王 青 王金娜 何 雪 劉 靜 賀紅艷
(西安醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院,陜西 西安 710021)
尿液蛋白質(zhì)的定性檢測(cè)是尿液常規(guī)檢測(cè)必做項(xiàng)目之一,能夠有效反映腎臟的功能狀態(tài),可作為泌尿系統(tǒng)疾病的篩選指標(biāo)[1]。血漿中小相對(duì)分子量(<40 000)蛋白能順利通過腎小球的濾過膜并被重吸收,由于其血漿中濃度較低,最終僅有少量蛋白出現(xiàn)在尿液中。白蛋白等中相對(duì)分子量的蛋白在血漿中濃度較高,絕大部分血漿白蛋白在通過濾過膜后都被腎小管重吸收,高相對(duì)分子量(>90 000)蛋白很難通過正常的腎小球?yàn)V過膜。一般常規(guī)方法無(wú)法檢出[2]。隨著醫(yī)療水平和人民健康意識(shí)的增強(qiáng),人們對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,可靠性要求更高[3]。如何合理選擇檢測(cè)方法是檢驗(yàn)工作者必須認(rèn)真思考的問題。該實(shí)驗(yàn)同時(shí)使用三種方法檢測(cè)同一尿液標(biāo)本,比較三種方法結(jié)果的差異,并從原理進(jìn)行探討分析。
連續(xù)7 d隨機(jī)收集住院病人尿液標(biāo)本500例,并于2 h內(nèi)檢驗(yàn)完成。
尿液分析儀,酒精燈,5%醋酸溶液,10%磺基水楊酸。
(1)干化學(xué)法。確保儀器狀態(tài)良好、質(zhì)控結(jié)果在控后,嚴(yán)格按照試紙條和儀器使用說明進(jìn)行操作,儀器自動(dòng)打印結(jié)果。
(2)磺基水楊酸法。留取離心后上清尿液2 mL于小試管中,滴加10%磺柳酸試劑1~2滴,觀察尿液渾濁度變化、有無(wú)沉淀生成,判讀并記錄結(jié)果。
(3)加熱乙酸法。向玻璃試管加入尿液8 mL約占試管的2/3,試管夾持試管底部,試管呈60°傾斜,管口朝外,將尿液上端部分置于火焰上方加熱煮沸,以小滴管加入2~3滴醋酸溶液后,觀察有無(wú)渾濁,繼續(xù)加熱至沸,判讀并記錄結(jié)果。
對(duì)比干化學(xué)法、加熱乙酸法,磺基水楊酸法三種方法的陽(yáng)性率,計(jì)數(shù)資料以百分率表示。并將磺基水楊酸法作為參考方法,計(jì)算干化學(xué)法和加熱乙酸法的靈敏度、特異度。
對(duì)500例尿標(biāo)本同時(shí)用三種蛋白定性方法進(jìn)行檢測(cè)?;腔畻钏岱ǖ鞍钻?yáng)性117例,陽(yáng)性率23.40%;干化學(xué)法蛋白陽(yáng)性161例,陽(yáng)性率32.20%,加熱乙酸法蛋白陽(yáng)性111例,陽(yáng)性率22.20 %。見表1。干化學(xué)法的假陽(yáng)性率、真陽(yáng)性率高于加熱乙酸法,假陰性率、真陰性率低于加熱乙酸法。見表2、表3。
表1 三種蛋白檢測(cè)方法陽(yáng)性率比較
表2 磺基水楊酸法(設(shè)為參考方法),干化學(xué)法、加熱乙酸法檢驗(yàn)結(jié)果比較
表3 干化學(xué)法、加熱乙酸法評(píng)價(jià)指標(biāo)的比較
尿液干化學(xué)法方便快捷,成本低,是臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的篩選方法[4]。但由于檢測(cè)原理的局限,影響因素較多,如pH過高、陰道分泌物的污染、色素、部分鹽類或標(biāo)本含有較多細(xì)胞成分時(shí),干化學(xué)法檢測(cè)可引起假陽(yáng)性。加熱乙酸法中加入乙酸可使尿液pH下降到蛋白質(zhì)等電點(diǎn),從而促進(jìn)蛋白質(zhì)變性沉淀,并可消除尿液中某些磷酸鹽受熱析出結(jié)晶,進(jìn)而避免混濁的干擾,結(jié)果準(zhǔn)確,可作為蛋白質(zhì)定性實(shí)驗(yàn)的確證實(shí)驗(yàn),但當(dāng)尿呈強(qiáng)堿性時(shí),加熱乙酸法呈假陰性反應(yīng)。磺基水楊酸法操作便捷,敏感度較高。易受干擾因素影響,造成假性結(jié)果。
本實(shí)驗(yàn)對(duì)比了三種尿蛋白定性檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果的差異,發(fā)現(xiàn)干化學(xué)法的假陽(yáng)性率(誤診率)、真陽(yáng)性率(靈敏度)高于加熱乙酸法,假陰性率、真陰性率低于加熱乙酸法,假陰性率(漏診率)、真陰性率(特異度)低于加熱乙酸法。林榮萬(wàn)[5]等研究尿蛋白三種檢驗(yàn)方法比較結(jié)果顯示,干化學(xué)法陽(yáng)性率最高,為31.33%,且靈敏度較高,但誤診率較高,加熱
乙酸法特異度最高,三種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),應(yīng)綜合分析,慎重選擇檢測(cè)方法,與本研究結(jié)果相符。
綜上所述,三種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),相輔相成,在臨床工作中應(yīng)全面分析,合理選擇,特別是要注重干擾因素的影響,從而降低方法學(xué)所帶來的假陽(yáng)性率和假陰性率。