林裕慶 王文革 唐學(xué)武 譚漢旭 楊云月

1河北北方學(xué)院（河北張家口075000）；2中國(guó)人民解放軍空軍特色醫(yī)學(xué)中心（北京100142）

濕疹是兒童最常見(jiàn)的變應(yīng)性皮膚病，發(fā)病機(jī)理復(fù)雜，其中遺傳及免疫因素被視為是影響濕疹患病的關(guān)鍵因素［1］。嬰兒的免疫系統(tǒng)最早在母親妊娠期宮內(nèi)就開(kāi)始發(fā)育，母親的特異性體質(zhì)也是從這個(gè)時(shí)候?qū)μ寒a(chǎn)生影響［2］。臍血的免疫炎性指標(biāo)反應(yīng)新生兒最早的免疫功能狀態(tài)，因此，研究臍血免疫相關(guān)的炎性因子等成分與嬰兒濕疹發(fā)病的關(guān)系，對(duì)嬰兒濕疹的早期防治具有積極的意義。近些年來(lái)，有研究者發(fā)現(xiàn)臍血IgE、維生素D水平與嬰兒濕疹發(fā)生密切相關(guān)，可作為預(yù)測(cè)濕疹等變態(tài)反應(yīng)性疾病發(fā)生的早期篩查指標(biāo)［3-4］。目前對(duì)早期嬰兒濕疹發(fā)生相關(guān)因素尚未有全面的認(rèn)識(shí)，進(jìn)一步探究臍血其他炎癥因子與濕疹的關(guān)系，將有利于全面揭示嬰兒濕疹的影響因素，進(jìn)而及早發(fā)現(xiàn)早期過(guò)敏性疾病，并采取相應(yīng)的干預(yù)措施。

研究［5］發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子（Eotaxin）是趨化嗜酸性粒細(xì)胞發(fā)揮作用的關(guān)鍵因子，在濕疹等過(guò)敏性疾病中發(fā)揮著重要的作用，近些年來(lái)受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注及研究。已有研究證實(shí)Eotaxin 通過(guò)特異性結(jié)合CCR3 受體后趨化血液、骨髓中的嗜酸性粒細(xì)胞到達(dá)局部組織中的炎癥部位，并促進(jìn)IgE 的合成及分泌，IgE 與其受體結(jié)合后誘導(dǎo)細(xì)胞活化、脫顆粒釋放相關(guān)炎癥介質(zhì)，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致濕疹的發(fā)生［5-6］。成人濕疹患者血清Eotaxin 水平顯著升高［7］，然而兒童濕疹患者血清Eotaxin 的研究不多，目前關(guān)于臍血Eotaxin 水平與嬰兒濕疹的關(guān)系的研究也甚少。本研究通過(guò)檢測(cè)臍血Eotaxin 水平，隨訪42 d 嬰兒濕疹的發(fā)生情況，分析影響臍血Eotaxin 水平相關(guān)因素，并探討臍血Eotaxin 水平對(duì)嬰兒濕疹的預(yù)測(cè)意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年10月至2019年11月期間，在空軍特色醫(yī)學(xué)中心的婦產(chǎn)科醫(yī)生協(xié)助下采集188 例新生兒臍帶血。所有新生兒均為足月健康兒。新生兒出生時(shí)采集臍帶血標(biāo)本4 mL 冷藏于-4 ℃冰箱，在24 h 內(nèi)從-4 ℃冰箱取出然后在我院中心實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)以轉(zhuǎn)速為3 000 r/min 進(jìn)行離心5 min，靜置后用移液槍將采血管的上層血漿分離放入1.5 mL EP 管中保存，最后將EP 管編號(hào)后保存在零下80 ℃的冰箱中待測(cè)。本次研究已通過(guò)倫理委員會(huì)的審查后獲得批準(zhǔn)，納入研究的新生兒父母已知曉并簽署知情同意書(shū)。

1.2 研究方法

1.2.1 問(wèn)卷調(diào)查內(nèi)容在新生兒出生后到婦產(chǎn)科登記其出生信息（日期、性別、胎齡、體質(zhì)量、身長(zhǎng)、分娩方式等），母親妊娠期是否健康情況（妊娠期高血壓、妊娠合并貧血、甲狀腺功能減退癥、妊娠期糖尿病等疾?。?，家族過(guò)敏史（哮喘、過(guò)敏性結(jié)膜炎、過(guò)敏性鼻炎、濕疹、蕁麻疹、食物藥物過(guò)敏等）。

1.2.2 Eotaxin 水平檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定臍帶血中Eotaxin 含量。Eotaxin 的ELISA 檢測(cè)試劑盒（產(chǎn)品批號(hào)：20054311）從美國(guó)的英杰生物技術(shù)有限公司（Invitrogen）購(gòu)買(mǎi)。

1.3 隨訪分析嬰兒生后42 d 進(jìn)行隨訪，對(duì)家長(zhǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)卷調(diào)查，記錄濕疹發(fā)生的情況（濕疹發(fā)生時(shí)間、部位、程度、伴隨癥狀、用藥情況）。嬰兒濕疹的診斷參考《濕疹診療指南（2011年）》［8］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；采用logistic回歸分析嬰兒濕疹發(fā)生的危險(xiǎn)因素。采用受試者工作特征曲線（ROC）分析臍血Eotaxin 水平對(duì)42 d嬰兒濕疹的預(yù)測(cè)意義。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 影響臍血Eotaxin水平的相關(guān)因素納入研究的新生兒臍帶血Eotaxin水平為（121.75±72.22）pg/mL。將新生兒性別、出生體重、出生身長(zhǎng)、出生季節(jié)、分娩方式、胎齡以及母親年齡、孕期體檢情況和有無(wú)家族過(guò)敏史進(jìn)行分組，采用t檢驗(yàn)分析它們是否與臍血Eotaxin 的水平相關(guān)。有家族過(guò)敏史和無(wú)家族過(guò)敏史的新生兒臍帶血Eotaxin 水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其余資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。

表1 影響臍血Eotaxin 的相關(guān)因素Tab.1 Correlation factors of affecting umbilical cord blood Eotaxin ±s

表1 影響臍血Eotaxin 的相關(guān)因素Tab.1 Correlation factors of affecting umbilical cord blood Eotaxin ±s

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2.2 42 d 嬰兒有濕疹組與無(wú)濕疹組臍血Eotaxin水平比較將188 例嬰兒根據(jù)42 d 是否患有濕疹分為濕疹組和無(wú)濕疹組，t檢驗(yàn)結(jié)果表明濕疹組臍血Eotaxin 表達(dá)水平明顯高于無(wú)濕疹組（P＜0.05），說(shuō)明臍血Eotaxin 水平與嬰兒患有濕疹密切相關(guān)，見(jiàn)表2。

2.3 嬰兒濕疹起病時(shí)間與臍血Eotaxin 水平的比較根據(jù)42 d 嬰兒濕疹起病時(shí)間進(jìn)行分為1 ～3 周組和3 ～6 周組，兩組之間臍血Eotaxin 水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表2 42 d嬰兒有濕疹組和無(wú)濕疹組臍血Eotaxin水平比較Tab.2 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin levels between groups with or without eczema in 42-day infants ±s

表2 42 d嬰兒有濕疹組和無(wú)濕疹組臍血Eotaxin水平比較Tab.2 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin levels between groups with or without eczema in 42-day infants ±s

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表3 嬰兒濕疹不同起病時(shí)間組臍血Eotaxin 水平比較Tab.3 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin level in differend onset time groups of infantile eczema ±s

表3 嬰兒濕疹不同起病時(shí)間組臍血Eotaxin 水平比較Tab.3 Comparison of umbilical cord blood Eotaxin level in differend onset time groups of infantile eczema ±s

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2.4 嬰兒濕疹相關(guān)因素的logistic 回歸分析將與濕疹相關(guān)的家族過(guò)敏史、臍血Eotaxin 水平作為自變量進(jìn)行l(wèi)ogistic 逐步回歸分析，結(jié)果表明臍血Eotaxin 高表達(dá)水平及過(guò)敏性家族史均是影響濕疹發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 嬰兒濕疹相關(guān)因素的logistic 回歸分析Tab.4 Logistic regression analysis of infant eczema related factors

2.5 臍血Eotaxin 水平對(duì)早期嬰兒濕疹的預(yù)測(cè)價(jià)值臍血的Eotaxin ROC 分析結(jié)果見(jiàn)表5、圖1，說(shuō)明臍血Eotaxin 對(duì)嬰兒濕疹的發(fā)生具有一定的預(yù)測(cè)意義，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表5 臍血Eotaxin 水平的ROC 曲線分析Tab.5 ROC curve analysis of cord blood Eotaxin level

圖1 臍血Eotaxin 水平的ROC 曲線分析Fig.1 ROC curve analysis of cord blood Eotaxin level

3 討論

過(guò)敏性疾病在嬰幼兒期常表現(xiàn)為濕疹或牛奶蛋白過(guò)敏［9-10］，其中嬰兒濕疹發(fā)病率為20%～57.3%不等［11-12］，呈逐年上升趨勢(shì)，不同國(guó)家地區(qū)存在差異。本次研究入組188 例嬰兒，42 d 隨訪有101 例嬰兒有濕疹，87 例無(wú)濕疹，42 d 嬰兒濕疹患病率為53.7%。有研究表明患有濕疹的嬰兒在后期患有過(guò)敏性鼻炎、哮喘等過(guò)敏性疾病的風(fēng)險(xiǎn)也增高，因此嬰兒濕疹的防治需要盡早進(jìn)行［10］。濕疹的發(fā)病與遺傳因素、免疫、環(huán)境等多種因素有關(guān)，其中遺傳及免疫功能失衡被視為是導(dǎo)致濕疹發(fā)病的兩個(gè)最重要的因素［13］，同時(shí)遺傳因素對(duì)免疫功能是有一定影響的。目前研究［14］證實(shí)Eotaxin 的表達(dá)調(diào)控與濕疹等過(guò)敏性疾病密切相關(guān)。嬰兒臍帶血能反映與遺傳有關(guān)的最早期免疫功能狀態(tài)，因此本課題通過(guò)采集臍帶血檢測(cè)Eotaxin 水平，分析其與遺傳等因素的關(guān)系。研究顯示有家族過(guò)敏史的嬰兒發(fā)生過(guò)敏性疾病的風(fēng)險(xiǎn)相應(yīng)提高［12］，本研究采用logistic 回歸分析家族過(guò)敏史與嬰兒濕疹患病的關(guān)系，也證實(shí)了家族過(guò)敏史是影響嬰兒濕疹患病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。此外，本研究結(jié)果表明有家族過(guò)敏史組的新生兒臍血Eotaxin 水平明顯高于無(wú)家族過(guò)敏史組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說(shuō)明家族過(guò)敏史對(duì)新生兒Eotaxin 臍血水平有一定的影響，從而對(duì)新生兒的免疫功能產(chǎn)生影響，結(jié)果與鄒艷等［15］研究是一致的。因此，臨床工作中對(duì)父母有過(guò)敏史的高危新生兒臍血Eotaxin 水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)及篩查，有利于對(duì)濕疹等過(guò)敏性疾病的早期干預(yù)。

近年來(lái)，研究顯示Eotaxin 是過(guò)敏反應(yīng)的重要組成部分，可誘導(dǎo)活化嗜酸性粒細(xì)胞，并延長(zhǎng)其壽命、減少凋亡和趨化到相應(yīng)炎癥部位［16］。Eotaxin也可以介導(dǎo)靶細(xì)胞中MAPK 的激活，通過(guò)局部產(chǎn)生IL-13、IL-4 等Th2 型細(xì)胞因子，而后者在濕疹等過(guò)敏性疾病中也發(fā)揮核心的作用［17］。目前研究表明Eotaxin 是選擇性最高的嗜酸性粒細(xì)胞（Eos）趨化因子，通過(guò)與嗜酸性粒細(xì)胞表面的CC 趨化因子受體結(jié)合后激活下游的絲裂原的蛋白激酶和胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶使嗜酸性粒細(xì)胞活化、增殖并募集到促使其定向遷移到相應(yīng)過(guò)敏性炎癥部位，引起組織損傷，參與濕疹的發(fā)病機(jī)制，因此Eotaxin/CCR3 相互作用軸在濕疹等過(guò)敏性疾病起著至關(guān)重要的作用［16，18］。而臍血Eotaxin 及細(xì)胞因子水平等指標(biāo)可反映最早遺傳、環(huán)境因素對(duì)胎兒免疫功能的影響［19］。但是目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于臍血Eotaxin水平與嬰兒濕疹的相關(guān)性研究鮮有報(bào)道。本研究結(jié)果顯示嬰兒濕疹組臍血Eotaxin 水平明顯高于無(wú)濕疹組（P＜0.05），說(shuō)明新生兒臍帶血高Eotaxin表達(dá)水平與濕疹的發(fā)生有一定的相關(guān)性。同時(shí)采用logistic 回歸分析臍血Eotaxin 水平與嬰兒濕疹的關(guān)系，結(jié)果表明臍血Eotaxin 高水平是影響嬰兒濕疹發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。臍血Eotaxin 高表達(dá)水平提示在胎兒期受到母親體內(nèi)的抗原物質(zhì)致敏或特應(yīng)性體質(zhì)的影響［20-21］，出生后的新生兒為此增加患有濕疹等過(guò)敏性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。此外，嬰兒在1 ～3 周、3 ～6 周發(fā)生濕疹的臍血Eotaxin 水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），考慮到隨訪的時(shí)間短及樣本量有限，可能對(duì)結(jié)果有一定的影響。同時(shí)進(jìn)一步分析臍血Eotaxin 的ROC 曲線的結(jié)果顯示：AUC 為0.773、95%CI為0.704 ～0.841，特異度為52.9%，靈敏度為88.8%，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.035，表明臍血Eotaxin 水平與濕疹患病具有一定的相關(guān)性，且對(duì)嬰兒濕疹具有一定的預(yù)測(cè)意義。

本研究也存在一些局限性，樣本量不夠大，納入的研究對(duì)象均來(lái)自在我院出生的新生兒，范圍相對(duì)局限，隨訪時(shí)間短。本研究組成員在后續(xù)的研究中繼續(xù)納入更多的研究對(duì)象，擴(kuò)大樣本量，同時(shí)追蹤隨訪嬰兒在3、6、12 個(gè)月時(shí)濕疹患病情況，甚至可以隨訪至2 ～3 歲，讓實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加具有說(shuō)服力。本次研究中收集臍帶血的優(yōu)勢(shì)是采集方便，而且臍帶血與母體血液相連，臍帶血相關(guān)免疫炎性因子能反映新生兒最早的免疫功能狀態(tài)以及遺傳因素對(duì)其免疫的影響，有利于研究臍血相關(guān)因子與嬰兒濕疹發(fā)病的關(guān)系。新生兒血清Eotaxin水平的檢測(cè)需要采集靜脈血，考慮新生兒血管細(xì)，操作不方便，家長(zhǎng)依從性也不高。嬰兒后續(xù)隨訪研究中可進(jìn)一步完善檢測(cè)血清Eotaxin 水平，并將血清Eotaxin 水平與臍血Eotaxin 水平做比較，驗(yàn)證臍帶血Eotaxin 對(duì)濕疹預(yù)測(cè)作用的可靠性。

綜上所述，臍血Eotaxin水平與家族過(guò)敏史及早期嬰兒濕疹的發(fā)病有密切的關(guān)系，且臍血Eotaxin高表達(dá)水平是嬰兒濕疹患病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。臍血Eotaxin 水平對(duì)早期嬰兒濕疹的患病具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，對(duì)早期嬰兒濕疹等過(guò)敏性疾病防治有一定的積極意義。本研究下一步對(duì)入組的研究對(duì)象繼續(xù)進(jìn)行追蹤隨訪，然后綜合分析兒童在各個(gè)年齡段濕疹等變應(yīng)性疾病的患病情況與臍血Eotaxin 水平的關(guān)系，更全面探討臍血Eotaxin 水平對(duì)早期濕疹等過(guò)敏性疾病的預(yù)測(cè)價(jià)值。