杜鎣淦，孫紹星，陸允平，周志有

肺癌的發(fā)病率及死亡率居于惡性腫瘤之首[1]，是嚴重危害人們生命健康的惡性腫瘤之一。肺癌根據(jù)病理類型分為非小細胞肺癌（NSCLC）和小細胞肺癌。其中NSCLC占絕大多數(shù)，約為85%，其病死率占據(jù)世界癌癥首位[2-3]。目前，因肺癌治療手段單一，導致晚期肺癌患者生存期短，生存質(zhì)量難以得到保障。因此對其病理研究與治療顯得尤為重要[4-5]。本研究通過檢測NSCLC患者癌組織細胞中甲基轉(zhuǎn)移酶3A（DNMT3A）、基因關聯(lián)蛋白A（MGA）及磷脂酰肌醇-3-激酶催化亞基r基因（PIK3CG）突變狀況，以探究其檢測意義。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2015年2月至2019年10月浙江省金華市中心醫(yī)院收治的260例NSCLC患者，男119例，女141例；年齡20～80歲，平均（48.3±8.2）歲；腺癌（ADC）186例，鱗癌（SQC）74例；其中120例發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移；102例有吸煙史，158例無吸煙史。本研究經(jīng)過倫理委員會批準，且在征得患者本人及家屬的同意下進行。

1.2 方法采集所有患者術中切除的癌組織或活體組織，送至長沙健路醫(yī)學檢驗所檢測DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突變情況。具體方法：（1）通過組織切片機（上海寰熙醫(yī)療器械有限公司，KD-3358）將組織切成4 m切片，置于EP試管中使其充分消化。（2）利用雙鏈DNA試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）提取DNA，將所提取的DNA采用擴增阻滯突變系統(tǒng)進行DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變檢測；提取的DNA作為模板，使其進行聚合酶連反應擴增，反應結束后根據(jù)聚合酶連反應儀輸出的結果判斷其突變情況。若突變位點有擴增，且Ct值≤35，則表明該樣品DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變陽性；若突變位點無擴增，且Ct值＞35，則表明該樣品DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變陰性。

1.3 觀察指標觀察肺癌患者癌組織細胞中DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變情況，并分析其與病理特征的關系。

1.4 統(tǒng)計方法采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料采用2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變情況260例NSCLC患者中DNMT3A基因突變陽性50例（19.2%），MGA基因突變陽性31例（11.9%），PIK3CG基因突變陽性23例（8.8%）。

2.2 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變與病理特征的關系NSCLC患者DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變與性別、吸煙情況無關（均P＞0.05），與病理類型有關（P＜0.05），且發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移的患者DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突變率明顯高于未發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移患者。見表1。

表1 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變與病理特征的關系 例

3 討論

肺癌由多基因參與，且病變過程復雜，臨床研究發(fā)現(xiàn)越來越多的基因與腫瘤相關[6-8]。目前，肺癌治療主要通過對敏感基因突變患者實施靶向藥物治療，其有一定的療效。肺癌分子靶向治療所關注的是NSCLC患者基因突變的共存及耐藥機制，隨著醫(yī)療技術及檢測儀器的進步，多重基因檢測被應用于臨床[9-10]。患者DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變、基因間的雙突變及多突變的檢測對靶向藥物的選擇提供了理論依據(jù)[11-12]。

DNMT3A表達指標與肝細胞癌及黑色素瘤有關，DNMT3A突變發(fā)生于11號外顯子移碼突變，常發(fā)生在急性髓細胞白血病中，其突變率可高達30%[13-14]。MGA可調(diào)節(jié)靶基因Max和T-box表達的雙特異性轉(zhuǎn)錄因子，它與堿性螺旋異源二聚化參與細胞增殖來調(diào)節(jié)基因表達[15]。MGA可作為轉(zhuǎn)錄激活因子或阻遏蛋白，轉(zhuǎn)錄激活依賴于Max。因MGA基因內(nèi)含子的剪接突變可導致MGA突變，該基因突變常在肺癌、白血病及淋巴瘤中表達。PIK3CG（p110-r）是類磷脂酰肌醇3激酶家族中唯一成員，它與IA類家族成員一起生成重要的第二信使PIP2。然而，PIK3CG與IA類酶不同，后者將信號傳導至受體酪氨酸激酶下游，而前者將信號傳導至GPCR下游[16]。p110-r作為催化亞基，其在磷酸化磷脂?；嫉闹|(zhì)和蛋白發(fā)揮激酶作用。其主要表達在白蛋白中，且通過與Ras和G-蛋白耦聯(lián)受體作用參與免疫細胞應答和炎性刺激中。PIK3CG作用于細胞外信號傳導使細胞表面受體與細胞內(nèi)信號傳導網(wǎng)絡相連接，激活后下游信號可促進細胞的存活、增殖生長和運動。PIK3CG突變主要發(fā)生于4號外顯子的突變，該基因突變常表達于骨髓惡性腫瘤[17]。

本研究結果顯示，260例NSCLC患者中DNMT3A基因突變陽性50例（19.2%），MGA基因突變陽性31例（11.9%），PIK3CG基因突變陽性23例（8.8%）；NSCLC患者DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突變與性別及吸煙情況無關，但與病理類型、淋巴結是否發(fā)生轉(zhuǎn)移有關，且淋巴結轉(zhuǎn)移會提高DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變率。