張玉基
摘要:本文中簡單分析了新型冠狀病毒疫情在我國的特點,并探討了相應(yīng)的臨床檢測方式和病毒防控方式,旨在為我國新冠病毒控制提供參考。
關(guān)鍵詞:新型冠狀病毒;臨床監(jiān)測;疫情防控;病情管理
新冠疫情在2019年年底在我國武漢爆發(fā),并且快速在全球范圍內(nèi)流行,直至2021年這一疾病已經(jīng)擴散至全球。新型冠狀病毒主要通過呼吸道飛沫以及密切接觸進行傳播,這種疾病具有極強的傳染性,尤其是部分患者不會出現(xiàn)病情癥狀,但依舊具有較強的感染力,這也直接導(dǎo)致新冠疫情的控制難度明顯增加。新冠肺炎的確診以及檢測對于疫情防控的開展來說極為重要,快速檢測患者的疾病,并及早對患者進行隔離和治療,是疫情防控的關(guān)鍵點,新冠病毒的監(jiān)測以及核酸以及特異性抗體監(jiān)測涉及到的內(nèi)容較為復(fù)雜,需要針對新型冠狀病毒的病原學(xué)特點和我國目前所具有的檢測方式進展進行綜合評估,只有這樣才能夠保障我國現(xiàn)代化的新型冠狀病毒的監(jiān)測工作順利開展。
一、新型冠狀病毒的病原學(xué)特點
在2019年12月,一種由新型冠狀病毒所引發(fā)的肺炎,在武漢爆發(fā)并且正逢我國的春節(jié),這一集并快速在我國形成傳播趨勢,并且新冠病毒具有極強的人傳人能力,疾病已經(jīng)被作為急性呼吸道傳染疾病并納入我國的傳染病防治法中,屬于乙類傳染病,并且在進行管控時選擇甲類傳染病的預(yù)防管控方案。新冠病毒不僅對于我國的醫(yī)療環(huán)境產(chǎn)生了極大的威脅,同時也在一定程度上波及了全球的公共衛(wèi)生安全,所以快速準(zhǔn)確的對患者的疾病進行判斷并開展有效的防控工作,是現(xiàn)代相關(guān)管理人員需要重視的一項問題。新型冠狀病毒是發(fā)現(xiàn)的第7種β屬冠狀病毒,對其進行分析可以發(fā)現(xiàn)其具有包膜,并且顆粒呈現(xiàn)圓形或橢圓形,直徑大約為60~140nm。新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì)為單股正鏈RNA,而其中的基因組大小大約為30KB,是目前已知基因組最大的一種RNA病毒。對其生物學(xué)行為進行研究可以發(fā)現(xiàn)這一疾病的轉(zhuǎn)錄模式與2012年出現(xiàn)的SARS-CoV具有較高的相似性。新型冠狀病毒中包含14個ORF,這一物質(zhì)對其中的27種蛋白質(zhì)進行編譯。在近年來的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)這種疾病與蝙蝠冠狀病毒的同源性可以達(dá)到85%以上,而新型冠狀病毒在體外分離的環(huán)境下進行培養(yǎng),在人呼吸道上皮細(xì)胞中可以在培養(yǎng)96小時后被發(fā)現(xiàn),而在分離培養(yǎng)皿中大約發(fā)現(xiàn)時間為6天。新型冠狀病毒對于環(huán)境中的溫度以及紫外線有較高的敏感度,在56攝氏度的環(huán)境下對新型冠狀病毒進行處理,大約30分鐘即可被完全滅活,同時乙醚和75%乙醇以及含氯消毒劑均能夠有效滅活新型冠狀病毒。在相關(guān)研究中證實, ACE2作為受體蛋白與病毒一起被內(nèi)吞進入細(xì)胞,這也直接導(dǎo)致細(xì)胞表面的ACE2蛋白酶出現(xiàn)明顯減少,這也在一定程度上導(dǎo)致患者的血管緊張素以及腎素系統(tǒng)完全失衡。患者本身存在類似于糖尿病、高血壓的基礎(chǔ)疾病患者在發(fā)生感染后病情則更加嚴(yán)重。針對新冠肺炎患者進行研究,可以發(fā)現(xiàn)患者的下呼吸道病毒含量,相較于上呼吸道來說明顯更高。而在對患者進行病情檢驗時,患者的呼吸道病毒檢驗準(zhǔn)確度相較于血液檢測來說明顯更高,所以在進行患者的病情取樣時,一般情況下建議選擇下呼吸道樣本,肺泡灌洗液和支氣管灌洗液,其次可選擇患者的呼吸道深部深部痰液以及患者口咽部位的粘液。在對患者進行診斷前取樣,應(yīng)當(dāng)根據(jù)患者的接受度以及診斷需求來進行調(diào)整,所以目前我國在對普通民眾進行檢測時,選擇的是鼻咽拭子,而在對重癥患者進行診斷時,則主要采用下呼吸道標(biāo)本來進行檢驗,以保障患者的診斷準(zhǔn)確度。除此之外,部分患者的檢驗結(jié)果中發(fā)現(xiàn)糞便樣本與常用的因式子咽拭子樣本的診斷準(zhǔn)確率基本相似,甚至檢驗準(zhǔn)確率更高,需要相關(guān)工作人員引起高度重視。
二、檢測方法
1.實驗室的病毒分離以及鑒定
病毒培養(yǎng)以及分離鑒定是實驗室內(nèi)開展病原體檢測的新標(biāo)準(zhǔn),研究人員在進行研究時通過獲取患者的支氣管肺泡灌洗液,將其分離的病毒接種制人上皮細(xì)胞后,大約在96小時后,可在人氣道上皮細(xì)胞的表層觀察到其細(xì)胞出現(xiàn)病變。在進行判斷是工作人員可以在透射電鏡的環(huán)境下,觀察到病毒顆粒所具備的冠狀病毒日冕的特殊結(jié)構(gòu)。在進行病情分析室分離,純化病毒能夠為今后的病毒生物學(xué)特征以及致病機理和疫苗研發(fā)奠定基礎(chǔ),但由于不同病毒的培養(yǎng)時間以及培養(yǎng)技術(shù)有不同的要求,所以工作人員在進行管理時,應(yīng)當(dāng)在三級安全的生物實驗室內(nèi)開展鑒定以及分離,所以這一技術(shù)也僅僅適合應(yīng)用于疫情期間的研究,而并不適用于新型冠狀病毒的快速診斷。
2.核酸檢測
核酸檢測涉及到的內(nèi)容較為復(fù)雜,而核酸檢測是目前我國對新冠肺炎進行診斷的最常用的一種方式。面對新型冠狀病毒所引發(fā)的本次疫情,在進行病毒的控制前,對病毒進行遺傳序列的基因組測序,則能夠幫助研究人員了解病毒所具有的遺傳學(xué)特征,同時還能夠幫助研究人員預(yù)測病毒可進行的進化以及變異,同時還能在一定程度上解釋病毒所具備的獨立來源,做好病毒的追蹤以及溯源分析,在進行檢測時通過對病毒的基因組進行測序,還能夠研發(fā)特異性的檢驗試劑盒,為疫苗研發(fā)工作提供基礎(chǔ)的理論支持。而在本次疫情爆發(fā)后,我國研究人員在一個月以內(nèi)就通過宏轉(zhuǎn)錄測序技術(shù)對病毒的基因組進行了有效的促敘,了解了病毒的發(fā)育樹特征,并且在測序完成后將測序結(jié)果直接上報給whoWHO,并且全世界范圍內(nèi)進行共享,對于各個國家的疫情防控提供了基礎(chǔ)的理論支持。研究人員通過第3代測序技術(shù),在6~10小時內(nèi)完成了新型冠狀病毒以及其他病毒的檢測,不僅十分快速,并且準(zhǔn)確度極高。高通量測序技術(shù)在應(yīng)用過程中所展現(xiàn)出的高度準(zhǔn)確以及高度靈敏的特征,為相關(guān)工作人員開展檢驗工作打下了堅實的基礎(chǔ)。并且這一技術(shù)在應(yīng)用過程中還可通過鑒定的方式了解其他的致病病原體,但在檢驗過程中,高通量測序技術(shù)具有較高的檢驗成本,并且檢測時間較長,并且還需要專業(yè)的生物研究人員對最終的測試結(jié)果進行分析和解答,導(dǎo)致專業(yè)性要求較高,所以并不適合在疫情的高發(fā)時間段內(nèi)進行大規(guī)模的應(yīng)用,僅僅適合應(yīng)用于病毒的特征學(xué)研究中。
實時熒光定量PCR技術(shù)在應(yīng)用過程中同樣能夠獲得較為良好的效果。熒光探針法具有較高的特異性,在進行判斷時通過不同的診斷要求合理設(shè)計探針,則能夠區(qū)分常見的不同病原菌,對于多個靶標(biāo)進行同時監(jiān)測,也能夠在一定程度上使檢測工作的準(zhǔn)確度得到提升。除此之外,在進行檢測是時PCR技術(shù)還可進行進一步的優(yōu)化,例如將其分為一步法和兩步法,一步法,診斷相較于兩步法,診斷來說,不僅操作簡單并且也十分迅速,能夠有助于提高樣本的反應(yīng)濃度,并且減少開蓋次數(shù),有助于避免樣本遭到周圍環(huán)境或空氣的污染。熒光定量PCR技術(shù)在應(yīng)用過程中,憑借其檢測快速以及成本較低的特征,被廣泛應(yīng)用于我國疫情期間的病情診斷中。這項檢測技術(shù)在應(yīng)用過程中容易受到多方面因素的影響,而出現(xiàn)假陰性的情況,所以在進行病情判斷時,應(yīng)當(dāng)對其進行多次檢測,通過這種方式保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。
三、監(jiān)測結(jié)果受影響以及疫情防控方法探討
新冠病毒核酸檢測在應(yīng)用過程中陽性檢出率大約為30%~50%,在檢測時應(yīng)用于檢測的樣本不合格或者樣品收集過早過晚,都有可能導(dǎo)致檢出結(jié)果受到影響,所以在進行樣本采集時,一般情況下建議選擇多個部位的樣本進行混合檢查或者同時檢查,尤其是在進行樣本采集時,一定要嚴(yán)格按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)進行處理。相關(guān)研究人員針對鼻拭子、咽拭子以及痰液等樣本的檢測準(zhǔn)確率進行對比可以發(fā)現(xiàn)支氣管肺泡灌洗液具有最高的診斷陽性率,其次則為痰液標(biāo)本,鼻咽拭子經(jīng)對比分析未見明顯差異,所以在目前我國進行檢查時,所選擇的檢測方式為鼻咽拭子檢測方案。這一檢測技術(shù)能夠在最短的時間內(nèi)完成病原菌的檢測,并且還能為相關(guān)工作人員提供患者的病原感染菌特征,以確?;颊叩脑\斷準(zhǔn)確度,降低外界因素對檢驗結(jié)果產(chǎn)生的影響。
病毒核酸檢測陽性是新型冠狀病毒的病原學(xué)診斷依據(jù),目前臨床上在對患者的病情進行診斷時,主要采用上呼吸道鼻咽拭子作為核酸檢測樣本,而其他生物樣本在臨床上的診斷準(zhǔn)確度較少。在研究結(jié)果中,痰液樣本診斷陽性率最高的原因可能是由于新型冠狀病毒經(jīng)呼吸道分泌物進入消化道所導(dǎo)致的,但也并不排除消化道粘膜屏障損傷,可能會導(dǎo)致患者陽性率增加的情況。在患者假陰性出院以及出院后患者的復(fù)陽性風(fēng)險較高,故而醫(yī)務(wù)人員在對患者的病情進行判斷時,可根據(jù)患者的臨床癥狀作出相應(yīng)的診斷方式選擇必要時可以采用消化道檢測聯(lián)合痰液檢測的方式對患者進行判斷,能夠有助于改善患者的病情。而在對患者進行診斷時,所應(yīng)用的診斷方式會在一定程度上影響檢驗效率,故而醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)選擇一種最有效率的檢驗方案,以保障檢驗工作的有效性。
總結(jié)
新冠疫情在發(fā)生后對病毒進行檢驗,受到了相關(guān)工作人員的高度重視,而新型冠狀病毒的檢驗方式較多并且其優(yōu)勢和劣勢各不相同,在對患者進行檢測時,應(yīng)當(dāng)提高檢驗方法的準(zhǔn)確性,并盡量選擇全自動流水式的快速檢驗方式,只有這樣才能夠使現(xiàn)代化的檢驗工作更加順利的開展,方便普通民眾在社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)內(nèi)進行篩查,這樣能夠有助于提高新冠病毒的檢驗準(zhǔn)確度,使檢測效率得到提升。
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