李 陽(yáng)，張 琨，張澤良，俞杞泉，包 祺，吳春曉，壽偉臻

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院，上海 200032)

肺癌是世界上發(fā)病率及死亡率較高的惡性腫瘤之一[1],按病理可將其分為非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和小細(xì)胞肺癌，其中NSCLC約占肺癌發(fā)病的85%，NSCLC一般分為鱗癌、腺癌及大細(xì)胞癌3種類型[2],目前非小細(xì)胞肺癌的治療包括分子靶向治療、免疫治療、化療和放療等[3]，雖然NSCLC的治療技術(shù)已經(jīng)取得重大突破，但是在經(jīng)過相關(guān)藥物治療之后的耐藥問題日益突出，新的治療靶點(diǎn)及藥物開發(fā)也迫在眉睫。中醫(yī)藥具有多靶點(diǎn)治療的優(yōu)勢(shì)，能夠彌補(bǔ)耐藥方面的空白，目前較多研究也證實(shí)其有效性，但是由于成分復(fù)雜，諸多研究也遭受質(zhì)疑，從單味中藥進(jìn)行研究，找出有效成分成為目前的熱點(diǎn)及難點(diǎn)，本文將近十年單味中藥提取物治療NSCLC的相關(guān)研究進(jìn)行綜述，希望能為后續(xù)的中藥治療NSCLC提供思路和方法。

1 黃芪提取物

黃芪提取物中含有皂、葉酸、多糖、氨基酸等活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)能夠抑制腫瘤的增殖，影響腫瘤組織的代謝及調(diào)節(jié)人體的免疫[4]。殷采萎等[5]通過meta分析發(fā)現(xiàn)黃芪注射液聯(lián)合鉑化療方案能夠改善晚期NSCLC患者的臨床癥狀，提高生活質(zhì)量，且能夠降低化療引起的骨髓抑制，效果較單純含鉑方案相比為佳。黃芪多糖是黃芪的主要成分之一，張瑩等[6]使用黃芪多糖聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞來治療中晚期氣虛型的NSCLC患者，研究納入75例患者，共治療2個(gè)月，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩藥聯(lián)合治療能夠改善患者的神疲乏力、自汗懶言癥狀，延緩NSCLC患者的腫瘤病灶的進(jìn)展，提高患者的免疫力，且不良反應(yīng)較少。雷琰等[7]則在常規(guī)的放療基礎(chǔ)上加用黃芪多糖，以觀察它的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃芪多糖能夠降低NSCLC患者外周血中糖類抗原125(CA125)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表達(dá)，提高臨床療效，且能夠緩解骨髓抑制。黃芪甲苷也是黃芪的主要成分之一，賈力維等[8]通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)經(jīng)過黃芪甲苷(As-Ⅳ)作用后24 h的非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞，它的胞質(zhì)蛋白Bax/Bcl2水平較未用藥的對(duì)照組高，同時(shí)As-Ⅳ也促進(jìn)了Caspase-3 裂解為cleaved Caspase-3，說明黃芪甲苷在體外可以抑制非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的增殖、遷移并誘導(dǎo)其凋亡，其作用機(jī)制可能和調(diào)NEDD4/PTEN/PI3K/Akt通路有關(guān)。另外還有一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)黃芪的乙酸乙酯組分(EAM)可以誘導(dǎo)染色質(zhì)濃縮，并以時(shí)間依賴性方式增加了亞G1期和膜聯(lián)蛋白V陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量，EAM還增強(qiáng)了裂解的caspase-8和-9的表達(dá)，并增加了裂解的多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的積累，結(jié)果表明EAM通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡在NSCLC中表現(xiàn)出抗癌作用[9]。

2 姜黃素

姜黃素能夠通過抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、抑制血管生成、上調(diào)癌癥易感基因的表達(dá)、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等多種機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用[10]。蔡勇等[11]使用姜黃素聯(lián)合順鉑探討其對(duì)NSCLC細(xì)胞A549放射增敏的影響，采用人工劃痕、Transwell試驗(yàn)及Western blotting檢測(cè)處理24 h后的細(xì)胞遷移、侵襲及表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)的蛋白水平，最后發(fā)現(xiàn)姜黃素聯(lián)合順鉑能夠抑制A549細(xì)胞增殖且具有放射增敏作用，同時(shí)還可以抑制其侵襲和遷移，這可能和EGFR相關(guān)信號(hào)通路受抑制相關(guān)。李玲等[12]從姜黃素聯(lián)合化療方面進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)姜黃素和多烯紫杉醇聯(lián)用后會(huì)使誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞凋亡的作用增強(qiáng)，且二者聯(lián)用會(huì)有效減少化療的毒副作用。陳曉琳等[13]則發(fā)現(xiàn)姜黃素能夠通過下調(diào)波形蛋白(Vimentin)、E鈣黏蛋白(E-cadherin)、Twist的表達(dá)，并提高上皮標(biāo)志物角蛋白(pan-Keratin)的表達(dá)，從而逆轉(zhuǎn)電離輻射誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。另外汪叢叢等[14]發(fā)現(xiàn)姜黃素對(duì)肺癌A549細(xì)胞株具有抑制作用,與XAV939對(duì)照組相比,姜黃素含藥組血管形成數(shù)目減少,且呈劑量依賴性；隨著姜黃素濃度增加，β-連環(huán)蛋白(β-catenin)基因的mRNA表達(dá)水平顯著降低，結(jié)果表明姜黃素能夠抑制肺癌細(xì)胞的血管生成，其機(jī)制或許是通過抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路的活性來實(shí)現(xiàn)的。另外，藥物的耐藥性是目前腫瘤治療的一大難點(diǎn)，具有野生型EGFR和KRAS突變的NSCLC患者對(duì)吉非替尼等具有耐藥性，而目前姜黃素已經(jīng)被公認(rèn)為是幾種主要人類癌癥的潛在治療劑，有研究[15]探索姜黃素對(duì)逆轉(zhuǎn)NSCLC吉非替尼耐藥性及其分子機(jī)制，結(jié)果表明姜黃素顯著增強(qiáng)了吉非替尼對(duì)原發(fā)性吉非替尼耐藥的NSCLC細(xì)胞H157和H1299的抑制作用。姜黃素和吉非替尼的聯(lián)合治療通過抑制Sp1并阻斷Sp1和HADC1的相互作用而下調(diào)了EGFR活性，并抑制了耐藥NSCLC細(xì)胞中的受體酪氨酸激酶以及ERK/MEK和AKT/S6K途徑。同時(shí)，與單獨(dú)使用姜黃素或吉非替尼治療相比，姜黃素和吉非替尼聯(lián)合治療可引起劇烈的自噬誘導(dǎo)、自噬細(xì)胞死亡和自噬介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，這一發(fā)現(xiàn)證明姜黃素和吉非替尼聯(lián)合治療可產(chǎn)生協(xié)同的生長(zhǎng)抑制和凋亡活化作用。

3 丹參提取物

丹參中含有多種化學(xué)成分，主要可以分為丹參酮類，單酚酸類和無機(jī)元素等，其中丹參酮類的組分是其細(xì)胞毒性作用的基礎(chǔ)，具有廣泛的抗腫瘤作用[16]。丹參素是丹參水溶成分中含量最高的成分，陶麗等[17]探討丹參素抗腫瘤的分子機(jī)制，通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)丹參素能夠降低A549細(xì)胞內(nèi)的活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平，這與它的抗氧化活性和自由基清除有關(guān)，并通過進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)它能降低Nrf2表達(dá)，這與丹參素抑制Akt以及ERK1/2的磷酸化水平有關(guān)，表明丹參素是通過清除ROS進(jìn)而抑制Akt，ERK1/2的磷酸化進(jìn)而下調(diào)Nrf2的表達(dá)來抑制A549細(xì)胞的生長(zhǎng)的。郭忠聰?shù)萚18]使用丹參酮IIA聯(lián)合TP化療方案治療NSCLC，并用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者治療前后P-gp蛋白含量的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參酮IIA能夠提高TP方案治療NSCLC的療效，并且發(fā)現(xiàn)它不會(huì)增加化療的毒副作用。簡(jiǎn)曉順等[19]則通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)來探索丹參酮ⅡA抑制非小細(xì)胞肺癌NCI-H52細(xì)胞生長(zhǎng)和其分子機(jī)制，在使用不同濃度的丹參酮ⅡA處理非小細(xì)胞肺癌NCI-H52細(xì)胞后，使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期，并采用免疫印跡方法檢測(cè)蛋白表達(dá)水平，最后發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA能夠抑制非小細(xì)胞肺癌NCI-H520細(xì)胞的生長(zhǎng)，且呈濃度依賴方式，細(xì)胞周期蛋白Cyclin E和CDK2抑制劑P27也較處理前明顯上調(diào)，說明丹參酮ⅡA可能通過上調(diào)P27同時(shí)抑制CDK2來發(fā)揮抗腫瘤作用的。隱丹參酮也是丹參的有效成分之一，雷俊華等[20]發(fā)現(xiàn)其聯(lián)合順鉑作用于非小細(xì)胞肺癌NCI-H1975細(xì)胞可以起到協(xié)同抗腫瘤作用，其機(jī)制和抑制信號(hào)通路JAK2 /STAT3的磷酸化表達(dá)水平有關(guān)。葉歡等[21]則探討隱丹參酮抑制A549細(xì)胞復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的機(jī)制，最后發(fā)現(xiàn)它能夠抑制非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，其機(jī)制可能和β整合素下調(diào)、E-cadherin的上調(diào)和阻滯細(xì)胞周期有關(guān)。

4 人參提取物

人參中含有人參皂苷、多聚糖、脂肪酸等多種活性成分，現(xiàn)在被用于防治腫瘤和免疫疾病等[22]。江冠銘等[23]人參皂苷Rg3發(fā)現(xiàn)其聯(lián)合奧希替尼治療EGFR-TKI耐藥的晚期NSCLC患者的療效較單獨(dú)使用奧希替尼好，能夠改善患者的生存質(zhì)量，延長(zhǎng)患者的生存期。臨床實(shí)驗(yàn)表明人參皂苷Rg3可以提高化療的作用，減少其副作用，且已經(jīng)有研究表明參皂苷Rg3可以通過誘導(dǎo)DNA損傷來減少NSCLC的發(fā)生，其在腫瘤細(xì)胞中的抗DNA損傷作用和機(jī)制仍不完全清楚，有研究通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg3能夠通過上調(diào)VRK1表達(dá)和P53BP1灶形成而減輕DNA的損傷，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞的生存能力[24]。另外一個(gè)研究發(fā)現(xiàn)人參的另外一種有效成分人參二醇能夠使NSCLC細(xì)胞中的G1期細(xì)胞周期停滯，并通過進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的周期停滯主要與Ca2+的上調(diào)密切相關(guān)，說明它是治療肺癌的一種有前途的方法[25]。

5 薏苡仁提取物

薏苡仁抗癌的研究已經(jīng)持續(xù)很久，多項(xiàng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都表明它能夠抑制腫瘤生長(zhǎng)，并且提高機(jī)體免疫力也是其抗腫瘤的作用機(jī)制之一[26]。孟麗娟等[27]發(fā)現(xiàn)薏苡仁油注射液聯(lián)合培美曲塞能夠增加老年晚期NSCLC的控制率，并可以減輕化療相關(guān)的不良反應(yīng)，改善患者的生存質(zhì)量，效果較單用培美曲塞為佳。蕭娟等[28]則發(fā)現(xiàn)薏苡仁注射液聯(lián)合羥喜樹堿治療老年晚期NSCLC惡性胸腔積液效果較佳并可有效改善患者免疫功能,其機(jī)制可能與薏苡仁注射液能夠調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白有關(guān)。嚴(yán)萍萍等[29]通過基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)薏苡仁注射液在體外能夠抑制A549細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，還發(fā)現(xiàn)且與順鉑聯(lián)用體內(nèi)抗腫瘤作用更強(qiáng)。有學(xué)者進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)薏苡仁提取物可以增加caspase-3和caspase-9蛋白的表達(dá)，最后表明它是通過激活內(nèi)在線粒體途徑抑制腫瘤細(xì)胞增殖的[30]。

6 鴉膽子提取物

鴉膽子化學(xué)成分較多，可分為極性化合物和非極性化合物，其中包括鴉膽子油等非極性化合物的研究就多，目前多項(xiàng)研究都深入探索了其非極性化合物的抗癌機(jī)制和療效。劉素榮等[31]使用鴉膽子油注射液聯(lián)合順鉑治療NSCLC，發(fā)現(xiàn)鴉膽子油注射液能夠降低順鉑化療造成的骨髓抑制發(fā)生率，且能夠提高患者的免疫力。有學(xué)者納入18篇文獻(xiàn)，通過meta分析發(fā)現(xiàn)鴉膽子油聯(lián)合化療方案治療NSCLC，能夠明顯提高臨床治療有效率，降低白細(xì)胞減少的發(fā)生率，提高患者的生活質(zhì)量[32]。王敏等[33]使用鴉膽子苦醇進(jìn)行研究，最后發(fā)現(xiàn)它能夠抑制A549和H460細(xì)胞的生長(zhǎng)，其機(jī)制可能和抑制Nrf2-Notch1信號(hào)軸相關(guān)。另外一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)鴉膽子的另一種成分鴉膽子素D能夠抑制H460和A549細(xì)胞的活力，最終結(jié)果表明它是通過激活JNK來發(fā)揮對(duì)NSCLC細(xì)胞的抗癌活性的[34]。

7 華蟾素

華蟾素成分復(fù)雜，里面包括甾體類強(qiáng)心苷、吲哚類生物堿、多肽類和氨基酸等，目前多項(xiàng)研究已經(jīng)證明華蟾素有明確的抗癌作用，并且能夠減輕癌性疼痛[35]。徐泳等[36]查閱2018年12月之前的中外有關(guān)華蟾素注射液聯(lián)合含鉑類一線化療方案治療NSCLC的文章，共納入27個(gè)隨機(jī)對(duì)照研究，通過meta分析發(fā)現(xiàn)在常規(guī)含鉑化療方案的基礎(chǔ)之上加用華蟾素能夠增加化療的療效，減輕化療的毒副作用，提高患者的生活質(zhì)量。陳娟等[37]使用華蟾素聯(lián)合PC化療方案治療NSCLC，通過監(jiān)測(cè)患者治療前后的T淋巴細(xì)胞亞群和CA125水平，最后發(fā)現(xiàn)此方案能夠降低患者的血清CA125水平，并且可以改善患者的免疫功能，延長(zhǎng)生存期。

8 其他中藥提取物

除了上面幾種研究較多的藥物之外，還有一些中藥的提取物在研究中表明對(duì)治療NSCLC有效。周微等[38]發(fā)現(xiàn)不同濃度莪術(shù)醇作用于A549細(xì)胞以后，細(xì)胞增殖的數(shù)量顯著降低，侵襲細(xì)胞的數(shù)目明顯減少，細(xì)胞中E-cadherin的表達(dá)水平也出現(xiàn)升高，但Vimentin、cadherin、β-catenin、snail、細(xì)胞周期蛋白1(Cyclin-D1) 和T細(xì)胞因子4(T-cell factor 4，TCF4)的表達(dá)水平顯著降低，說明莪術(shù)醇能夠抑制非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的增殖，其機(jī)制可能Wnt/β-catenin通路有關(guān)。陳儀坤等[39]使用赤芍總苷進(jìn)行研究，在用藥物干預(yù)模型大鼠后，檢測(cè)MDR1-mRNA、MRP-mRNA和LRP-mRNA的基因表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)赤芍總苷組的相關(guān)基因的表達(dá)水平均較環(huán)磷酰胺組增加，說明赤芍總苷能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，并能夠降低多耐藥基因的表達(dá)，進(jìn)而提高機(jī)體對(duì)藥物的敏感性。車杭盈[40]使用白花蛇舌草注射液進(jìn)行研究，通過基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)它能夠促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的凋亡，并說明其機(jī)制可能和減少凋亡相關(guān)基因Bbl-2及survivin的表達(dá)相關(guān)。

綜上所述，可以看出一些中藥提取物在腫瘤治療方面有確切療效，并有改善腫瘤細(xì)胞耐藥性和增強(qiáng)放化療的作用等明顯優(yōu)勢(shì)，但是目前中藥提純?nèi)匀皇且淮箅y點(diǎn)，中醫(yī)藥是個(gè)巨大的寶庫(kù)，相信隨著藥物提純技術(shù)的發(fā)展，更多的中藥有效成分被挖掘研究，將來中藥會(huì)在腫瘤治療方面發(fā)揮更多的光和熱。