卿 艷,齊景梁,趙春艷,周 娟

（四川省食品藥品檢驗檢測院，四川 成都 611731）

澤瀉為澤瀉科植物東方澤瀉Alisma orientalis（Sam.）Juzep.或澤瀉Alisma plantago-aquaticaLinn.的干燥塊莖。冬季莖葉開始枯萎時采挖，洗凈，干燥，除去須根和粗皮。主要功效為利水滲濕、泄熱、化濁降脂。用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛、高脂血等癥的治療[1]。主產(chǎn)于四川、福建等地?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》將澤瀉列為上品。近年來隨著環(huán)境的污染，人們對藥物安全性的重視程度日益劇增，一些中藥材及飲片被檢出重金屬超標的問題，眾所周知，重金屬在人體內代謝緩慢，容易積累，對人體產(chǎn)生危害，經(jīng)查閱文獻，目前澤瀉的重金屬及有害元素方面的研究還比較少，而在四川（Alisma plantago-aquaticaLinn.主產(chǎn)于四川彭山，俗稱“川澤瀉”），澤瀉為用量較大的藥材，目前未見對澤瀉中的重金屬及有害元素進行研究的相關報告，為全面了解川澤瀉飲片的重金屬及有害元素污染情況，本研究在四川省范圍內廣泛收集澤瀉飲片，采用微波消解-ICP-MS測定法對5種重金屬及有害元素進行測定，并采用單項污染指數(shù)法和內梅羅綜合污染指數(shù)法對污染情況進行評價。為澤瀉的安全使用提供數(shù)據(jù)支撐和科學依據(jù)，以確保人民群眾用藥安全，為臨床配方服務。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

熱電X2型電感耦合等離子體質譜儀（美國賽默飛世爾公司）；MS1602S型電子天平（瑞士梅特勒—托利多公司）；MARS型微波消解萃取儀（美國CEM公司）；611VF型超純水儀（德國賽多利斯公司）。

1.2 試藥

澤瀉樣品：樣品抽取覆蓋了全省22個地、市、州，并同時覆蓋生產(chǎn)企業(yè)、經(jīng)營單位及醫(yī)療機構，最終共收集了共計90批飲片（歸屬于60家生產(chǎn)企業(yè)，其中鹽澤瀉37批，澤瀉片53批）。經(jīng)四川省食品藥品檢驗檢測院主任藥師黎躍成鑒定為澤瀉科植物澤瀉Alisma plantago-aquaticaLinn.的干燥塊莖。Pb、Cd、As、Hg、Cu、In、Ge、Bi各元素標準溶液均購于國家有色金屬及電子材料分析測試中心，標準值均為106ng/mL，硝酸（MOS級，德國CNW公司）。

2 方法與結果

2.1 儀器工作參數(shù)

ICP-MS測定條件為射頻功率：1 400 W，采樣深度：76 step，載氣流速：0.83 L/min，輔助氣流量：0.95 L/min，冷卻氣流速：13 L/min，蠕動泵采集樣品時轉速：30 r/min，積分時間：40 s。75As、65Cu以72Ge作內標，111Cd以115In作內標，202Hg、208Pb以209Bi作內標。微波消解程序：從室溫5 min升至120 ℃，保持20 min，再5 min升至160 ℃，保持15 min，再7 min升至185 ℃，保持20 min。

2.2 溶液的制備

2.2.1標準品溶液的制備 精密吸取各標準貯備溶液，用5%硝酸稀釋配制混合系列溶液（As、Cd、Pb為0.2、1、 2、4、10、20 ng/mL，Cu為2、10、20、40、100、200 ng/mL，Hg為0.05、0.1、0.5、1、2、5 ng/mL）。另取上述115In、72Ge、209Bi標準溶液，用5%硝酸稀釋成10 ng/mL的溶液，作為內標溶液。

2.2.2供試品溶液的制備 精密稱取澤瀉粉末約0.5 g，置微波消解罐中，加硝酸7 mL，放置60 min，密閉，按“2.1”項下微波消解程序，消解樣品。冷卻取出，揮去濃煙，用去離子水轉移至50 mL容量瓶并定容。同時制備試劑空白溶液。

2.3 線性關系與檢出限

采用雙蠕動泵管進樣系統(tǒng)分別引入空白、標準、供試品溶液與內標溶液，然后按 “2.1”項下ICP-MS測定工作條件進行測定。依次測定5種元素的系列質量濃度對照品溶液，以對照品質量濃度為橫坐標（X），對照品峰強度為縱坐標（Y），繪制標準曲線，得各元素的回歸方程、相關系數(shù)及線性范圍，結果顯示各元素線性關系良好，相關系數(shù)r> 0.999。精密吸取5%硝酸空白溶液連續(xù)測定12次，計算測得信號的標準偏差（δ），3δ所對應的濃度即為儀器的檢出限，檢出限為0.018～0.165 ng/mL。

2.4 重復性試驗

取澤瀉粉末6份，按“2.2.2”方法操作配置供試品溶液，按 “2.1”項下ICP -MS 測定工作條件進行測定，計算各元素RSD為0.0%～8.75%，符合痕量分析要求。

2.5 回收率實驗

精密稱取樣品約 0.5 g，置微波消解罐中，加入硝酸7 mL，再加入混合標準儲備液1 mL，其它按“2.2.2”方法操作配置供試品溶液，按“2.1”項下方法進行測定，結果見表1，各元素加樣回收率在86.8% ～ 103.8% 之間，符合痕量分析要求，見表1。

表1 線性關系、檢出限及回收率Tab. 1 Linear relationship，detection limit and recovery rate

2.6 樣品的測定

取澤瀉樣品，分別按“2.2.2”項下方法操作，制備供試品溶液，按 “2.1”項下ICP -MS 測定工作條件進行測定，結果見表2（編號1～37為鹽澤瀉，編號38～90為澤瀉片）。

表2 澤瀉飲片中Pb、Cd、As、Hg、Cu 檢測結果（mg / kg，n = 2）Tab. 2 Test results of Pb，Cd，As，Hg and Cu in Alismatis Rhizoma（mg / kg，n = 2）

參照現(xiàn)行《中國藥典》 （2020年版）藥材及飲片（植物類）中重金屬及有害元素的限量指導值（ Pb≤5 mg/kg，Cd≤1 mg/kg，As≤2 mg/kg，Hg≤0.2 mg/kg，Cu≤20 mg/kg），澤瀉飲片中Cu元素不合格率為4.4%，Hg元素不合格率為1.1%，Cd、As、Pb元素均合格，見表3。

表3 澤瀉中Pb、Cd、As、Hg、Cu不合格率統(tǒng)計Tab. 3 Disqualification rate of Pb, Cd, As, Hg and Cu in Alismatis Rhizoma

3 污染分析

3.1 評價方法

經(jīng)查閱文獻，目前很多學者在對中藥材或蔬菜中的重金屬及有害元素進行評價時，均參考內梅羅指數(shù)法，包括單因子污染指數(shù)法和內梅羅綜合污染指數(shù)法[2-6]，是當前國內外進行環(huán)境、農(nóng)作物、中藥材綜合污染指數(shù)評價的最常用的方法之一。

續(xù)表2

3.1.1單因子污染指數(shù)法 單一重金屬及有害元素評價采用單因子污染指數(shù)法。Pi（單因子污染指數(shù)）＝Ci（污染物的測量值）/Si（污染物的評價標準）。Pi≤1為非污染，Pi＞1即表明受到污染，以Pi的值大小來分級，1＜Pi≤2為輕度污染，2＜Pi≤3為中度污染，Pi＞3為重度污染。經(jīng)查閱文獻，有很多研究選用此法來反映中藥材中重金屬及有害元素的單元素污染狀況[7]。

3.1.2內梅羅綜合污染指數(shù)法 單因子污染指數(shù)只能反映單個金屬元素的污染程度，不能反映中藥材的整體污染狀況。中藥材重金屬及有害元素的污染非常復雜，需要綜合評價，而內梅羅綜合污染指數(shù)法能夠反映出各個重金屬及有害元素對中藥材的綜合影響。目前這種方法已經(jīng)廣泛應用在水、土壤、乳制品、水果、蔬菜、中藥材等污染狀況研究中[8-10]。

公式中的P綜合為綜合污染指數(shù)；Pmax為各單因子污染指數(shù)中的最大值；Pave為所有單因子污染指數(shù)的平均值。共劃分成5個等級，分別為：安全級（P綜合≤0.7）；警戒級（0.7＜P綜合≤1）；輕度污染（1＜P綜合≤2）；中度污染（2＜P綜合≤3）；重度污染（P綜合＞3）。

3.2 評價結果

分別采用單因子污染指數(shù)法及內梅羅綜合污染指數(shù)法對澤瀉飲片污染情況進行分析，結果見表6。澤瀉飲片5種重金屬及有害元素平均單項污染指數(shù)由大到小順序為Cu＞Cd＞As＞Pb＞Hg，其中Cu是主要的污染物，單項污染指數(shù)平均值為0.83，有10批澤瀉飲片污染程度為警戒級，占比11.1%，Cd、Pb、Hg、As則基本不存在污染情況，總的來看，澤瀉飲片的內梅羅綜合污染指數(shù)為0.62，污染程度為安全，結果見表4。

表4 污染評價結果Tab. 4 Results of pollution assessment

續(xù)表4

37批鹽澤瀉的Cu單項污染指數(shù)平均值為0.84，內梅羅綜合污染指數(shù)為0.62，53批澤瀉片Cu單項污染指數(shù)平均值為0.83，內梅羅綜合污染指數(shù)為0.63，基本無差異，可見炮制過程對澤瀉飲片的污染影響不大，結果見表5。

表5 不同炮制品污染情況對比Tab. 5 Comparison of contamination by different processed products

4 討論

根據(jù)《中國藥典》（2020年版）藥材及飲片（植物類）重金屬及有害元素的限量指導值，通過采用單項污染指數(shù)及內梅羅綜合污染指數(shù)分析方法分析，綜合來看四川范圍內澤瀉藥材及飲片的總體情況較好，為安全級別。但從單項污染指數(shù)分析，Cu為主要污染物，為警戒級別，應引起人們的重視。經(jīng)查閱目前國際上的重金屬限量標準發(fā)現(xiàn)，我國對于植物藥的限度標準，處于較為嚴格的水平，如果以目前各國家（地區(qū)）最大限量標準（Pb≤20 mg/kg，Cd≤4 mg/kg，As≤5 mg/kg，Hg≤3 mg/kg，Cu≤ 150mg/kg）為依據(jù)，重新計算，此次收集的90批澤瀉飲片中Pb、Cd、As、Hg、Cu單項污染指數(shù)平均值分別為0.01、0.09、0.05、0.00、0.11，污染程度均為非污染，內梅羅綜合污染指數(shù)平均值為0.09，均為安全級。因此，重金屬及有害元素標準限度值的高低直接決定了該品種的污染等級，大大影響了評價結果。

5 結論

本研究采用微波消解-ICP-MS測定法，對澤瀉飲片中Pb、Cd、As、Hg、Cu的含量進行測定，具有良好的精密度、重復性和準確性，方法可操作性強。采用不同的限度標準，其污染等級存在明顯差異，因此，我們更應該結合實際，建立更加完善的合理的中藥材及飲片的重金屬及有害元素殘留限量標準，保障公眾用藥安全有效。同時，更應該從源頭開始，從種植過程入手，對其土壤、水源、肥料等多因素進行結合分析，找到污染源頭，這也是下一步的研究方向。