子將其肝胰腺與胃剔出來(lái)，再拿牙刷將附著在頭胸甲內(nèi)部的黑色物質(zhì)盡可能地刷干凈，然后將其放入胰蛋白酶溶液中約6 h，再拿牙刷清洗，待無(wú)明顯雜質(zhì)后，拿清水沖洗干凈即可。

注意：頭胸甲處理后盡快進(jìn)行硬化及亮化，這樣頭胸甲中的色素才能最大程度保持不變。

1.5.3 胸部腹甲中肌肉的去除 拿死皮鉗沿鰓生長(zhǎng)的地方連同下面的幾丁質(zhì)一同剪去，注意不要破壞邊緣以及嘴外部的兩片甲，盡量將容易去除的肉去除，然后放入5%KOH溶液24 h，視情況增加時(shí)間，待胸甲內(nèi)部無(wú)明顯肌肉時(shí)，將其拿出，用尖口鑷將其中已化為黏液狀的肌肉剔除，用清水沖洗干凈即可。

1.6 螃蟹的拼接

1.6.1 胸部腹甲與腹臍的拼接 用速干膠填滿腹臍內(nèi)部的腹甲溝，然后將腹臍鑲嵌于胸部腹甲，用吹風(fēng)機(jī)將膠吹干，再用白乳膠把胸部腹甲與腹臍之間的縫隙涂1遍，再用吹風(fēng)機(jī)將其烘干。

注意：如果腹部甲片僵硬變白，可以將其放在75%乙醇溶液泡5 min拿出，可以達(dá)到軟化的效果，使其更好的嵌合胸部腹甲(本文中提到的所有的“用吹風(fēng)機(jī)吹干”的步驟完全可以由“自然風(fēng)干”代替)。

1.6.2 頭胸甲與胸部腹甲的拼接 用速干膠將頭胸甲與胸甲接觸的邊緣涂滿，將其粘合，嘴部用白乳膠覆蓋一層使其粘緊密，用吹風(fēng)機(jī)吹干，然后用白乳膠填涂連接邊緣的縫隙，用吹風(fēng)機(jī)吹干即可。

1.6.3 螯足、步足及泳足散肢拼接 將速干膠打入各個(gè)部位(指節(jié)除外)，打1/3即可，然后將錫絲插入，再將另一部分插入錫絲的另一端。以此類(lèi)推，將步足、泳足和螯足拼裝好，最后再到各個(gè)連接處涂一層白乳膠加固，用吹風(fēng)機(jī)吹干即可。

1.6.4 附肢與胸甲的拼接 往胸部腹甲與附肢分離處的洞，打入速干膠然后插入適當(dāng)長(zhǎng)度的錫絲(可視情況多放幾根錫絲，多放的錫絲要比最長(zhǎng)的那根短)，將錫絲另一端再插入附肢中(插錫絲時(shí)，插入胸甲一端再無(wú)延伸空間時(shí)，再將另一端插入附肢中)，用白乳膠將拼接處涂抹平整，用吹風(fēng)機(jī)吹干，此步驟重復(fù)至少2次。為之后的整姿提供足夠的韌性，防止整姿時(shí)附肢掉落。

1.7 標(biāo)本的整姿

1.7.1 眼睛的整姿 眼睛較短的蟹類(lèi)保持眼睛在眼窩之外即可，用標(biāo)本針固定眼部之后在眼窩處加滿白乳膠，保持姿勢(shì)自然風(fēng)干即可。眼睛較長(zhǎng)的蟹類(lèi)制作同上，唯一注意的是眼睛與頭胸甲之間的角度，最好遵照本品種螃蟹活體狀態(tài)下的樣子進(jìn)行制作(例如，日本大眼蟹為72°左右)。

1.7.2 螯足的整姿 正常狀態(tài)下的螯足的指節(jié)與掌節(jié)要處于閉合狀態(tài)，螯足的長(zhǎng)節(jié)、腕節(jié)和掌節(jié)也盡量的與頭胸甲粘連在一起；攻擊狀態(tài)下的螯足的指節(jié)與掌節(jié)處于張開(kāi)狀態(tài)(張開(kāi)角度一般都為20°～30° 為宜，特殊品種可視情況改變角度)，螯足的長(zhǎng)節(jié)可與頭胸甲相連(也可與頭胸甲不相連，視個(gè)人喜好改變)腕節(jié)，掌節(jié)不與頭胸甲粘連。

1.7.3 步足的整姿 長(zhǎng)節(jié)與腕節(jié)要保持一定的角度，范圍為120°～170°(一般為135°左右)。腕節(jié)與前節(jié)一般保持180°，指節(jié)與前節(jié)之間角度范圍為90°～150°(一般為135°左右)。最后保證在正面觀看下螃蟹是水平的，俯視觀看下盡可能對(duì)稱，造型可從網(wǎng)絡(luò)尋找同品種螃蟹圖片，自行微調(diào)。

1.8 硬化與亮化

1.8.1 硬化 使用金剛噴劑，噴口距標(biāo)本約20 cm，在通風(fēng)處噴一層薄漆(作業(yè)過(guò)程中需戴手套、口罩)，放置6 h，再重復(fù)以上操作1次，即可達(dá)到硬化效果。

1.8.2 亮化 在標(biāo)本外表均勻涂一層亮油，待其自然風(fēng)干即可。

注意：長(zhǎng)絨毛處不要涂亮油，此舉會(huì)大大影響整體效果，例如：中華絨螯蟹、中華虎頭蟹等；還有絨毛或剛毛較多的品種直接無(wú)需涂亮油，例如：紅毛蟹、棉蟹等。

2 結(jié)果

經(jīng)過(guò)本法制作的細(xì)紋愛(ài)潔蟹干制標(biāo)本，由于不同部位使用不同化學(xué)特性的溶液進(jìn)行處理，含有色素較多的部位得以保護(hù)，減少了色素的溶解，故使細(xì)紋愛(ài)潔蟹的甲殼得以最大程度的保持原色(中插彩版圖6～8)；適當(dāng)?shù)挠不傲粱胧┦辜?xì)紋愛(ài)潔蟹標(biāo)本增加了表光面的亮度和飽滿度，標(biāo)本眼部水靈、飽滿、炯炯有神(中插彩版圖6、7)；白乳膠配合錫絲粘連標(biāo)本的各個(gè)部分，不僅將斷裂處幾乎恢復(fù)至原樣(中插彩版圖8)，而且關(guān)節(jié)處有錫絲的支持，可以將其整形至自然形態(tài)(中插彩版圖6)，猶如剛從水中拿出來(lái)一般栩栩如生。

圖6 細(xì)紋愛(ài)潔蟹(Atergatis reticulatus)干制標(biāo)本正面觀

圖7 細(xì)紋愛(ài)潔蟹(Atergatis reticulatus)干制標(biāo)本背面觀

圖8 細(xì)紋愛(ài)潔蟹(Atergatis reticulatus)干制標(biāo)本腹面觀

3 討論

3.1 本法對(duì)其他甲殼生物的通用性 本法在適用于蟹類(lèi)的同時(shí)，也同樣適用于制作甲殼層較厚生物的干制標(biāo)本，例如：螯蝦類(lèi)、龍蝦類(lèi)以及具足蟲(chóng)類(lèi)等；但對(duì)制作甲殼層較薄生物的干制標(biāo)本的方法還正處于一個(gè)研究階段。例如：米蝦類(lèi)、長(zhǎng)臂蝦類(lèi)等。

3.2 標(biāo)本的后期維護(hù) 蟹類(lèi)干制標(biāo)本的附肢連接處都十分脆弱，很容易折斷，因此運(yùn)輸時(shí)要把標(biāo)本放入標(biāo)本盒內(nèi)，還有標(biāo)本不宜放在陽(yáng)光直射的地方，以防標(biāo)本褪色[7]，還要注意不宜放在潮濕、不通風(fēng)的地方，以免受潮發(fā)霉[8]。放標(biāo)本的地方要適量放入活性炭和樟腦丸，防止標(biāo)本生蟲(chóng)、長(zhǎng)霉。

標(biāo)本在保存過(guò)一段時(shí)間后，若發(fā)現(xiàn)附肢有破裂，拿白乳膠涂抹在破裂處風(fēng)干即可，視破裂程度可增加上述操作次數(shù)。若發(fā)現(xiàn)附肢斷裂，拿速干膠涂抹在斷面口，然后在縫隙中插入細(xì)錫絲，將錫絲固定好，插入斷裂端附肢，晾干后，再涂一層白乳膠，風(fēng)干即可。

3.3 與國(guó)內(nèi)外傳統(tǒng)方法的比較及本方法的優(yōu)點(diǎn) 首先在使用藥品方面，本方法使用的藥品成本低，方便易得，無(wú)毒無(wú)味，安全環(huán)保，而國(guó)內(nèi)傳統(tǒng)方法中的浸制法，因其主要采用福爾馬林等對(duì)人體有刺激危害的溶液，且在保存過(guò)程中易生成多聚甲醛(白色沉淀)的化學(xué)性質(zhì)，需每年更換浸制液，大大增加了標(biāo)本后期維護(hù)的人力與物力。干制標(biāo)本因?yàn)椴皇褂媒埔?，所以可以將其近距離手持觀察，根據(jù)形態(tài)差異初步辨別中華絨螯蟹和日本絨螯蟹[9-10]。標(biāo)本裝裱后也可作為家中高檔藝術(shù)裝飾品。在整姿方面，本方法結(jié)合錫絲與白乳膠進(jìn)行連接，加強(qiáng)了標(biāo)本關(guān)節(jié)處的機(jī)械強(qiáng)度，可按照自己喜好的姿勢(shì)進(jìn)行整姿。

肌肉去除是蟹類(lèi)干制標(biāo)本中最為重要的環(huán)節(jié)之一，甲殼中肌肉去除的是否干凈直接影響到整個(gè)標(biāo)本的整體效果，在肌肉去除時(shí)一定要去除徹底，不然后期殘余肌肉腐爛，會(huì)導(dǎo)致甲殼變黑，產(chǎn)生刺激性氣體，滋生細(xì)菌與蛆蟲(chóng)，減短其保存時(shí)間，大大降低標(biāo)本整體效果[3]。與國(guó)內(nèi)一些使用防腐粉法制作蟹類(lèi)干制標(biāo)本相比，本法規(guī)避以上缺點(diǎn)并且本法采用不同部位使用不同處理方法，頭胸甲因其甲殼中蝦青素和色素含量較多，故使用化學(xué)性質(zhì)較溫和的2%胰蛋白酶溶液處理，胸部腹甲因其蝦青素和色素含量較少，故用化學(xué)性質(zhì)較強(qiáng)烈的5%KOH溶液處理。此法對(duì)甲殼損傷小，比人工剔肉節(jié)省時(shí)間，無(wú)毒無(wú)味，并且使用的試劑成本低，容易獲取，安全環(huán)保，具有廣闊的推廣應(yīng)用價(jià)值，可作為以后蟹類(lèi)干制標(biāo)本方法的新標(biāo)桿。