王學(xué)娟，王天琦

疾病防治

一起規(guī)?；i場(chǎng)豬流行性腹瀉的防治

王學(xué)娟1，王天琦2

（1.山東省臨朐縣城關(guān)畜牧獸醫(yī)站，山東 濰坊 262600；2.山東省青島市信得科技股份有限公司，山東 青島）

山東某豬場(chǎng)豬群發(fā)生腹瀉，通過(guò)采集發(fā)病豬糞便與乳汁樣品進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè)，結(jié)合發(fā)病豬只臨床癥狀和病理變化，將引起該場(chǎng)豬群腹瀉的原因診斷為豬流行性腹瀉病毒感染。根據(jù)不同豬群的癥狀與病毒載量，制定合理的針對(duì)性的防治方案。在治療后檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，該病毒流行已基本控制，表明制定的防治方案效果理想。

豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhea, PED）是一種由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起的以嘔吐、腹瀉、脫水為特征的消化道傳染病，該病有明顯的季節(jié)性，冬季和春季是高發(fā)季節(jié)。哺乳仔豬、斷奶仔豬和育肥豬均可感染，成年母豬發(fā)病率為15 %～90 %，7日齡內(nèi)仔豬發(fā)病率和死亡率可達(dá)100 %。該病由于流行廣泛，感染和傳播迅速，引起產(chǎn)房仔豬傷亡率高，已成為制約養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要疾病之一。

1 發(fā)病情況

2020年4月，山東某規(guī)?；i場(chǎng)育肥豬與后備豬群出現(xiàn)腹瀉癥狀，3 d后產(chǎn)房仔豬出現(xiàn)腹瀉。對(duì)不同階段豬群取糞便拭子與母豬乳汁進(jìn)行檢測(cè)，以查明引起腹瀉的病原。該場(chǎng)目前存欄2 000頭母豬，免疫程序齊全，均于產(chǎn)前40日接種某廠家豬流行性腹瀉（PED）滅活疫苗1頭份，20日后二免PED滅活疫苗4 ml。2020年4月初開始該豬場(chǎng)部分產(chǎn)房母豬出現(xiàn)嘔吐、稀瀉等癥狀。3～5日齡新生仔豬開始出現(xiàn)嘔吐、稀瀉癥狀，多為腥臭味黃白色水樣糞便；多數(shù)從肛門流下稀便，少數(shù)仔豬出現(xiàn)噴射癥狀。稀瀉的仔豬逐漸消瘦，死亡率70 % 以上。治療效果不佳，且保育豬和育肥豬也出現(xiàn)分散性整棟舍暴發(fā)，大于40日齡的豬在治療后基本康復(fù)，無(wú)臨床癥狀。

2 樣品收集與病原檢測(cè)

2.1 樣品收集

分別在感染的保育舍、育肥舍隨機(jī)采樣各10份糞便拭子，產(chǎn)房母豬隨機(jī)采樣10份糞便拭子和10份乳汁樣品，仔豬隨機(jī)采樣20份糞便拭子，共60份樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，每份樣品重復(fù)3次檢測(cè)。

2.2 病原檢測(cè)

使用杭州博日DNA/RNA核酸提取試劑盒提取60份樣品的核酸，使用湖南圣湘PEDV、豬傳染性胃腸炎病毒、豬輪狀病毒、豬Delta病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光RT-PCR定性檢測(cè)，用不同病原特異性引物擴(kuò)增豬大腸桿菌、豬沙門氏菌、豬產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增擴(kuò)增產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)。

2.3 防治方案

2.3.1 母豬群體防治方案 口服暢健50億IU/頭，肌注PEDV滅活疫苗，母豬全群飼喂?？? d、2次/d、10ml/次；間隔一月后，再進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫；母豬上產(chǎn)床前飼喂2 d，15 ml/次·頭，上產(chǎn)床后再飼喂1 d，15 ml/次·頭，后期豬場(chǎng)穩(wěn)定后只需上產(chǎn)床時(shí)給母豬清洗消毒同步飼喂福康15 ml/頭一次即可。

2.3.2 新生仔豬防治方案 建議仔豬出生1～3 d連續(xù)灌服暢健和?？?，?？?ml/次·頭、3次/d，暢健50億IU/頭、1次/d。灌服?？导皶辰r(shí)，一窩使用一副一次性手套，防止人為散毒。后期豬場(chǎng)穩(wěn)定后，只需仔豬出生灌服1次暢健，25億IU/頭，可選用?？颠M(jìn)行稀釋。

2.3.3 已發(fā)生腹瀉的仔豬防治方案 超過(guò)1 d以上腹瀉仔豬（無(wú)治療意義）建議進(jìn)行無(wú)害化處理，降低感染壓力。只要一窩豬中發(fā)生腹瀉，則全窩進(jìn)行治療，使用?？? ml/次·頭、3次/d，建議配合抗生素使用?？股乜蛇x擇頭孢曲松鈉（1:1混勻）或者4～6片瀉立停碾碎加入到福康中混勻或者其他類抗生素。

2.3.4 保育豬和育肥豬散毒防治方案 建議豬場(chǎng)減少飼養(yǎng)量，減輕生產(chǎn)壓力，并對(duì)空置的豬舍進(jìn)行消毒干燥處理再進(jìn)豬。若不能有效處理豬群，針對(duì)保育及育肥進(jìn)行全群飼喂?？? d、2次/d、10 ml/次，可噴料飼喂，也可將藥物加入可控水中集中飲完。

2.3.5 飼養(yǎng)管理防治方案 （1）溫度管理：產(chǎn)房母豬分娩一周內(nèi)24 ℃；保溫箱維持32 ℃，每周降低2 ℃。（2）較少冷應(yīng)激并及時(shí)補(bǔ)液，腹瀉仔豬使用35～40 ℃ 生理鹽水灌服或者腹腔注射。（3）腹瀉期間，保持圈舍干燥同時(shí)減少應(yīng)激包括剪牙、斷尾等應(yīng)激性操作。（4）7日齡以上腹瀉仔豬立刻斷奶，針對(duì)斷奶仔豬以及母豬無(wú)乳仔豬使用人工代乳、誘食等并加強(qiáng)飼養(yǎng)管理包括溫度、飲水等。（5）消毒：①母豬上產(chǎn)床前徹底清洗消毒，母豬分娩后先用消毒液（0.1 % KMnO4或者其他消毒液）清洗母豬乳房，擠掉乳汁，再開始喂乳；②糞便消毒：腹瀉產(chǎn)房、產(chǎn)床下糞便清理后撒生石灰，產(chǎn)床上使用消毒液浸泡過(guò)抹布或者拖把擦干，該過(guò)程切忌不可沖洗，保溫箱內(nèi)腹瀉糞便及嘔吐物如產(chǎn)床，同時(shí)撒上干燥粉；③環(huán)境消毒：產(chǎn)房人員禁止串舍，同時(shí)對(duì)外環(huán)境、產(chǎn)房通道鋪生石灰；每周灑一次；④空舍消毒；對(duì)妊娠舍地面及墻體進(jìn)行“白化—高壓水槍沖洗—噴撒泡沫消毒液—干燥一周”的程序后再上豬。

2.4 治療后樣本采集

與治療前在相同的保育舍、育肥舍隨機(jī)采樣各10份糞便拭子，產(chǎn)房母豬隨機(jī)采樣10份糞便拭子和10份乳汁樣品，仔豬隨機(jī)采樣20份糞便拭子，共60份樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室熒光定量RT-PCR檢測(cè)，每份樣品重復(fù)3次檢測(cè)。

3 結(jié)果與分析

3.1 病理變化

解剖病死仔豬發(fā)現(xiàn)胃內(nèi)有黃白色乳凝塊，小腸鼓氣腫大，腸壁變薄通透，里面充滿黃色液體，腸系膜有充血、淋巴結(jié)腫脹。

3.2 病原檢測(cè)結(jié)果

實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)和普通PCR檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，僅PEDV的基因檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性。表明該豬場(chǎng)出現(xiàn)腹瀉問(wèn)題，是由于PEDV感染引起的。

3.3 PEDV定量檢測(cè)及結(jié)果

對(duì)60份糞便拭子樣品使用湖南圣PEDV實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)PEDV定量檢測(cè)，以確定不同豬群和豬舍的感染情況，制定合理的防治方案。60份糞便拭子樣品熒光定量RT-PCR檢測(cè)結(jié)果見表1。

表1 PEDV熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果

熒光定量PCR結(jié)果表明，各階段豬均感染了PEDV。其中產(chǎn)房仔豬以及保育豬散毒最為嚴(yán)重，該階段基本可確定處于腹瀉階段。而產(chǎn)房母豬乳汁及糞便雖然帶毒且病毒載量并不高，但是需要重視其散毒感染產(chǎn)房仔豬問(wèn)題。

3.4 治療后復(fù)檢結(jié)果

60份樣品熒光定量RT-PCR檢測(cè)結(jié)果見表2。

表2 PEDV熒光定量PCR檢測(cè)復(fù)檢結(jié)果

從復(fù)檢結(jié)果的病毒載量判斷，該豬場(chǎng)治療前的病毒流行已經(jīng)基本得到控制。其中產(chǎn)房母豬和乳汁、保育豬、育肥豬的糞便樣本已檢測(cè)不到病毒載量，可以說(shuō)明這些豬群的PED已經(jīng)治愈。仔豬仍有零散帶毒豬只，但是病毒載量對(duì)比治療前已顯著降低。久治不愈或嚴(yán)重影響生長(zhǎng)發(fā)育的仔豬，應(yīng)考慮大腸桿菌等細(xì)菌性繼發(fā)感染或無(wú)害化處理，避免影響豬場(chǎng)的階段性生產(chǎn)。

4 討論

（1）PED是一種傳染性極強(qiáng)的腸道傳染病，具有高傳染性，高死亡率的發(fā)病特點(diǎn)。近年來(lái)，PED表現(xiàn)出四季發(fā)病的態(tài)勢(shì)，已不再有明顯的季節(jié)性。給我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大的損失。截止到目前尚無(wú)一種特效的治療方案。只能通過(guò)各種手段進(jìn)行預(yù)防，豬場(chǎng)一旦發(fā)病，只能采取多種措施保護(hù)未感染豬只，其中緊急免疫、返飼、自家苗等防治方法已是前人證實(shí)的有效方法。而本次豬場(chǎng)PED治療使用了暢鍵和福康，其效果顯著。（2）對(duì)于受PED危害最大的仔豬群體，其防控方法主要依靠母乳中的母源抗體SIgA，而母豬接種疫苗主要產(chǎn)生IgG抗體，并不能產(chǎn)生足夠的黏膜抗體。而暢鍵產(chǎn)品可以很好的解決此問(wèn)題。暢鍵是一種PED-傳染性胃腸炎二聯(lián)基因工程重組乳酸菌，利用乳酸菌載體表達(dá)平臺(tái)，將PEDV與傳染性胃腸炎病毒的S蛋白基因、M蛋白基因克隆到表達(dá)質(zhì)粒，嫁接到乳酸菌內(nèi)。借助乳酸菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)PEDV與傳染性胃腸炎病毒的S蛋白、M蛋白。通過(guò)母豬和仔豬口服使用，刺激消化道黏膜免疫系統(tǒng)產(chǎn)生SIgA抗體，在腸壁產(chǎn)生一層黏膜保護(hù)，并清除腸道病毒，降低排毒。同時(shí)母豬口服可以刺激乳腺產(chǎn)生針對(duì)性的SIgA抗體，產(chǎn)生具有SIgA母源抗體保護(hù)作用的乳汁，實(shí)現(xiàn)雙重防護(hù)。（3）目前國(guó)內(nèi)進(jìn)行腹瀉治療的產(chǎn)品主要為中藥、干擾素等，其作用機(jī)理為增強(qiáng)非特性免疫以及干擾病毒復(fù)制等，其效果參差不齊。而針對(duì)病毒性疾病最有效的為抗體治療，雖然市面上已有卵黃抗體，但是可能由于禽與豬之前抗體結(jié)構(gòu)等存在差異性，導(dǎo)致其效果不佳。卵黃抗體的主要成分為IgY而防控腹瀉需要的抗體為IgA，故?？诞a(chǎn)品選用培養(yǎng)、純化的PEDV、傳染性胃腸炎病毒流行株作為抗原，接種免疫哺乳動(dòng)物奶牛，收集牛奶檢測(cè)，引進(jìn)日本先進(jìn)工藝進(jìn)行過(guò)濾、提純、濃縮并添加黃芪多糖制成。在本案例中，面對(duì)PED全群散度的感染狀態(tài)，推薦豬場(chǎng)全群灌服?？?，利用其IgA抗體在消化道中中和流行腹瀉病原，并覆蓋在消化道黏膜表面堵截和滅活特異性病原，阻止病原在腸道黏膜上皮細(xì)胞中繁殖，形成局部免疫被動(dòng)保護(hù)，減少排毒與水平傳播，不僅對(duì)感染豬起到了治療作用，而且降低豬群糞便散毒量。（4）PED在養(yǎng)殖場(chǎng)豬群中的傳播，與飼養(yǎng)管理水平也息息相關(guān)。在該病的高發(fā)季節(jié)加強(qiáng)和改善飼養(yǎng)管理，注重生物安全，做到防重于治。PED往往伴隨著細(xì)菌繼發(fā)感染，豬場(chǎng)的抗生素使用應(yīng)當(dāng)科學(xué)合理，避免長(zhǎng)期、頻繁和濫用，必要時(shí)可通過(guò)藥敏試驗(yàn)，選擇最佳的抗生素進(jìn)行輔助治療。

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（2021–01–11）

S858.28

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1007-1733（2021）05-0023-04