李和教，黃毅嵐，黃易

1.海南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部，海南 海口 570102；2.西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，四川 瀘州 646000

血管性認(rèn)知障礙(vascular cognitive impairment，VCI)是由腦血管病變或由血管性因素導(dǎo)致與之有關(guān)的認(rèn)知損害，亦是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)退行性疾病[1]，主要以學(xué)習(xí)、記憶及社交等能力降低為主要的疾病特點(diǎn)認(rèn)知功能障礙[2]，多發(fā)于中老年。隨著社會(huì)的老齡化，血管性認(rèn)知障礙對(duì)人們的健康及生活質(zhì)量的影響越來越明顯及其發(fā)病率較高，甚至進(jìn)展成癡呆，這不僅給患者的健康及生活質(zhì)量帶來嚴(yán)重的影響，還給社會(huì)及其家庭帶來嚴(yán)峻的考驗(yàn)[3]。目前在臨床及基礎(chǔ)研究針對(duì)血管性認(rèn)知功能障礙的發(fā)病機(jī)制亦尚未明確，且在臨床治療上沒有療效確切的藥物和治療方案[4]；在中醫(yī)上采用辨證論治方法，以滋益固腎、活血化瘀、化痰開竅的治療原則治療及改善患者的血管性認(rèn)知功能障礙的癥狀方面取得良好的臨床效果。

血府逐瘀湯是治療“胸中血府淤血”的常用理血藥方之一，具有活血化瘀、行氣通絡(luò)之效，對(duì)血管性癡呆具有明顯改善作用[5]。有研究顯示通過多成分、多層面、多靶點(diǎn)及多通路研究及分析該方所包含的活血化瘀中藥，發(fā)現(xiàn)血府逐瘀湯及其活性成分具有減輕氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，改善機(jī)體微循環(huán)障礙等作用，在一定程度可改善或延緩認(rèn)知功能障礙的惡化[6-9]。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)主要利用生物信息學(xué)和分子生物學(xué)等研究方法，通過“成分-潛在靶點(diǎn)-分子通路”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建，從整體上對(duì)中藥物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理作用進(jìn)行系統(tǒng)和多層次的解析[10-12]。本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，篩選血府逐瘀湯的活性成分靶點(diǎn)，構(gòu)建“活性成分-潛在靶點(diǎn)”和“成分-潛在靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)，尋找潛在通路，探討血府逐瘀湯通過多成分、多靶點(diǎn)、多通路發(fā)揮治病作用的機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供證據(jù)，更為血管性認(rèn)知功能障礙的臨床干預(yù)治療提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 血府逐瘀湯活性成分的篩選 通過檢索TCMSP 數(shù)據(jù)庫(kù)檢索血府逐瘀湯的活性成分，根據(jù)OB%≥30%和DL≥0.18 條件[13]篩選血府逐瘀湯的活性成分，并且通過PuChem 數(shù)據(jù)查詢活性成分對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)式(SMILES)將所得信息錄入Excel 表格，且下載2D和3D結(jié)構(gòu)。

1.2 血府逐瘀湯活性成分靶點(diǎn)反向預(yù)測(cè) 通過將SMILES 依次輸入SWISS 數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.swisstargetprediction.ch/)[14]中的SWISS，以“人類”為研究物種預(yù)測(cè)活性成分的靶點(diǎn)，整合去重得到血府逐瘀湯的作用靶點(diǎn)。

1.3 血管性認(rèn)知功能障礙的靶點(diǎn)獲取 利用“vascular cognitive impairment”作為關(guān)鍵詞，對(duì)Gene-Card等數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行疾病靶點(diǎn)的檢索及篩選。整合去除重復(fù)靶點(diǎn)，即可獲得血管性認(rèn)知功能障礙的相關(guān)靶點(diǎn)。

1.4 構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖 利用韋恩圖(Venn diagram)得到成分靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)的交集，即潛在靶點(diǎn)，使用Cytoscape 3.6.0軟件構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)。網(wǎng)絡(luò)圖中的節(jié)點(diǎn)(node)分別為活性成分和潛在靶點(diǎn)；邊(edge)表示三者的相互關(guān)系。使用Cytoscape 中Network Analysis 插件對(duì)相應(yīng)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)湫再|(zhì)分析，根據(jù)節(jié)點(diǎn)連接度(degree)和介數(shù)中心性(betweenness centrality)設(shè)置網(wǎng)絡(luò)樣式，節(jié)點(diǎn)大小反映degree大小，邊的粗細(xì)反映betweenness centrality大小。

1.5 蛋白質(zhì)相互關(guān)系網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和關(guān)鍵靶點(diǎn)篩選 將血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫(kù)，得到潛在作用靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果以TSV格式導(dǎo)出結(jié)果，將結(jié)果中的node1、node2、combined score信息以TXT格式導(dǎo)入Cytoscape軟件中進(jìn)行可視化和Network Analyzer分析，以節(jié)點(diǎn)degree 值反映靶點(diǎn)大小和顏色，從而構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)。以節(jié)點(diǎn)度值(degree)和介數(shù)中心度(betweenness centrality)大于等于所有點(diǎn)中位數(shù)值2倍的靶點(diǎn)，并滿足接近中心度(closeness centrality)大于所有點(diǎn)中位數(shù)值條件篩選關(guān)鍵靶點(diǎn)作為血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的“關(guān)鍵靶點(diǎn)”，研究關(guān)鍵靶標(biāo)可能存在的藥理作用。

1.6 GO 與KEGG 通路富集分析 通過DAVID 數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GeneOntology 分析(生物過程、分子功能和細(xì)胞成分三個(gè)層面)和Pathways分析，保存并整理結(jié)果，篩選排名靠前的生物過程或信號(hào)通路，通過Omicshare進(jìn)行可視化。

1.7 構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖 根據(jù)KEGG 分析結(jié)果篩選出關(guān)鍵基因富集基因數(shù)相對(duì)大的通路，通過Cytoscape 軟件構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖。

2 結(jié)果

2.1 血府逐瘀湯的活性成分篩選結(jié)果 通過TCMSP 數(shù)據(jù)庫(kù)以及文獻(xiàn)分別檢索血府逐瘀湯的活性成分及相應(yīng)靶點(diǎn)等信息，滿足OB＞30%和DL＞0.18 條件的成分作為主要活性成分，共得到活性成分212個(gè)，其中桃仁23 個(gè)、紅花22 個(gè)、當(dāng)歸2 個(gè)、川芎7 個(gè)、赤芍29 個(gè)、牛膝20 個(gè)、柴胡17 個(gè)、桔梗7 個(gè)、甘草23 個(gè)、枳殼5 個(gè)、地黃57 個(gè)，去重及去除無(wú)結(jié)構(gòu)式的活性成分后有105個(gè)活性成分，部分主要活性成分見表1。

表1 血府逐瘀湯的主要活性成分信息

2.2 構(gòu)建血府逐瘀湯活性成分-血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的潛在靶點(diǎn)藥理網(wǎng)絡(luò) 活性成分-潛在靶點(diǎn)藥理網(wǎng)絡(luò)共包括147個(gè)節(jié)點(diǎn)和519個(gè)邊，該網(wǎng)絡(luò)包含了88個(gè)化合物節(jié)點(diǎn)和59個(gè)潛在靶點(diǎn)節(jié)點(diǎn)(圖1)。紅色(node)：潛在靶點(diǎn)；深藍(lán)色(node)：活性成分；這些潛在的活性成分與靶點(diǎn)產(chǎn)生519個(gè)相互作用關(guān)系。通過Network Analyzer對(duì)網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行分析，結(jié)果顯示：與潛在靶點(diǎn)相互作用的活性成分中，甘草查爾酮B、刺槐黃素、刺果甘草查耳酮、橙皮素、柚皮素、槲皮素、山奈酚、甘草寧G、漢黃芩素等大于活性成分的中位數(shù)度值，即與6個(gè)以上靶點(diǎn)連接，是血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的主要成分；在這個(gè)網(wǎng)絡(luò)中，藥物活性成分可作用于相同的靶點(diǎn)，也可作用于不同的靶點(diǎn)，一種成分對(duì)應(yīng)多個(gè)靶點(diǎn)，一個(gè)靶點(diǎn)也對(duì)應(yīng)多種成分，這體現(xiàn)了其多成分、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)。

圖1 血府逐瘀湯的“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖

2.3 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建 使用STRING網(wǎng)站對(duì)得到的血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的潛在靶點(diǎn)進(jìn)行分析，為獲得更加簡(jiǎn)潔PPI網(wǎng)絡(luò)，首先刪除了自相作用關(guān)系蛋白邊，再刪除沒有相互作用蛋白的節(jié)點(diǎn)，在使用Cytoscape軟件構(gòu)建潛在蛋白質(zhì)-潛在蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)(圖2)。PPI網(wǎng)絡(luò)中有59個(gè)節(jié)點(diǎn)和588 個(gè)邊緣。PPI 網(wǎng)絡(luò)圖中節(jié)點(diǎn)的大小與其在網(wǎng)絡(luò)中的度值呈正相關(guān)。節(jié)點(diǎn)的度值越大，它在網(wǎng)絡(luò)中作用越重要，相應(yīng)的蛋白質(zhì)靶點(diǎn)在疾病過程中有著更重要的作用。而在PPI圖中，用紅色飛鏢形代表關(guān)鍵蛋白、黃色飛鏢形代表其他主要蛋白、藍(lán)色圓形代表其他相關(guān)蛋白，在PPI 網(wǎng)絡(luò)中APP(Degree34)、MAPK 1(Degree34)、TNF (Degree61)、FGF2 (Degree37)、EGFR(Degree38)、VEGFA(Degree39)、IL6 (Degree40)、AKT1(Degree44)蛋白質(zhì)節(jié)點(diǎn)的程度較高，大于節(jié)點(diǎn)中位數(shù)對(duì)應(yīng)的度的2 倍以上，這些靶點(diǎn)蛋白可能在血管性認(rèn)知功能障礙的發(fā)展中起關(guān)鍵作用，見表2。

表2 血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的關(guān)鍵靶點(diǎn)

2.4 生物通路富集分析 使用DAVID網(wǎng)站對(duì)血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GO富集分析，得到了P＜0.05的GO條目共計(jì)40個(gè)，其中包含生物過程(biological process，BP)條目共26 個(gè)，最顯著的為ERK1 和ERK2 級(jí)聯(lián)正調(diào)控、MAP 激酶活性的正調(diào)節(jié)、MAPK 級(jí)聯(lián)、蛋白激酶B 信號(hào)的正調(diào)控等；細(xì)胞組成(cell composition，CC)分析結(jié)果一共有9條，最顯著的為細(xì)胞表面、質(zhì)膜、細(xì)胞外間隙、胞外區(qū)、細(xì)胞核等；分子功能(molecular function，MF) 分析結(jié)果共有5條，最顯著的為酶結(jié)合、ATP結(jié)合、肝素結(jié)合、細(xì)胞因子活性、ATP 結(jié)合等，各類分別取前20 條。通過對(duì)血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG 通路分析得到了P＜0.05 的通路共44條，包括PI3K-Akt(磷酸肌醇-3羥激酶/蛋白激酶B)通路、HIF-1(缺氧誘導(dǎo)因子1)信號(hào)通路、MAPK(絲裂原活化蛋白激酶)信號(hào)通路、TNF(腫瘤壞死因子)信號(hào)通路、FoxO 信號(hào)通路、Ras 信號(hào)通路、Toll 樣受體信號(hào)通路等，見圖3。此20 條作用通路均與血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙相關(guān)的4 個(gè)以上靶基因富集重疊，揭示血府逐瘀湯的有效成分可能通過作用于以上多條信號(hào)通路來治療血管性認(rèn)知功能障礙。相關(guān)通路信息及富集基因見表3。

圖2 血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的潛在靶點(diǎn)的蛋白-蛋白相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)

圖3 GO和KEGG富集分析

表3 血府逐瘀治療血管性認(rèn)知功能障礙的關(guān)鍵通路

圖4 血府逐瘀湯的“活性成分-潛在靶點(diǎn)-通路”的網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 構(gòu)建血府逐瘀湯活性成分-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò) 為研究血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的主要作用通路，本研究將血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙作用的8 個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白置入DAVID 數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行通路富集分析，將結(jié)果中含有特殊疾病信號(hào)通路刪除，并將結(jié)果在Cytoscape軟件中構(gòu)建血府逐瘀湯活性化合物-疾病靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)，見圖4。共有163個(gè)節(jié)點(diǎn)和582 個(gè)邊，有88 個(gè)血府逐瘀湯中的化合物，59個(gè)主要的血管性認(rèn)知功能障礙潛在靶點(diǎn)和16 個(gè)通路。其中PI3K-Akt 信號(hào)通路含有6 個(gè)蛋白被富集，HIF-1 信號(hào)通路有5 個(gè)蛋白被富集，Ras 信號(hào)通路有5個(gè)蛋白被富集，MAPK 信號(hào)通路有5 個(gè)蛋白被富集，F(xiàn)oxO 和腫瘤壞死因子通路有4 個(gè)蛋白被富集，VEGF信號(hào)通路有5 個(gè)蛋白被富集，其余通路富集蛋白數(shù)量見表3。

3 討論

血管性認(rèn)知功能障礙是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)退行性疾病，隨著年齡的增長(zhǎng)，其對(duì)健康和生活質(zhì)量的影響越來越明顯，發(fā)病率也越來越高，甚至?xí)l(fā)展為癡呆，這不僅嚴(yán)重影響了患者的健康和生活質(zhì)量，而且也給社會(huì)和家庭帶來了嚴(yán)峻的考驗(yàn)[3]。針對(duì)血管性認(rèn)知功能障礙的發(fā)病機(jī)制，目前臨床及基礎(chǔ)研究尚無(wú)定論，在臨床治療中也無(wú)療效確切的藥物和方案[4]。中醫(yī)采用辨證論治方法，以滋養(yǎng)腎、活血化瘀、化痰開竅為原則治療血管性認(rèn)知功能障礙，取得較好的臨床效果。血府逐瘀湯是治療“胸中血府淤血”的常用理血方劑之一，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛的功效，對(duì)血管性癡呆有明顯的改善作用[5]。研究顯示，通過多成分、多層面、多靶點(diǎn)、多通路研究及分析血府逐瘀湯及其有效成分，發(fā)現(xiàn)具有抗氧化應(yīng)激、抗炎癥、改善機(jī)體微循環(huán)障礙等作用，并在一定程度上改善或延緩認(rèn)知功能障礙的惡化[6-9]。因此，本文采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究血管性認(rèn)知功能障礙相關(guān)藥物及其作用機(jī)理，為臨床和基礎(chǔ)研究奠定基礎(chǔ)，對(duì)緩解臨床癥狀和改善預(yù)后具有重要意義[15]。

本研究分析結(jié)果顯示，通過TCMSP 數(shù)據(jù)庫(kù)檢索血府逐瘀湯中各味藥的活性成分，并篩選出口服生物利用度(OB)≥30%和類藥性值(DL)≥0.18 的血府逐瘀湯活性成分，共得到105 個(gè)有效活性成分和59個(gè)血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的主要潛在靶點(diǎn)。分析圖1 可見，有些化合物能調(diào)節(jié)多個(gè)作用靶點(diǎn)，比如甘草查爾酮B 可調(diào)控14 個(gè)潛在靶點(diǎn)、柚皮素能影響12 個(gè)潛在靶點(diǎn)、懈皮素可以調(diào)控10個(gè)潛在靶點(diǎn)等，但有少部分化合物只能調(diào)節(jié)一個(gè)靶點(diǎn)，比如β-胡蘿卜素僅作用于RBP4 靶點(diǎn)；反過來，一些關(guān)鍵蛋白也能被多種化合物調(diào)節(jié)和作用，但有部分蛋白質(zhì)也只受一個(gè)化合物調(diào)節(jié)及影響。如AKT1 蛋白被12 種化合物調(diào)控，EGFR 可被31 種化合物調(diào)控，而TGFBR2、HLA-DRB1 和VCAM1 僅由一個(gè)化合物調(diào)控，這說明血府逐瘀湯具有多成分、多靶點(diǎn)間相互作用和作用的特點(diǎn)，一些關(guān)鍵化合物作用于關(guān)鍵靶點(diǎn)起到治療疾病的主要作用。

血府逐瘀湯治療VCI 有8 個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)，44 條信號(hào)通路和40條GO生物功能過程，主要是通過調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖周期、激酶活性、胰島素抵抗、MAPK 信號(hào)通路、PI3K-Akt 信號(hào)通路和TNF 通路等多靶點(diǎn)、多途徑、多層面發(fā)揮作用，有效地改善及治療血管性認(rèn)知功能障礙的作用。在圖4中可見，一共有163個(gè)節(jié)點(diǎn)和582個(gè)邊，該網(wǎng)絡(luò)包含88個(gè)化合物、59個(gè)潛在靶點(diǎn)和16個(gè)通路。通過GO和KEGG富集分析可見，關(guān)鍵靶點(diǎn)TNF、EGFR、AKT1、MAPK富集于多條分子通路，亦反映關(guān)鍵靶點(diǎn)和分子通路在血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的關(guān)鍵性作用，如6個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)富集于PI3K-Akt(磷酸肌醇-3羥激酶/蛋白激酶B)信號(hào)通路，5個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)富集于HIF-1(缺氧誘導(dǎo)因子1)信號(hào)通路，5個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)富集于MAPK(絲裂原活化蛋白激酶)信號(hào)通路，F(xiàn)oxO和TNF通路有4個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)被富集。整個(gè)富集中，PI3K-Ak信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、FoxO和TNF通路被富集的蛋白最多，這均可說明這些通路在血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的過程中起到關(guān)鍵性作用。

Akt 是PI3K 信號(hào)傳導(dǎo)途徑中一個(gè)重要的下游靶激酶，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和遷移作用。PI3K/Akt信號(hào)通路在神經(jīng)組織中廣泛存在，比如腦組織海馬，其PI3K和Akt靶點(diǎn)酶的活化可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞生存、減輕神經(jīng)元的損傷[16-17]，減少炎癥細(xì)胞的死亡[18-19]、阻擋神經(jīng)元凋亡[20-21]；血管性認(rèn)知功能障礙與許多腦血管疾病有關(guān)，大多數(shù)患者表現(xiàn)為學(xué)習(xí)記憶力減退，嚴(yán)重者出現(xiàn)智能障礙和無(wú)法自理，其智能障礙呈現(xiàn)進(jìn)行性發(fā)展趨勢(shì)[22]。研究顯示[23]：PI3K/Akt 信號(hào)通路存在于各種神經(jīng)細(xì)胞中，通過激活PI3K/Akt 信號(hào)通路[24]及提高PI3K、Akt、HIF-1α以及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)蛋白和基因表達(dá)，從而修復(fù)及保護(hù)神經(jīng)元、發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用、調(diào)節(jié)血管舒縮功能[25]、改善腦循環(huán)、改善腦組織海馬神經(jīng)元突觸可塑形態(tài)[26]、改善腦海馬神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)，說明PI3K/Akt通路在神經(jīng)退行性疾病及腦血管疾病等中發(fā)揮重要作用。此外，PI3K/Akt通路的激活可通過調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)元及各膠質(zhì)細(xì)胞的活性、凋亡及自噬來發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)[27-28]及調(diào)節(jié)學(xué)習(xí)記憶功能[25]。葛根素和黃芪均能通過激活PI3K/Akt通路減少大鼠腦缺血再灌注引起神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡，起到神經(jīng)保護(hù)作用[29-30]。中藥復(fù)方補(bǔ)陽(yáng)還五湯及中藥單體化合物(地黃屬、魚草屬、車前屬等)通過促進(jìn)腦皮層腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)，激活PI3K/Akt信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，從而抑制腦組織神經(jīng)細(xì)胞的凋亡、改善血管血流量及能量、促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)及保護(hù)作用，進(jìn)而保護(hù)腦組織及改善認(rèn)知功能[31]。與之相關(guān)的TNF、EGFR、MAPK等主要及關(guān)鍵基因，在血管性認(rèn)知功能障礙的相關(guān)分子通路中起到相應(yīng)的調(diào)節(jié)作用，改善認(rèn)知功能障礙的相應(yīng)臨床表現(xiàn)，為后期的臨床研究及基礎(chǔ)研究提供更深入的研究方向及靶點(diǎn)。

本文基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測(cè)血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的潛在靶點(diǎn)預(yù)測(cè)及研究其分子機(jī)制，從多成分、多靶點(diǎn)及多通路等系統(tǒng)層面揭示血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的作用機(jī)制，為臨床及基礎(chǔ)研究血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙的作用成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)及其相關(guān)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。下一步，我們將對(duì)預(yù)測(cè)的關(guān)鍵靶標(biāo)和關(guān)鍵通路進(jìn)行藥理學(xué)驗(yàn)證，為進(jìn)一步研究血府逐瘀湯治療血管性認(rèn)知功能障礙提供依據(jù)。