朱蓓蓓

（恩施職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖北 恩施 445000）

犬螨蟲病又名犬疥癬，是以患部劇癢、脫毛、結(jié)痂為主要臨床癥狀的一類慢性寄生性傳染病，該病的傳染性非常強(qiáng)，寵物犬感染后稍不注意就會(huì)傳染給人，是當(dāng)前阻礙寵物行業(yè)發(fā)展的主要疫病之一[1]。目前對(duì)于寵物犬螨蟲的預(yù)防和治療，臨床上多使用伊維菌素等化學(xué)藥物，抗生素治療動(dòng)物螨病具有作用快、療效高、使用方便等優(yōu)點(diǎn)[2]，但抗生素大量使用會(huì)產(chǎn)生耐藥性、藥物殘留及環(huán)境污染等問題。當(dāng)前研制廣譜、高效、無殘留、無毒、經(jīng)濟(jì)、方便，尤其是能夠適用于寵物醫(yī)院及基層獸醫(yī)站使用和推廣的殺蟲藥十分必要。中藥用于人類疾病的防治具有悠久的歷史，但在動(dòng)物疫病防治中的應(yīng)用尚處于起步階段。與抗生素相比，中草藥不良反應(yīng)較少，不產(chǎn)生耐藥性，是研發(fā)新型動(dòng)物抗菌藥物的重要來源[3]。鑒于此，本研究比較分析了花椒制劑、蒜酊合劑、復(fù)方制劑、復(fù)方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑對(duì)寵物犬螨蟲的體外殺滅效果，以期篩選出對(duì)寵物犬螨蟲具有殺滅效果的最佳中藥制劑，為天然殺螨劑的開發(fā)與研制提供參考數(shù)據(jù)，為中藥在寵物犬螨蟲防治中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 中藥制備

花椒制劑、蒜酊合劑、復(fù)方制劑（百部、苦參、檳榔、蛇床子、沙參5味草藥等比例混合）、復(fù)方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑，各取50 g分別水煎，將藥液過濾、濃縮至生藥含量約為10 mg/ml，將5種藥物分別溶于液體石蠟，置于冰箱備用。

1.2 寵物犬螨蟲

經(jīng)實(shí)驗(yàn)室確診為患有螨蟲病的寵物犬，從嚴(yán)重感染的患病部位收集痂皮置于玻璃平皿中，用柔軟的昆蟲分離針挑取成蟲蟲體120只備用，顯微鏡下鑒定120只蟲體均具有較強(qiáng)的活力。

1.3 體外殺螨試驗(yàn)

將60只螨蟲隨機(jī)分為6組，每組10只，在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔放入1組螨蟲，60只螨蟲共放置于6個(gè)孔中，前5孔為中藥制劑組，分別滴加溶于液體石蠟的花椒制劑、蒜酊合劑、復(fù)方制劑、復(fù)方橘皮素、小蘭杜制劑水煎藥液0.1 ml。第6孔為對(duì)照組，滴加液體石蠟0.1 ml。保證各孔中的藥液與蟲體充分接觸，把細(xì)胞培養(yǎng)板置于溫度為25℃、相對(duì)濕度為75%的恒溫箱中保育，每隔1小時(shí)取出在顯微鏡下觀察記錄螨蟲活動(dòng)與死亡情況，當(dāng)蟲體完全不動(dòng)、對(duì)刺激沒有任何反應(yīng)時(shí)判定為死亡。

1.4 花椒制劑不同使用劑量和殺滅時(shí)間試驗(yàn)

將生藥含量為10 mg/ml的花椒制劑2倍倍比稀釋成5個(gè)濃度，即10 mg/ml、5 mg/ml、2.5 mg/ml、1.25 mg/ml、0.63 mg/ml。將剩余60只螨蟲隨機(jī)分為6組，每組10只，分別放置于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板的6個(gè)孔中，前5孔為花椒制劑不同使用劑量組，分別滴加溶于液體石蠟的10 mg/ml、5 mg/ml、2.5 mg/ml、1.25 mg/ml、0.63 mg/ml花椒制劑水煎藥液0.1 ml。第6孔為對(duì)照組，滴加液體石蠟0.1 ml。保證各孔中的藥液與蟲體充分接觸，把細(xì)胞培養(yǎng)板置于溫度為25℃、相對(duì)濕度為75%的恒溫箱中保育，每隔1小時(shí)取出在顯微鏡下觀察記錄螨蟲活動(dòng)與死亡情況，統(tǒng)計(jì)分析花椒制劑不同使用劑量對(duì)螨蟲的殺滅時(shí)間。

2 結(jié)果與分析

2.1 體外殺螨試驗(yàn)結(jié)果

由表1可知，花椒制劑、蒜酊合劑、復(fù)方制劑、復(fù)方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑將試驗(yàn)螨蟲全部殺死的時(shí)間分別為4 h、6 h、5 h、7 h、6 h，而對(duì)照組在12 h后試驗(yàn)螨蟲存活率仍達(dá)80%。表明5種中藥制劑對(duì)寵物犬螨蟲均具有一定的殺滅效果，且花椒制劑對(duì)寵物犬螨蟲的殺滅效果最好。

表1 中藥制劑對(duì)螨蟲體外存活的影響

2.2 花椒制劑不同使用劑量和殺滅時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，當(dāng)花椒制劑濃度在5 mg/ml及以上時(shí)，可在4 h內(nèi)將螨蟲100%滅殺；當(dāng)花椒制劑濃度為2.5 mg/ml時(shí)，可在8 h內(nèi)將螨蟲100%滅殺；當(dāng)花椒制劑濃度為1.25 mg/ml時(shí)，可在11 h內(nèi)將螨蟲100%滅殺；當(dāng)花椒制劑濃度為0.63 mg/ml時(shí)，在12 h內(nèi)對(duì)螨蟲的滅殺率僅為50%。表明隨著花椒制劑濃度的降低，花椒制劑對(duì)螨蟲的殺滅時(shí)間逐步延長(zhǎng)，為確保滅殺效果、縮短滅殺時(shí)間，應(yīng)保持花椒制劑濃度在5 mg/ml以上。

表2 花椒制劑不同劑量對(duì)螨蟲體外存活的影響

3 討論

近幾年隨著我國(guó)寵物行業(yè)的快速發(fā)展，犬皮膚性疫病的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年升高的趨勢(shì)，而在寵物犬的諸多皮膚病中，有一半以上是犬螨蟲病。中藥不產(chǎn)生耐藥性，在自然界中可自行降解，不存在藥物長(zhǎng)期殘留和環(huán)境污染問題，且中藥在治療動(dòng)物疾病的同時(shí)能夠提高動(dòng)物機(jī)體的免疫力和抗病力，達(dá)到標(biāo)本兼治的效果。因此，中藥在寵物犬螨蟲病的防治中具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。本研究結(jié)果表明：花椒制劑、蒜酊合劑、復(fù)方制劑、復(fù)方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑對(duì)寵物犬螨蟲均具有一定的殺滅效果，但以花椒制劑對(duì)寵物犬螨蟲的殺滅效果最好，該結(jié)論與譚德展等[4]進(jìn)行的五種中藥制劑對(duì)兔螨蟲殺滅效果的研究表現(xiàn)出了高度的相似性。譚德展等[4]比較分析了花椒制劑、苦參水煎劑、苦楝皮水煎劑、明雄散、擦疥散5種中藥制劑對(duì)兔螨蟲離體成蟲的體外滅殺作用，結(jié)果表明花椒制劑的殺螨效果最好。同時(shí)，本研究進(jìn)一步分析了花椒制劑不同使用劑量對(duì)寵物犬螨蟲的殺滅效果，表明隨著花椒制劑濃度的降低，其殺滅螨蟲所需時(shí)間逐步延長(zhǎng)，為確保滅殺效果，應(yīng)保持花椒制劑濃度在5 mg/ml以上。當(dāng)然，本研究確定的花椒制劑使用劑量是針對(duì)離體螨蟲而言，由于螨蟲在離體情況下受到外界環(huán)境應(yīng)激的影響，其活力越來越低，故在臨床中應(yīng)用花椒制劑治療寵物犬螨蟲病時(shí)還需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)一步確定使用劑量和殺滅時(shí)間，切記盲目使用?？傊?，本研究通過體外離體試驗(yàn)篩選出了對(duì)寵物犬螨蟲具有良好殺滅效果的中藥制劑，并明確了花椒制劑體外使用劑量和殺滅所需時(shí)間，為中藥在寵物犬螨蟲防治中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。