彭穎，胡潔品，劉峰，張敏，彭崇勝，李曉波

（上海交通大學(xué)藥學(xué)院，上海 200240)

山楂（Crataegus pinnatifidaBunge）為薔薇科山楂屬植物，俗稱山馬林果、野婆婆頭、山里紅。山楂的果實具有較高的營養(yǎng)及藥用價值，在食品、醫(yī)藥和工業(yè)上具有廣泛的應(yīng)用。山楂核為山楂加工過程中的副產(chǎn)品，約占山楂果實總重的1/3。山楂核藥用歷史悠久，在《滇南本草》中記載其具有消食，散結(jié)的功效，歸胃、肝經(jīng)[1]。以往山楂核大多在山楂果實加工過程中被丟棄，造成資源的浪費，而近年來山楂核的開發(fā)利用越來越受到食品醫(yī)療行業(yè)的青睞。山楂核干餾油含有大量的醛類、酚類物質(zhì)[2]，已被開發(fā)成紅核洗液和舒痛精等抑菌鎮(zhèn)痛相關(guān)產(chǎn)品。與干餾油相比，山楂核醇提物成分有較大的差異[3]，具有抗炎[4]、抗腫瘤[5]和降血脂[6]等生物活性。體外抗氧化實驗發(fā)現(xiàn)，山楂核醇提物具有清除DPPH·、ABTS+·、羥自由基、還原Fe3+、抑制酪氨酸酶的生物活性[7]，在抗氧化相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)上具有較強的應(yīng)用前景。我們前期研究亦證實，除山楂核醇提物外，山楂核醇提物的乙酸乙酯萃取和水萃取組分均具有一定體外清除自由基的活性，并通過UPLC-Q-TOF/MS從山楂核醇提物的乙酸乙酯萃取組分中鑒定出10個成分，主要為木脂素和醛類成分[8]，其中木脂素類化合物Hawthornnin G和7S，8R-Ficusal具有清除ABTS和DPPH自由基活性的報道[4]。

生物機體的代謝會產(chǎn)生大量自由基，在遭遇刺激或在病理狀態(tài)下，自由基產(chǎn)生和消除的動態(tài)平衡被打破后，自由基會對蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能造成損傷。一些疾病的產(chǎn)生，例如癌癥、神經(jīng)退行性疾病、糖尿病、白內(nèi)障、炎癥等都與自由基有關(guān)[9]。表皮是皮膚的第一道屏障，主要由棘層、顆粒層和位于表皮最外層的角質(zhì)層組成，表皮受到外界的一些刺激，例如紫外線、氧化因子等會形成氧化應(yīng)激，參與皮膚老化、炎癥性皮膚病、表皮腫瘤等一系列皮膚疾病[10,11]。外源性H2O2可引起氧化應(yīng)激，增加細胞內(nèi)活性氧的種類。HaCaT細胞是永生化的人角質(zhì)形成細胞，常用于構(gòu)建表皮模型，其氧化損傷后會產(chǎn)生大量ROS，引發(fā)細胞的衰老、凋亡，而SOD和GSH-Px是機體內(nèi)清除自由基的酶，是維持機體氧化平衡的重要成分。此外，氧自由基被認為在胃炎或胃癌的形成和發(fā)展中起著重要的作用[12,13]。GES-1細胞是人胃黏膜上皮細胞，是胃黏膜遭受外界刺激的第一道屏障，常用于構(gòu)建胃黏膜保護作用篩選模型。為進一步開發(fā)利用山楂核資源，發(fā)掘山楂核抗氧化方面的新應(yīng)用，本研究通過建立H2O2誘導(dǎo)的HaCaT和GES-1細胞氧化損傷模型，比較山楂核醇提物及其不同萃取組分對H2O2誘導(dǎo)氧化損傷的HaCaT和GES-1細胞的保護活性，以期為山楂核抗過氧化皮膚衰老和胃黏膜保護等方面的開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)，為山楂核種子資源的開發(fā)和綜合利用提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 原料與試劑

人永生化HaCaT細胞：北京北納創(chuàng)聯(lián)生物科技有限公司；GES-1細胞：上海中喬新舟生物科技有限公司；山楂核：由山西振東制藥有限公司提供。噻唑藍（Thiazoyl blue tetrazolium bromide，MTT）、二甲基亞砜（Dimethyl sulfoxide，DMSO）、雙氧水：美國sigma公司；胰酶、北美胎牛血清：美國Gibco公司；DMEM培養(yǎng)基、磷酸緩沖鹽溶液（Phosphate buffer saline，PBS）、雙抗：美國Hyclone公司；SOD試劑盒、GSH-Px試劑盒、BCA試劑盒：南京建成科技有限公司。

1.2 主要儀器設(shè)備

BS-500A電子分析天平：賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；LD2X-30KBS立式壓力蒸汽滅菌器：上海申安醫(yī)療器械廠；3020-910酶標儀：美國賽默飛世爾公司；SB-5200超聲波細胞粉碎機：寧波新芝生物科技股份有限公司；5418高速離心機：德國EPPENDORF股份公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 山楂核醇提物及其不同萃取組分制備

7 kg山楂核粉碎過1號篩。按料液比1:10加入95%的乙醇回流提取，80 ℃恒溫回流提取3次，每次3 h，過濾，合并濾液，減壓干燥得山楂核醇提取物浸膏（EE）。上述提取物浸膏與水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到山楂核醇提物石油醚萃取組分（PEF）、乙酸乙酯萃取組分（EAF）、正丁醇萃取組分（BF）和水萃取組分（WF），經(jīng)減壓干燥后保存于4 ℃。

1.3.2 氧化損傷細胞模型造模條件考察

取對數(shù)生長的HaCaT細胞，配置成1×105個/mL的細胞溶液，每孔100 μL接種到96孔板中。當細胞鋪滿96孔板的80%時，換液，繼續(xù)培養(yǎng)12 h。實驗組加入100 μL的H2O2溶液作用于HaCaT細胞，H2O2終濃度為0.20、0.18、0.14、012、0.10、0.08 mg/mL，空白組加入100 μL的培養(yǎng)基。培養(yǎng)4 h后，采用MTT法檢測細胞活力并計算細胞存活率[14]，將存活率在50%左右的H2O2濃度作為HaCaT細胞造模濃度。取對數(shù)生長的GES-1細胞，配置成8×104個/mL的細胞溶液，每孔100 μL接種到96孔板中。當細胞鋪滿96孔板的80%時，換液，繼續(xù)培養(yǎng)24 h。實驗組加入100 μL的H2O2溶液作用于GES-1細胞，H2O2終濃度為0.20、0.18、0.16、0.14、0.10 mg/mL，空白組加入100 μL的培養(yǎng)基。培養(yǎng)4 h后，采用MTT法檢測細胞活力并計算細胞存活率，將存活率在50%左右的H2O2濃度作為GES-1細胞造模濃度。

1.3.3 不同樣品對細胞毒性考察

將1×105個/mL的HaCaT細胞溶液接種到96孔板中，每孔100 μL，當細胞鋪滿96孔板的80%時，給藥組加入配置好的250、125、62.5 μg/mL的山楂核醇提物及其不同萃取組分，每孔100 μL，空白組加入100 μL的培養(yǎng)基。培養(yǎng)16 h后，采用MTT法檢測細胞活力并計算細胞存活率，存活率大于90%的濃度為安全濃度。將8×104個/mL的GES-1細胞溶液接種到96孔板中，每孔100 μL，當細胞鋪滿96孔板的80%時，給藥組加入250、125、62.5 μg/mL濃度的山楂核醇提物及其不同萃取組分，每孔100 μL，空白組加入100 μL的培養(yǎng)基。培養(yǎng)28 h后，采用MTT法檢測細胞活力并計算細胞存活率，存活率大于90%的濃度為安全濃度。

1.3.4 不同樣品對氧化損傷細胞存活率的考察

將1×105個/mL的HaCaT細胞溶液接種到96孔板中，每孔100 μL。當細胞鋪滿96孔板的80%時，給藥組加入50、25、12.5 μg/mL的山楂核醇提物及其不同萃取組分作用于HaCaT細胞，每孔100 μL，模型組和空白組加入等體積的培養(yǎng)基，陽性藥組加入50 μg/mL維生素C。繼續(xù)培養(yǎng)12 h后，除空白組外其余各組加入終濃度為0.12 mg/mL的H2O2，4 h后采用MTT法檢測細胞活力并計算細胞存活率。將8×104個/mL的GES-1細胞溶液接種到96孔板中，每孔100 μL。當細胞鋪滿96孔板的80%時，給藥組加入50、25、12.5 μg/mL的山楂核醇提物及其不同萃取組分作用于GES-1細胞，每孔100 μL，模型組和空白組加入等體積的培養(yǎng)基，陽性藥組加入50 μg/mL維生素C。繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，除空白組外其余各組加入終濃度為0.2 mg/mL的H2O2，4 h后采用MTT法檢測細胞活力并計算細胞存活率。

1.3.5 細胞中SOD和GSH-Px水平的檢測

將1×105個/mL的HaCaT細胞溶液接種到6孔板中，每孔2.5 mL。當細胞鋪滿6孔板的80%時，給藥組加入不同濃度的山楂核醇提物中的活性組分樣品作用于HaCaT細胞，每孔2.5 mL，模型組和空白組加入等體積的培養(yǎng)基，陽性藥組加入等體積的50 μg/mL維生素C。12 h后，除空白組外其余各組加入終濃度為0.12 mg/mL的H2O2，4 h后超聲破裂后取細胞內(nèi)液，按照GSH-Px和SOD試劑盒說明進行操作。將8×104個/mL的GES-1細胞溶液接種到6孔板中，每孔2.5 mL。當細胞鋪滿6孔板的80%時，給藥組加入不同濃度的山楂核醇提物中的活性組分樣品作用于GES-1細胞，每孔2.5 mL，模型組和空白組加入等體積的培養(yǎng)基，陽性藥組加入等體積的50 μg/mL維生素C。24 h后，除空白組外其余各組加入終濃度為0.2 mg/mL的H2O2，4 h后超聲破裂后取細胞內(nèi)液，按照GSH-Px和SOD檢測試劑盒說明進行操作。

1.3.6 山楂核醇提物中活性組分大類成分含量測定

將EAF溶于DMSO中，配制成5 mg/mL作為供試品溶液。將WF溶于超純水中，配制成10 mg/mL作為供試品溶液。參考文獻方法[15]以沒食子酸為對照品，采用福林酚比色法測定供試品溶液中多酚含量。參考文獻方法[16]以蘆丁為對照品，采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法測定供試品溶液中黃酮含量；以葡萄糖為對照品，采用苯酚-硫酸比色法測定供試品溶液中多糖含量；以半乳糖醛酸為對照品，采用間羥基聯(lián)苯法測定供試品溶液中糖醛酸含量。參考文獻方法[17]以蛇菰寧為對照品，采用紫外分光光度法測定供試品溶液中總木脂素含量。供試品溶液中蛋白質(zhì)含量測定采用考馬斯亮藍法，按照試劑盒說明書方法進行測定。

1.3.7 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)以Mean±SD表示，采用SPSS 22軟件進行統(tǒng)計分析，組間比較用ANOVA檢驗。p＜0.05認為具有顯著性差異。實驗數(shù)據(jù)繪圖由Graph Prism 7.00軟件完成。

2 結(jié)果與討論

2.1 H2O2誘導(dǎo)HaCaT細胞和GES-1細胞氧化損傷模型的建立

如圖1a所示，隨著造模劑H2O2濃度的增大（0.08 mg/mL增至0.20 mg/mL），HaCaT細胞存活率逐漸降低（90.63%減至36.60%），當H2O2濃度為0.12 mg/mL時，HaCaT細胞相對存活率為50%左右，因此選用0.12 mg/mL的H2O2做為氧化損傷HaCaT細胞的造模劑濃度。

GES-1細胞的存活率和H2O2濃度的關(guān)系如圖1b所示，隨著H2O2濃度的增大（0.10 mg/mL增至0.20 mg/mL），GES-1細胞存活率逐漸降低（108.19%減至51.99%），當H2O2濃度為0.2 mg/mL時，GES-1細胞相對存活率為50%左右，因此選用0.2 mg/mL的H2O2濃度為氧化損傷GES-1細胞的造模劑濃度。

圖1 不同濃度的造模劑H2O2對HaCaT細胞（a）和GES-1細胞（b）存活率的影響Fig.1 Effects of different concentrations of H2O2 on the cell viability of HaCaT cells (a) and GES-1 cells (b)

2.2 山楂核醇提物及其不同萃取組分對HaCaT細胞和GES-1細胞的細胞毒性

HaCaT細胞的存活率和樣品濃度（250 μg/mL、125 μg/mL和62.5 μg/mL）的關(guān)系如圖2a所示，山楂核醇提物及其不同萃取組分濃度為62.5 μg/mL時，HaCaT細胞存活率約為91.34%到112.08%間，均大于90%。但隨著樣品濃度的增大，HaCaT細胞存活率逐漸降低，其中當EE、EFA和WF濃度為250 μg/mL時，HaCaT細胞存活率為72.08%到87.60%間，小于90%，表現(xiàn)出一定毒性。因此取低于62.5 μg/mL的濃度作為山楂核醇提物及其各萃取組分對HaCaT細胞的給藥濃度，實驗設(shè)置50、25和12.5 μg/mL三個濃度。

GES-1細胞的存活率和樣品濃度（250 μg/mL、125 μg/mL和62.5 μg/mL）的關(guān)系如圖2b所示。除WF外，山楂核醇提物及其各萃取組分在高濃度250 μg/mL時，GES-1細胞存活率約為16.28%到83.83%間，均小于90%，表現(xiàn)出一定毒性，其中EAF對GES-1細胞毒性較明顯，其細胞存活率僅為16.27%±0.93%。山楂核醇提物及其各萃取組分在62.5 μg/mL濃度下GES-1細胞存活率約為99.17%到100.81%，均大于90%，因此取低于62.5 μg/mL的濃度作為山楂核醇提物及各部位對GES-1細胞的給藥濃度，設(shè)置50、25和12.5 μg/mL三個濃度。

圖2 山楂核醇提物及其不同萃取組分對HaCaT細胞（a）和GES-1細胞（b）存活率的影響Fig.2 Effects of alcohol extraction from hawthorn kernel and its different polar fractions on the cell viability of HaCaT cells (a)and GES-1 cells (b)

2.3 山楂核醇提物及其不同萃取組分對氧化損傷HaCaT細胞和GES-1細胞的保護作用

人皮膚角質(zhì)形成細胞HaCaT細胞是人體最外層皮膚的主要構(gòu)成細胞，是人體隔離外界環(huán)境的天然屏障，也最易受到氧自由基的侵害[18]。山楂核醇提物及其不同萃取組分（50 μg/mL、25 μg/mL和12.5 μg/mL）對氧化損傷的HaCaT細胞存活率的影響如圖3a所示。與空白組相比，H2O2顯著降低HaCaT細胞存活率（細胞存活率43.03%，p＜0.01），表明氧化損傷HaCaT細胞模型誘導(dǎo)成功。與模型組比較，維生素C組HaCaT細胞存活率顯著升高（細胞存活率57.46%，p＜0.01）；50 μg/mL和25 μg/mL的EAF顯著提高氧化損傷HaCaT細胞的存活率18.18%和21.23%，細胞存活率分別為50.85%和52.17%（p＜0.01）；此外25 μg/mL和12.5 μg/mL的WF組氧化損傷HaCaT細胞的存活率亦顯著升高16.20%和14.95%，細胞存活率分別為50.00%和49.46%（p＜0.01）。其余各組分對氧化損傷HaCaT細胞的存活率沒有明顯影響。這些結(jié)果表明，EAF和WF對H2O2誘導(dǎo)氧化損傷HaCaT細胞具有一定的保護作用。

圖3 不同濃度山楂核醇提物及其不同萃取組分對H2O2誘導(dǎo)的HaCaT細胞（a）和GES-1細胞（b）存活率的影響Fig.3 Effects of alcohol extraction from hawthorn kernel and its different polar fractions on the cell viability of oxidation-damaged HaCaT cells (a) and GES-1 cells (b)

氧自由基作為第二信使激活不同的氧化還原反應(yīng)敏感的信號傳導(dǎo)通路，導(dǎo)致組織炎癥和損傷，這是急性胃粘膜損傷形成和發(fā)展的重要因素[13]。山楂核醇提物及其不萃取組分（50 μg/mL、25 μg/mL和12.5 μg/mL）對氧化損傷的GES-1細胞的存活率影響如圖3b所示。與空白組相比，H2O2處理顯著降低GES-1細胞存活率（細胞存活率55.34%，p＜0.01），表明氧化損傷GES-1細胞模型誘導(dǎo)成功。與模型組比較，維生素C組GES-1T細胞存活率顯著升高（細胞存活率68.27%，p＜0.05）；EE及WF在50 μg/mL和25 μg/mL濃度下均能顯著提高氧化損傷GES-1細胞的存活率（p＜0.05），其余部位無明顯作用。其中50 μg/mL WF組氧化損傷GES-1細胞的存活率為63.28%（p＜0.05），與模型組相比提高了23.15%，25 μg/mL山楂核水部位組氧化損傷GES-1細胞的存活率為64.78%（p＜0.05），與模型組相比提高了23.61%。這些結(jié)果表明，WF對H2O2誘導(dǎo)氧化損傷GES-1細胞具有一定的保護作用。

本研究中，WF對H2O2誘導(dǎo)氧化損傷兩種細胞均具有一定保護作用，而EAF僅對H2O2氧化損傷HaCaT細胞具有一定保護作用，表明WF在抗H2O2誘導(dǎo)氧化損傷方面可能優(yōu)于EAF，這與我們前期研究結(jié)果相一致。前期研究[8]發(fā)現(xiàn)，EAF在清除DPPH和ABTS自由基、Fe3+還原能力方面優(yōu)于其他組分；WF在清除羥自由基能力方面表現(xiàn)最好，EAF次之。因此WF在對H2O2誘導(dǎo)細胞應(yīng)激氧化損傷方面具有較好的保護作用。

2.4 山楂核醇提物中的活性組分對氧化損傷的HaCaT細胞和GES-1細胞中SOD和GSH-Px的影響

SOD和GSH-Px是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，作為清除生物體內(nèi)自由基的首要物質(zhì)，其可以及時修復(fù)因氧自由基對細胞造成的損傷，其表達高低可以看做是細胞衰老與死亡的指標之一。因此，我們進一步考察了山楂核醇提物中抗氧化活性組分對H2O2誘導(dǎo)氧化損傷HaCaT和GES-1細胞中SOD和GSH-Px水平的影響，初步探索山楂核醇提物中活性組分對氧化損傷細胞保護作用機制。

圖4 山楂核活性組分對H2O2誘導(dǎo)氧化損傷HaCaT細胞內(nèi)SOD（a）和GSH-Px（b）、氧化損傷GES-1細胞內(nèi)SOD（c）和GSH-Px（d）水平的影響Fig.4 Effects of alcohol extraction from hawthorn kernel and its different polar fractions on SOD (a) and GSH-Px (b) activity in oxidation-damaged HaCaT cells, SOD (c) and GSH-Px (d)activity in oxidation-damaged GES-1 cells

EAF對氧化損傷的HaCaT細胞中SOD和GSH-Px水平的影響見圖4a和圖4b。其中，EAF在50 μg/mL和25 μg/mL濃度下分別提高H2O2誘導(dǎo)氧化損傷HaCaT細胞中SOD水平16.45%和9.09%，細胞內(nèi)SOD水平分別為13.81 U/mg prot（p＜0.01）和12.94 U/mg prot（p＜0.05）。50 μg/mL的EAF能顯著提高氧化損傷HaCaT細胞中GSH-Px水平1.16倍，細胞中GSH-Px水平為14.54 U/mg prot（p＜0.01）；但25 μg/mL的EAF對氧化損傷HaCaT細胞中GSH-Px的水平無明顯影響。由圖4a和4b可知，WF在25 μg/mL和12.5 μg/mL濃度下分別提高H2O2誘導(dǎo)氧化損傷HaCaT細胞中SOD水平16.62%和12.32%，細胞內(nèi)SOD水平分別為13.83 U/mg prot（p＜0.01）和13.32 U/mg prot（p＜0.01）；提高GSH-Px的水平1.22倍和88.78%，細胞內(nèi)GSH-Px水平分別為15.00 U/mg prot（p＜0.01）和12.72 U/mg prot（p＜0.01）。

此外，WF在50 μg/mL和25 μg/mL濃度下分別提高H2O2誘導(dǎo)氧化損傷GES-1細胞中SOD水平37.38%和17.38%，細胞內(nèi)SOD水平分別為108.44 U/mg prot（p＜0.01）和92.66 U/mg prot（p＜0.01，圖4c）；在50 μg/mL濃度下提高H2O2誘導(dǎo)氧化損傷GES-1細胞中GSH-Px的水平72.58%，細胞中GSH-Px水平為25.74 U/mg prot（p＜0.01，圖4d）。

這些結(jié)果表明，EAF可通過調(diào)節(jié)細胞內(nèi)抗氧化物酶水平保護H2O2誘導(dǎo)氧化損傷的HaCaT細胞，WF可通過調(diào)節(jié)細胞內(nèi)抗氧化物酶水平保護H2O2誘導(dǎo)氧化損傷的HaCaT細胞和GES-1細胞。

2.5 山楂核醇提物中活性組分大類成分分析

表1 對照品沒食子酸、蘆丁、葡萄糖、半乳糖醛酸和蛇菰寧線性關(guān)系Table 1 Linear regression equations of five reference materials

根據(jù)多酚（沒食子酸）、黃酮（蘆?。?、糖（葡萄糖）、糖醛酸（半乳糖醛酸）和木脂素（蛇菰寧）對照品的標準曲線（表1），計算EAF和WF中的各大類成份含量。由結(jié)果可知（表2），EAF中糖含量占該組分的32.73%，其次為黃酮、木脂素和多酚。糖類成分為EAF主要成分，由于EAF水溶性較差，其糖類成分可能為一些醇溶性糖和糖苷類成分。研究表明，EAF中所含木脂素類化合物Hawthornnin G和7S，8R-Ficusal具有清除ABTS和DPPH自由基活性[4]。除木脂素外，黃酮類[19]、多糖[20]類成分亦具有體外抗氧化活性。此外，多酚[21]、木脂素[22]、多糖[18]類成分均被證明對氧化損傷的HaCaT細胞具有一定保護作用，提高氧化損傷細胞的存活率。因此我們推測，EAF中含有的多糖、黃酮、木脂素、多酚類成分，可能為其抗氧化的活性成分，其在抗過氧化皮膚衰老方面具有一定開發(fā)和應(yīng)用前景。

如表3所示，WF中糖含量占該組分的59.59%，主要為水溶性多糖，為其主要成份。除了被證明對氧化損傷的HaCaT細胞具有保護作用外，WF對氧化損傷的GES-1細胞也具有一定的保護活性，能夠提高細胞內(nèi)SOD和GSH-Px的活力。研究表明，天然產(chǎn)物的糖類成分可以通過提高機體免疫功能、提高胃黏膜組織的抗氧化能力、控制炎癥反應(yīng)等途徑來保護胃黏膜[23,24]。猴頭菇多糖能夠降低氧化損傷的GES-1細胞內(nèi)ROS的含量，同時能夠減少細胞的凋亡[13]。WF中糖含量較高，多糖類成分可能對過氧化引起的皮膚衰老和胃黏膜具有一定保護活性，其在抗過氧化皮膚衰老和胃黏膜保護方面具有較好的開發(fā)應(yīng)用前景，后續(xù)可對其中的多糖類成分進行進一步純化研究。

表2 山楂核醇提物中乙酸乙酯萃取組分（EAF）化學(xué)成分含量分析Table 2 Composition analysis of ethyl acetate fraction of hawthorn kernel alcohol extraction

表3 山楂核醇提物中水萃取組分（WF）化學(xué)成分含量分析Table 3 Composition analysis of water fraction of hawthorn kernel alcohol extraction

3 結(jié)論

EAF和WF為山楂核醇提物中改善細胞氧化損傷的活性組分，其可通過提高細胞內(nèi)SOD和GSH-Px的活力對氧化損傷細胞發(fā)揮保護作用，提高細胞存活率。其中，EAF對氧化損傷的HaCaT細胞具有一定保護作用；而WF對氧化損傷的HaCaT細胞和GES-1細胞均具有保護作用，且主要成分為糖，具備進一步開發(fā)的潛力。山楂核作為山楂加工過程中的副產(chǎn)品，大多在山楂果實加工過程中被丟棄，造成資源的浪費，因此亟待深入開發(fā)和合理利用。后續(xù)我們將對WF中多糖類成分進一步深入研究，以期為山楂核在抗過氧化皮膚衰老和胃黏膜保護等方面的開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)，為山楂核種子資源的開發(fā)和綜合利用提供數(shù)據(jù)支持。