賴夢雨 周向梅 趙德明 楊利峰

(中國農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，北京 100193)

1 病理學檢查在實驗動物質(zhì)量評價中的地位和作用

獸醫(yī)在實驗動物的疾病診療、種群繁育、研究設(shè)計、動物福利等方面發(fā)揮著極其重要的作用[1]。獸醫(yī)病理學是獸醫(yī)學的重要分支，是具有獸醫(yī)臨床性質(zhì)的基礎(chǔ)學科，它既可作為獸醫(yī)基礎(chǔ)理論學科為臨床醫(yī)學奠定堅實的基礎(chǔ)，又可作為應(yīng)用學科直接參與動物疾病的診斷和防治。因此，獸醫(yī)病理學是連接基礎(chǔ)獸醫(yī)學與臨床獸醫(yī)學的橋梁。病理學檢查是判斷動物健康與否的“金標準”，利用病理學檢查等方法，由組織器官的病理學變化最直接、最明確地反映動物的健康狀況。尤其是當動物由于如應(yīng)激和飼養(yǎng)管理不當，或不慎接觸有毒有害物質(zhì)等不確定因素，進入健康與疾病的中間態(tài)即“亞健康”狀態(tài)[2]時，病理學能夠?qū)o臨床癥狀的實驗動物質(zhì)量進行更準確地評估，避免實驗動物“亞健康”狀態(tài)影響動物實驗結(jié)果的準確性。因此，通過病理學檢查，對實驗動物健康狀況進行監(jiān)測，是評價實驗動物質(zhì)量，保障實驗動物健康必不可少的重要環(huán)節(jié)。實驗動物資源建設(shè)和質(zhì)量標準化與科技創(chuàng)新、社會經(jīng)濟發(fā)展和人類健康密切相關(guān)[3]，因此，病理學在實驗動物質(zhì)量監(jiān)測中的應(yīng)用與發(fā)展具有重要意義。

2 病理學標準的研究與發(fā)布實施

病理學在動物質(zhì)量控制和評價中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，在北京實驗動物行業(yè)協(xié)會、北京市實驗動物管理辦公室的帶領(lǐng)下，在多位病理學專家的共同努力下，率先在全國開展實驗動物病理學診斷技術(shù)規(guī)范的研究工作。目前，北京市已經(jīng)頒布實施了一系列實驗動物病理學診斷規(guī)范，詳見表1所列。同時，實驗用雞、鴨、鵝、鴿等病理學診斷規(guī)范也在研究制定中，即將陸續(xù)發(fā)布。

表1 已頒布實驗動物病理學診斷規(guī)范

實驗動物病理學標準的陸續(xù)頒布和實施，將為北京地區(qū)各種實驗動物質(zhì)量控制和健康評價提供重要的依據(jù)和指導(dǎo)，為提高實驗動物品質(zhì)進而保障動物實驗結(jié)果的科學性、可靠性及穩(wěn)定性發(fā)揮重要作用。同時，北京市實驗動物病理學標準的制定也將起到引領(lǐng)和示范作用，為全國和其他省市實驗動物的監(jiān)督管理工作提供參考。

3 實驗動物病理學檢測的實施與成效

從2009年開始，北京地區(qū)實驗動物質(zhì)量檢測中納入了病理學的檢測，主要由中國農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院獸醫(yī)病理學專業(yè)的老師及技術(shù)人員負責完成。一年兩次檢查，以大鼠、小鼠、豚鼠、金黃地鼠等嚙齒動物為抽檢對象，對動物的心臟、肝臟、脾臟、腎臟、大腸和小腸，進行大體檢查后采樣，使用石蠟切片、HE染色、冰凍切片、油紅O染色、PAS染色、免疫組化等方法，對組織結(jié)構(gòu)和細胞病變特征進行病理學描述，并結(jié)合微生物、寄生蟲等檢測結(jié)果以及動物飼養(yǎng)管理制度等進行綜合診斷。最后，出具病理檢測報告，對嚙齒類實驗動物的整體健康狀況做出分析與評價，根據(jù)檢測結(jié)果梳理病變發(fā)生的可能原因并提出建議。

在十一年的檢測過程中，我們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了送檢實驗動物不同組織臟器的病變，如肝細胞脂肪變性、肝細胞糖原沉積、肝臟局灶性或彌漫性壞死、脾臟出血、間質(zhì)性腎炎、嗜酸性粒細胞性腸炎(可見腸道寄生蟲)、增生性心包炎、嗜酸性粒細胞性心肌炎、間質(zhì)性肺炎、肉芽腫性肺炎和支氣管肺炎等[4-13]。2009—2019年的數(shù)據(jù)整體結(jié)果對比顯示，大、小鼠肝臟病變率確有明顯下降趨勢，小鼠肝臟病變率從最高值57.35%(2011年)下降至0.51%(2019年)，大鼠肝臟病變率從最高值65.00%(2011年)下降至0(2019年)，但豚鼠肝臟病變率仍相對較高，最高值為78.25%(2010年)，下降至5.00%(2019年)；各種嚙齒類實驗動物腎臟、腸道、肺臟、心臟、脾臟等臟器的病變?nèi)匀粫r有發(fā)現(xiàn)，近五年內(nèi)病變率不超過5.00%。

我們發(fā)現(xiàn)，肝細胞腫脹主要以脂肪變性和糖原沉積為主，這可能與長期的飼料營養(yǎng)成分有關(guān)，而各送檢單位均使用目前市場上商品化飼料，可見其原料質(zhì)量及配方有待規(guī)范；秋、冬季低溫影響同樣不容忽視。在低溫環(huán)境下，動物能量代謝加強，需要通過增加采食量來維持熱平衡，如果飼料供應(yīng)不足，同樣會引起營養(yǎng)不良和抗病力下降，飼料充足又易造成脂肪沉積，故應(yīng)注意優(yōu)化飼喂次數(shù)及進食量；腎臟管型及腎炎等病變可能與代謝或接觸有害物質(zhì)有關(guān)，應(yīng)注意飼料、飲水、墊料等是否有污染；肺臟間質(zhì)性肺炎、支氣管肺炎及肉芽腫性肺炎等重點要考慮飼養(yǎng)環(huán)境空氣是否達標等因素；腸道所見嗜酸性粒細胞腸炎及蟲體結(jié)構(gòu)則多與寄生蟲感染有關(guān)。及時向送檢單位反饋檢查結(jié)果，給出合理的飼養(yǎng)管理建議的同時，在下一年度的監(jiān)測中，也進行了追溯對比分析，部分單位在接受建議并完善、調(diào)整管理制度后，動物健康狀況確實得到了明顯改善。這一檢測作為病理學在實驗動物質(zhì)量控制中的應(yīng)用，為北京市實驗動物病理學診斷規(guī)范的制定，積累了寶貴的實踐經(jīng)驗，使規(guī)范能夠更加貼近生產(chǎn)實際，有利于規(guī)范的推行普及，為實驗動物病理學診斷規(guī)范未來的升級提供基礎(chǔ)。

4 “獸醫(yī)病理師”在實驗動物病理學檢測中的作用

實驗動物病理學診斷規(guī)范的執(zhí)行應(yīng)由病理學專業(yè)人員實施，從對實驗動物外觀的檢查、血液學及生化指標的檢測到動物的剖檢、組織器官制片、組織病理學觀察、結(jié)果判定等一系列病理學檢查，均需要具有獸醫(yī)病理學專業(yè)知識和技能的人員完成。檢測完畢后，病理學專業(yè)技術(shù)人員需要出具病理診斷報告并在報告上簽字確認。因此，病理學從業(yè)人員的規(guī)范在實驗動物病理學檢測中至關(guān)重要。2018年10月23日，中國獸醫(yī)協(xié)會正式宣布成立“獸醫(yī)病理師分會”。這一舉措，將為獸醫(yī)病理學人才隊伍的培養(yǎng)、繼續(xù)教育活動的開展、從業(yè)人員的規(guī)范、病理學標準體系的建設(shè)等搭建起重要的平臺?！矮F醫(yī)病理師”的推出，不僅是行業(yè)自律的基本體現(xiàn)，更是推動獸醫(yī)病理學發(fā)展，加強病理學在動物臨床診斷或健康評價中服務(wù)的關(guān)鍵舉措。對于實驗動物病理學檢測，應(yīng)由“獸醫(yī)病理師”執(zhí)行并出具病理學診斷報告，以保證檢測過程的科學性、規(guī)范性和準確性。因此，負責病理學檢測的相關(guān)單位應(yīng)重視人才隊伍的培養(yǎng)，積極組織參加病理學專業(yè)技能培訓(xùn)和診斷交流活動，不斷提高綜合診斷水平，積累豐富的診斷經(jīng)驗，以更好地服務(wù)于實驗動物的病理學監(jiān)測。

5 推動我國實驗動物病理學評價體系的建設(shè)與運行的意義

中國的生物醫(yī)藥行業(yè)正在飛速發(fā)展，實驗動物作為生命科學發(fā)展的重要基石和必備工具發(fā)揮著舉足輕重的作用。實驗動物的質(zhì)量不僅代表著一個國家開展生命科學研究的能力，更體現(xiàn)著這個國家生物醫(yī)藥發(fā)展的水平，決定著人類醫(yī)學發(fā)展的方向！未來，實驗動物將始終在國家戰(zhàn)略發(fā)展及社會文明進步中扮演著重要角色，始終與人類生命健康和社會和諧發(fā)展息息相關(guān)。因此，作為實驗動物管理工作者、實驗動物獸醫(yī)，我們責無旁貸，要為我國實驗動物的飼養(yǎng)管理方案、健康評價體系的不斷完善提出建議、提供策略且保障高品質(zhì)實驗動物的生產(chǎn)。實驗動物病理學作為檢驗動物質(zhì)量的關(guān)鍵指標，能夠最真實、最明確地反映動物的健康狀況，無論是微生物、寄生蟲等病原的感染，還是應(yīng)激、營養(yǎng)失衡、飼養(yǎng)環(huán)境不良等問題的出現(xiàn)，病理學技術(shù)人員均可通過病理學檢測方法提供最可靠、最權(quán)威的“證據(jù)”。從診斷結(jié)果分析原因、機理、致病因素等，進而為實驗動物疾病監(jiān)測、環(huán)境管理、飼料配方、遺傳背景等提供最具價值的參考依據(jù)。因此，實驗動物病理學檢測是動物健康評價體系中的必備環(huán)節(jié)，如何加強和提高病理學檢測的效率與準確性應(yīng)從如下三方面入手：①根據(jù)不同類型實驗動物的特點，以科學性、標準性、可操作性為指導(dǎo)原則，制定相對應(yīng)的病理學診斷規(guī)范。②在全國實驗動物健康監(jiān)測體系中納入病理學檢測，推行病理學診斷規(guī)范，以期為我國實驗動物的品質(zhì)監(jiān)控保駕護航。③“獸醫(yī)病理師”具備病理學從業(yè)人員技能的基本要求，因此，實驗動物病理學檢測及病理報告的出具，應(yīng)由“獸醫(yī)病理師”完成。

為了更好地為我國生命科學技術(shù)的發(fā)展服務(wù)，應(yīng)逐步完善實驗動物質(zhì)量控制檢測技術(shù)標準，與國際水平接軌，突顯獸醫(yī)病理學在監(jiān)測體系中的作用與地位，全面推進實驗動物監(jiān)管體系創(chuàng)新，提升實驗動物科技工作對生命科學領(lǐng)域研究與創(chuàng)新的支撐能力和服務(wù)水平。