李秀萍，簡瑩娜，王戈平，胡勇，馬利青，王光華

(青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，西寧 810016)

布氏桿菌病、衣原體病及弓形蟲病是引起家畜流產(chǎn)為共同特征的動物疫病，也是嚴(yán)重的人獸共患病。本調(diào)查采用病原抗體檢測方法對青海省剛察縣、門源縣、烏蘭縣、海晏縣部分地區(qū)流產(chǎn)母羊血液進行了布氏桿菌病、衣原體病和弓形蟲病的檢測，旨在掌握流產(chǎn)母羊中病原體的感染情況，為綿羊流產(chǎn)提供科學(xué)有效的防控措施。

1 材料與方法

1.1樣品來源及采樣方法

被檢血清共計183份，采自青海省剛察縣、烏蘭縣、海晏縣、門源縣部分牧戶流產(chǎn)母羊?？崭共裳?，采集后擺成斜面，待凝固后，置4℃冰箱4h，取出血樣在室溫下放置2h，待血清析出后，收集血清冷凍保存待檢。

1.2診斷液

布氏桿菌病用布魯氏菌病虎紅平板凝集抗原及陽性標(biāo)準(zhǔn)血清(010012011)，購自青島易邦生物有限公司；衣原體IHA抗原及陽性標(biāo)準(zhǔn)血清(20200515204)；弓形蟲IHA抗原及陽性標(biāo)準(zhǔn)血清(20200508203)，均購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.3器械

96孔“V”型有機玻璃微量反應(yīng)板，微量加樣器，微量振蕩器。

1.4檢測方法

1.4.1布氏桿菌病 布魯氏菌虎紅平板凝集試驗，按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部頒發(fā)的《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)動物布魯氏桿菌病診斷技術(shù)》中規(guī)定的技術(shù)要求進行操作。

1.4.2衣原體病 按照衣原體IHA試劑盒介紹的方法檢測。

1.4.3弓形蟲病 按照弓形蟲IHA試劑盒介紹的方法檢測。

1.5判定結(jié)果

1.5.1布氏桿菌病 在陰、陽性血清對照成立的條件下，若待檢血清在 4min 內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象即判為陽性(+); 若無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。

1.5.2衣原體 陽性對照血清各孔均為(+)，陰性對照血清各孔均為(-)，被檢血清滴度不低于1∶16(第二孔)為陽性，被檢血清滴度低于1∶4(第一孔)為陰性，被檢血清滴度在1∶4～1∶16之間為可疑。

1.5.3弓形蟲 陽性對照血清各孔均為(+)，陰性對照血清除第1孔允許存在前帶現(xiàn)象(+)外，其余各孔為(-)，被檢血清抗體滴度達到1∶64 判為陽性，判(++)為陽性終點。

2 結(jié)果

在183份被檢血清中，布氏桿菌抗體陽性6份，陽性率3.28%；衣原體抗體陽性10份，陽性率5.46%；弓形蟲抗體陽性1份，陽性率0.55%。

表1 布氏桿菌病、弓形蟲病和衣原體病血清學(xué)檢測結(jié)果

3 小結(jié)與討論

3.1本次檢測的183份血清中，布氏桿菌抗體陽性6份，陽性率3.3%。陳曉霞等(2007)[1]對海晏縣綿羊布氏桿菌病的檢測抗體陽性率為 0.5%。萬瑪吉等(2011)[2]對祁連縣綿羊布氏桿菌血清學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)抗體陽性率為0.9%，這說明近年來我省部分地區(qū)綿羊布氏桿菌病陽性率有上升趨勢。建議有關(guān)部門做好監(jiān)測和淘汰工作，羊場和牧戶一定要做好引種工作，提倡“自繁自育”， 引種工作不能盲目進行，必須進行引種時也要嚴(yán)格做好檢疫工作，隔離飼養(yǎng)一定周期之后，確定引進種畜健康，才能進行混群飼養(yǎng)。此外，縣級畜牧獸醫(yī)部門應(yīng)該定期抽檢綿羊血液樣品，一旦檢查出患病羊，要立刻做好捕殺和無害化處理工作。對患病綿羊采取焚燒深埋等措施，對于被污染過的畜舍、運動場、飼槽、水槽等用10%石灰乳或5%火堿水嚴(yán)格消毒。病畜分泌物、排泄物等應(yīng)做無害化處理或消毒深埋，以達到凈化的目的。及時做好規(guī)范、合理的疫苗注射及人員的防護工作，防止交叉感染和病原的擴散。

3.2本次檢測中衣原體抗體陽性10份，陽性率5.5%。楊占魁等(2006)[3]對青海省烏蘭縣改良絨山羊進行了衣原體病的血清學(xué)調(diào)查，結(jié)果陽性率達到14.73%。何成基等(2010)[4]對青海省海北州門源縣、祁連縣、剛察縣和海晏縣1223份羊血清采用間接血凝試驗進行檢測，結(jié)果生產(chǎn)母羊血清陽性率為8.07%。衣原體病陽性率有所下降，但長期存在，因此做好綜合防治是關(guān)鍵。山羊和綿羊分群飼養(yǎng)；生產(chǎn)母羊在缺乏飼草料季節(jié)需注意補飼；建立疫情監(jiān)測制度，清除傳染源；在衣原體病流行地區(qū)，應(yīng)制定疫苗免疫計劃，定期進行預(yù)防接種[5]。

3.3本次檢測弓形蟲陽性1份，陽性率0.55%。表明弓形蟲感染率較低，這與趙志剛等[6]的調(diào)查結(jié)果0.54%基本一致。弓形蟲的傳播經(jīng)口、呼吸道、腸道、皮膚等途徑或經(jīng)胎盤感染胎兒，也可通過昆蟲叮咬傳播而感染，即平行或垂直途徑傳播給易感動物，因而科學(xué)合理的防治措施能有效控制羊弓形蟲病的發(fā)生和傳播，加強監(jiān)測力度，對陽性病畜及時淘汰，病死畜必須無害化處理，環(huán)境保持干凈，定時驅(qū)除環(huán)境中昆蟲，管理好中間宿主犬和貓，防止感染。