趙賀，洪繼彪，趙年樺，胡仁云，魏杰*，聶竹蘭

(1.塔里木大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆維吾爾自治區(qū) 阿拉爾 843300； 2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆維吾爾自治區(qū) 阿拉爾 843300； 3.塔里木珍稀魚(yú)類研究中心，新疆維吾爾自治區(qū) 阿拉爾 843300；4.武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司，湖北 武漢 430000)

厚唇裂腹魚(yú)Schizothoraxirregularis屬鯉形目Cypriniformes鯉科Cyprinidae裂腹魚(yú)亞科Schizothoracinae裂腹魚(yú)屬Schizothorax，是新疆克孜勒河土著魚(yú)之一[1]?？俗卫蘸游挥谥袊?guó)最西端，隸屬于新疆維吾爾自治區(qū)克孜勒蘇柯?tīng)柨俗灾沃?，發(fā)源于天山南脈中吉邊界西側(cè)吉爾吉斯斯坦境內(nèi)扎爾多布卡山口海拔4 419 m的冰山上，是喀什噶爾河水系中水量最大的一條河流[2]。近幾十年來(lái)，受氣候變化影響，克孜勒河流域內(nèi)植被覆蓋率逐年降低，少有降水，加之人類對(duì)環(huán)境的破壞，厚唇裂腹魚(yú)生存環(huán)境日漸惡劣，種群數(shù)量急劇減少。

目前，關(guān)于厚唇裂腹魚(yú)的研究?jī)H限于其資源分布[3-4]、形態(tài)學(xué)[5-6]、線粒體COI基因序列[7]、游泳能力[8]和精子活力[9]等方面，有關(guān)其人工繁殖、胚胎發(fā)育和早期仔魚(yú)發(fā)育方面的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究中，對(duì)克孜勒河厚唇裂腹魚(yú)親魚(yú)進(jìn)行人工繁殖，探索厚唇裂腹魚(yú)的繁殖時(shí)期、雌雄鑒別、人工催產(chǎn)和人工孵化等技術(shù)，并系統(tǒng)觀察了其胚胎和早期仔魚(yú)發(fā)育的過(guò)程，以探究其胚胎和早期仔魚(yú)發(fā)育各個(gè)時(shí)期的典型特征，旨在為厚唇裂腹魚(yú)的資源保護(hù)和人工繁殖提供基礎(chǔ)資料和科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)于2019年4—5月在新疆維吾爾自治區(qū)克孜勒蘇柯?tīng)柨俗灾沃轂跚】h卡拉貝利水利樞紐工程魚(yú)類增殖放流站進(jìn)行厚唇裂腹魚(yú)人工繁殖試驗(yàn)。試驗(yàn)親魚(yú)于2017年12月、2018年1—12月捕自克孜勒河流域，共捕野生親魚(yú)1 380尾，體長(zhǎng)為152.31～271.25 mm,體質(zhì)量為102.17～265.31 g，暫養(yǎng)于室內(nèi)玻璃缸(直徑為2 m，水深為1 m)中，15 d后轉(zhuǎn)移至養(yǎng)殖池(面積≥667 m2，水深≥0.6 m，循環(huán)水≥1 m3)中進(jìn)行培育。親魚(yú)培育過(guò)程中全程投喂飼料，飼料以漂浮料(成都海大6602)為主，鹵蟲(chóng)和升索顆粒飼料為輔，日投餌量為魚(yú)體質(zhì)量的2%～5%。

1.2 方法

1.2.1 親魚(yú)雌雄和成熟度鑒別 生殖季節(jié)雌魚(yú)形體明顯大于雄魚(yú)，腹部膨大柔軟，體表顏色相對(duì)雄魚(yú)較淺，臀鰭較肥厚；雄魚(yú)鰭條及身體顏色較鮮艷，臀鰭呈斜三角且末端尖形，形體修長(zhǎng)，輕壓腹部有少量白色精液流出(圖1)。

圖1 繁殖期厚唇裂腹魚(yú)雌雄鑒別

1.2.2 人工催產(chǎn) 挑選3+齡雄性和4+齡雌性人工馴養(yǎng)成熟的親魚(yú)，雌雄親魚(yú)比為1∶2，使用2次注射進(jìn)行催產(chǎn)。催產(chǎn)藥物為促黃體激素釋放激素(LHRH-A3)、馬來(lái)酸地歐酮(DOM)和人絨毛膜促性腺激素(HCG)，第1針注射LHRH-A34 μg/kg+DOM 3 mg/kg，間隔24 h后注射第2針(LHRH-A34 μg/kg+DOM 3 mg/kg+HCG 1 000 IU/kg)。為確定催產(chǎn)最佳水溫，水溫從16.0～19.5 ℃，設(shè)置8個(gè)梯度試驗(yàn)，每組間隔為0.5 ℃，用溫控加熱棒控溫。每組雌魚(yú)10尾，雄魚(yú)20尾，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。

1.2.3 人工授精及孵化 至效應(yīng)時(shí)間，采用人工干法授精，將成熟的魚(yú)卵直接擠入干燥的孵化筐(0.50 m×0.40 m×0.35 m)中，再將雄魚(yú)的精液直接擠到卵子上，用鵝毛輕輕攪動(dòng)使二者充分混合。2 min后加入適量清水，受精卵吸水膨脹，25 min后再用清水清洗受精卵，轉(zhuǎn)入孵化缸(5.00 m×0.45 m×0.50 m)中孵化。每個(gè)孵化缸可放孵化筐5個(gè)，每筐可放卵粒5 000粒，孵化時(shí)受精卵在水下0.03 m。孵化進(jìn)水管道連接軟管，在軟管另一端接上淋浴蓬頭，蓬頭固定在孵化缸水面上方0.50 m，蓬頭朝正上方方向噴水，噴出的水可距孵化水體水面0.90～1.30 m，淋水平均落差為1.10 m，水體交換量為0.11～0.22 m3/h。為確定受精卵孵化最佳水溫，水溫從16.0～19.5 ℃，設(shè)置8個(gè)溫度梯度試驗(yàn)，每組間隔為0.5 ℃，用溫控加熱棒控溫。每組受精卵500 粒，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。

1.2.4 胚胎發(fā)育和早期仔魚(yú)發(fā)育觀察 選取同批次50粒受精卵進(jìn)行胚胎發(fā)育觀察研究，利用顯微鏡(SMZ 1 270數(shù)碼體式)觀察受精卵發(fā)育各時(shí)期，以70%的受精卵進(jìn)入相同發(fā)育時(shí)期作為一個(gè)發(fā)育期判定；選取同批次受精卵發(fā)育出膜的仔魚(yú)用于早期仔魚(yú)發(fā)育觀察研究，每次選取至少5尾仔魚(yú)，采用體積分?jǐn)?shù)10%的福爾馬林溶液固定，在顯微鏡(CX31-32C02型)4×10倍鏡下進(jìn)行觀察并記錄。

1.2.5 孵化效率評(píng)價(jià)

催產(chǎn)率=產(chǎn)卵魚(yú)數(shù)/催情魚(yú)總數(shù)×100%，

受精率=原腸中期活卵數(shù)/產(chǎn)卵總數(shù)×100%，

孵化率=魚(yú)苗水花尾數(shù)/受精卵總數(shù)×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±S.D.)表示。使用SPSS 26.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan法進(jìn)行多重比較，顯著性水平設(shè)為0.05。采用Excel 2020軟件進(jìn)行早期仔魚(yú)的全長(zhǎng)生長(zhǎng)方程擬合。

2 結(jié)果與分析

2.1 厚唇裂腹魚(yú)人工催產(chǎn)和孵化的適宜水溫

從圖2可見(jiàn)：不同溫度下厚唇裂腹魚(yú)的催產(chǎn)率和受精率有顯著性差異；溫度對(duì)催產(chǎn)率影響試驗(yàn)中，水溫為18.5 ℃時(shí)，催產(chǎn)率達(dá)到100%，當(dāng)水溫低于18.5 ℃，催產(chǎn)率顯著下降(P<0.05)，因此，水溫維持在18.5 ℃左右時(shí)有利于親魚(yú)集中產(chǎn)卵，這也是提高催產(chǎn)率的有效途徑之一，可見(jiàn)最適催產(chǎn)水溫是18.5 ℃；溫度對(duì)孵化率影響試驗(yàn)中，當(dāng)水溫為17.0 ℃時(shí)，受精卵孵化率最高，達(dá)87%，水溫為17.5 ℃時(shí)，孵化率達(dá)到84%，溫度低于17.0 ℃或高于17.5 ℃時(shí)，孵化率顯著下降(P<0.05)，因此，其最適孵化水溫為17.0～17.5 ℃。

標(biāo)有不同字母者表示組間有顯著性差異(P<0.05)，標(biāo)有相同字母者表示組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

2.2 厚唇裂腹魚(yú)胚胎發(fā)育

厚唇裂腹魚(yú)胚胎發(fā)育過(guò)程分為胚盤、卵裂、囊胚、原腸胚、神經(jīng)胚、器官形成和出膜7個(gè)階段，劃分方法參考其他硬骨魚(yú)類[10]，整個(gè)發(fā)育過(guò)程劃分為18個(gè)時(shí)期(表1)。在水溫為(17.14±0.01)℃條件下，厚唇裂腹魚(yú)受精卵發(fā)育經(jīng)過(guò)147 h 31 min孵化，總積溫為2 513.01 ℃·h。

表1 厚唇裂腹魚(yú)胚胎發(fā)育時(shí)序

2.2.1 受精卵胚盤形成時(shí)期 厚唇裂腹魚(yú)成熟卵為微黏性沉性卵、淺黃色、圓球形、半透明，卵徑(2.95±0.15)mm，吸水膨脹后達(dá)(3.53±0.12)mm(圖3A)，沉于水底。受精后2 h 27 min動(dòng)物極出現(xiàn)明顯的胚盤，隆起高度約占卵黃的1/4(圖3B)。

2.2.2 卵裂階段 厚唇裂腹魚(yú)卵裂發(fā)生于胚盤，受精后3 h 26 min，胚盤中部形成分裂溝，將胚盤分裂為2個(gè)大小相近的分裂球，為2細(xì)胞期(圖3C)。受精后3 h 50 min，胚盤再次分裂，形成4個(gè)大小相近的細(xì)胞，為4細(xì)胞期(圖3D)。受精后4 h 56 min進(jìn)行第3次分裂，形成8個(gè)大小相近的細(xì)胞，進(jìn)入8細(xì)胞期(圖3E)。受精后5 h 47 min進(jìn)行第4次分裂，形成均勻排列的4排16個(gè)細(xì)胞，且細(xì)胞體積明顯變小，此時(shí)期為16細(xì)胞期(圖3F)。受精后6 h 47 min進(jìn)行第5次分裂，細(xì)胞體積進(jìn)一步縮小，進(jìn)入32細(xì)胞期(圖3G)。受精后7 h 17 min，第6次分裂完成，細(xì)胞團(tuán)向上隆起，進(jìn)入64細(xì)胞期(圖3H)。受精后8 h 42 min，細(xì)胞數(shù)量不斷增多，細(xì)胞團(tuán)繼續(xù)向上隆起，細(xì)胞體積變小，此時(shí)受精卵進(jìn)入多細(xì)胞期(圖3I)。

2.2.3 囊胚階段 受精后10 h 17 min，細(xì)胞數(shù)量急劇增加，細(xì)胞界限不明顯，胚胎發(fā)育進(jìn)入囊胚早期(圖3J)。受精后10 h 35 min，胚胎發(fā)育進(jìn)入囊胚中期，此時(shí)單個(gè)細(xì)胞體積較小，且無(wú)法分辨細(xì)胞界限，分裂球隆起高度達(dá)到最大，占卵球高度的1/3(圖3K)。受精后19 h 2 min，隆起高度逐漸降低，呈小帽狀，胚胎發(fā)育進(jìn)入囊胚后期(圖3L)。

2.2.4 原腸胚階段 受精后36 h 1 min，分裂球細(xì)胞向植物極移動(dòng)下包至卵黃高度的1/3，邊緣細(xì)胞排列平整，胚胎發(fā)育進(jìn)入原腸胚早期(圖3M)。受精后38 h 14 min，胚層繼續(xù)下包至卵黃囊的1/2處，胚盾出現(xiàn)，進(jìn)入原腸胚中期(圖3N)。受精后40 h 4 min，胚層下包至卵黃囊4/5處，胚盾伸長(zhǎng)，胚胎發(fā)育進(jìn)入原腸后期(圖3O)。

2.2.5 神經(jīng)胚形成階段 受精后44 h 1 min，胚體出現(xiàn)并緊貼于卵黃囊上，前端膨大形成腦泡，胚胎發(fā)育進(jìn)入神經(jīng)胚期(圖3P)。受精后46 h 26 min，胚層完全包裹住卵黃，胚孔封閉，這個(gè)時(shí)期稱為胚孔封閉期(圖3Q)。

2.2.6 器官形成階段 受精后57 h 3 min，胚體中部位置出現(xiàn)約6對(duì)透明肌節(jié)，為肌節(jié)出現(xiàn)期(圖3R)。受精后64 h 1 min，頭部?jī)蓚?cè)出現(xiàn)橢圓形的凹陷并形成眼囊，此時(shí)肌節(jié)增至約10對(duì)，胚胎發(fā)育進(jìn)入眼囊期(圖3S)。受精后70 h 41 min，卵黃一側(cè)開(kāi)始凹陷，肌節(jié)增至約23對(duì)，為尾芽期(圖3T)。受精后74 h 30 min，眼杯口出現(xiàn)圓形的晶體，尾與胚體長(zhǎng)軸成銳角，肌節(jié)約26對(duì)，為晶體出現(xiàn)期(圖3U)。受精后76 h 1 min進(jìn)入肌肉效應(yīng)期，胚體開(kāi)始顫動(dòng)，尾芽逐步增長(zhǎng)，肌節(jié)約31對(duì)，此時(shí)為肌肉效應(yīng)期(圖3V)。受精后77 h 56 min，肌節(jié)約35對(duì)，卵黃囊前方出現(xiàn)排列成串的細(xì)胞，形成心臟原基，即心臟原基期(圖3W)。受精后82 h 6 min，胚體兩側(cè)的耳囊中出現(xiàn)2個(gè)顆粒，肌節(jié)約37對(duì)，此時(shí)為耳石期(圖3X)。受精后86 h 23 min，尾部細(xì)胞聚集突出于體表，形成尾鰭原基，肌節(jié)約39對(duì)，為尾鰭原基期(圖3Y)。受精后104 h 1 min，肌節(jié)約42對(duì)，心臟開(kāi)始搏動(dòng)，胚胎發(fā)育進(jìn)入心臟搏動(dòng)期(圖3Z)。受精后123 h 51 min，耳囊后下方與卵黃交界處出現(xiàn)胸鰭原基，軀干出現(xiàn)血液循環(huán)，進(jìn)入胸鰭原基形成期(圖3a)。

2.2.7 孵化出膜階段 受精后145 h 1 min進(jìn)入出膜期(圖3b)，此階段胚體開(kāi)始劇烈運(yùn)動(dòng)，尾部最先破膜而出，仔魚(yú)身體完全伸展。受精后147 h 31 min，完成出膜，出膜仔魚(yú)呈淡黃色，通體透明，全長(zhǎng)為(8.72±0.26)mm，可以觀察到血液循環(huán)路線，卵黃囊緊貼仔魚(yú)腹部，仔魚(yú)靜臥魚(yú)水底，此時(shí)為初孵仔魚(yú)(4A)。

A—受精卵；B—胚盤期；C—2細(xì)胞期；D—4細(xì)胞期；E—8細(xì)胞期；F—16細(xì)胞期；G—32細(xì)胞期；H—64細(xì)胞期；I—多細(xì)胞期；J—囊胚早期；K—囊胚中期；L—囊胚后期；M—原腸早期；N—原腸中期；O—原腸后期；P—神經(jīng)胚期；Q—胚孔封閉期；R—肌節(jié)出現(xiàn)期；S—眼囊期；T—尾芽期；U—晶體出現(xiàn)期；V—肌肉效應(yīng)期；W—心臟原基期；X—耳石期；Y—尾鰭原基期；Z—心臟搏動(dòng)期；a—胸鰭原基形成期；b—出膜期。

2.3 厚唇裂腹魚(yú)早期仔魚(yú)發(fā)育

早期仔魚(yú)發(fā)育分為眼球色素出現(xiàn)期、體色素出現(xiàn)期、鰾充氣期和卵黃囊完全吸收期4個(gè)時(shí)期(表2)。仔魚(yú)生長(zhǎng)溫度控制在15.0～19.0 ℃，出膜后158 h后，仔魚(yú)開(kāi)始攝取開(kāi)口餌料豐年蟲(chóng)。待到出膜后432 h后，仔魚(yú)卵黃囊消耗完全，依靠外源性營(yíng)養(yǎng)存活時(shí)，投喂微粒子飼料。經(jīng)過(guò)回歸分析，厚唇裂腹魚(yú)早期仔魚(yú)的全長(zhǎng)生長(zhǎng)方程為

表2 厚唇裂腹魚(yú)早期仔魚(yú)發(fā)育觀察

L=6×10-5t2+0.001 8t+9.417 6

(R2=0.992 2，n=70)。

其中：L為仔魚(yú)全長(zhǎng)(mm)；t為出膜時(shí)間(h)。

出膜后200 h內(nèi)，仔魚(yú)生長(zhǎng)較緩慢，200 h后仔魚(yú)生長(zhǎng)速度逐漸加快，在出膜后432 h時(shí)全長(zhǎng)達(dá)到(21.51±0.75)mm(圖5)。當(dāng)仔魚(yú)體色變?yōu)楹谏珪r(shí)，卵黃囊吸收50%以上，消化道貫通，即可下土池塘。

圖5 厚唇裂腹魚(yú)早期仔魚(yú)的生長(zhǎng)

2.4 厚唇裂腹魚(yú)人工繁殖試驗(yàn)

2019年4月27日—5月16日在新疆維吾爾自治區(qū)克孜勒蘇柯?tīng)柨俗灾沃轂跚】h卡拉貝利水利樞紐工程魚(yú)類增殖放流站催產(chǎn)厚唇裂腹魚(yú)親魚(yú)35組，進(jìn)行了9批次厚唇裂腹魚(yú)人工繁殖試驗(yàn),共獲得成熟卵粒20.69萬(wàn)粒，平均催產(chǎn)率為77.71%，平均受精率為76.73%，平均孵化率為89.14%，獲水花魚(yú)苗14.12萬(wàn)尾(表3)。

表3 厚唇裂腹魚(yú)人工繁殖試驗(yàn)

3 討論

3.1 人工馴養(yǎng)與繁殖

親魚(yú)是人工繁殖的基礎(chǔ)，其培育的最終目的是獲取性腺成熟的個(gè)體[11]。本試驗(yàn)中所用親魚(yú)捕自天然水體，野性較強(qiáng)，應(yīng)激反應(yīng)明顯。為避免因應(yīng)激反應(yīng)造成親魚(yú)拒絕攝食、體弱染病和四處亂撞等情況，需精心培育親魚(yú)，投喂鮮活餌料，保持長(zhǎng)流水。經(jīng)人工馴養(yǎng)后，厚唇裂腹魚(yú)性腺可發(fā)育成熟并正常進(jìn)入繁殖期。人工催產(chǎn)的原理是通過(guò)注射外源激素來(lái)調(diào)節(jié)魚(yú)類自身的內(nèi)分泌活動(dòng)，促進(jìn)內(nèi)源性激素的釋放，從而誘導(dǎo)性腺發(fā)育成熟并排出精子和卵子[12]。本試驗(yàn)中，選擇促黃體激素釋放激素LHRH-A3、馬來(lái)酸地歐酮DOM和人絨毛膜促性腺激素HCG 3種催產(chǎn)劑，采用2次注射法進(jìn)行催產(chǎn)，這與對(duì)云南盤鮈Discogobioyunnanensis[13]、翹嘴鱖Sinipercachuasti[14]和泥鰍Misgurnusanguilicaudatus[15]的催產(chǎn)方法類似。

A—初孵仔魚(yú)；B、C—眼球色素出現(xiàn)期；D、E—體色素出現(xiàn)期；F、G—鰾充氣期；H—卵黃囊完全吸收期。

3.2 水溫對(duì)人工繁殖的影響

本試驗(yàn)中，厚唇裂腹魚(yú)最佳催產(chǎn)水溫在18.5 ℃，催產(chǎn)率高達(dá)100%，在17.5～19.5 ℃水溫下，厚唇裂腹魚(yú)催產(chǎn)率均達(dá)到50%以上，這與其他裂腹魚(yú)亞科催產(chǎn)所需水溫相似，如青海湖裸鯉Gymnocypisprzewalskii[16]為16.0～20.0 ℃，塔里木裂腹魚(yú)Schizothoraxbiddulphi[11]為13.0～18.0 ℃，扁吻魚(yú)Aspiorhynchuslaticeps[17]為14.0～21.0 ℃。本試驗(yàn)中，厚唇裂腹魚(yú)最佳孵化溫度為17.0～17.5 ℃，溫度較低。低溫可以延緩魚(yú)卵胚胎發(fā)育，減少能量消耗，有效抵御外界溫度強(qiáng)烈變化，從而提高胚胎成活率[18]。

3.3 孵化缸淋浴式孵化的優(yōu)點(diǎn)

劉鑒毅等[19]在改進(jìn)中華鱘人工繁殖關(guān)鍵技術(shù)中，采用孵化缸淋浴式方法孵化受精卵，結(jié)果顯示，該方法可有效減少水霉的發(fā)生，同時(shí)孵化率高達(dá)96%。康鵬天等[20]通過(guò)孵化缸淋浴式孵化法、比平列槽微流水孵化法和孵化缸微流水孵化法3種用不同的孵化方式進(jìn)行青海湖裸鯉受精卵孵化試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，孵化缸淋浴式孵化方式有利于將空氣中的氧氣帶入孵化水體，降低了水霉病的發(fā)病率；孵化缸淋浴式孵化方式可有效提高孵化率,與比平列槽微流水孵化法相比提高了15%,比孵化缸微流水孵化法提高了7%；孵化缸淋浴式孵化方式還可縮短26～42 h的孵化期，以及13 h的出苗高峰期時(shí)間差。裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類人工繁殖過(guò)程中多數(shù)采用微水流孵化法，微流水孵化法結(jié)果顯示，花斑裸鯉Gymnocypriseckloni孵化率為72.2%[21]，齊口裂腹魚(yú)Schizothoraxprenanti孵化率最高為77.0%[22]，長(zhǎng)絲裂腹魚(yú)Schizothoraxdolichonema平均孵化率為45.7%[23]。本試驗(yàn)中采用孵化缸淋浴式孵化方式，平均孵化率高達(dá)89.14%，遠(yuǎn)高于其他裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類的孵化率。筆者推測(cè)，孵化缸淋浴式孵化法可有效提高孵化率，值得在裂腹魚(yú)類人工繁殖中推廣。

3.4 厚唇裂腹魚(yú)與其他裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類的胚胎發(fā)育差異

將厚唇裂腹魚(yú)與短須裂腹魚(yú)Schizothoraxwangchiachii[24]、拉薩裂腹魚(yú)Schizothoraxwaltoni[25]、光唇裂腹魚(yú)Schizothoraxlissolabiatus[26]、齊口裂腹魚(yú)[27]、新疆裸重唇魚(yú)Gymnodiptychusdybowskii[28]、祁連山裸鯉Cymnocyprischilianensis[29]、扁吻魚(yú)[30]、硬刺松潘裸鯉Gymnocyprispotaninifirmispinatus[31]等其他裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類胚胎發(fā)育進(jìn)行比較，結(jié)果如表4所示。裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類胚胎發(fā)育溫度均較低(不超過(guò)22 ℃)，這與裂腹魚(yú)類生活在高原地區(qū)的寒冷水體環(huán)境相適應(yīng)。厚唇裂腹魚(yú)胚胎發(fā)育用時(shí)長(zhǎng)于齊口裂腹魚(yú)、新疆裸重唇魚(yú)、扁吻魚(yú)，短于短須裂腹魚(yú)、拉薩裂腹魚(yú)、光唇裂腹魚(yú)、祁連山裸鯉魚(yú)、硬刺松潘裸鯉，這可能是孵化水溫和魚(yú)的種類差異造成的。厚唇裂腹魚(yú)的受精卵卵徑在幾種裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類屬于較大類型，卵徑較大的魚(yú)類可能發(fā)育速率較慢[32]，但是較大卵黃可為仔魚(yú)提供更多營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，彌補(bǔ)了厚唇裂腹魚(yú)孵化時(shí)間長(zhǎng)帶來(lái)的存活壓力[33-34]，延長(zhǎng)了仔魚(yú)從內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)向外源性營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)變的時(shí)間，從而提高了仔魚(yú)的成活率[35]。出膜階段時(shí)，厚唇裂腹魚(yú)、短須裂腹魚(yú)、拉薩裂腹魚(yú)、硬刺松潘裸鯉為胸鰭原基形成期，光唇裂腹魚(yú)、齊口裂腹魚(yú)、新疆裸重唇魚(yú)、祁連山裸鯉為心臟搏動(dòng)期，而扁吻魚(yú)為血液循環(huán)期。在胚胎發(fā)育過(guò)程中，厚唇裂腹魚(yú)心臟及血液循環(huán)、尾鰭原基和胸鰭原基均在孵化出膜前形成，這有利于仔魚(yú)更好地適應(yīng)高原貧營(yíng)養(yǎng)及低水溫環(huán)境[36]，而厚唇裂腹魚(yú)、短須裂腹魚(yú)、新疆裸重唇魚(yú)和祁連山裸鯉均為尾部先出膜，拉薩裂腹魚(yú)、光唇裂腹魚(yú)、齊口裂腹魚(yú)、扁吻魚(yú)和硬刺松潘裸鯉的出膜方式均為頭部或尾部出膜，出膜方式的不同可能與魚(yú)的種類差異有關(guān)。

表4 厚唇裂腹魚(yú)與其他裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類胚胎發(fā)育特點(diǎn)比較

3.5 厚唇裂腹魚(yú)與其他裂腹魚(yú)亞科魚(yú)類的仔魚(yú)發(fā)育差異

厚唇裂腹魚(yú)初孵仔魚(yú)全長(zhǎng)大于祁連山裸鯉、扁吻魚(yú)和硬刺松潘裸鯉，短于短須裂腹魚(yú)、齊口裂腹魚(yú)和新疆裸重唇魚(yú)，與光唇裂腹魚(yú)相近(表4)，推測(cè)厚唇裂腹魚(yú)初孵仔魚(yú)在裂腹魚(yú)亞科中屬于中等類型。厚唇裂腹魚(yú)仔魚(yú)出膜18 d后卵黃囊才消耗殆盡，時(shí)間遠(yuǎn)長(zhǎng)于光唇裂腹魚(yú)、新疆裸重唇魚(yú)、祁連山裸鯉、扁吻魚(yú)和硬刺松潘裸鯉(表4)。推測(cè)厚唇裂腹魚(yú)仔魚(yú)為了更好地適應(yīng)餌料生物匱乏的低溫環(huán)境，所以發(fā)育過(guò)程中需要更多的內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以降低仔魚(yú)在短時(shí)間內(nèi)攝食不到外源營(yíng)養(yǎng)而死亡的風(fēng)險(xiǎn)，從而提高仔魚(yú)的成活率[37]，但關(guān)于厚唇裂腹魚(yú)卵黃囊確切機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)顯示，厚唇裂腹魚(yú)仔魚(yú)孵化后158 h后，進(jìn)入混合營(yíng)養(yǎng)期，此時(shí)卵黃囊并未完全吸收，仔魚(yú)生長(zhǎng)緩慢，孵化后200 h，卵黃囊被大量吸收，呈細(xì)條狀，仔魚(yú)攝取外源性營(yíng)養(yǎng)的能力增強(qiáng)，生長(zhǎng)速度加快[38-39]。

3.6 厚唇裂腹魚(yú)早期發(fā)育與環(huán)境適應(yīng)性

克孜勒河位于中國(guó)最西部，平均海拔4 000 m以上，年平均降水量150 mm左右，晝夜溫差大，年平均氣溫較低，流域內(nèi)大部分地區(qū)為荒山戈壁，生態(tài)環(huán)境惡劣[40]。本試驗(yàn)顯示，厚唇裂腹魚(yú)胚胎孵化溫度較低，發(fā)育過(guò)程中器官發(fā)育較快，心臟及血液循環(huán)、尾鰭原基和胸鰭原基在出膜前就已形成，使出膜后仔魚(yú)能更好地適應(yīng)貧營(yíng)養(yǎng)型水體。出膜仔魚(yú)卵黃囊存在時(shí)間較長(zhǎng)，從而降低了仔魚(yú)因攝取不到外源營(yíng)養(yǎng)而死亡的風(fēng)險(xiǎn)，因此，厚唇裂腹魚(yú)胚胎和早期仔魚(yú)發(fā)育過(guò)程與其生境具有一定的適應(yīng)性。