胡雪廬，湯強(qiáng)

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是臨床上十分常見的慢性腸道疾病，近年來發(fā)病率有逐漸上升的趨勢。甘聚糖結(jié)合凝集素（MBL）參與炎癥介質(zhì)產(chǎn)生和結(jié)腸損傷過程[1]，CC修飾趨化因子11（CCL11）參與了血管生長和促炎性因子釋放過程，在多種腫瘤形成和發(fā)展中具有重要作用[2]，Beclin1蛋白可調(diào)節(jié)機(jī)體自噬活性，并可發(fā)揮抑制過度炎癥反應(yīng)和介導(dǎo)免疫反應(yīng)的作用[3]。研究認(rèn)為，UC的發(fā)病與腸道菌群存在密切聯(lián)系，腸道寄生的大量細(xì)菌，影響了腸道消化能力、自體免疫力及機(jī)體抗感染等過程，在炎癥性腸道疾病中發(fā)揮重要作用[4]。因此，本研究探究UC患者血清MBL、CCL11及Beclin1蛋白水平及與腸道菌群分布和病情的關(guān)系，以期為臨床提供相關(guān)參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取寧波市北侖區(qū)人民醫(yī)院和浙江省云和縣人民醫(yī)院2015年12月至2019年12月收治的UC患者66例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）存在腹瀉、糞便含有黏液、膿、血等，排便后緩解，結(jié)腸鏡檢查黏膜水腫、充血，部分可見息肉樣潰瘍；（2）符合《中國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見》[5]中UC的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（3）自愿參與本研究并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）肝、腎、心、肺等器官功能不全；（2）合并免疫系統(tǒng)疾病、凝血障礙、神經(jīng)疾病者及其他感染性疾??；（3）合并惡性腫瘤。根據(jù)Raclmilewitz UC臨床活動指數(shù)評估系統(tǒng)（CAI評分）[6]分為活動期組（≥4分，n=28）和緩解期組（＜4分，n=38）。其中活動期組男16例，女12例；年齡35～58歲，平均（46.7±4.1）歲；緩解期組男23例，女15例；年齡32～60歲，平均（47.2±3.9）歲。另選擇同期健康志愿者60例作為對照組，其中男39例，女21例；年齡31～60歲，平均（47.3±4.2）歲。3組一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 所有研究對象均抽取空腹靜脈血5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測血清MBL、CCL11及Beclin1水平，試劑盒購自加拿大ELIXIR醫(yī)藥公司。采用美國Thermo Fisher Scientific公司生產(chǎn)的酶標(biāo)儀于450 nm波長下測定吸光度，并由標(biāo)準(zhǔn)濃度曲線計(jì)算OD值。所有受試者取1～2 g新鮮糞便樣本，檢測大腸桿菌、消化球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌及腸球菌水平。采用CAI評分、Mayo活動評分[7]及Baron分級評分[8]評估病情活動程度。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)，組間比較采用單因素方差分析；相關(guān)性分析采用Spearman檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清MBL、CCL11及Beclin1水平比較 對照組、緩解期組、活動期組MBL水平依次降低，CCL11、Beclin1水平依次升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

表1 各組血清MBL、CCL11及Beclin1水平比較

2.2 各組腸道菌群分布比較 活動期組大腸桿菌、腸球菌數(shù)量高于緩解期組和對照組，乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數(shù)量低于緩解期組和對照組（均P＜0.05）；緩解期組乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數(shù)量低于對照組（均P＜0.05），緩解期組與對照組大腸桿菌、腸球菌數(shù)量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見表2。

表2 各組腸道菌群分布比較 （×109個(gè)）

2.3 不同病情UC患者CAI、Mayo及Baron評分比較 活動期組CAI、Mayo及Baron評分均高于緩解期組（均P＜0.05），見表3。

表3 各組CAI、Mayo及Baron評分比較 分

2.4 MBL、CCL11及Beclin1與腸道菌群數(shù)量的相關(guān)性 Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清MBL與大腸桿菌、腸球菌數(shù)量存在負(fù)相關(guān)，與乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數(shù)量存在正相關(guān)（均P＜0.05）；CCL11、Beclin1與大腸桿菌、腸球菌數(shù)量存在正相關(guān)性，與乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數(shù)量存在負(fù)相關(guān)（均P＜0.05）。見表4。

表4 血清MBL、CCL11及Beclin1與腸道菌群數(shù)量的相關(guān)性分析

2.5 血清MBL、CCL11、Beclin1與病情的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清MBL與CAI、Mayo及Baron評分存在負(fù)相關(guān)（均P＜0.05）；CCL11、Beclin1與CAI、Mayo及Baron評分存在正相關(guān)（均P＜0.05）。見表5。

表5 血清MBL、CCL11及Beclin1與病情活動的相關(guān)性分析

3 討論

目前，內(nèi)鏡及結(jié)腸鏡檢查是評估UC病情的主要方式，但均具有入侵性，不適合耐受性較差的患者。因此，通過準(zhǔn)確、快捷且無創(chuàng)的檢測標(biāo)志物評估UC病情為臨床研究的重要內(nèi)容。

本研究探討MBL、CCL11及Beclin1在UC患者中的表達(dá)，并探討與UC患者腸道菌群的相關(guān)性，結(jié)果顯示活動期UC患者中，CCL11、Beclin1水平升高明顯，MBL水平則顯著降低，且與緩解期UC患者及健康對照人群存在明顯差異。這提示檢測血清MBL、CCL11及Beclin1水平有助于UC患者的疾病診斷和病情評估。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清MBL、CCL11及Beclin1水平與UC患者CAI、Mayo及Baron評分均存在顯著相關(guān)性（均P＜0.05）。因此，MBL、CCL11及Beclin1可作為UC診斷和病情評估的潛在生物學(xué)指標(biāo)。

腸道菌群可反應(yīng)腸道細(xì)菌狀態(tài)，分為有益菌、有害菌和中性菌，不同菌群數(shù)量存在動態(tài)平衡。菌群數(shù)量失衡將影響機(jī)體功能，并引發(fā)多種疾病。研究指出[9]，腸道炎癥疾病狀態(tài)下，腸道菌群會對腸黏膜的功能造成影響，并誘發(fā)機(jī)體免疫炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致UC發(fā)生。另有研究指出[10]，不同時(shí)期UC患者腸道菌群會發(fā)生改變。本研究活動期組大腸桿菌、腸球菌數(shù)量明顯高于緩解期組和對照組，乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數(shù)量明顯低于緩解期組和對照組，這與上述研究結(jié)果相類似。雙歧桿菌、乳酸桿菌和和消化球菌為腸道有益菌，可與腸黏膜細(xì)胞密切結(jié)合，形成腸黏膜表面的生物學(xué)屏障，發(fā)揮阻止病原菌定植和入侵等作用，三者數(shù)量降低腸黏膜的防御作用隨之降低；腸球菌可釋放外毒素，加重UC患者免疫紊亂和腸道局部炎癥反應(yīng)。本研究對于血清MBL、CCL11及Beclin1水平與腸道菌群數(shù)量的相關(guān)性分析結(jié)果顯示，MBL、CCL11及Beclin1分別與大腸桿菌、腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌存在密切相關(guān)性。這提示檢測血清MBL、CCL11及Beclin1水平還有助于揭示UC患者腸道菌群紊亂情況，有助于UC患者的病情評估和病因分析。