陳超超，畢曉潔，沈 波

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬臺州醫(yī)院檢驗科，浙江 臺州 317000）

心肌肌鈣蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）是心肌損傷的確診標志物，其特異性較高[1]，可敏感地反映小灶性、可逆性心肌損傷的存在，還可用于溶栓后再灌注的判斷[2]。目前，cTnI多采用化學(xué)發(fā)光法檢測，自身免疫性抗體、人抗動物抗體、異嗜性抗體等可能會對其結(jié)果造成一定的干擾。本研究對cTnI測定中的假陽性結(jié)果進行分析。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取溫州醫(yī)科大學(xué)附屬臺州醫(yī)院就診患者10例，其中男4例、女6例，年齡（60.5±5.5）歲。納入標準：（1）有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病史；（2）檢驗結(jié)果多次提示cTnI顯著增高，但患者無明顯胸悶、胸痛表現(xiàn)；（3）心電圖檢查未發(fā)現(xiàn)明顯異常；（4）頭顱電子計算機斷層掃描（computed tomography，CT）提示未見明顯異常，排除心肌相關(guān)疾病。

1.2 樣本

采集所有對象靜脈血6 mL，其中3 mL采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝，剩余3 mL置于促凝管中，分別以800×g離心10 min，分離血清或血漿。以各儀器配套的陽性質(zhì)控品作為陽性對照樣本。本實驗室用于cTnI測定的常規(guī)檢測系統(tǒng)為UniCel DxI 800全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（美國貝克曼庫爾特公司）及配套cTnI試劑（簡稱DxI 800系統(tǒng)），檢測原理為雙位點酶聯(lián)免疫法。cTnI參考區(qū)間為<0.10 ng/mL。

1.3 處理方法

1.3.1 直接測定患者及陽性對照樣本 分別采用cobas e411全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀（瑞士羅氏公司）及配套cTnI試劑（簡稱e411系統(tǒng)）、ARCHITECT i2000SR全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（美國雅培公司）及配套cTnI試劑（簡稱i2000SR系統(tǒng)）和CL-6000i全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（深圳邁瑞公司）及配套cTnI試劑（簡稱CL-6000i系統(tǒng)）直接測定10例患者樣本及陽性對照樣本。

1.3.2 稀釋法處理 采用Access Sample Diluent A樣本稀釋液（美國貝克曼庫爾特公司）對患者樣本和陽性對照樣本分別進行2、4、8倍稀釋，采用DxI 800系統(tǒng)檢測cTnI水平。

1.3.3 異嗜性阻斷試劑（heterophilic blocking reagent，HBR）預(yù)處理 采用HBR預(yù)處理患者樣本及陽性對照樣本，采用DxI 800系統(tǒng)檢測cTnI水平。

1.3.4 采用2-巰基乙醇（2-mercaptoethanol，2-Me）預(yù)處理 采用2-Me預(yù)處理患者樣本及陽性對照樣本，采用DxI 800系統(tǒng)檢測cTnI水平。

2 結(jié)果

2.1 10例患者一般臨床資料

10例患者血清類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）均>1 000 kU/L，心肌相關(guān)指標（B型鈉尿肽、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶和肌酸激酶）均處于參考區(qū)間內(nèi)，僅cTnI水平異常升高。見表1。

表1 10例患者一般臨床資料

2.2 不同檢測系統(tǒng)直接檢測患者樣本及陽性對照樣本的結(jié)果

e411系統(tǒng)、i2000SR系統(tǒng)和CL-6000i系統(tǒng)檢測10例患者樣本的cTnI結(jié)果均正常，DxI 800系統(tǒng)檢測cTnI的結(jié)果均異常升高。見表2。

表2 不同檢測系統(tǒng)直接檢測患者樣本及陽性對照樣本的cTnI結(jié)果 ng/mL

2.3 患者樣本和陽性對照樣本經(jīng)稀釋、HBR及2-Me處理后的cTnI檢測結(jié)果

按2、4、8倍稀釋后，患者樣本的cTnI檢測結(jié)果無線性變化規(guī)律，而陽性對照樣本的cTnI檢測結(jié)果隨稀釋倍數(shù)的增大而成倍降低。經(jīng)HBR處理后，患者樣本與陽性對照樣本檢測結(jié)果均未見明顯下降。經(jīng)2-Me處理后，10例患者樣本檢測結(jié)果均降至正常，陽性對照樣本未見明顯變化。見表3。

表3 患者樣本和陽性對照樣本經(jīng)稀釋、HBR及2-Me處理后的cTnI檢測結(jié)果 ng/mL

3 討論

多種病理學(xué)因素可能在無明顯缺血性心臟疾病條件下引起肌鈣蛋白升高，如充血性心力衰竭、急性和慢性創(chuàng)傷、電擊復(fù)律等[3]，因此在臨床難以判斷時需要進行連續(xù)監(jiān)測。

RF是以變性IgG為靶抗原的自身抗體。人血清中的IgM、IgG型RF可以與化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)中的捕捉抗體及酶標二抗的Fc段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性[4]。加入2-Me可直接破壞IgM、IgG等分子中的二硫鍵，使RF滅活。RF屬于內(nèi)源性干擾因素之一，會對β-人絨毛膜促性腺激素、促甲狀腺素、cTnI和B型鈉尿肽等的檢測造成影響[5-7]。

本研究10例患者入院后多次采用DxI 800系統(tǒng)檢測cTnI，結(jié)果均升高。與臨床溝通后，考慮到這些患者無胸痛、胸悶等癥狀，且心電圖不支持心肌損傷，因此懷疑存在某種干擾，造成結(jié)果假性增高。本研究通過稀釋法處理、更換檢測系統(tǒng)、添加阻斷劑以及物理化學(xué)技術(shù)對樣本進行預(yù)處理?；颊邩颖窘?jīng)2-Me預(yù)處理后，檢測結(jié)果變?yōu)殛幮?，可證實RF為干擾cTnI檢測的因素。本研究使用的DxI 800系統(tǒng)、e411系統(tǒng)、CL-6000i系統(tǒng)均采用雙抗體夾心法，但是RF僅對DxI 800系統(tǒng)產(chǎn)生干擾，可能與雙抗體標記的位點不同有關(guān)。

總之，在實際工作中，如遇到RF水平較高的患者，在使用DxI 800系統(tǒng)檢測相關(guān)項目時應(yīng)引起重視，若檢測結(jié)果異常，應(yīng)結(jié)合臨床，多方面考慮，以減少不必要的檢查及用藥。