黃文植，萬(wàn)里，馮宇哲，崔占鴻，張曉衛(wèi)

(青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院 青海省放牧家畜動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西寧810016 )

牦牛主要生長(zhǎng)在青藏高原等高海拔地區(qū)，為當(dāng)?shù)厝嗣竦纳婧桶l(fā)展提供了可靠的保障[1,2]。傳統(tǒng)的牦牛養(yǎng)殖主要以放牧為主，在冷季由于牧草缺乏以及較低的溫度，牦牛的營(yíng)養(yǎng)攝入不能滿足其需求，從而導(dǎo)致體重降低。Long等[3]研究發(fā)現(xiàn)，放牧牦牛在冷季損失體重約為暖季末重的10%～20%。牦牛犢牛是牦牛產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展的重要基礎(chǔ)，其早期培育質(zhì)量決定著牦牛成年后生長(zhǎng)性能的表現(xiàn)[4]。王斌星等[5]，許先查[6]等研究發(fā)現(xiàn)，舍飼育肥可提高牦牛血清總蛋白的含量。然而牧區(qū)并不具備舍飼育肥的條件，補(bǔ)飼精料是提高牦牛生長(zhǎng)性能的有效措施之一。對(duì)于牦牛犢牛的培育目前多采用哺乳+放牧的形式，對(duì)于斷奶后牦牛犢牛冷季補(bǔ)飼的相關(guān)研究較少，關(guān)于牦牛冷季補(bǔ)飼的研究主要針對(duì)生長(zhǎng)牦牛和母牦牛[7-9]，如何保證牦牛犢牛健康生長(zhǎng)，使其安全度過(guò)冷季，是亟待解決的問(wèn)題。本試驗(yàn)通過(guò)補(bǔ)飼試驗(yàn)探究精料對(duì)放牧牦牛犢牛生長(zhǎng)性能、瘤胃發(fā)酵及血清生化指標(biāo)的影響，旨在減少牦牛犢牛冷季的掉膘，為其冷季補(bǔ)飼提供重要參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于青海省海晏縣西海鎮(zhèn)，地處N36°56"15'，E100°53"11'，海拔3219m，年均氣溫低，草地類(lèi)型為高寒草甸草地，牧草以禾本科和莎草科為主，植物生長(zhǎng)期120～140d；牦牛和藏羊?yàn)楫?dāng)?shù)刂饕倚笃贩N。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

選取健康、生長(zhǎng)發(fā)育良好、體重相近(67.20±5.90kg)的4月齡牦牛犢牛28頭，按性別組成相同的原則隨機(jī)分為兩組，每組14頭。補(bǔ)飼組牦牛犢牛在歸牧后補(bǔ)飼精料0.4kg/d·頭，對(duì)照組只進(jìn)行放牧。試驗(yàn)牦牛每天8：00出牧，18：00歸牧，自由飲水。歸牧后在暖棚中過(guò)夜。

1.3 日糧組成

補(bǔ)飼精料的主要成分為玉米、麩皮、豆粕、鈣、磷、氯化鈉、微量元素(銅、鐵、鋅、錳、硒、碘、鈷等)，精料補(bǔ)充料和牧草的營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)地牧草及補(bǔ)飼精料營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.4 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

1.4.1體重的測(cè)定 于試驗(yàn)期的第1d、第30d、第60d和第90d放牧前稱(chēng)試驗(yàn)牦牛犢牛體重?？傇鲋?第90d體重-初始體重，日均增重=(末重-始重)/90d。

1.4.2瘤胃液采集及瘤胃發(fā)酵指標(biāo)測(cè)定 將牦牛頭部固定在保定架中，使用瘤胃液采樣器由口部插至胃部，用150mL注射器采集牦牛犢牛的瘤胃液，使用HANNA HI221型臺(tái)式酸度計(jì)測(cè)定其pH,其余樣品放入-80℃冰箱保存。NH3-N含量采用馮宗慈[10]改進(jìn)的比色法測(cè)定，使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(TU-1810)，預(yù)熱30min，在波長(zhǎng)625nm處測(cè)定溶液吸光度，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線求出待測(cè)樣品的NH3-N含量。VFA濃度參考徐曉峰[11]的測(cè)定方法，使用島津GC-2014氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。

1.4.3血清樣品采集與生化指標(biāo)測(cè)定 試驗(yàn)期第30d、60d、90d對(duì)牦牛犢牛進(jìn)行頸靜脈采血，采集的血液在4000r/min條件下離心6min，取上清液裝于2mL凍存管中，-80℃下保存。血清樣品送至青海省婦女兒童醫(yī)院用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定下列指標(biāo)：血清能量指標(biāo)(TCH、TG、GLU)，蛋白指標(biāo)(TP、ALB、GLB、A/G、BUN)，酶活性指標(biāo)(AST、ALT、AST/ALT、ALP、LDH)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2016初步整理統(tǒng)計(jì)，采用SPSS軟件進(jìn)行單因素ANOVA模型方差分析，并用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 冷季補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛體增重的影響

由表2可知，試驗(yàn)放牧牦?？傇鲋?、平均日增重補(bǔ)飼組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；試驗(yàn)30d、60d份補(bǔ)飼組平均體重(分別為84.26kg、86.66kg)與對(duì)照組(78.70kg、77.30kg)相比差異不顯著(P>0.05)；90d份補(bǔ)飼組體重顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表2 補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛生長(zhǎng)性能的影響

2.2 冷季補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛瘤胃發(fā)酵的影響

由表3可知，兩組瘤胃液的pH呈先升高后降低的趨勢(shì)，試驗(yàn)30d、60d、90d對(duì)照組和補(bǔ)飼組的pH差異不顯著(P>0.05)。對(duì)照組瘤胃發(fā)酵后的NH3-N呈降低的趨勢(shì)，補(bǔ)飼組的NH3-N含量呈升高的趨勢(shì)，試驗(yàn)30d對(duì)照組和補(bǔ)飼組瘤胃發(fā)酵后的NH3-N差異不顯著(P>0.05)，試驗(yàn)60d、90d補(bǔ)飼組的NH3-N顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表3 補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛瘤胃發(fā)酵的影響

試驗(yàn)30d、60d、90d補(bǔ)飼組的牦牛犢牛瘤胃液乙酸、總揮發(fā)性脂肪酸顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，異丁酸、戊酸含量?jī)山M間差異不顯著(P>0.05)，試驗(yàn)30d丙酸、異戊酸含量、乙酸丙酸比差異不顯著(P>0.05)，補(bǔ)飼組丁酸含量顯著高于對(duì)照組；試驗(yàn)60d丙酸、丁酸、異戊酸含量補(bǔ)飼組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；試驗(yàn)90d丙酸含量補(bǔ)飼組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

2.3 冷季補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛血清生化指標(biāo)的影響

從表4中可以看出，試驗(yàn)30d、60d對(duì)照組和補(bǔ)飼組牦牛犢牛血清中TP含量無(wú)顯著差異，試驗(yàn)90d補(bǔ)飼組TP含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；試驗(yàn)30d、60d、90d補(bǔ)飼組血清中的ALB、GLB含量、ALB/GLB與對(duì)照組的差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)30d補(bǔ)飼組BUN含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，試驗(yàn)60d兩組BUN含量無(wú)顯著差異(P>0.05)，試驗(yàn)90d補(bǔ)飼組BUN顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表4 補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛血清生化指標(biāo)的影響

對(duì)照組和補(bǔ)飼組牦牛血清中的TCh呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，GLU呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)；試驗(yàn)30d、60d、90d對(duì)照組和補(bǔ)飼組牦牛血清中的GLU含量差異不顯著(P>0.05)；補(bǔ)飼組血清中TG在數(shù)值上高于對(duì)照組，試驗(yàn)30d補(bǔ)飼組TG含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，補(bǔ)飼60d、90d兩組間差異不顯著(P>0.05)。

試驗(yàn)30d、60d、90d補(bǔ)飼組以及對(duì)照組血清中AST、AST/ALT、LDH之間差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)30d、60d兩組間ALT活力差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)90d對(duì)照組血清中ALT活力顯著高于補(bǔ)飼組(P<0.05)，補(bǔ)飼組血清中ALP活力顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

3 討論

3.1 冷季補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛體增重的影響

鄭群英等[12]對(duì)放牧牦牛冷季補(bǔ)飼的研究發(fā)現(xiàn)，與傳統(tǒng)放牧相比能減少掉膘20%。馬登錄等[13]研究不同年齡甘南牦牛補(bǔ)飼精料的效果，研究表明，可以明顯增加犢牦牛的體重，與本研究結(jié)果一致。吳成梁等[14]對(duì)天祝白牦牛犢牛的冷季補(bǔ)飼研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)飼青干草高于2kg、精料2kg可以達(dá)到最佳犢牛增重效果。本研究補(bǔ)飼組牦牛平均日增重達(dá)184.44g/d，高于上述報(bào)道犢牛增重的效果，說(shuō)明隨著精料補(bǔ)飼量的提高，會(huì)提高牦牛犢牛的增重。同時(shí)，本試驗(yàn)補(bǔ)飼組牦牛犢?？傇鲋?、平均日增重均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。王威等[15]，吳華卓等[16]研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)飼精料可以直接為牦牛提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有利于放牧牦牛維持體重。與對(duì)照組相比，補(bǔ)飼精料緩解牦牛體重降低的效果明顯，這與徐田偉等[17],沈景林等[18],景小平等[19]研究結(jié)果一致。梁正滿等[20]對(duì)冷季補(bǔ)飼燕麥草和不同比例青貯玉米秸的結(jié)果表明，放牧組的體重在冷季6個(gè)月一直呈下降趨勢(shì)，保膘效果較差；而補(bǔ)飼組則有明顯的保膘效果，本試驗(yàn)的精料補(bǔ)飼效果與此相似。說(shuō)明補(bǔ)飼精料能顯著提高牦牛犢牛的生長(zhǎng)性能。放牧牦牛采食量主要受草場(chǎng)草量的影響，通過(guò)冷季補(bǔ)飼，能夠減緩掉膘。

3.2 冷季補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛瘤胃發(fā)酵的影響

瘤胃液pH是評(píng)價(jià)反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)環(huán)境與機(jī)體健康最為直觀的指標(biāo)。本試驗(yàn)中瘤胃液pH除試驗(yàn)60d高于7.5，均在正常范圍內(nèi)。NH3-N濃度對(duì)瘤胃微生物影響較大，其濃度過(guò)低時(shí)會(huì)降低瘤胃微生物活性，過(guò)高則會(huì)造成氮的浪費(fèi)，有報(bào)道指出，放牧家畜瘤胃液NH3-N濃度范圍為0.35～29mg/dL[21]，本試驗(yàn)對(duì)照組和補(bǔ)飼組的NH3-N均在合理范圍之內(nèi)，補(bǔ)飼組瘤胃NH3-N高于對(duì)照組，表明補(bǔ)飼組對(duì)氮源的利用率較高，提高了機(jī)體對(duì)含氮物質(zhì)的利用率。VFA是反芻動(dòng)物瘤胃代謝產(chǎn)生能量的主要方式[22]，反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)乙酸和丁酸主要用于合成脂肪酸，丙酸則是合成葡萄糖的前體。補(bǔ)飼組的牦牛犢牛瘤胃液乙酸、總揮發(fā)性脂肪酸顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，這是因?yàn)榫咸岣吡岁笈Ａ鑫肝⑸飳?duì)牧草中碳水化合物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的降解效率。各組的乙酸濃度均高于丙酸濃度，這與夏洪澤等[23]、Copani[24]的研究結(jié)果一致。補(bǔ)飼精料使牦牛犢牛瘤胃液中的VFA濃度增加，說(shuō)明在一定程度上促進(jìn)了瘤胃微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)了瘤胃發(fā)酵。

3.3 冷季補(bǔ)飼精料對(duì)放牧牦牛犢牛血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)能夠反映機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝情況，一定程度上能夠反映反芻動(dòng)物的生產(chǎn)性能[25]。血清中TP、ALB、GLB、BUN的含量是反映動(dòng)物機(jī)體蛋白代謝的重要指標(biāo)，蛋白質(zhì)攝入不足或吸收障礙，可以引起血漿中總蛋白和白蛋白含量降低。補(bǔ)飼精料能為放牧牦牛提供一定的粗蛋白質(zhì)，促進(jìn)牦牛的生長(zhǎng)，與韓興泰等[26]研究結(jié)果一致。試驗(yàn)90d補(bǔ)飼組TP含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，表明補(bǔ)飼精料能促進(jìn)牦牛對(duì)蛋白的利用。補(bǔ)飼組血清BUN含量呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，可能是因?yàn)殡S著日糧中含氮物質(zhì)攝入增加，導(dǎo)致血中BUN含量升高。鐘華配等[27]在犢牛飼料中添加燕麥草后，犢牛血清中TP和BUN含量有較為明顯的提高，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

對(duì)照組和補(bǔ)飼組牦牛血清中的TCh呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，GLU呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，GLU的下降，可能與大量消耗來(lái)維持體溫有關(guān)。試驗(yàn)60d、90d補(bǔ)飼組血清GLU含量在數(shù)值上高于對(duì)照組，這與楊俊[28]的研究結(jié)果相一致，說(shuō)明精料補(bǔ)飼能通過(guò)促進(jìn)機(jī)體的生長(zhǎng)速度進(jìn)而使血清GLU含量上升。TG是與機(jī)體能量、脂肪代謝相關(guān)的指標(biāo)，本試驗(yàn)30d補(bǔ)飼組TG含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，可能是該月份牦牛犢牛攝入較多脂肪，促使機(jī)體脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的活化，從而導(dǎo)致血清 TG 含量發(fā)生變化。補(bǔ)飼精料有助于牦牛犢牛的脂肪沉積，從而提高犢牛的體重。

補(bǔ)飼90d對(duì)照組血清中ALT活力顯著高于補(bǔ)飼組(P<0.05)，可能與應(yīng)激有關(guān)。補(bǔ)飼30d、60d補(bǔ)飼組與對(duì)照組血清中ALT、AST差異不顯著，且在范小紅等[29]研究范圍內(nèi)。ALP與糖類(lèi)、脂肪、蛋白等物質(zhì)代謝密切相關(guān)，補(bǔ)飼組血清中ALP在數(shù)值上高于對(duì)照組，說(shuō)明補(bǔ)飼組牦牛犢牛的物質(zhì)代謝強(qiáng)于對(duì)照組。LDH是糖類(lèi)無(wú)氧酵解及異生的一個(gè)重要酶系，補(bǔ)飼精料對(duì)血清中LDH濃度影響不顯著，與王娟[30]報(bào)道一致。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，補(bǔ)飼精料有效提高了冷季放牧牦牛犢牛對(duì)營(yíng)養(yǎng)的攝入、代謝和吸收，改善了瘤胃的發(fā)酵功能，進(jìn)而顯著提高了冷季放牧牦牛犢牛的體增重，為實(shí)施冷季放牧牦牛犢牛營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)飼調(diào)控提供了參考。