劉尹正澤 肖 寒 梁 欣 張利霞

遵義醫(yī)科大學(xué)第五附屬 （珠海）醫(yī)院感染科，廣東珠海 519100

獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immune deficiency syndrome，AIDS）又稱為艾滋病，是由人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）引起的一種傳染性疾病。HIV通過破壞人的免疫系統(tǒng)，使患者喪失對(duì)各種疾病的抵抗力，嚴(yán)重危害人的生命。HIV高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療（highly active antiretroviral therapy，HAART）可有效抑制機(jī)體HIV增殖復(fù)制，促進(jìn)患者免疫功能恢復(fù)，進(jìn)而延長患者生存期并控制并發(fā)癥[1-2]。淋巴細(xì)胞功能缺陷是艾滋病患者免疫功能缺陷的主要病因，T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞同屬淋巴細(xì)胞，前者介導(dǎo)特異和非特異性免疫，后者產(chǎn)生抗體發(fā)揮特異性體液免疫功能，兩者相輔相成[3-4]。本研究選取2018年6月至2019年9月我院收治的艾滋病患者，對(duì)其接受HAART治療前后的外周血淋巴細(xì)胞變化進(jìn)行研究，分析外周血淋巴細(xì)胞改變對(duì)于預(yù)后的評(píng)估價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2018年6月至2019年9月間收治的艾滋病患者120例作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國艾滋病診療指南（2018版）》中對(duì)艾滋病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②經(jīng)免疫印跡法證實(shí)為HIV抗體陽性；③均可接受治療期間1、3、6及12個(gè)月復(fù)診檢測(cè)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①在近3個(gè)月內(nèi)接受HAART治療；②存在明顯機(jī)會(huì)性感染患者；③合并肺結(jié)核、病毒性肝炎等其他傳染性疾病；④合并血液、免疫、內(nèi)分泌或神經(jīng)等系統(tǒng)嚴(yán)重疾病；⑤合并嚴(yán)重的心腦血管、肝腎肺等實(shí)質(zhì)性臟器功能障礙；⑥妊娠期或哺乳期女性；⑦資料不完整或失訪。選擇同期門診體檢健康志愿者100名作為對(duì)照組。

觀察組中男69例，女51例，年齡19～68歲，平均（36.71±8.52）歲，平均體重指數(shù)（21.31±1.36）kg/m2；對(duì)照組中男57例，女43例，年齡20～71歲，平均（37.05±8.63）歲，平均體重指數(shù)（21.28±1.27）kg/m2。兩組受試者的一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有受試者均簽署知情同意書。本研究已經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

觀察組患者給予HAART治療：①替諾福韋（Tenofovir Disoproxil Fumarate，TDF）（國 藥 準(zhǔn) 字H20193014，安徽貝克生物制藥有限公司）口服300 mg/次，1次 /d；或 2.0 mg/kg（體重＜ 50.0 kg），1次/d；②拉米夫定（Lamiv udine，3TC）（蘇州葛蘭素史克制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字：H20030581，國藥準(zhǔn)字：H20030581，）口服300.0 mg/次，1次/d；③依非韋倫（Efavirenz，EFV）（浙江華海藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字：H20143154）口服600 mg/次，1次/d。連續(xù)治療12個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)

①比較觀察組患者治療前及治療1、3、6及12個(gè)月的CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，并與對(duì)照組進(jìn)行比較。采集受試者外周靜脈血3.0 ml，將外周靜脈血置于含乙二胺四乙酸二鉀的抗凝管中抗凝，5000 rpm離心5 min得血漿，2 h內(nèi)上機(jī)完成檢測(cè)，采用Partec CyFlow PA流式細(xì)胞儀及配套試劑（德國PARTEC公司）檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)；②治療12個(gè)月，以CD4+T淋巴細(xì)胞較治療前升高＞100個(gè)/μl作為治療有效標(biāo)準(zhǔn)，分為有效亞組和無效亞組，比較觀察組患者治療前及治療1、3、6及12個(gè)月的CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件，計(jì)量資料以（）表示，多組比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNQ檢驗(yàn)，兩組間同一時(shí)間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比較采用t檢驗(yàn)；采取Pearson相關(guān)及散點(diǎn)圖描述觀察組患者治療前及治療12個(gè)月后的CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差值（ΔCD4+T淋巴細(xì)胞和ΔB淋巴細(xì)胞）相關(guān)性；繪制受試者工作特征曲線（receiver operator characteristic curve，ROC），分析B淋巴細(xì)胞最佳治療切入點(diǎn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)變化比較

觀察組治療前后的CD4+T及B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均低于對(duì)照組（P＜0.05），與治療前比，觀察組患者治療1、3、6及12個(gè)月后的CD4+T及B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯升高（P＜0.05），且呈時(shí)間依賴性相關(guān)趨勢(shì)。見表1。

表1 兩組患者治療前后淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)變化比較（，個(gè)/μl）

表1 兩組患者治療前后淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)變化比較（，個(gè)/μl）

注：F*、P*為對(duì)照組與觀察組前后的單因素方差分析比較；1）觀察組治療前后與對(duì)照組比較，P＜0.05，2）觀察組治療后與治療前比較，P＜0.05，3）觀察組治療3、6及12個(gè)月與治療1個(gè)月比較，P＜0.05，4）觀察組治療6及12個(gè)月與治療3個(gè)月比較，P＜0.05，5）觀察組治療12個(gè)月與治療6個(gè)月比較，P＜0.05

組別 n CD4+T淋巴細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞對(duì)照組 100 830.26±182.39 301.38±114.82觀察組 120 治療前 216.37±88.591） 114.57±39.851）治療 1 個(gè)月 265.92±94.281）2） 122.88±43.161）2）治療 3 個(gè)月 294.34±92.731）2）3） 135.40±50.721）2）治療 6 個(gè)月 331.50±98.471）2）3）4）157.63±61.291）2）3）4）治療 12 個(gè)月 395.81±106.361）2）3）4）5）195.74±70.351）2）3）4）5）F值* 413.357 117.948 P值* 0.000 0.000

2.2 有效亞組與無效亞組治療前后淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比較

根據(jù)治療有效標(biāo)準(zhǔn)將患者分為有效亞組73例（60.83%），無效亞組47例（39.17%）。治療前、治療1個(gè)月和治療3個(gè)月，有效亞組及無效亞組的CD4+T淋巴細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與無效亞組比較，有效亞組治療6個(gè)月、12個(gè)月的CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯升高（P＜0.05）；與無效亞組比較，有效亞組治療前后的B淋巴細(xì)胞均明顯升高（P＜0.05）；治療有效亞組及無效亞組的CD4+T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均高于治療前（P＜0.05），且呈時(shí)間依賴性相關(guān)趨勢(shì)。見表2。

表2 有效亞組與無效亞組治療前后淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比較（）

表2 有效亞組與無效亞組治療前后淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比較（）

注：①與治療前比較，P＜0.05；②與治療1個(gè)月比較，P＜0.05；③與治療3個(gè)月比較，P＜0.05；④與治療6個(gè)月比較，P＜0.05

組別 n CD4+T淋巴細(xì)胞（個(gè)/μl）治療前 治療1個(gè)月 治療3個(gè)月 治療6個(gè)月 治療12個(gè)月 F值 P值有效亞組 73 215.25±54.37 251.62±98.27① 300.51±98.74①② 352.25±101.48①②③ 432.31±116.29①②③④ 57.732 0.000無效亞組 47 206.11±55.21 238.07±61.35① 269.56±79.45①② 304.27±84.41①②③ 341.12±90.46①②③④ 23.385 0.000 t值 0.894 0.845 1.805 2.695 4.559 P值 0.373 0.4 0.074 0.008 0.000組別 n B淋巴細(xì)胞（個(gè)/μl）治療前 治療1個(gè)月 治療3個(gè)月 治療6個(gè)月 治療12個(gè)月 F值 P值有效亞組 73 111.36±47.54 132.26±49.78① 153.96±57.25①② 179.66±64.98①②③ 215.35±85.06①②③④ 30.979 0.000無效亞組 47 92.27±33.48 113.31±39.86① 133.27±46.35①② 155.96±57.68①②③ 184.60±59.35①②③④ 26.069 0.000 t值 2.395 2.195 2.077 2.039 2.161 P值 0.018 0.03 0.04 0.044 0.033

2.3 治療12個(gè)月ΔCD4+T和ΔB淋巴細(xì)胞的相關(guān)性分析

治療12個(gè)月，觀察組患者的ΔCD4+T淋巴細(xì)胞與ΔB淋巴細(xì)胞呈明顯正相關(guān)（r=0.396，P＜0.05）。見圖1。

圖1 ΔCD4+T淋巴細(xì)胞和ΔB淋巴細(xì)胞相關(guān)性分析

2.4 HAART治療最佳B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)分析

ROC曲線顯示，治療前外周血B淋巴計(jì)數(shù)在101.28個(gè)/μl時(shí)，曲線下面積為0.853，治療有效的敏感度為81.93%，特異度為83.47%。見圖2。

圖2 艾滋病患者接受HAART治療前外周血最佳B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的ROC曲線圖

3 討論

近年來，艾滋病發(fā)生率逐年升高，已成為國內(nèi)重點(diǎn)關(guān)注的公共衛(wèi)生問題[6]。CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平可直接反映艾滋病患者免疫缺陷程度，有效評(píng)估艾滋病患者病情進(jìn)程和藥物治療效果，同時(shí)還可監(jiān)測(cè)機(jī)會(huì)性感染和死亡風(fēng)險(xiǎn)[7-8]。目前，HAART是艾滋病的最有效治療手段，通過提高機(jī)體CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，促進(jìn)患者免疫系統(tǒng)重建，延緩病情進(jìn)展[9]。

CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)是評(píng)價(jià)患者患者機(jī)會(huì)性感染和死亡風(fēng)險(xiǎn)的重要參數(shù)，HAART能持續(xù)提升CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，促進(jìn)患者免疫系統(tǒng)功能重建[10]。B淋巴細(xì)胞是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，經(jīng)抗原激活后能提呈抗原，參與免疫調(diào)節(jié)及炎癥反應(yīng)，其計(jì)數(shù)水平亦直接決定機(jī)體體液免疫功能[11-12]。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者治療1、3、6及12個(gè)月后的CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯高于治療前，但仍明顯低于健康者，提示HAART對(duì)艾滋病患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)提升效果明顯，但無法徹底清除HIV，因此與健康人群相比，艾滋病患者的免疫功能仍不完全。進(jìn)一步采取Pearson相關(guān)及散點(diǎn)圖描述CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的相關(guān)性分析顯示，治療12個(gè)月患者的B淋巴細(xì)胞和CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)變化呈現(xiàn)正相關(guān)性，提示HAART能同時(shí)改善體液和細(xì)胞免疫功能。

B淋巴細(xì)胞作為機(jī)體唯一可產(chǎn)生抗HIV-1中和抗體免疫細(xì)胞，是延緩艾滋病病情進(jìn)展的重要保護(hù)因素[13]。本研究以CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)升高＞100個(gè)/μl作為治療有效標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示120例艾滋病患者中，有效亞組73例（60.83%），無效亞組47例（39.17%），有效亞組患者治療前后的B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯高于無效亞組（P＜0.05）。分析可能原因在于艾滋病患者B淋巴細(xì)胞對(duì)HIV損害敏感度不同，部分患者傳遞T淋巴細(xì)胞活化信號(hào)及其分泌白介素-6（interleukin-6，IL-6）等炎癥介質(zhì)等途徑減弱，正向調(diào)控CD4+T淋巴細(xì)胞能力減弱，啟動(dòng)B淋巴細(xì)胞凋亡途徑，又可通過“旁鄰者效應(yīng)”加快CD4+T淋巴細(xì)胞凋亡，降低了HAART治療效果[14-15]。進(jìn)一步通過ROC曲線分析顯示，治療前外周血B淋巴計(jì)數(shù)在101.28個(gè)/μl時(shí)，曲線下面積為0.853，治療有效的敏感度為81.93%，特異度為83.47%，提示外周血B淋巴計(jì)數(shù)可用于指導(dǎo)艾滋病采用HAART治療提供借鑒意義。

綜上所述，HAART能明顯提高艾滋病患者機(jī)體CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，同時(shí)治療前B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)艾滋病患者HAART治療效果有明顯影響。